實(shí)驗(yàn)三.四.平板劃線斜面接種

平板劃線分離純化

菌落形態(tài)識別

斜面接種了解平板劃線法的基本原理，掌握其操作方法

掌握無菌操作法移接斜面菌種的步驟和方法掌握常用的簡易菌種保藏法熟悉細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌的菌落形態(tài)特征，并對一批未知菌落進(jìn)行識別實(shí)驗(yàn)?zāi)康钠桨鍎澗€法是指把雜菌樣品通過在平板表面劃線稀釋而獲得單菌落的方法。一般是將混雜在一起的不同種微生物或同種微生物群體中的不同細(xì)胞，通過在分區(qū)的平板表面作多次劃線稀釋，形成較多的獨(dú)立分布的單個細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)而繁殖成相互獨(dú)立的多個單菌落。通常認(rèn)為這種單菌落就是某個微生物的“純種”在實(shí)際操作中，要獲得可靠的純種微生物，需進(jìn)行多次劃線分離實(shí)驗(yàn)原理（實(shí)驗(yàn)教材P110）平板、斜面、接種環(huán)超凈工作臺土壤溶液大腸桿菌和酵母菌的混合菌恒溫培養(yǎng)箱

材料儀器實(shí)驗(yàn)流程消毒平板劃線接種培養(yǎng)清潔衛(wèi)生平板劃線操作示意圖斜面接種燒環(huán)和試管口拔塞接種加塞燒環(huán)斜面接種接種斜面接種（實(shí)驗(yàn)教材P8）斜面培養(yǎng)情況（實(shí)驗(yàn)教材P12）觀察細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌等微生物具體菌種菌落的形態(tài)特征?？偨Y(jié)幾類微生物菌落的一般特征并能識別。（二）各類微生物菌落特征觀察菌落形態(tài)：形狀，邊緣情況大?。罕砻鏍顩r：濕潤、粘稠或干燥，隆起或扁平，厚或薄，是否粉末狀質(zhì)地：致密或疏松蔓延程度：與培養(yǎng)基結(jié)合程度顏色（正面、反面、邊沿、中心）氣味四大類微生物識別要點(diǎn)(實(shí)驗(yàn)教程P18)菌落濕潤，正反面、中央與邊緣顏色一致干燥，正反面、中央與邊緣顏色不一小而扁平小小大大小而隆起大而扁平大而隆起致密致密疏松霉菌細(xì)菌……酵母菌……放線菌微生物菌落形態(tài)描述(實(shí)驗(yàn)教程P18)菌落形態(tài)觀察記錄土壤3個平板分別對應(yīng)三個表格，提前畫好空表格判斷每個平板中有多少種不同形態(tài)的菌落。每種形態(tài)的菌落選取其中一個典型方便觀察的菌落作為該形態(tài)菌落來記錄。連續(xù)觀察3天。記錄同一個菌落形態(tài)隨培養(yǎng)時間的變化情況。如果后繼時間平板中出現(xiàn)新形態(tài)的菌落，需增加記錄該形態(tài)菌落。當(dāng)場用記錄本做好記錄，然后老師簽名確認(rèn)。菌落號培養(yǎng)時間濕干菌落描述判斷結(jié)果厚薄大小松密大小表面邊緣隆起形狀顏色透明度正面反面水溶色素11d

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未知菌落識別結(jié)果記錄（實(shí)驗(yàn)教材P21）細(xì)菌菌落特征：凝膠狀、表面較光滑、濕潤、與培養(yǎng)基結(jié)合不緊密，易挑取，正反顏色一致。酵母菌菌落特征（與細(xì)菌相似)：比細(xì)菌大而厚，不透明，表面光滑、濕潤、粘稠，易用針挑起。多呈乳白色，少數(shù)呈紅色。YeastBacteria放線菌特征:致密、堅(jiān)硬、多皺、不易用針挑起，不透明。孢子成熟后，表面粉末狀，