DB32-T 4344-2022 海洋沉積物 油類的測定 超聲提取-紫外分光光度法

ICS01.040.13CCSZ1732江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)DB32/T4344—2022海洋沉積物油類的測定超聲提取-紫外分光光度法Marinesediment-Determinationofoil-UltrasonicExtraction-UVspectrophotometricmethod（報批稿）2022-09-06發(fā)布2022-10-06實施江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB32/T4344—2022目次前言.................................................................................II1234567范圍...............................................................................1規(guī)范性引用文件.....................................................................1術(shù)語和定義.........................................................................1方法原理...........................................................................1試劑和材料.........................................................................1儀器和設(shè)備.........................................................................2樣品...............................................................................27.1樣品采集、貯存及運輸...........................................................27.2樣品制備.......................................................................27.3含水率的測定...................................................................38分析步驟...........................................................................38.1樣品提取.......................................................................38.2樣品分離.......................................................................38.3空白試樣的制備.................................................................38.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立.................................................................38.5樣品測定.......................................................................39計算與表示.........................................................................39.1計算...........................................................................39.2表示...........................................................................31011準(zhǔn)確度............................................................................410.1精密度........................................................................410.2正確度........................................................................4質(zhì)量保證和質(zhì)量控制................................................................411.1空白試驗......................................................................411.2校準(zhǔn)..........................................................................411.3平行樣........................................................................411.4加標(biāo)樣........................................................................412注意事項..........................................................................5附錄A（資料性）精密度和正確度.......................................................7I

DB32/T4344—2022前言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由江蘇省生態(tài)環(huán)境廳提出并歸口。本文件起草單位：江蘇省環(huán)境監(jiān)測中心。本文件主要起草人：袁廣旺、付丹、呂贏、鄭江鵬、張曉昱、魏愛泓、周超凡、董冰潔、蔡瑞。IIDB32/T4344—2022海洋沉積物油類的測定超聲提取-紫外分光光度法1范圍本文件規(guī)定了超聲提取-紫外分光光度法測定海洋沉積物油類的方法原理、試劑和材料、儀器和設(shè)備、樣品、分析步驟、計算與表示、準(zhǔn)確度、質(zhì)量保證和質(zhì)量控制。本文件適用于海洋沉積物中油類超聲提取-紫外分光光度法的測定。當(dāng)取樣質(zhì)量為1g，提取定容體積為25.0ml，使用10mm比色皿時，本方法的檢出限為2mg/kg，測定下限為8mg/kg。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB17378.2海洋監(jiān)測規(guī)范第2部分：數(shù)據(jù)處理與分析質(zhì)量控制GB17378.3海洋監(jiān)測規(guī)范第3部分：樣品采集、貯存與運輸GB17378.5海洋監(jiān)測規(guī)范第5部分：沉積物分析HJ168環(huán)境監(jiān)測分析方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂技術(shù)導(dǎo)則HJ442.4近岸海域環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范第四部分近岸海域沉積物監(jiān)測3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1油類oil指在本文件規(guī)定的條件下，能被正己烷提取，不經(jīng)過硅酸鎂吸附，在225nm波長處有特征吸收的物質(zhì)。4方法原理利用超聲波的空化作用、機械效應(yīng)和熱效應(yīng)等加速沉積物顆粒內(nèi)油類物質(zhì)的釋放、溶解和擴散至正己烷中，定容后于225nm波長測定吸光度，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量計算沉積物樣品中油類濃度。5試劑和材料5.1硫酸：ρ（H2SO4）=1.84g/ml，分析純。5.2正己烷（C6H14）：使用前于波長225nm處，以純水做參比，使用1cm比色皿測定其透光率，當(dāng)透光率大于90%時方可使用，否則需脫芳處理。脫芳處理方法：將500ml正己烷加入1000ml分液漏1

