高效液相色譜法同時測定新面醑中甲硝唑、氯霉素、水楊酸三組分含量

高效液相色譜法同時測定新面醑中甲硝唑、氯霉素、水楊酸三組分含量〔〕:

摘要：目的建立同時測定新面醑中甲硝唑、氯霉素、水楊酸含量測定方法。方法采用HPLC法，色譜柱：Extend-C1〔8250mmx4.6mm，5m〕，流動相：甲醇水〔55：45〕〔磷酸調(diào)節(jié)pH至3.2〕，檢測波長230nm；柱溫35，進樣量：10l。結(jié)果甲硝唑、氯霉素、水楊酸分別在21.88~218.78g/mL20.42~204.17g/mL、5.04~50.4g/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系〔r=0.9999、r=1、r=1〕。結(jié)論采用高效液相色譜法能同時檢測出新面醑中甲硝唑、氯霉素、水楊酸含量。

關(guān)鍵詞：新面醑；甲硝唑；氯霉素；水楊酸；含量測定；HPLC

本文引用格式：杜建紅,鐘元高,何德云,等.高效液相色譜法同時測定新面醑中甲硝唑、氯霉素、水楊酸三組分含量[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘,2022,18(72):270-271,275.

HPLCMethodfortheDeterminationofMetronidazole,Chloramphenicol,SalicylicAcidintheNewSurfaceXu

DUJian-hong1,ZHONGYuan-gao1,HEDe-yun1,TUXian-qin2

(1.InstituteforDrugandInstrumentControlofChengduMilitaryRegion,ChengduSichuan;2.BayiorthopedicshospitalofChengduMilitaryRegion,ChengduSichuan)

ABSTRACT:ObjectiveToestablishthemethodformetronidazoleandchloramphenicolinthenewsurfaceXubyapplyingHPLC.MethodsUsingHPLCmethod,chromatographycolumn:Extend-C18(250mmx4.6mm,5m),mobilephase:acetonitrile-0.05mol/Lsodiumdihydrogenphosphatesolution(withphosphoricacidadjustablepHto2.5)(55:45),detectionwavelengthof274nm,Columntemperature40Ⅱ.ResultsMetronidazoleshowedgoodlinearrelationshipintherangeof54.0~162.1g/mL,r=0.9999;Chloramphenicolshowedgoodlinearrelationshipintherangeof48.0~144.0g/mL,r=1;ConclusionThemethodofHPLCcanaccuratlydetectthecontentofmetronidazole、chloramphenicolandSalicylicacidnthenewsurfaceXu.

KEYWORDS:ThenewsurfaceXu;Metronidazole;Chloramphenicol;Salicylicacid;Content;HPLC

0引言

新面醑為原第三軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院消費的醫(yī)院制劑，臨床主要用于治療尋常痤瘡及頭皮脂溢性皮炎等，為常見的皮膚科用藥。主要有效成分為甲硝唑、氯霉素、水楊酸，原標(biāo)準(zhǔn)采用容量分析方法測定水楊酸的含量，并未對甲硝唑和氯霉素含量做詳細規(guī)定，為了實現(xiàn)對該制劑質(zhì)量的更好把控，通過查閱相關(guān)文獻資料[1-8]，本文采用高效液相色譜法，討論同時檢測甲硝唑、氯霉素、水楊酸含量測定方法，供同仁參考。

1儀器和試藥

1.1儀器

高效液相色譜儀〔LC-20A〕，優(yōu)普系列超純水器〔UPT-Ⅰ，成都超純科技〕，超聲波清洗器〔KQ5200E，昆山市超聲儀器〕，電子分析天平〔BT25S，賽多利斯〕。

1.2試藥

甲硝唑?qū)φ掌贰?00191-202206，中國食品藥品檢定研究院，純度：99.9%〕，氯霉素對照品〔130555-202202，中國藥品生物制品檢定所，純度：99.4%〕，水楊酸對照品〔100106-202204，中國食品藥品檢定研究院，純度：99.9%〕，甲醇〔批號：2022120401，成都科龍化工試劑廠〕，磷酸〔批號：20220413，成都科龍化工試劑廠〕，色譜甲醇〔A455-4，fisherscientific〕，超純水〔自制〕，新面醑〔批號：140207、140219、140316，第三軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院提供〕。

2方法與結(jié)果

2.1溶液制備

2.1.1混合對照品溶液制備

精細稱取的甲硝唑?qū)φ掌?0.95mg置10mL量瓶中，加流動相溶解、稀釋、定容至刻度，搖勻，作為儲藏液A；精細稱取氯霉素對照品10.27mg置10mL量瓶中，加流動相溶解、稀釋、定容至刻度，搖勻，作為儲藏液B；精細稱取水楊酸對照品12.60mg置100mL量瓶中，加流動相溶解、稀釋、定容至刻度，搖勻，作為儲藏液C；再分別量取儲藏液A、B各1mL，儲藏液C2mL置同一10mL量瓶中，加流動相稀釋，定容至刻度，搖勻，作為混合對照品溶液。

