水產(chǎn)微生物學

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第一章緒論

一.名詞解釋

1.微生物：存在于自然界中的一群個體微小、結(jié)構(gòu)簡單、必須借助顯微鏡放大數(shù)百倍甚至數(shù)萬倍才能觀察清楚的一類微小生物的總稱。

2.微生物學：是在細胞、分子或群體水平上研究微生物形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理代謝、遺傳變異、生態(tài)分布、分類進化和生命活動基本規(guī)律以及微生物與人類、動植物和自然界的相互關系，并將其應用于農(nóng)牧漁業(yè)、工業(yè)、環(huán)境保護、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物工程等領域的科學。

3.水產(chǎn)微生物學：是微生物學應用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)后而形成的微生物學的一個分支學科，其主要任務是在研微生物學的—般理論和技術的基礎上，研究微生物與水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境、水產(chǎn)動物飼料、水產(chǎn)動物疾病和水產(chǎn)品保鮮、貯藏的關系，充分發(fā)揮微生物在改善養(yǎng)殖環(huán)境、提高抗病力和健康水平、防治水產(chǎn)動物疾病以及防止水產(chǎn)品腐敗變質(zhì)中的作用。

二、雜題

1、原核細胞型微生物：細菌、放線菌、霉形菌、立克次體、衣原體、螺旋體、藍細菌。

2、真核細胞型微生物：真菌、原生動物等。

3、按結(jié)構(gòu)差異，微生物有三種類型：非細胞型微生物（主要是病毒）、原核細胞型微生物、真核細胞型微生物。

4、病原微生物的致病性檢測技術有：檢樣處理、細胞與動物接種、MLD口LD50測定、致病因子分析等

5、用于微生物的免疫學技術有：抗原和抗體的制備、凝集、沉淀和抗體標記技術等。

6、研究病毒大小和形態(tài)的方法有：電子顯微鏡法、超濾膜過濾法、超速離心法、電離輻射與X線衍射法。

三.問答題

1、微生物有哪些特性？

①個體微小，結(jié)構(gòu)簡單②種類繁多，分類廣泛

③群居混雜，相生相克④生長繁殖快，適應能力強。

⑤生物遺傳性狀典型，實驗技術體系完善。

2、微生物的主要作用

1）有益方面：①推動自然界物質(zhì)循環(huán)和能量流動②凈化環(huán)境，維持生態(tài)平衡

③維護人和動物健康④制造加工食品和工農(nóng)業(yè)產(chǎn)品⑤用于生物科學研究和生物工程

2）有害方面：①某些微生物能引起人和動植物疾病

②毀壞工農(nóng)業(yè)產(chǎn)品，農(nóng)副產(chǎn)品和生活用品

第二章細菌

一、名詞解釋

1、細菌：是指個體微小、形態(tài)與結(jié)構(gòu)簡單、具有細胞壁和原始核質(zhì)，無核仁和核膜，除核糖體外無其他細胞器的原核生物。

2、菌落：某個細菌在適合生長的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部，在適宜的條件下，經(jīng)過一定時間培養(yǎng)，多

數(shù)為18-24h,可生長繁殖大量的菌體，形成一個肉眼可見的、有一定形態(tài)的獨立群體，稱為菌落，又稱克隆。

3、細菌的多形性：有些細菌在適宜的環(huán)境條件下生長，其形態(tài)并不會完全一致的現(xiàn)象。

4、細菌細胞壁：在細菌細胞的外圍，是一層堅韌而具有一定彈性的膜。

5、原生質(zhì)體：革蘭氏陽性菌經(jīng)溶菌酶或青霉素處理后，可完全除去細胞壁，形成僅有細胞膜包裹細胞質(zhì)的菌體稱為原生質(zhì)體。

6、原生質(zhì)球：用溶菌酶等作用于革蘭氏陰性菌，僅能除去細胞壁內(nèi)的肽聚糖，形成仍有外膜層包裹的菌體，稱為原生質(zhì)球。

7、間體：細菌的部分細胞膜內(nèi)陷、折疊、卷曲形成的囊狀物，多見于革蘭氏陽性菌，或叫中介體。

8、質(zhì)粒：染色體外的遺傳物質(zhì)，存在于細胞質(zhì)中。是環(huán)狀閉合的雙鏈DNA帶有遺傳信息，

控制細菌某些特定的遺傳性狀。

9、核質(zhì)：是細菌的遺傳物質(zhì)，集中于細胞質(zhì)的某一區(qū)域，多在菌體中央，無核膜、核仁和有絲分裂

器。因其功能與真核細胞的染色體相似，故習慣上亦稱為細菌的染色體。

10、芽孢：某些細菌在其生長發(fā)育后期，在細胞內(nèi)形成一個圓形或橢圓形、厚壁、含水量極

低、抗逆性極強的休眠體，稱芽孢。

11、糖被：包被于某些細菌細胞壁外的一層厚度不定的膠狀物質(zhì)。

12、S層：某些細菌的一種特殊的表層結(jié)構(gòu)，它完整的包裹菌體，由單一的蛋白質(zhì)亞單位組成，規(guī)則排列，呈類晶格結(jié)構(gòu)。

