動(dòng)物細(xì)胞工程hao課件

人耳鼠“人耳鼠”再出風(fēng)頭

2001年，一只特別的活老鼠在北京引起轟動(dòng)——這是有著一對(duì)紅眼睛的、尾巴長長的、渾身沒毛的小白鼠。值得一提的是，這只小白鼠的背上，竟長著一只幾乎與身子一般大小的“人耳”。這只老鼠背上的“人耳”是由上海市第九人民醫(yī)院副院長、整復(fù)外科主任曹誼林教授利用組織工程技術(shù)復(fù)制出來的。

在京展出的數(shù)天，盡管門票高達(dá)20元，但還是有將近20萬人，心甘情愿地掏錢一睹“人耳鼠”的風(fēng)采。

“人耳鼠”是怎樣制作出來的呢？是人的耳朵基因插進(jìn)老鼠的基因了嗎？不是的，這與細(xì)胞的研究有關(guān)。據(jù)“人耳鼠”的制作者曹誼林教授說，人耳是先用一種高分子化學(xué)材料聚羥基乙酸做成人耳的模型支架，然后讓細(xì)胞在這個(gè)支架上繁殖生長。等“耳朵”長好后，就在無毛鼠的背上割開一個(gè)口子，植入“人耳”并縫合。過一段時(shí)間后，“人耳”的支架會(huì)自己降解消失，于是“人耳”就“長”在老鼠的背上。人耳鼠“人耳鼠”再出風(fēng)頭在京展出的數(shù)天，盡管門票高達(dá)20元思考與回憶：1、動(dòng)物細(xì)胞全能性特點(diǎn)？

隨著細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到限制，分化潛能變窄。細(xì)胞核仍具有全能性。2、能否用植物組織培養(yǎng)的方法使動(dòng)物細(xì)胞發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體？

不能。動(dòng)物細(xì)胞和組織在體外培養(yǎng)的過程中，伴隨一定的組織分化，不管采用什么手段和培養(yǎng)條件，由于細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、變化，細(xì)胞發(fā)生結(jié)構(gòu)功能變異，結(jié)果長時(shí)間的培養(yǎng)只能使單一類型的細(xì)胞保存下來，最終成了簡(jiǎn)單的細(xì)胞培養(yǎng)。3、動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)的理論依據(jù)（原理）？

細(xì)胞增殖思考與回憶：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)核移植動(dòng)物細(xì)胞工程常用技術(shù)其它動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)核移植動(dòng)物細(xì)胞工程常用專題2.2動(dòng)物細(xì)胞工程2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)專題2.2動(dòng)物細(xì)胞工程2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用和概念：1、概念：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物有機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和增殖.2、原理：細(xì)胞增殖一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用和概念：1、概念：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)定義：人們通常將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。胰蛋白酶處理取出組織胚胎或幼齡動(dòng)物器官組織剪碎單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)（貼壁生長長成單層細(xì)胞。有接觸抑制現(xiàn)象）。①原代培養(yǎng)3：過程圖示原代培養(yǎng)定義：人們通常將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。胰蛋白強(qiáng)調(diào)一：細(xì)胞貼壁過程■細(xì)胞貼壁：在培養(yǎng)瓶懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。■培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿壁要求：表面光滑、無毒、易于貼附。強(qiáng)調(diào)一：細(xì)胞貼壁過程■細(xì)胞貼壁：在培養(yǎng)瓶懸液中分散的細(xì)胞很快■當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。強(qiáng)調(diào)二：接觸抑制■當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)無限傳代單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液（分解彈性纖維）原代培養(yǎng)胰蛋白酶剪碎過程：細(xì)胞株細(xì)胞系遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變接觸抑制動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)無限傳代單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液（分解彈性纖維）原代培養(yǎng)胰蛋白酶剪碎過程：細(xì)胞株細(xì)胞系動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變接觸抑制動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞

