前列腺癌基因治療概要課件

前列腺癌基因治療中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院張潤順?biāo)呜Q旗前列腺癌基因治療中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院1主要內(nèi)容流行病學(xué)解剖病理生理病因診斷癥狀

治療主要內(nèi)容流行病學(xué)2流行病學(xué)

前列腺癌是老年男性常見的惡性腫瘤，95％以上得到確診的病例在45-89歲之間，平均年齡為72歲，并隨著年齡的增長而增加。

3解剖解剖4病理生理病理生理5病因

前列腺癌早期病變與癌細(xì)胞中cdc37基因表達(dá)增加，可能是癌變開始的重要步驟。抑癌基因的失活或缺失雄激素受體CAG微小重復(fù)區(qū)的長度與該病的發(fā)展有潛在的關(guān)系病因前列腺癌早期病變與癌細(xì)胞中cdc37基因表達(dá)增加，6膀胱出口梗阻癥狀轉(zhuǎn)移癥狀癥狀癥狀7DREPSA前列腺穿刺活檢

診斷DRE診斷8治療

隨訪觀察藥物治療手術(shù)治療放、化療基因治療治療隨訪觀察9載體系統(tǒng)

基因?qū)氲耐緩?/p>

基因治療的靶向特異性基因治療策略基因治療載體系統(tǒng) 基因治療10載體系統(tǒng)病毒載體

逆轉(zhuǎn)錄病毒

腺病毒腺相關(guān)病毒

單純皰疹病毒

痘病毒

非病毒載體裸露的DNA

脂質(zhì)體

基因槍

分子偶聯(lián)載體

載體系統(tǒng)病逆轉(zhuǎn)錄病毒腺病毒腺相關(guān)病毒單純皰疹病11逆轉(zhuǎn)錄病毒載體逆轉(zhuǎn)錄病毒（RV）載體是目前研究最透徹的一種病毒載體。逆轉(zhuǎn)錄病毒是單鏈二倍體RNA病毒，依賴其env基因編碼的病毒表面衣殼蛋白與細(xì)胞表面特異性蛋白受體結(jié)合進(jìn)入靶細(xì)胞，之后由病毒pol基因編碼的病毒逆轉(zhuǎn)錄酶將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為雙鏈DNA，病毒DNA進(jìn)入分裂細(xì)胞胞核，進(jìn)而隨機(jī)整合到宿主細(xì)胞DNA。

逆轉(zhuǎn)錄病毒載體逆轉(zhuǎn)錄病毒（RV）12腺病毒腺病毒（Ad）是前列腺癌科學(xué)研究中最常用的載體，它是雙鏈DNA病毒，分子量大約為36Kb。通過與細(xì)胞表面的受體結(jié)合，腺病毒進(jìn)入細(xì)胞漿內(nèi)，自內(nèi)質(zhì)體釋放，病毒基因轉(zhuǎn)位到細(xì)胞核開始基因復(fù)制表達(dá)。

腺病毒腺病毒（Ad）13腺相關(guān)病毒腺相關(guān)病毒（A-AV）載體腺相關(guān)病毒是一組對人類無致病性的單鏈DNA病毒，與細(xì)胞表面的硫酸肝素結(jié)合進(jìn)入胞漿，在輔助病毒（如腺病毒或單純皰疹病毒）同時(shí)存在的條件下，腺相關(guān)病毒才能完成病毒復(fù)制。

腺相關(guān)病毒腺相關(guān)病毒（A-AV）載體14單純皰疹病毒載體單純皰疹病毒（HSV）載體

單純皰疹病毒是雙鏈DNA病毒，分子量約為150Kb。病毒糖蛋白gB和gD與細(xì)胞表面的硫酸肝素殘基結(jié)合進(jìn)入胞漿。單純皰疹病毒能長期潛伏在人體內(nèi)，當(dāng)機(jī)體免疫狀態(tài)下降時(shí)啟動(dòng)病毒復(fù)制而致病

。單純皰疹病毒載體單純皰疹病毒（HSV）載體15痘病毒痘病毒

一組雙鏈DNA病毒，包括牛痘病毒和金絲雀痘病毒。由于痘病毒DNA中含有缺陷胸苷激肽酶，感染痘病毒后，病毒將優(yōu)先在腫瘤細(xì)胞中復(fù)制。

其他病毒載體桿狀病毒和乳頭瘤病毒

痘病毒痘病毒16非病毒載體裸露的DNA將純化的閉環(huán)DNA直接注入腫瘤內(nèi)是最簡單的基因表達(dá)系統(tǒng)。注入后，DNA就被帶入細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，在附著體表達(dá)或整合到宿主基因組中去，這一過程叫轉(zhuǎn)染。骨骼肌是高效被轉(zhuǎn)染的組織，研究表明，直接注入骨骼肌的DNA可以進(jìn)入肌細(xì)胞，并持續(xù)表達(dá)一年

