依非韋倫原料有機殘留溶劑方法驗證

.目的為依非韋倫有機殘留溶劑氣相色譜頂空法"AMV/F1010/RS-GC/00”分析方法提供驗證數(shù)據(jù)支持。.再驗證關鍵指標測試步驟（見5.0節(jié)）應檢查標準溶液的拖尾因子、理論板數(shù)、容量因子（K值），確保分析方法的有效性?？山邮軜藴剩和衔惨蜃硬坏眠^1.5；理論板數(shù)不得少于5000；容量因子不得小于1.0。上述三個指標是除驗證方案規(guī)定的系統(tǒng)適用性指標（分離度、RSD%）外要求的指標。線性范圍（見8.5節(jié)）標準濃度序列溶液的Y截距不得過峰面積的10%。除檢查驗證方案所規(guī)定的相關系數(shù)外應檢查此指標。.再驗證原因基于客戶最佳系統(tǒng)適用性建議實施檢驗方法變更。.批準姓名職務簽名日期制定復核審閱批準依非韋倫有機殘留溶劑氣相色譜頂空法分析方法驗證方案方案編號：AMV/F1010/RS-GC/00批準姓名職務簽名日期制定復核審閱批準驗證方案產品名稱：依非韋倫頒布日期：方法名稱：氣相頂空法檢測殘留溶劑頁數(shù)：2/15.目的：以氣相頂空法驗證依非韋倫中有機殘留溶劑，確保分析方法符合預期要求。.范圍:本方案適用于XXX公司QC實驗室依非韋倫有機殘留溶劑氣相色譜頂空法的驗證。.責任：按下述完成此項驗證的責任：QC：執(zhí)行驗證。QC：驗證數(shù)據(jù)匯總、出具驗證報告書并復核。QA：驗證數(shù)據(jù)的檢查、驗證報告的批準。.依據(jù)：ICH指南Q2（R1）。.測試步驟：應使用HPLC級甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯作為對照品。以HPLC級二甲亞砜（DMSO）為稀釋劑。色譜條件：色譜柱：DB-624,30mx0.53mm（內徑），3乩毛細管色譜柱。載氣（氮氣）流速：3.0ml/min。程序升溫：先于40℃維持2分鐘，再以10℃/分鐘升至108℃，維持8分鐘，再以10℃/分鐘升至220℃，維持2分鐘。進樣室溫度：140℃。檢測器溫度：260℃。分流比：1：5。運行時間：30分鐘。頂空條件：樣品保溫室溫度：95℃。樣品平衡時間：40分鐘。進樣管溫度：105℃。進樣體積：1ml（氣態(tài)）?？瞻兹芤旱闹苽洌壕芪《讈嗧?.0ml,置于頂空瓶中，以丁基橡膠塞鋁蓋密封。標準儲備溶液的制備：取50ml二甲亞砜，置于100ml量瓶中，分別精密加入0.30g甲醇，0.50g異丙醇，0.50g甲基叔丁基醚（MTBE）,0.50g正庚烷，0.089g甲苯，以二甲亞砜溶解并稀釋至刻度。標準溶液的制備：精密吸取10ml標準儲備液，置于100ml量瓶中，以二甲亞砜稀釋至刻度。精密吸取此溶液5.0ml,置于頂空瓶中，以丁基橡膠塞鋁蓋密封。供試品溶液的制備：精密稱取依非韋倫供試品0.50g,置于頂空瓶中，加5ml二甲亞砜，以丁基橡膠塞鋁蓋密封。測試步驟：先注入空白溶液一針,再注入標準溶液6針,按下述檢查系統(tǒng)適用性：.標準溶液6次進樣甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯的峰面積RSD%不得過15.0%。.上述各溶劑峰的分離度不得低于3.0。如通過系統(tǒng)適用性檢測，再進供試品溶液一次，按下式計算殘留溶劑含量（ppm）：公式：ATWS105殘留溶劑％=X——X——X——X106AS100100WT式中：AT—供試品溶液溶劑峰峰面積；AS一標準溶液溶劑峰峰面積；WS一用于標準品的溶劑加入量，g；WT一供試品稱樣量，g。.預研究要求：所有驗證實驗均應按驗證方案規(guī)定在合格的、經校驗的氣相、頂空色譜系統(tǒng)中完成。.原材料：應使用依非韋倫成品批用于驗證并在驗證報告中注明批號。.驗證參數(shù)專屬性系統(tǒng)精密度和方法精密度中間精密度檢測限和定量限線性和范圍準確度耐用性專屬性方法學：分別進樣DMSO及規(guī)定濃度的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯、未加5個標準溶液的供試液、加5個標準溶液的供試液，連續(xù)進樣6次，檢查：8.1.1.所有溶劑峰的保留時間。所有溶劑峰的分離度?？瞻紫♂寗θ軇┓灞Ａ魰r間的影響?？山邮軜藴剩簶藴嗜芤哼B續(xù)進樣6次的溶劑峰峰面積的RSD%均不得過15.0%；依非韋倫加標溶液的各溶劑峰應分離良好，分離度不得低于3.0%；空白稀釋劑對溶劑峰保留時間的影響不得過0.5%。