定義：當(dāng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞處于接觸抑制后,用胰蛋白酶處理,使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來,然后加入新的培養(yǎng)液,將細(xì)胞分離稀釋,并從原培養(yǎng)瓶內(nèi)轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),這個(gè)過程稱傳代培養(yǎng).（分瓶培養(yǎng)的過程）②傳代培養(yǎng)定義：②傳代培養(yǎng)▲細(xì)胞株：傳代細(xì)胞一般能傳到40-50代，遺傳物質(zhì)一般不會(huì)發(fā)生改變，叫細(xì)胞株。強(qiáng)調(diào)：細(xì)胞系、細(xì)胞株（了解即可，老課本體系）▲細(xì)胞系：傳代50代以后不能再傳下去，部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，能連續(xù)傳代，獲得不死性，叫細(xì)胞系?！?xì)胞株：傳代細(xì)胞一般能傳到40-50代，遺傳物質(zhì)一般不會(huì)發(fā)3、總結(jié)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官配置細(xì)胞懸液剪碎用胰蛋白酶處理10代細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶40-50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)無限傳代單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液稀釋傳代10代以內(nèi)，遺傳物質(zhì)不改變，保持正常二倍體核型。傳代10-50代左右，增長緩慢以至于完全停止，部分細(xì)胞核型可能發(fā)生變化（遺傳物質(zhì)可能改變）為什么用胰蛋白酶處理？分瓶傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng)特點(diǎn)：細(xì)胞貼壁、接觸抑制繼續(xù)傳代培養(yǎng)少部分細(xì)胞獲得不死性，細(xì)胞突變，遺傳物質(zhì)已經(jīng)改變，等同于癌細(xì)胞。細(xì)胞株：一般說遺傳物質(zhì)未改變細(xì)胞系：遺傳物質(zhì)已改變?cè)囵B(yǎng)3、總結(jié)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官配置4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:1）無菌無毒的環(huán)境：

適宜的溫度：人和哺乳動(dòng)物細(xì)胞最適溫度為36.5±0.5℃。適宜的酸堿度：PH：7.2-7.4液體合成培養(yǎng)基：（糖、氨基酸）、促生長因子、（水、無機(jī)鹽、微量元素）等；通常還需加入血漿、血清等天然成分。4）氣體環(huán)境：2）營養(yǎng)：3）溫度和pH：“95％空氣+5％CO2”的混合氣體培養(yǎng)箱。氧氣是細(xì)胞代謝必須的；CO2維持培養(yǎng)液的PH。對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具無菌處理；培養(yǎng)液中添加抗生素防止培養(yǎng)過程中污染；定期更換培養(yǎng)液以清除代謝產(chǎn)物，防止對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞造成危害。補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:1）無菌無毒的環(huán)境：適宜的溫度問題3：為什么用胰蛋白酶處理？問題1：、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料？因?yàn)槠浼?xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)，分化程度低。問題2、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？擴(kuò)大細(xì)胞與培養(yǎng)液的接觸面積，利與細(xì)胞吸收營養(yǎng)。動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，胰蛋白酶處理動(dòng)物組織，可以使動(dòng)物組織細(xì)胞間的蛋白質(zhì)和細(xì)胞外的其他成分酶解，獲得單個(gè)細(xì)胞。

問題4：為什么用胰蛋白酶處理而不用胃蛋白酶？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的最適PH值為7.2-7.4，胰蛋白酶作用的適宜PH為7.2-8.4，胃蛋白酶適宜PH為2.胃蛋白酶在PH為7.2-7.4的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中無活性。問題5：用胰蛋白酶處理不會(huì)把所培養(yǎng)的細(xì)胞消化掉嗎？控制好時(shí)間！長時(shí)間處理當(dāng)然會(huì)損傷細(xì)胞。問題3：為什么用胰蛋白酶處理？問題1：、為什么選用動(dòng)物胚胎或問題6、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處？問題7、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體？主要成分：（葡萄糖、氨基酸）、（水、無機(jī)鹽）、維生素和動(dòng)物血清等。獨(dú)特之處有：1、液體培養(yǎng)基2、成分中有動(dòng)物血清等不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體問題8、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理：細(xì)胞增殖。問題9、目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常在10代以內(nèi)，為什么？10代以內(nèi)的細(xì)胞遺傳物質(zhì)不改變，保持正常二倍體核型。問題6、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何5.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:1.蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體2.應(yīng)用于基因工程主要用于作為受體細(xì)胞3.檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性