13、生長曲線：將一定數(shù)量的細菌接種于適宜的液體培養(yǎng)基中，連續(xù)定時取樣檢查活菌數(shù)，可發(fā)現(xiàn)

其生長過程的規(guī)律性。以培養(yǎng)時間為橫坐標，培養(yǎng)物中活菌數(shù)的對數(shù)縱坐標，可繪制出一條生長曲線。根據(jù)生長曲線，細菌的群體生長繁殖可分為遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期。

14、培養(yǎng)基：是用人工方法配置而成的，專供微生物生長繁殖的混合營養(yǎng)物制品。

15、增菌培養(yǎng)基：若了解某種細菌的特殊營養(yǎng)要求，可配制出適合這種細菌而不適合其他細菌生

長的培養(yǎng)基。

16、選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)，使之抑制某些細菌生長，而有利于另一些

細菌生長，從而將后者區(qū)分出來，這種培養(yǎng)基叫選擇培養(yǎng)基。

17、鑒別培養(yǎng)基：用于培養(yǎng)和區(qū)分不同細菌種類的培養(yǎng)基。

18、病原菌：能使機體產(chǎn)生損害的細菌叫病原菌，大多數(shù)是寄生性細菌。

19、條件病原菌：有些致病菌進入機體后，并不表現(xiàn)出致病性，只有在一定的條件下，如機體抵抗力下降時，才表現(xiàn)出致病性，這部分細菌叫條件性病原菌，如嗜水氣單胞菌。

20、致病性：病原菌在一定的條件下，能在宿主體內(nèi)引起感染的能力。致病性也稱致病力或病原性。

21、毒力：病原菌致病力的強弱程度稱為毒力，毒力是菌株的特征。

22、柯赫法則：是確定某種細菌是否具有致病性的主要依據(jù)，其要點是：（1）特殊的病原菌應在同一疾病中查出，在健康者中不存在；（2）此病原菌能被分離培養(yǎng)而得到純種；（3）此純培養(yǎng)物接種易感動物，能導致同樣病癥；（4）從實驗感染的動物體內(nèi)能重新獲得該病原菌的純培養(yǎng)物。

23、基因水平的柯赫法則：主要內(nèi)容：（1）在致病菌株中檢出某些基因或其產(chǎn)物。而無毒力

菌株中無。（2）有毒力菌株的某個基因被損壞，則菌株的毒力應減弱或消除，或者將此基因克隆到無毒株內(nèi)，后者成為有毒力的菌株。（3）將細菌接種動物時，這個基因應在感染過程中表達。（4）在接種動物體內(nèi)檢測到這個基因產(chǎn)物的抗體，或產(chǎn)生免疫保護。