系統(tǒng)精密度和方法精密度系統(tǒng)精密度：按上述測試步驟制備標準溶液，以氣相頂空法連續(xù)進樣6次，計算標準溶液連續(xù)進樣6次的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯溶劑峰峰面積的RSD%。方法精密度：分別制備6個依非韋倫供試液，每個供試液均加入25%的標準溶液，分別以頂空法進樣1次，另取未加標依非韋倫供試液進樣，計算供試液連續(xù)進樣6次的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯溶劑含量的RSD%?？山邮軜藴剩核腥軇┓彘g的分離度均不得小于3.0。系統(tǒng)精密度：標準溶液連續(xù)進樣6次的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯溶劑峰峰面積的RSD%不得過15.0%。方法精密度：供試品連續(xù)進樣6次的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯溶劑含量的RSD%不得過15.0%。間精密度：方法學：以不同的檢驗員、不同檢測日期重復方法精密度測試步驟。分別制備6個依非韋倫供試液，每個供試液均加入25%的標準溶液，分別以頂空法進樣1次，另取未加標依非韋倫供試液進樣，計算供試液連續(xù)進樣6次的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯溶劑含量的RSD%。求得每個溶劑6次測試方法精密度和中間精密度的累積RSD%?？山邮軜藴剩杭訕訕藴嗜芤哼B續(xù)進樣6次的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯溶劑峰峰面積的RSD%不得過15.0%。所有溶劑峰間的分離度均不得小于3.0。依非韋倫供試品6次測得的各溶劑含量的RSD%不得過15.0%。依非韋倫供試品12次（6次方法精密度+6次中間精密度）測得的各溶劑含量的RSD%不得過15.0%。測限和定量限方法學：通過連續(xù)3次注射不同濃度的標準溶液（如實際檢測濃度的10%、5%、2.5%、1.25%、0.63%、0.32%、0.16%、0.08%）分別測定甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯溶劑峰的檢測限和定量限。計算不同濃度所有溶劑峰峰面積的RSD%,計算3次進樣的標準偏差，平均標準偏差和斜率。按下式計算LOD和LOQ：關于LOD：DL=3XO/S關于LOQ：QL=10Xo/S式中。為標準偏差；S為斜率；DL為檢測限；QL為定量限。按上述公式以實際檢測濃度的150%?LOQ級濃度計算線性度，通過連續(xù)進樣6次LOQ級溶液（氣相頂空法）計算LOQ級精密度，建立LOQ級預測曲線?？山邮軜藴剩簶藴嗜芤哼B續(xù)進樣6次的各溶劑峰峰面積的RSD%不得過15.0%。所有溶劑峰間的分離度均不得小于3.0。LOQ級精密度不得過15.0%。性和范圍方法學：完成甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯的線性研究。制備7種不同濃度的標準溶液（從LOQ級濃度?實際檢測濃度的150%）,分別進樣2次（氣相頂空法），取2次峰面積的平均值，以溶劑濃度VS平均峰面積作圖，求得相關系數(shù)。以Y=截距+斜率XX做回歸方程可接受標準：標準溶液連續(xù)進樣6次的各溶劑峰峰面積的RSD%不得過15.0%。所有溶劑峰間的分離度均不得小于3.0。相關系數(shù)不得小于0.995。確度方法學：以回收率完成準確度研究。制備3X3個加標依非韋倫供試液（加入標準溶液濃度分別為實際檢測濃度的50%、100%、150%）,共計9個供試液,分別進樣（氣相頂空法）,分別計算甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯回收率百分比（%）。可接受標準：標準溶液連續(xù)進樣6次的各溶劑峰峰面積的RSD%不得過15.0%。所有溶劑峰間的分離度均不得小于3.0?；厥章拾俜直葢獮?0.0%?110.0%。