4.細(xì)胞的生理、藥理、病理研究

如用于篩選抗癌藥物5.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:1.蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較：見導(dǎo)學(xué)教程P31表比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖促--動(dòng)物血清培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白取材植物幼嫩部分或花藥胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織其他條件無菌無毒，適宜條件無菌無毒，適宜條件植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較：見導(dǎo)學(xué)教程P31表比較項(xiàng)目二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1、定義：

動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中.使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體.3、分類：

胚胎核移植、體細(xì)胞核移植。胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易。動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難2、原理：

動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1、定義：動(dòng)物核移植是將二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1、定義：

動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中.使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體.3、分類：

胚胎核移植、體細(xì)胞核移植。胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易。動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難2、原理：

動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1、定義：動(dòng)物核移植是將4、體細(xì)胞核移植過程---示動(dòng)物克隆---無性繁殖1.）克隆羊多利培育過程：黑面綿羊去核卵母細(xì)胞白面綿羊乳腺細(xì)胞核細(xì)胞核移植重組細(xì)胞電脈沖刺激早期重組胚胎胚胎移植另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利◆特別注意：克隆動(dòng)物性狀與供體動(dòng)物完全一樣嗎？不可能！因?yàn)椋阂弧⒐w動(dòng)物只提供細(xì)胞核，而細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)（如線粒體DNA）來自于受體卵母細(xì)胞.二、生物的性狀不僅與遺傳物質(zhì)有關(guān)，還受環(huán)境的影響。供體受體代孕受體4、體細(xì)胞核移植過程---示動(dòng)物克隆---無性繁殖1.）克隆黑面綿羊去核卵母細(xì)胞白面綿羊乳腺細(xì)胞核a重組細(xì)胞電脈沖刺激早期重組胚胎b另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利1、寫出AB所代表細(xì)胞工程名稱：a表示：

b表示:

2、實(shí)施細(xì)胞工程時(shí)，所需受體細(xì)胞大多采用卵母細(xì)胞的原因：體積大，易操作。含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營養(yǎng)條件。3、多利面部毛色是：

根據(jù)遺傳學(xué)原理說明判斷依據(jù)。4、若黑面綿羊的基因型為AA,白面綿羊的基因型為aa，則克隆羊的基因型為

核移植胚胎移植白色多利全部的核基因都來自白面綿羊aa黑面綿羊去核卵母細(xì)胞白面綿羊乳腺細(xì)胞核a重組細(xì)胞電脈沖刺激早

◆取供體細(xì)胞傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞.為什么？◆用的是去核的減數(shù)第二次分裂中期細(xì)胞（MⅡ中期）為什么？◆激活方法：◆激活目的：◆促融方法：電刺激◆胚胎移植至代孕受體內(nèi)

妊娠、分娩2.）核移植流程供體：優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)奶牛受體：普通奶牛（卵母細(xì)胞的采集與培養(yǎng)）

1.體積大，易操作。2.含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營養(yǎng)條件。有人說它三個(gè)母親，對(duì)嗎？◆取供體細(xì)胞傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞取供體細(xì)胞取卵母細(xì)胞