DB32/T4344—2022斗（6.7）中，加入25ml硫酸（5.1）萃洗10min，棄去硫酸相，重復(fù)上述操作，直至硫酸相近無色，再用蒸餾水萃洗3次，至透光率大于90%即可。5.3油類標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ=1000mg/L。溶劑為正己烷，適用于紫外分光光度法測定的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。5.4油類標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：ρ=200mg/L。用胖肚吸管移取10.00ml油類標(biāo)準(zhǔn)貯備液（5.3）于50ml棕色容量瓶中，加入正己烷（5.2）定容至標(biāo)線，搖勻。放置于4℃冰箱中封口保存，有效期為1個月。5.5油類標(biāo)準(zhǔn)樣品：與油類標(biāo)準(zhǔn)貯備液（5.3）為同一油源制備，溶劑為正己烷，適用于紫外分光光度法測定的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。6儀器和設(shè)備6.1電子天平：量程不小于100g，精度為0.1mg。6.2紫外分光光度計：波長范圍190nm～400nm，并配備1cm具塞石英比色皿。6.3冷凍干燥機：冷阱空載最低溫度低于﹣50℃，配不銹鋼凍干盤。6.4超聲清洗儀：超聲頻率不低于40kHz，具備水溫監(jiān)控功能；超聲架，與50ml離心管配套使用，底部鏤空，保證樣品充分接受超聲萃取。6.5渦旋混合儀：可在連續(xù)和點觸振動模式之間切換，速度可調(diào)。6.6大容量離心機：最高轉(zhuǎn)速大于3000r/min，配50ml玻璃或全氟乙烯丙烯共聚物（FEP）材質(zhì)離心管。6.7分液漏斗：1000ml玻璃分液漏斗，具聚四氟乙烯旋塞。6.8比色管：10ml和25ml玻璃比色管。6.9容量瓶：10ml和50ml棕色玻璃容量瓶。6.10一般實驗室常用儀器和設(shè)備。7樣品7.1樣品采集、貯存及運輸按照GB17378.3和GB17378.5的相關(guān)規(guī)定開展海洋沉積物油類樣品的采集、貯存和運輸。7.2樣品制備7.2.1風(fēng)干法按照GB17378.5中的相關(guān)規(guī)定開展海洋沉積物油類樣品制備。7.2.2冷凍干燥法冷凍干燥法制備海洋沉積物樣品按以下步驟操作：a)取約300g海洋沉積物濕樣，盛入不銹鋼、四氟乙烯（TFE）或全氟乙烯丙烯共聚物（FEP）材質(zhì)冷凍干燥盤中，均勻地平鋪在盤底，放入-20℃～-25℃的冰柜中冷凍24h；開啟冷凍干燥機，待冷阱溫度降至﹣50℃后，將冷凍好的樣品放入冷凍干燥機中，開啟真空泵，冷凍干燥48h；b)c)d)取出冷凍干燥后的樣品，剔除礫石和顆粒較大的動植物殘?。辉谇蚰x上粉碎至全部通過80目（180μm）金屬篩，也可用陶瓷研缽手工粉碎，用80目（180μm）金屬篩蓋上金屬蓋過篩，嚴(yán)防樣品逸出，將研磨后的樣品充分混勻；四分法縮分分取40g～50g制備好的樣品，放入樣品袋，保存在干燥器中待測。e)2