用性方法學：通過任意改變如下分析方法（如改變載氣流速、進樣器溫度、檢測器溫度、進樣管溫度、樣品保溫室溫度）,重復方法精密度研究,計算6次測得的依非韋倫供試品中甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯含量的RSD%。求得6次測得的每個溶劑含量方法精密度和6次耐用性研究的累積RSD%。耐用性研究方法1#和方法2#：改變載氣流速為3.0±0.2ml/分鐘。耐用性研究方法3#和方法4#：改變進樣器溫度為140±2℃，檢測器溫度為260±2℃。耐用性研究方法5#和方法6#：改變進樣管溫度為105±2℃。耐用性研究方法7#和方法8#：改變樣品保溫室溫度為95±2℃。可接受標準：標準溶液連續(xù)進樣6次的各溶劑峰峰面積的RSD%不得過15.0%。所有溶劑峰間的分離度均不得小于3.0。依非韋倫供試品6次測得的各溶劑含量的RSD%不得過15.0%。依非韋倫供試品12次（6次方法精密度+6次耐用性）測得的各溶劑含量的RSD%不得過15.0%。.研究可接受標準：如依非韋倫有機殘留溶劑氣相色譜頂空法分析方法驗證的所有驗證參數(shù)在測試可接受標準范圍內，可認為研究設定參數(shù)值已經過驗證，準予采用。依非韋倫有機殘留溶劑氣相色譜頂空法分析方法驗證報告方案編號：AMV/F1010/RS-GC/00

報告編號：RAMV/F1010/RS-GC/01

批準姓名職務簽名日期制定復核批準質量控制部依非韋倫有機殘留溶劑氣相色譜頂空法分析方法驗證報告頁數(shù)：2/105目錄表Sr.No.目錄頁數(shù)1目的032范圍033責任034參考依據(jù)035驗證過程中所使用的儀器、編號（批號）、溶劑標準、稀釋劑及測試步驟列表03-066分析方法驗證參數(shù)076.1.專屬性086.2.系統(tǒng)和方法適用性146.3.中間精密度196.4.檢測限和定量限256.4.1.LOQ級精密度356.5.線性和范圍396.6.準確度476.7.耐用性607驗證參數(shù)驗證結果摘要1018驗證結論105目的匯總依非韋倫有機殘留溶劑氣相色譜頂空法分析方法驗證結果，保證分析方法與設定指標相適應。范圍此報告適用于XXX公司QC實驗室依非韋倫有機殘留溶劑氣相色譜頂空法的驗證。責任按下述完成此項驗證的責任：.QC：執(zhí)行驗證。.QC：驗證數(shù)據(jù)匯總、出具驗證報告書并復核。.QA：驗證數(shù)據(jù)的檢查、驗證報告的批準。依據(jù)：ICH指南Q2（R1）。驗證過程中所使用的儀器、編號（批號）、溶劑標準、稀釋劑列表。儀器儀器編碼/ID型號分析天平INT-16精密*(XB120A)氣相色譜儀INT-32島津GC-20145.2.用于驗證的產品批號序號名稱批號1依非韋倫IL706745.3用于標準品的HPLC級溶劑序號名稱批號1甲醇2異丙醇3甲基叔丁基醚4正庚烷5甲苯5.4驗證中所使用的HPLC級稀釋劑序號名稱批號1二甲亞砜4236038測試步驟色譜條件：色譜柱：DB-624,30mX0.53mm（內徑），3乩毛細管色譜柱。載氣（氮氣）流速：3.0ml/min。程序升溫：先于40℃維持2分鐘，再以10℃/分鐘升至108℃，維持8分鐘，再以10℃/分鐘升至220℃，維持2分鐘。進樣室溫度：140℃。檢測器溫度：260℃。分流比：1：5。運行時間：30分鐘。頂空條件：樣品保溫室溫度：95℃。樣品平衡時間：40分鐘。進樣管溫度：105℃。進樣體積：1ml（氣態(tài)）?？瞻兹芤旱闹苽洌壕芪《讈嗧?.0ml,置于頂空瓶中，以丁基橡膠塞鋁蓋密封。標準儲備溶液的制備：取50ml二甲亞砜，置于100ml量瓶中，分別精密加入0.30g甲醇，0.50g異丙醇，0.50g甲基叔丁基醚（MTBE），0.50g正庚烷，0.089g甲苯，以二甲亞砜溶解并稀釋至刻度。標準溶液的制備：精密吸取10ml標準儲備液，置于100ml量瓶中，以二甲亞砜稀釋至刻度。精密吸取此溶液，置于頂空瓶中，以丁基橡膠塞鋁蓋密封。供試品溶液的制備：精密稱取依非韋倫供試品0.50g，置于頂空瓶中，加5ml二甲亞砜，以丁基橡膠塞鋁蓋密封。測試步驟：先注入空白溶液一針，再注入標準溶液6針，按下述檢查系統(tǒng)適用性：.標準溶液6次進樣甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯的峰面積RSD%不得過15.0%。.上述各溶劑峰的分離度不得低于3.0。