供體細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)到MⅡ中期

卵母細(xì)胞去核

供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞

供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞

重組胚胎

代孕母牛

生出與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個(gè)體2.過程：取供體細(xì)胞取卵母細(xì)胞供體細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)到MⅡ中期卵母細(xì)胞4.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景●畜牧生產(chǎn)方面：培育良種動(dòng)物。保護(hù)瀕危物種●醫(yī)藥衛(wèi)生方面：生產(chǎn)醫(yī)用蛋白、器官和組織移植4.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景●畜牧生產(chǎn)方面：5.體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題（1）胚胎成活率低（2）動(dòng)物健康問題（3）克隆動(dòng)物安全性5.體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題（1）胚胎成活率低專題2.2動(dòng)物細(xì)胞工程2.2.1動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體專題2.2動(dòng)物細(xì)胞工程2.2.1動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體1、定義：指用自然或人工方法使兩個(gè)或多個(gè)不同的細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞的過程。一、動(dòng)物細(xì)胞融合◆細(xì)胞雜交：不同基因型的細(xì)胞之間的融合就是細(xì)胞雜交?！綦s交細(xì)胞：融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞成為雜交細(xì)胞。1、定義：指用自然或人工方法使兩個(gè)或多個(gè)不同的細(xì)胞融合成一個(gè)

細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合

受精作用細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合受精作用2、誘導(dǎo)融合的因素生物法：滅活的病毒誘導(dǎo)融合.(動(dòng)物細(xì)胞融合所特有的。這是由于病毒的磷脂外衣與動(dòng)物細(xì)胞的膜十分相似的緣故。病毒外殼上的某些糖蛋白可能還有促進(jìn)細(xì)胞融合的功能。喪失感染性,保留融合活性)

化學(xué)法：聚乙二醇PEG誘導(dǎo)融合.物理法：電激融合病毒顆粒黏附細(xì)胞表面細(xì)胞膜連接細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通細(xì)胞融合、形成雜種細(xì)胞2、誘導(dǎo)融合的因素病毒顆粒黏附細(xì)胞表面細(xì)胞膜連接細(xì)胞膜被

二.動(dòng)物細(xì)胞融合二.動(dòng)物細(xì)胞融合思考討論：為什么細(xì)胞融合過程中使用的病毒需要滅活？不滅活行嗎？

因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合，不滅活的話會(huì)感染細(xì)胞，而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。思考討論：為什么細(xì)胞融合過程中使用的病毒需要滅活？不滅活行嗎3、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用意義：細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。應(yīng)用：利用雜交瘤技術(shù)，制備單克隆抗體。3、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用意義：細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動(dòng)、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法（同左）人們獲得抗體的傳統(tǒng)方法是?將抗原注入動(dòng)物體,然后從動(dòng)物血清中提取抗體這種方法的缺點(diǎn)是什么?效率低，產(chǎn)量有限，純度低，動(dòng)物抗體注入人體可能產(chǎn)生嚴(yán)重的過敏反應(yīng)。運(yùn)用已學(xué)知識(shí)，設(shè)想怎樣獲得單一類型的抗體？能否用單個(gè)B淋巴細(xì)胞通過克隆形成的細(xì)胞群來產(chǎn)生單一類型的抗體呢？B淋巴細(xì)胞在體外不能無限增殖。二：動(dòng)物細(xì)胞融合的成功應(yīng)用

——單克隆抗體的制備思考人們獲得抗體的傳統(tǒng)方法是?二：動(dòng)物細(xì)胞融合的成功應(yīng)用單克隆抗體的制備—極富創(chuàng)造性的方案將能夠產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞和具有無限增殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合在一起，形成雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞既能在體外快速生長，又能持續(xù)分泌成分單一的特異性抗體。這種單一類型的只針對(duì)某一特定抗原決定簇的抗體分子，就是單克隆抗體。米爾斯坦(阿根廷)和科勒(德國)因此在1984年獲諾貝爾獎(jiǎng)。單克隆抗體的制備—極富創(chuàng)造性的方案雜交細(xì)胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞經(jīng)免疫的小鼠提取雜交瘤細(xì)胞第一次篩選用特定的選擇性培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生特定抗體、培養(yǎng)條件下能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體雜交細(xì)胞滅活的病毒等手段小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞經(jīng)免疫的小動(dòng)物特異性免疫分離B淋巴細(xì)胞（B）；找到骨髓瘤細(xì)胞（G）。注意B淋巴細(xì)胞是一個(gè)系列。（B1,B2,B3,---Bn）細(xì)胞融合——三種融合方式:（BB;BG;GG）第一次篩選：在“選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)”上培養(yǎng)篩選雜交瘤細(xì)胞（只有BG雜交瘤細(xì)胞存活。但BG雜交瘤細(xì)胞也是一個(gè)系列：如B1G,B2G---BnG。而BB,GG在此培養(yǎng)基上不能存活。）第二次篩選：在“多孔培養(yǎng)板上”培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞系列