脂質(zhì)體：脂質(zhì)體是由包含多種物質(zhì)包括DNA的雙層磷脂膜組成的環(huán)型封閉囊泡，可被細(xì)胞內(nèi)吞而使基因轉(zhuǎn)入細(xì)胞中

非病毒載體裸露的DNA將純化的閉環(huán)DNA直接注入腫瘤內(nèi)是最簡17非病毒載體金屬顆粒包裹的DNA用基因槍（一種顆粒轟擊技術(shù)）注入金屬顆粒包裹的DNA可以大大提高轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞的效率。分子偶聯(lián)載體：大量的非脂質(zhì)的陽離子聚合物與DNA形成復(fù)合物，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)。

非病毒載體金屬顆粒包裹的DNA用基因槍（一種顆粒轟擊技術(shù)）注18基因?qū)氲耐緩侥康幕虻挠行?dǎo)入是基因治療成功的前提之一前列腺癌瘤體內(nèi)注射、靜脈注射、皮下注射、肌肉注射及皮內(nèi)注射的選擇應(yīng)根據(jù)患者的病情和載體及治療的靶基因的特點(diǎn)來選擇促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡或腫瘤自殺基因治療的基因治療多采用直接前列腺癌瘤體內(nèi)注射。而針對前列腺癌的免疫基因治療可以選擇皮下、皮內(nèi)或肌肉注射基因?qū)氲耐緩?9基因治療的靶向特異性組織特異性啟動(dòng)子可驅(qū)動(dòng)目的基因在靶器官或組織中特異性表達(dá),實(shí)現(xiàn)基因治療的靶向性。數(shù)種前列腺組織特異性啟動(dòng)子已應(yīng)用于前列腺癌的實(shí)驗(yàn)治療中。有的啟動(dòng)子甚至僅在前列腺癌組織中表達(dá),對正常前列腺組織毒副作用很小。如PSA、PS2MA、KLK3(humanprostatespecifickalikrein3)啟動(dòng)子等。

基因治療的靶向特異性20基因治療策略基因矯正治療細(xì)胞減數(shù)基因治療免疫調(diào)節(jié)基因療法基因治療策略基因矯正治療21基因矯正治療基因改變分為二種一種是腫瘤生長抑制基因，即抑癌基因；另一種是促進(jìn)腫瘤生長的基因，即癌基因。矯正基因治療就是恢復(fù)那些突變或被刪除的抑癌基因和拮抗癌基因的功能?；謴?fù)抑癌基因的功能：這種方法的基因靶向包括p53、Rb、p16、p21和CAMs

抑制癌基因的功能：基因突變會(huì)導(dǎo)致癌基因的激活，促進(jìn)腫瘤生長或逃避正常凋亡程序。癌基因包括：ras、myc、erbB2和bcl-2

基因矯正治療基因改變分為二種22細(xì)胞減數(shù)基因治療細(xì)胞減數(shù)基因治療是通過轉(zhuǎn)移能直接殺死癌細(xì)胞的基因或通過增強(qiáng)癌細(xì)胞對藥物或放射線的敏感性或剝奪癌細(xì)胞的血供來間接殺死癌細(xì)胞

細(xì)胞減數(shù)基因治療細(xì)胞減數(shù)基因治療是通過轉(zhuǎn)移能直接殺死癌細(xì)胞的23免疫調(diào)節(jié)基因療法大多數(shù)免疫調(diào)節(jié)基因治療的研究主要集中在轉(zhuǎn)移細(xì)胞因子基因來刺激抗原遞呈細(xì)胞CD4+和CD8+定位于腫瘤細(xì)胞并殺死腫瘤細(xì)胞一些研究者采用病毒載體將前列腺癌抗原的基因?qū)隓C（樹突狀細(xì)胞），使其有效表達(dá)