DB32/T4344—20227.3含水率的測定按照GB17378.5中的相關(guān)規(guī)定測定海洋沉積物風(fēng)干樣品或凍干樣品的含水率。8分析步驟8.1樣品提取稱取1g（精確至0.0001g）沉積物干樣于離心管中（6.6），加入10ml正己烷，在超聲清洗儀（6.4）中超聲提取5min，超聲過程中間將離心管取出于渦旋混合儀(6.5)上將樣品混勻30s，以離心管內(nèi)沉積物樣品完全轉(zhuǎn)動，但不超過離心管高度的2/3為宜。8.2樣品分離將超聲提取后的樣品在3000r/min～5000r/min條件下離心3min，將上清液傾倒進25ml比色管中；再向沉積物樣品中加入10ml正己烷(5.2)，渦旋混勻后按8.1重復(fù)提取1次，再次離心分離，合并提取液，定容至25ml。8.3空白試樣的制備取50ml離心管，不稱取沉積物樣品，按照與8.1和8.2相同的步驟進行制備空白試樣。標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立8.4準(zhǔn)確移取0ml、0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml油類標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（5.4）至6個10ml容量瓶或比色管中，加正己烷(5.2)至標(biāo)線，搖勻。標(biāo)準(zhǔn)系列溶液濃度分別為0mg/L、4.00mg/L、8.00mg/L、12.0mg/L、16.0mg/L、20.0mg/L。于波長225nm處，使用1cm石英比色皿，以正己烷(5.2)作為參比，依次測定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液吸光度。以油類標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（mg/L）為橫坐標(biāo)，以相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。8.5樣品測定按8.4步驟測定樣品提取液吸光度As和空白試樣吸光度Ab。9計算與表示9.1計算海洋沉積物干樣中油類含量ω（mg/kg），按式（1）計算。=·······································································(1)）（1?2式中：——由（As-Ab）帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出提取液中油類的濃度，mg/L；——正己烷提取液定容體積，ml；——稱取沉積物干樣的質(zhì)量，g；——沉積物干樣的含水率，%。29.2表示樣品測定結(jié)果保留3位有效位數(shù)字。3DB32/T4344—202210準(zhǔn)確度10.1精密度10.1.1重復(fù)性在同一實驗室，由同一操作者使用相同設(shè)備，按照本文件的測試方法，并在短時間內(nèi)對油類含量為21.9mg/kg、149mg/kg、294mg/kg的三組海洋沉積物樣品分別進行相互獨立的6次測試，按照HJ168的要求計算方法重復(fù)性。實驗室內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.8%～4.2%、0.7%～3.0%、0.3%～0.7%；重復(fù)性限分別為2.2mg/kg、6.7mg/kg、3.9mg/kg。重復(fù)性數(shù)據(jù)參見附錄A。10.1.2再現(xiàn)性在不同的實驗室，由不同的操作者使用不同的設(shè)備，按照本文件的測試方法，對油類含量為21.9mg/kg、149mg/kg、294mg/kg的三組海洋沉積物樣品分別進行相互獨立的6次測試，按照HJ168的要求計算方法再現(xiàn)性。實驗室間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為6.5%、1.7%、0.8%；再現(xiàn)性限分別為4.5mg/kg、9.3mg/kg、7.2mg/kg。再現(xiàn)性數(shù)據(jù)參見附錄A。10.2正確度在不同的實驗室，按照本文件的測試方法，對油類含量為21.9mg/kg、149mg/kg、294mg/kg的三組海洋沉積物樣品分別進行相互獨立地6次加標(biāo)回收率測試，按照HJ168的要求計算方法正確度。加標(biāo)回收率分別為95.3%～98.7%、95.0%～101%、93.6%～100%；加標(biāo)回收率最終值分別為97.8%±2.6%、98.1%±4.2%、97.2%±4.2%。正確度數(shù)據(jù)參見附錄A。11質(zhì)量保證和質(zhì)量控制11.1空白試驗每批樣品應(yīng)按照8.3測試不少于10%的實驗室空白試樣，當(dāng)樣品數(shù)量少于10個時，空白試樣測試數(shù)量不少于1個，測定結(jié)果應(yīng)低于方法檢出限。11.2校準(zhǔn)每批次分析應(yīng)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，其相關(guān)系數(shù)應(yīng)≥0.999，同時至少測試一個油類標(biāo)準(zhǔn)樣品（5.5），其測定結(jié)果在標(biāo)準(zhǔn)樣品保證值的不確定度范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)曲線方可使用。11.3平行樣實驗室分析，每批樣品應(yīng)測試不少于10%的平行樣品，當(dāng)樣品數(shù)量少于10個時，平行樣品測試數(shù)量不少于1個，平行雙樣測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)滿足HJ442.4的控制要求。11.4加標(biāo)樣4

DB32/T4344—2022實驗室分析，每批樣品應(yīng)測試不少于10%的實際樣品加標(biāo)，當(dāng)樣品數(shù)量少于10個時，實際樣品加標(biāo)測試數(shù)量不少于1個，加標(biāo)樣測定結(jié)果的回收率應(yīng)在90.0%～110%。12注意事項本文件執(zhí)行中應(yīng)注意以下事項：——正己烷為易揮發(fā)性有機溶劑，分析人員應(yīng)帶好口罩、手套并在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。——所用器皿先用自來水浸泡、刷洗，再用重鉻酸鉀洗液清洗或使用超聲清洗儀清洗，最后用超純水蕩洗干凈。離心管和比色管低溫烘干，容量瓶自然晾干，使用前用正己烷（5.2）潤洗2次。——非玻璃材質(zhì)的離心管在第一次使用前需按照本文件8.3規(guī)定做管材的空白檢查，測定結(jié)果小于方法檢出限方可使用；具塞玻璃管需使用線繩將塞子與管體系在一起?！和槭軣嵋讚]發(fā)，樣品超聲提取時應(yīng)實時監(jiān)控水浴溫度，當(dāng)水溫超過25℃時需換水降溫或加入冰塊降溫?！?dāng)測定高濃度樣品時，比色后應(yīng)使用正己烷（5.2）清洗比色皿2次，重新校準(zhǔn)后繼續(xù)使用?！缬龅綄嶋H樣品加標(biāo)回收率低于90%時，整批樣品均需要復(fù)測。復(fù)測時可通過延長超聲提取時間、增加渦旋次數(shù)來提高樣品回收率；當(dāng)使用增加重復(fù)提取次數(shù)來提高樣品回收率時，（9.1）按實際定容體