，每孔只放一個(gè)雜交瘤細(xì)胞?！翱寺』囵B(yǎng)”每個(gè)雜交瘤細(xì)胞，并進(jìn)行“單一抗體檢測(cè)”，“檢測(cè)陽性”的孔內(nèi)即是所需要的雜交瘤細(xì)胞。選擇所需要的雜交瘤克隆細(xì)胞群，體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。提取單克隆抗體。1、單抗的制備過程要點(diǎn)：動(dòng)物特異性免疫1、單抗的制備過程要點(diǎn)：3）為何要進(jìn)行兩次篩選？4）、如何進(jìn)行第2次篩選？培養(yǎng)在多孔培養(yǎng)板上，每孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞。第1次篩選得到雜交瘤細(xì)胞（多種）。第2次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞群。問題強(qiáng)化：1）、本過程利用了哪些原理？免疫原理，細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理2）、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合？這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體3）為何要進(jìn)行兩次篩選？4）、如何進(jìn)行第2次篩選？培養(yǎng)在多孔1、作為診斷試劑：在臨床生化診斷、病理組織定位、體內(nèi)腫瘤的定位等,與常規(guī)抗體相比,具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速特點(diǎn).2、用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于癌癥治療。生物導(dǎo)彈：抗癌細(xì)胞的單克隆抗體+放射性同位素+化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素。（單克隆抗體：導(dǎo)向。準(zhǔn)確找到癌細(xì)胞位置，原位殺死癌細(xì)胞。）2、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備。3、單克隆抗體的應(yīng)用1、作為診斷試劑：在臨床生化診斷、病理組織定位、體內(nèi)腫瘤的定B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC

下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)方案2、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？4、圖中B為________過程，常用_________作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。1、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是__________3、A是從小鼠的脾臟中取得_______,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生______5、C過程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過程包括_____培養(yǎng)和_____培養(yǎng)兩個(gè)階段，其中_____代以內(nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。制備單克隆抗體B細(xì)胞抗體細(xì)胞融合滅活病毒雙親細(xì)胞分泌抗體無限增殖原代傳代50例3：B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到AC例題1：1975年，英國劍橋大學(xué)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的科勒和米爾斯坦，把小鼠的淋巴細(xì)胞（脾細(xì)胞）和小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合起來，成為雜交瘤細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)在體外大量生產(chǎn)抗體的目的。實(shí)驗(yàn)過程如圖所示。(1)淋巴細(xì)胞能與骨髓瘤細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，兩種細(xì)胞膜也能“融合”在一起，說明細(xì)胞膜

。(2)單克隆抗體的準(zhǔn)確定義應(yīng)為()A．一類特殊抗體B．無性繁殖系

C．單一抗體細(xì)胞的無性繁殖系產(chǎn)生的抗體

D．單一抗體細(xì)胞的有性繁殖系產(chǎn)生的抗體(3)雜交瘤細(xì)胞繁殖進(jìn)行的是_______分裂，其遺傳性狀__________。(4)單克隆抗體注入體內(nèi)后可以自動(dòng)追蹤抗原(病原體或癌變細(xì)胞等)并與之結(jié)合，而絕不攻擊任何正常細(xì)胞，故稱為“生物導(dǎo)彈”這是利用了