如通過系統(tǒng)適用性檢測，再進供試品溶液一次，按下式計算殘留溶劑含量（ppm）：公式：ATWS105殘留溶劑％=X——X——X——X106AS100100WT式中：AT—供試品溶液溶劑峰峰面積；AS一標準溶液溶劑峰峰面積；WS一用于標準品的溶劑加入量，g；WT一供試品稱樣量，g。析方法驗證參數(shù)依非韋倫有機殘留溶劑氣相色譜頂空法分析方法應驗證下列參數(shù)：專屬性系統(tǒng)精密度和方法精密度中間精密度檢測限和定量限線性和范圍準確度耐用性專屬性方法學可接受標準標準品儲備液的制備（5個溶劑實際對照品稱樣量）.標準溶液的制備.用于供試品加標的標準溶液（25%實際檢測濃度）取25ml標準溶液，置于100ml量瓶中，加DMSO稀釋至刻度。供試品溶液的制備（未加25%標準溶液）.加標供試品溶液的制備精密稱取依非韋倫供試品0.5002g,置于頂空瓶中，加25%標準溶液5ml,以丁基橡膠塞鋁蓋密封。甲醇溶液的制備（同6.1.3,6.1.4）異丙醇溶液的制備甲基叔丁基醚溶液的制備正庚烷溶液的制備甲苯溶液的制備進樣序列序列號進樣樣品名稱進樣針數(shù)1DMSO空白溶液12標準溶液63依非韋倫供試品溶液（未加標）14依非韋倫供試品溶液（加25%標準溶液）15甲醇溶液16異丙醇溶液17甲基叔丁基醚溶液18正庚烷溶液19甲苯溶液16.1.14標準溶液進樣結果匯總進樣序列色譜圖ID測得的面積甲醇異丙醇甲基叔丁基醚正庚烷甲苯118.02.0801218.02.0802318.02.0803418.02.0804518.02.0805618.02.0806平均標準偏差RSD%6.1.15供試品和單個溶劑進樣結果匯總進樣ID色譜ID測得的保留時間甲醇異丙醇甲基叔丁基醚正庚烷甲苯甲醇18.02.08073.501異丙醇18.02.08085.167甲基叔丁18.02.08095.953基醚庚烷18.02.08108.742甲苯18.02.081111.536標準溶液18.02.08013.5075.1745.9678.76111.565未加標供試品18.02.0812未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出加標供試品18.02.08133.4925.1525.9468.73611.533分離度18.02.081319.3156.70522.48421.451檢驗結論.標準溶液6針進樣測得的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯色譜峰峰面積的RSD%分別為3.7%、4.0%、1.5%、1.4%、1.8%。標準溶液6針進樣測得的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯色譜峰容量因子分別為2.1、3.6、4.3、6.7、9.2。標準溶液6針進樣測得的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯色譜峰拖尾因子分別為1.2、1.0、1.0、1.0、1.0。標準溶液6針進樣測得的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯色譜峰理論板數(shù)分別為45596、41443、32737、88279、102084。上述系統(tǒng)適用性指標均在規(guī)定范圍內。.依非韋倫加標供試品測得的所有溶劑峰均分離良好，甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯色譜峰的保留時間分別為3.5、5.2、5.9、8.7、11.5分鐘，甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯色譜峰的分離度分別為19.3、6.7、22.5、21.5。稀釋劑對溶劑峰保留時間的影響均為0，因此專屬性符合規(guī)定。系統(tǒng)和方法精密度方法學系統(tǒng)精密度：按上述測試步驟制備標準溶液，以氣相頂空法連續(xù)進樣6次，計算標準溶液連續(xù)進樣6次的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯溶劑峰峰面積的RSD%。方法精密度：分別制備6個依非韋倫供試液，每個供試液均加入25%的標準溶液，分別以頂空法進樣1次，另取未加標依非韋倫供試液進樣，計算供試液連續(xù)進樣6次的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯溶劑含量的RSD%?？