2.1.2供試品溶液制備

精細量取新面醑2mL，置200mL量瓶中，加流動相稀釋，定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.1.3陰性對照溶液

按處方量依次參加除甲硝唑、氯霉素和水楊酸以外的其他成分，制備陰性供試品100mL，照供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。

2.2色譜條件

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱Extend-C18〔250x4.6mm，5m〕；流動相：甲醇水〔55：45〕〔磷酸調(diào)節(jié)pH至3.2〕，檢測波長230nm；柱溫35℃，進樣量：10l。

2.3方法學(xué)考察

2.3.1專屬性試驗

精細汲取混合對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各10l，照上述色譜條件進樣分析，三組分出峰順序依次為甲硝唑、氯霉素、水楊酸。見圖1。三組分保存時間分別為：4.4min、7.0min、10.0min，別離度均大于1.5。結(jié)果顯示陰性對照溶液在主峰位置無色譜峰，對新面醑三組分含量測定不存在干擾。

2.3.2線性關(guān)系考察

精細汲取"2.1.1";混合對照品溶液各2、4、8、10、12、20l，照色譜條件依次進樣分析，記錄各組分出峰時間與峰面積。

以峰面積〔Y〕為縱坐標(biāo)，進樣量X〔g/mL〕為橫坐標(biāo)，進展線性回歸，得甲硝唑、氯霉素、水楊酸線性回歸方程式分別為Y=14971X+5047〔n=6〕，r=0.9999、Y=10361X+3279.5〔n=6〕，r=1、Y=36523X-821.64〔n=6〕，r=1；結(jié)果說明：甲硝唑、氯霉素、水楊酸分別在21.88~218.78g/mL、20.42~204.17g/mL、5.04~50.4g/mL范圍內(nèi)，與峰面積存在良好的線性關(guān)系。

2.3.3精細度試驗

取"2.1.1";項下對照品溶液，按照"2.2";色譜條件，依次連續(xù)進樣5次，每次10l，記錄三組分峰面積，結(jié)果三組分峰面積RSD分別為0.4%〔n=5〕、0.6%〔n=5〕、0.7%〔n=5〕，說明該方法精細度試驗好。

2.3.4重現(xiàn)性試驗

精細量取批號為140207供試品2mL，分別置6個200mL量瓶中，按"2.1.2";處理得供試品溶液6份，照上述色譜條件進樣分析，分別記錄三組分峰面積，計算三組分峰面積RSD分別為0.5%〔n=6〕、0.7%〔n=6〕、0.8%〔n=6〕，說明方法重現(xiàn)性試驗好。

2.3.5穩(wěn)定性試驗

取批號為140207供試品2mL，照"2.1.2";處理得供試品溶液，室溫下存放，依次在同一天內(nèi)第0、2、4、8、12、16、20、24h進樣分析，分別記錄三組分峰面積，計算三組分峰面積RSD分別為0.6%〔n=8〕、0.7%〔n=8〕、0.9%〔n=8〕，結(jié)果說明供試品溶液中三組分在24小時內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.6加樣回收率試驗

精細汲取批號為140207供試品1mL〔含甲硝唑、氯霉素、水楊酸分別為：10.02mg/mL、10.04mg/mL、2.52mg/mL〕各9份置200mL量瓶中，再精細稱取甲硝唑、氯霉素、水楊酸對照品，分別按已測出供試品含量的80%、100%、120%各三份投于上述量瓶中，照供試品溶液制備方法制備成9份供試品溶液，按2.2項下色譜條件進樣10l，記錄三組分峰面積，計算平均回收率〔表1〕。

2.4樣品含量測定

將批號為120529、120812、121023的3份樣品按照2.1.2項下處理，按照2.2項下色譜條件進展含量測定，每份樣品重復(fù)進樣4次，結(jié)果見表2。試驗結(jié)果說明，用HPLC法測定能準(zhǔn)確測定出新面醑中甲硝唑、氯霉素和水楊酸含量。

3討論

新面醑屬于醫(yī)院非標(biāo)準(zhǔn)制劑，主要用于治療尋常痤瘡和頭皮脂溢性皮炎等，主要有效成分為甲硝唑、氯霉素和水楊酸。其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)里面主要是一些常規(guī)的理化鑒別，含量測定為利用滴定法測定水楊酸含量，沒有提及對甲硝唑和氯霉素的含量測定，甲硝唑和氯霉素亦是該制劑中主要有效成分，本文采用高校液相色譜法討論能同時檢測出甲硝唑、氯霉素和水楊酸三組分含量的色譜條件。試驗結(jié)果說明，色譜條件為：流動相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液〔用磷酸調(diào)pH至2.5〕〔55：45〕；流速：1.0mL/min；檢測波長：274nm；柱溫：40℃，進樣量：20l，完全能同時檢測出甲硝唑、氯霉素和水楊酸，且該方法前處理簡單，方便，快捷。

參考文獻：

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