_____________

。具有一定的流動(dòng)性C有絲不變抗體能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特點(diǎn)例題1：(1)淋巴細(xì)胞能與骨髓瘤細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，兩種細(xì)胞1.動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是：（）

A．動(dòng)物細(xì)胞融合

B．胚胎移植

C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

D．核移植Ｃ課堂練習(xí);1.動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是：（）Ｃ課堂練習(xí);２．在動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（）A．結(jié)果是相同的

B．雜種細(xì)胞的形成過程基本相同C．操作過程中酶的作用相同D．誘導(dǎo)融合的手段相同Ｂ２．在動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（）３.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（）①淋巴細(xì)胞②小鼠骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A．②④B．①③⑤C．①②③④D．②③C３.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞C1、科學(xué)家用小鼠骨髓細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（）A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞

C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞D.沒經(jīng)過免疫的Ｂ淋巴細(xì)胞A鞏固練習(xí)1、科學(xué)家用小鼠骨髓細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)2..動(dòng)物細(xì)胞融合的目的中最重要的是----------------（）A.克服遠(yuǎn)緣雜交不親和B.制備單克隆抗體C.培育新品種D.生產(chǎn)雜種細(xì)胞3.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（）誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段基本相同C.所采用的原理完全相同D.都能形成雜種細(xì)胞BD2..動(dòng)物細(xì)胞融合的目的中最重要的是------------4.單克隆抗體制備過程中培育的雜交細(xì)胞是------（）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合B.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成C.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成D.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成D4.單克隆抗體制備過程中培育的雜交細(xì)胞是------（

[例題2]（1）在用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)，將抗原注射到小鼠體內(nèi)，可獲得(多選)

（）

A．T淋巴細(xì)胞B．效應(yīng)B淋巴細(xì)胞

C．抗體D．記憶細(xì)胞（2）下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應(yīng)用的敘述中，正確的是(多選)（）

A．B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合，一般需要滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇誘導(dǎo)

B．融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體

C．體外培養(yǎng)時(shí)，一個(gè)B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生一種抗體，但不能無限增殖

D．單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性明顯

BCD

ACD[例題2]BCDACD再見再見動(dòng)物細(xì)胞工程hao課件

1、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞是--------------------（）

A．細(xì)胞系B．細(xì)胞株

C．原代細(xì)胞D．傳代細(xì)胞2、動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是------（）

A.動(dòng)物細(xì)胞融合B.單克隆抗體

C.胚胎移植D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

AD1、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞是---3、用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細(xì)胞（）

A.容易產(chǎn)生各種變異

B．具有更強(qiáng)的全能性

C.取材十分方便

D．分裂增殖的能力強(qiáng)D3、用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡

4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于------------------------------（）

A.培養(yǎng)基不同；

B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行；

C.動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能；

D.動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株。A4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于-----體驗(yàn)高考(2008·寧夏理綜)(1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面

時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的

。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是

。要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要使用的酶是

。相互接觸接觸抑制單層胰蛋白酶體驗(yàn)高考(2008·寧夏理綜)(1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，體驗(yàn)高考(2008·寧夏理綜)(2)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)

的現(xiàn)象；但極少數(shù)可以連續(xù)增殖，其中有些會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變面變成