免疫調(diào)節(jié)基因療法大多數(shù)免疫調(diào)節(jié)基因治療的研究主要集中在轉(zhuǎn)移細(xì)24問題與展望基因治療前列腺癌是一種很有前景的治療方法，但仍有一些問題需要解決，如目的基因太少，必須分離出更多更有價(jià)值的基因，基因?qū)肴狈?zhǔn)確的定位等。相信隨著對前列腺癌基因突變機(jī)制的深入研究以及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的日臻完善，基因治療技術(shù)必將迅猛發(fā)展

問題與展望基因治療前列腺癌是一種很有前景的治療方法，但仍有一25謝謝！謝謝！26前列腺癌基因治療中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院張潤順?biāo)呜Q旗前列腺癌基因治療中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院27主要內(nèi)容流行病學(xué)解剖病理生理病因診斷癥狀

治療主要內(nèi)容流行病學(xué)28流行病學(xué)

前列腺癌是老年男性常見的惡性腫瘤，95％以上得到確診的病例在45-89歲之間，平均年齡為72歲，并隨著年齡的增長而增加。

29解剖解剖30病理生理病理生理31病因

前列腺癌早期病變與癌細(xì)胞中cdc37基因表達(dá)增加，可能是癌變開始的重要步驟。抑癌基因的失活或缺失雄激素受體CAG微小重復(fù)區(qū)的長度與該病的發(fā)展有潛在的關(guān)系病因前列腺癌早期病變與癌細(xì)胞中cdc37基因表達(dá)增加，32膀胱出口梗阻癥狀轉(zhuǎn)移癥狀癥狀癥狀33DREPSA前列腺穿刺活檢

診斷DRE診斷34治療

隨訪觀察藥物治療手術(shù)治療放、化療基因治療治療隨訪觀察35載體系統(tǒng)

基因?qū)氲耐緩?/p>

基因治療的靶向特異性基因治療策略基因治療載體系統(tǒng) 基因治療36載體系統(tǒng)病毒載體

逆轉(zhuǎn)錄病毒

腺病毒腺相關(guān)病毒

單純皰疹病毒

痘病毒

非病毒載體裸露的DNA

脂質(zhì)體

基因槍

分子偶聯(lián)載體

載體系統(tǒng)病逆轉(zhuǎn)錄病毒腺病毒腺相關(guān)病毒單純皰疹病37逆轉(zhuǎn)錄病毒載體逆轉(zhuǎn)錄病毒（RV）載體是目前研究最透徹的一種病毒載體。逆轉(zhuǎn)錄病毒是單鏈二倍體RNA病毒，依賴其env基因編碼的病毒表面衣殼蛋白與細(xì)胞表面特異性蛋白受體結(jié)合進(jìn)入靶細(xì)胞，之后由病毒pol基因編碼的病毒逆轉(zhuǎn)錄酶將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為雙鏈DNA，病毒DNA進(jìn)入分裂細(xì)胞胞核，進(jìn)而隨機(jī)整合到宿主細(xì)胞DNA。

逆轉(zhuǎn)錄病毒載體逆轉(zhuǎn)錄病毒（RV）38腺病毒腺病毒（Ad）是前列腺癌科學(xué)研究中最常用的載體，它是雙鏈DNA病毒，分子量大約為36Kb。通過與細(xì)胞表面的受體結(jié)合，腺病毒進(jìn)入細(xì)胞漿內(nèi)，自內(nèi)質(zhì)體釋放，病毒基因轉(zhuǎn)位到細(xì)胞核開始基因復(fù)制表達(dá)。

腺病毒腺病毒（Ad）39腺相關(guān)病毒腺相關(guān)病毒（A-AV）載體腺相關(guān)病毒是一組對人類無致病性的單鏈DNA病毒，與細(xì)胞表面的硫酸肝素結(jié)合進(jìn)入胞漿，在輔助病毒（如腺病毒或單純皰疹病毒）同時(shí)存在的條件下，腺相關(guān)病毒才能完成病毒復(fù)制。

腺相關(guān)病毒腺相關(guān)病毒（A-AV）載體40單純皰疹病毒載體單純皰疹病毒（HSV）載體

單純皰疹病毒是雙鏈DNA病毒，分子量約為150Kb。病毒糖蛋白gB和gD與細(xì)胞表面的硫酸肝素殘基結(jié)合進(jìn)入胞漿。單純皰疹病毒能長期潛伏在人體內(nèi)，當(dāng)機(jī)體免疫狀態(tài)下降時(shí)啟動(dòng)病毒復(fù)制而致病