24、侵襲力：病原菌具有在機體內(nèi)定值，突破其防御屏障，通過內(nèi)化作用進入細胞，然后繁

殖和擴散的能力。

25、毒力島（PAI）:指病原菌的某個或某些毒力基因組群,分子結(jié)構(gòu)與功能有別于細菌染色體但位于細菌染色體之內(nèi)，故稱為“島”。

26、外毒素：指細菌在生命活動過程中合成并釋放到周圍環(huán)境中的一種毒素，為一種蛋白質(zhì)。

27、內(nèi)化作用：指某些細菌黏附于細胞表面之后，能進入吞噬細胞或非吞噬細胞內(nèi)部的過程。

28、內(nèi)毒素：指革蘭氏陰性菌外膜中的脂多糖，細菌在死之后破裂或用人工分法裂解菌體后才釋放。

29、抗毒素：外毒素具有良好的免疫性，可刺激機體產(chǎn)生特導性的抗體，使機體具有免疫保護作用，這種抗體稱為抗毒素。

30、類毒素：外毒素在0.4%甲醛溶液作用下，經(jīng)過一段時間可以脫毒，但仍保留原有抗原性，稱為類毒素

31、傳染：指病原微生物在一定條件下侵入易感動物機體，并與之相互作用，使機體呈現(xiàn)出一種病理生理學的過程。

32、局部傳染：病原微生物侵入機體后，在一定的部位定居下來，生長繁殖，產(chǎn)生毒素產(chǎn)物引起局部損害的傳染過程。

33、全身傳染：由于病原菌的毒力強大，而機體免疫力又較弱，不能將病原微生物局限于局部，

以至其向周圍擴散，散布全身，這一過程叫全身感染。

34、明顯傳染：侵入機體的病原菌毒力強、數(shù)量多，而機體的抵抗力又弱時，病原菌可在機

體內(nèi)生長繁殖，產(chǎn)生毒素物質(zhì)，致使機體不能維持其體內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定，便表現(xiàn)出明顯的

臨床癥狀，叫做明顯傳染。

35、隱性傳染：侵入機體的病原菌毒力不強或數(shù)量不多時，機體能維持其內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定，

因而在臨床上不表現(xiàn)出明顯的癥狀。

36、帶菌現(xiàn)象：有些病原菌雖然侵入了動物機體，但不引起傳染，只呈現(xiàn)出無害的寄生狀態(tài)，或者動物發(fā)病痊愈后一定時間，病原菌尚未完全被消滅或排出，這兩種狀態(tài)均稱為帶菌現(xiàn)象。

37、菌血癥：病原菌侵入機體，突破機體防御屏障，進入血流，但是由于機體的抵抗力強，

而是病原菌不能在血液中停留，轉(zhuǎn)移到其他位置。

38、敗血癥：在菌血癥的同時，由于機體抵抗力較弱，致使侵入的病原菌在血液中大量繁殖，波及

全身，造成全身性的損害狀態(tài)。

39、膿毒敗血癥：化膿性細菌在引起敗血癥的同時，又引起膿灶的全身轉(zhuǎn)移。

40、周漿間隙：在革蘭氏陰性菌的細胞膜和外膜的脂質(zhì)雙層之間有一空隙，約占細胞體積的20%-40%稱為周漿間隙。該間隙含有多種蛋白酶、核酸酶、解毒酶及特殊結(jié)合蛋白，在細

菌獲得營養(yǎng)、解除有害物質(zhì)毒性等方面有重要作用。

二、雜題

1、細菌細胞壁的主要成分：肽聚糖和磷壁酸

2、自卑培養(yǎng)基的最常用的凝固劑為：瓊脂

細菌主要繁殖方式為：裂殖

3、性菌毛的數(shù)量一般是1-4根

4、細菌的特殊構(gòu)造有：鞭毛、莢膜、芽孢、菌毛。

5、芽孢核心的中心為核區(qū)，外圍依次有芽孢質(zhì)、芽孢膜、芽孢壁。

6、只在液體表面出現(xiàn)菌膜的微生物屬：好氧型微生物

7、固體培養(yǎng)基中，瓊脂使用濃度為1.5-2.5%，半固體：0.3-0.5%

8、碳源和氮源來自同一有機物的是：化能異養(yǎng)型

9、水產(chǎn)動物病原菌的溫度類型一般是嗜溫型。

10、菌膜是微生物在液體表面的培養(yǎng)特征

10、MR式驗是測定細菌分解糖類的試驗。

三、問答題

1、鞭毛的功能如何，如何確定細菌有無鞭毛？

答：鞭毛的功能：運動。

確定細菌有無鞭毛：①電鏡觀察②鞭毛染色、光鏡檢查③半固體穿刺培養(yǎng)④

凹片，水浸片，暗視野檢查運動性⑤觀察菌落，菌落形狀大、薄且不規(guī)則，邊緣極不圓

整，為運動能力很強，菌落外形圓整、邊緣光滑、厚度較大，是無鞭毛的細菌。

2、試述革蘭氏染色的步驟和主要原理

步驟：結(jié)晶紫初染-碘液媒染-酒精脫色-沙黃（或夏紅）復染。

原理：①革蘭氏陰性菌的細胞壁的粘肽少，脂類多，脫色時脂類被溶解，細胞壁通透性增大，結(jié)晶紫碘液復合物被抽提出，細胞呈無色，用復紅染色時呈紅色。

②革蘭氏陽性菌的細胞壁的粘肽多，脂類少，脫色時粘肽孔徑小（關閉），組織結(jié)晶紫復合物不能逸出，復染時呈紫色。

3、細菌生長曲線可分為哪幾個時期？各期的主要特征如何？

細菌生長曲線可分為四個時期：遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期。遲緩期：分裂緩慢、細胞基本不增加、代謝活躍、菌體體積增大、對藥物敏感。對數(shù)期：細菌分裂很快，數(shù)目呈幾何級數(shù)增加，細菌的形態(tài)、染色性、生理生化特性一致而典型，適宜作菌種和用鑒定。穩(wěn)定期細菌死亡數(shù)與繁殖數(shù)相似，總菌數(shù)達最高水平，形成有經(jīng)濟意義的產(chǎn)物。衰亡期菌體變