細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性

，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）的量

。衰老甚至死亡不死性降低減少體驗(yàn)高考(2008·寧夏理綜)衰老甚至死亡不死性降低減1.下列哪—項(xiàng)屬于克?。ǎ〢．將雞的某個(gè)DNA片段整合到小鼠的DNA分子中B．將抗藥菌的某基因引入草履蟲的細(xì)胞內(nèi)C．將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞D．將某腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個(gè)細(xì)胞系D2.（多選）美國杜克大學(xué)醫(yī)療中心的一個(gè)研究小組利用成年豬的動(dòng)脈血管細(xì)胞和模擬胚胎環(huán)境的新型生物反應(yīng)器,成功地在實(shí)驗(yàn)室里培育出新的動(dòng)脈血管，這種血管的外形和功能都與真的血管一樣,這一研究成果是生物組織培養(yǎng)領(lǐng)域的重大進(jìn)展。下列關(guān)于以上技術(shù)的敘述中，正確的是（）A．屬于“克隆”B．可能要利用去核卵細(xì)胞C．關(guān)鍵是激發(fā)血管細(xì)胞的全能性D．關(guān)鍵是激發(fā)血管細(xì)胞發(fā)育成血管的潛能ABD1.下列哪—項(xiàng)屬于克?。ǎ〥2.（多選）美國杜克大學(xué)3.從母羊甲的體細(xì)胞中取出細(xì)胞核，注入到母羊乙去掉核的卵細(xì)胞中，融合后的細(xì)胞經(jīng)卵裂形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙的子宮內(nèi)，出生小羊的大多數(shù)性狀 （）A、難以預(yù)測(cè)B、像甲C、像乙D、像丙4.生物技術(shù)的發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復(fù)生”將不再是神話。如果世界上最后一只野驢剛死亡，以下較易成功“復(fù)生”野驢的方法是（）A．將野驢的體細(xì)胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分化、再分化，培育成新個(gè)體B．將野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個(gè)體C．取出野驢的體細(xì)胞核移植到母家驢的去核卵細(xì)胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個(gè)體D．將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成新個(gè)體B

C

3.從母羊甲的體細(xì)胞中取出細(xì)胞核，注入到母羊乙去掉BC5.下圖所示為用兩棲動(dòng)物卵所做的實(shí)驗(yàn)圖解，據(jù)圖回答下列問題：⑴蝌蚪腸上皮細(xì)胞核中含有青蛙發(fā)育所需的_________，重新組合的細(xì)胞相當(dāng)于蛙的______

細(xì)胞，經(jīng)過____________和________________形成組織和器官。全部基因

受精卵

細(xì)胞分裂細(xì)胞分化⑵本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明_____________________具有全能性，圖中A過程采用的技術(shù)手段稱做_______________。

動(dòng)物體細(xì)胞核核移植技術(shù)5.下圖所示為用兩棲動(dòng)物卵所做的實(shí)驗(yàn)圖解，據(jù)圖回答⑴蝌蚪腸上1、基因型為Aa與基因型為Bb的動(dòng)物體細(xì)胞混合，用滅活的仙臺(tái)病毒處理后，不可能獲得下列哪種基因型的細(xì)胞A．AAaaB．AaBbC．AabbD．BBbb2、動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是①誘導(dǎo)融合的方法完全相同②所用的技術(shù)手段不相同③所采用的原理完全相同④都能形成雜種細(xì)胞A.①② B.①③C.②④ D.③④3、動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較，在動(dòng)物細(xì)胞融合中有特殊性的是A、融合的原理 B、融合的優(yōu)點(diǎn)C、融合的誘導(dǎo)手段 D、融合的過程C

C

C

1、基因型為Aa與基因型為Bb的動(dòng)物體細(xì)胞混合，用滅活CC4.科學(xué)工作者用綠色和紅色熒光材料，分別標(biāo)記人和鼠的細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)。當(dāng)兩個(gè)標(biāo)記細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞后，起初一半膜發(fā)出綠色熒光，另一半膜發(fā)出紅色熒光，一段時(shí)間后，兩種顏色的熒光點(diǎn)均勻分布，如圖所示。請(qǐng)分析回答：⑴該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明了細(xì)胞膜

，這是因?yàn)棰迫粼趦蓚€(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞后，將融合細(xì)胞置于0℃條件下再保持40min，則融合細(xì)胞仍然是一半膜發(fā)綠色熒光，另一半膜發(fā)紅色熒光，這說明具有一定的流動(dòng)性