。單純皰疹病毒載體單純皰疹病毒（HSV）載體41痘病毒痘病毒

一組雙鏈DNA病毒，包括牛痘病毒和金絲雀痘病毒。由于痘病毒DNA中含有缺陷胸苷激肽酶，感染痘病毒后，病毒將優(yōu)先在腫瘤細(xì)胞中復(fù)制。

其他病毒載體桿狀病毒和乳頭瘤病毒

痘病毒痘病毒42非病毒載體裸露的DNA將純化的閉環(huán)DNA直接注入腫瘤內(nèi)是最簡單的基因表達(dá)系統(tǒng)。注入后，DNA就被帶入細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，在附著體表達(dá)或整合到宿主基因組中去，這一過程叫轉(zhuǎn)染。骨骼肌是高效被轉(zhuǎn)染的組織，研究表明，直接注入骨骼肌的DNA可以進(jìn)入肌細(xì)胞，并持續(xù)表達(dá)一年

脂質(zhì)體：脂質(zhì)體是由包含多種物質(zhì)包括DNA的雙層磷脂膜組成的環(huán)型封閉囊泡，可被細(xì)胞內(nèi)吞而使基因轉(zhuǎn)入細(xì)胞中

非病毒載體裸露的DNA將純化的閉環(huán)DNA直接注入腫瘤內(nèi)是最簡43非病毒載體金屬顆粒包裹的DNA用基因槍（一種顆粒轟擊技術(shù)）注入金屬顆粒包裹的DNA可以大大提高轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞的效率。分子偶聯(lián)載體：大量的非脂質(zhì)的陽離子聚合物與DNA形成復(fù)合物，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)。

非病毒載體金屬顆粒包裹的DNA用基因槍（一種顆粒轟擊技術(shù)）注44基因?qū)氲耐緩侥康幕虻挠行?dǎo)入是基因治療成功的前提之一前列腺癌瘤體內(nèi)注射、靜脈注射、皮下注射、肌肉注射及皮內(nèi)注射的選擇應(yīng)根據(jù)患者的病情和載體及治療的靶基因的特點(diǎn)來選擇促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡或腫瘤自殺基因治療的基因治療多采用直接前列腺癌瘤體內(nèi)注射。而針對前列腺癌的免疫基因治療可以選擇皮下、皮內(nèi)或肌肉注射基因?qū)氲耐緩?5基因治療的靶向特異性組織特異性啟動(dòng)子可驅(qū)動(dòng)目的基因在靶器官或組織中特異性表達(dá),實(shí)現(xiàn)基因治療的靶向性。數(shù)種前列腺組織特異性啟動(dòng)子已應(yīng)用于前列腺癌的實(shí)驗(yàn)治療中。有的啟動(dòng)子甚至僅在前列腺癌組織中表達(dá),對正常前列腺組織毒副作用很小。如PSA、PS2MA、KLK3(humanprostatespecifickalikrein3)啟動(dòng)子等。

基因治療的靶向特異性46基因治療策略基因矯正治療細(xì)胞減數(shù)基因治療免疫調(diào)節(jié)基因療法基因治療策略基因矯正治療47基因矯正治療基因改變分為二種一種是腫瘤生長抑制基因，即抑癌基因；另一種是促進(jìn)腫瘤生長的基因，即癌基因。矯正基因治療就是恢復(fù)那些突變或被刪除的抑癌基因和拮抗癌基因的功能。恢復(fù)抑癌基因的功能：這種方法的基因靶向包括p53、Rb、p16、p21和CAMs

抑制癌基因的功能：基因突變會(huì)導(dǎo)致癌基因的激活，促進(jìn)腫瘤生長或逃避正常凋亡程序。癌基因包括：ras、myc、erbB2和bcl-2

基因矯正治療基因改變分為二種48細(xì)胞減數(shù)基因治療細(xì)胞減數(shù)基因治療是通過轉(zhuǎn)移能直接殺死癌細(xì)胞的基因或通過增強(qiáng)癌細(xì)胞對藥物或放射線的敏感性或剝奪癌細(xì)胞的血供來間接殺死癌細(xì)胞

細(xì)胞減數(shù)基因治療細(xì)胞減數(shù)基因治療是通過轉(zhuǎn)移能直接殺死癌細(xì)胞的49免疫調(diào)節(jié)基因療法大多數(shù)免疫調(diào)節(jié)基因治療的研究主要集中在轉(zhuǎn)移細(xì)胞因子基因來