形，出現(xiàn)退化形或畸形，細菌最后均歸于死亡。

4、細菌可產(chǎn)生那些合成產(chǎn)物？

細菌可產(chǎn)生的合成產(chǎn)物：是指菌體成分以外的其他合成物質(zhì)。主要有：（1）毒素：①外毒素：蛋白質(zhì)②內(nèi)毒素：糖、磷脂和蛋白質(zhì)復合物。（2）酶：①卵磷脂酶。②膠原酶。③透明

質(zhì)酸酶、凝血漿酶、溶纖維蛋白酶、溶血酶。（3）抗生素。（4）維生素。（5）熱原質(zhì)。（6）色素。

5、試述毒力的控制方法和測定方法？

毒力的控制包括：增強細菌毒力的方法，減弱細菌毒力的方法及固定細菌毒力的方法三個方面的內(nèi)容。

⑴增強細菌毒力的方法：①通過易感動物，②與其他細菌協(xié)同作用。

⑵減弱細菌毒力的方法：①長期在人工培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)，②高于最適溫度下進行培養(yǎng)，

③含有特殊化學物質(zhì)的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，④通過不易感動物，⑤在特殊的合適的氣體條件

下培養(yǎng)。

⑶固定細菌毒力的方法：低溫真空干燥法保存細菌，毒力數(shù)年不變。

細菌毒力的測定方法：

①最小致死量（MLD:能使特定的動物于感染后一定時間內(nèi)發(fā)生全部死亡的最小細菌劑量或毒素劑量。方法簡單，但可能由于實驗動物個體差異而產(chǎn)生誤差。

②半數(shù)致死量（LD50）:是指在一定時間內(nèi)能使半數(shù)實驗動物于感染后發(fā)生死亡所用的活細菌量或毒素劑量。此方法加入了統(tǒng)計方法，結(jié)果較準確。

第三章真菌

名詞解釋

1真菌：具有細胞壁和真正的細胞核，無葉綠素，不能進行光合作用，化能有機營養(yǎng)，能產(chǎn)生孢子進行有性和無性繁殖，不運動的一類真核微生物。

1酵母菌：一類單細胞的真核微生物，主要分布在含糖質(zhì)較高和偏酸性的環(huán)境。

2、霉菌：在基質(zhì)上生長的肉眼可見的絨毛狀，棉絮狀或蜘蛛網(wǎng)狀的絲狀真菌。

3、菌絲體：真菌的許多菌絲交織在一起叫菌絲體

4、營養(yǎng)菌絲：伸入基質(zhì)內(nèi)的菌絲，有吸收營養(yǎng)排除廢物的功能。

5、氣生菌絲：伸出基質(zhì)外的菌絲。

二、雜題

1酵母菌的大小一般為：1-5umX5-30um,最長可達lOOum。

2、霉菌的形態(tài)觀察方法有：菌落形態(tài)觀察法、直接取菌法、玻璃紙透析培養(yǎng)觀察法和載玻片培養(yǎng)觀

察法

3、綿霉菌的分類屬于：鞭毛菌亞門

4、綿霉、鰓霉、水霉、毛霉屬于：無隔菌絲的霉菌

5、木霉、曲霉、青霉屬于：有隔菌絲的霉菌

6、酵母菌細胞壁的主要成分是：葡萄糖、甘露聚糖、蛋白質(zhì)和幾丁質(zhì)，另有少量脂質(zhì)。

三、問答題試述檢查酵母菌假菌絲的步驟與方法(包括培養(yǎng)基種類、顯微鏡物鏡倍數(shù)、制片等)？

假菌絲的觀察方法：劃線接種法。

步驟：用劃線法把某個培養(yǎng)酵母菌接種到馬鈴薯或玉米粉瓊脂的平板培養(yǎng)基上，在劃線部分加無菌蓋玻片。25-28度培養(yǎng)3-5天，取蓋玻片油鏡下觀察，呈樹枝狀的分支的假菌絲細胞的形態(tài)為原始型的短鏈或延長的細胞。

第四章病毒

一.名詞解釋

1病毒：指一類超顯微結(jié)構(gòu)，非細胞形態(tài)，專性活細胞內(nèi)寄生的