構(gòu)成細(xì)胞膜的磷脂分子和蛋白質(zhì)大都是可以運(yùn)動(dòng)的膜的流動(dòng)性受溫度影響，在低溫下分子的運(yùn)動(dòng)受抑制4.科學(xué)工作者用綠色和紅色熒光材料，分別標(biāo)記人和鼠的⑴該實(shí)驗(yàn)1、下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，其中1過程注射的物質(zhì)和A細(xì)胞的名稱為 ()A、抗體、T淋巴細(xì)胞 B、抗原、T淋巴細(xì)胞C、抗體、B淋巴細(xì)胞 D、抗原、漿細(xì)胞D1、下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，其中1過程注射的物質(zhì)和A2、關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是A、可以制成診斷盒．用于疾病的珍斷B、可以與藥物結(jié)合，用于病變細(xì)胞的定向治療C、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)D、可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)3、“生物導(dǎo)彈”是指A、單克隆抗體B、帶有特定藥物的單克隆抗體C、雜交細(xì)胞D、B淋巴細(xì)胞D

B

4.單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯(cuò)誤的是 A．特異性強(qiáng)、靈敏度高B．與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈”C．體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體D．由效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌C

2、關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是DB4.單克隆抗體5.下圖為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過程（只考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合）請(qǐng)據(jù)圖回答：

I．若A、B是基因型分別為rrHH、RRhh兩個(gè)煙草品種細(xì)胞的花粉，且這兩對(duì)基因位于非同源染色體上，由于一對(duì)隱性純合基因(rr或hh)的作用，在光照強(qiáng)度大于800勒克斯時(shí)，都不能生長。⑴實(shí)驗(yàn)開始時(shí)必須用

除去不利于原生質(zhì)體融合的物質(zhì)。⑵實(shí)驗(yàn)中除獲得雜種細(xì)胞外，還有基因型為

的融合細(xì)胞。纖維素酶和果膠酶rrHH、RRhh

5.下圖為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過程（只考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合）I．若A⑶設(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，方法：

⑷將雜種細(xì)胞培養(yǎng)成雜種植株依據(jù)的理論基礎(chǔ)是

。II．若該過程是制備治療“SARS”病毒的單克隆抗體，A為人B淋巴細(xì)胞（染色體組成為2A＋XX=46），B為鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體組成為2A＋XX=40）⑸用單克隆抗體制成“生物導(dǎo)彈”主要利用了抗體的

特性。⑹A細(xì)胞來自于

，雜種細(xì)胞C共有

個(gè)染色體組。⑺雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)與植物組織培養(yǎng)的主要區(qū)別是培養(yǎng)基要用

培養(yǎng)基。（物理狀態(tài)），培養(yǎng)基中除了添加必要的營養(yǎng)物質(zhì)為還需加入

。置大于800勒克斯光照下培養(yǎng)，收集分化的細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞的全能性

抗體與抗原結(jié)合，發(fā)揮特異性免疫效應(yīng)

非典患者

4

液體動(dòng)物血清

⑶設(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜置大于806.右圖是制備分泌抗X抗體的過程，根據(jù)圖解回答問題：6.右圖是制備分泌抗X抗體的過程，根據(jù)圖解回答問題：⑴給小鼠注射抗原的目的是__________________。⑵在單克隆抗體制備過程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有________

的特性。⑶由圖中可看出，單克隆抗體制備過程運(yùn)用了________和______________的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段，前者常用的誘導(dǎo)劑與植物原生質(zhì)體融合不同的是可用_____________。⑷動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等，與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是，還含有_________________。獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體

動(dòng)物細(xì)胞融合

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

滅活的病毒

動(dòng)物血清

⑴給小鼠注射抗原的目的是__________________⑸在動(dòng)物細(xì)胞融合過程中，需要將所選取的組織細(xì)胞離散開，以利于細(xì)胞融合，可用________________