山邮軜藴剩核腥軇┓彘g的分離度均不得小于3.0。容量因子不得小于1.0。拖尾因子不得過1.5。理論板數(shù)不得少于5000。系統(tǒng)精密度：標準溶液連續(xù)進樣6次的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯溶劑峰峰面積的RSD%不得過15.0%。方法精密度：依非韋倫供試品連續(xù)進樣6次的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯溶劑含量的RSD%不得過15.0%。標準儲備溶液的制備（5個溶劑實際對照品稱樣量）：見驗證方案。標準溶液的制備：見驗證方案。.用于供試品加標的標準溶液（25%實際檢測濃度）

取25ml標準溶液，置于100ml量瓶中，加DMSO稀釋至刻度。6.2.6供試品溶液的制備（未加25%標準溶液）6.2.7.加標供試品溶液的制備按下表精密稱取依非韋倫供試品，置于頂空瓶中，加25%標準溶液5ml,以丁基橡膠塞鋁蓋密封。供試品制備供試品稱樣量（g）樣品10.5003樣品20.5002樣品30.5003樣品40.5001樣品50.5002樣品60.5002進樣序列進樣序列號進樣樣品名稱進樣針數(shù)1DMSO空白溶液12標準溶液63依非韋倫供試品溶液（未加標）14依非韋倫供試品溶液（加25%標準溶液）1?6每個1針6.2.9標準溶液進樣結果匯總—系統(tǒng)精密度進樣序列色譜圖ID測得的面積甲醇異丙醇甲基叔丁基醚正庚烷甲苯標準119.02.0801標準219.02.0802標準319.02.0803標準419.02.0804標準519.02.0805標準619.02.0806平均標準偏差RSD%6.2.10供試品加標和未加標進樣結果匯總進樣序列色譜ID測得的面積甲醇異丙醇甲基叔丁基醚正庚烷甲苯未加標供試品19.02.0807未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出樣品119.02.08082237754759894329172900738615樣品219.02.0809樣品319.02.0810樣品419.02.0811樣品519.02.0812樣品619.02.08136.2.11依非韋倫6個殘留溶劑測定結果匯總—方法精密度進樣序列色譜圖ID測定結果，ppm甲醇異丙醇甲基叔丁基醚正庚烷甲苯樣品119.02.08088731353樣品219.02.0809863樣品319.02.0810873樣品419.02.0811867樣品519.02.0812853樣品619.02.0813868平均866139111041024234標準偏差7.70537.01226.62828.8775.680RSD%0.8902.6622.4132.8212.4246.2.12殘留溶劑計算舉例：樣品1：22377X0.3022X10X5X106甲醇==873ppm77379X100X100X0.5003結論甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯色譜峰的分離度分別為19.9、6.8、22.5、21.4。標準溶液連續(xù)進樣6次的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯色譜峰的容量因子分別為2.1、3.6、4.3、6.7、9.2。標準溶液6針進樣測得的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯色譜峰拖尾因子分別為1.2、1.0、1.0、1.0、1.0。標準溶液6針進樣測得的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯色譜峰理論板數(shù)分別為45519、40253、32494、87452、101815。系統(tǒng)精密度：標準溶液6針進樣測得的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、正庚烷、甲苯色譜峰峰面積的RSD%分別為2.0%、1.5%、0.8%、1.4%、1.3%。均在規(guī)定的限度范圍內，系統(tǒng)適用性符合規(guī)定。方法精密度：依非韋倫供試品連續(xù)進樣6次的甲醇、異丙醇、甲基叔丁基醚、