分光光度法原理(雜項(xiàng))

建工分光光度法目錄第一節(jié)基本原理第二節(jié)儀器結(jié)構(gòu)第三節(jié)顯色與測(cè)量條件的選擇第四節(jié)型分光光度計(jì)操作維護(hù)第一節(jié)基本原理在光譜分析中，依據(jù)物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收而建立起來的分析方法稱為吸光光度主要有:紅外吸收光譜：分子振動(dòng)光譜，吸收光波長范主要用于有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)鑒定。紫外吸收光譜電子躍遷光譜收光波長范近紫外區(qū)于結(jié)構(gòu)鑒定和定量分析?？梢娢展庾V：電子躍遷光譜，吸收光波長范，主要用于有色物質(zhì)的定量分析。光的吸收定律朗伯比定律布格和朗伯)先后于和年闡明了光的吸收程度和吸收層厚度成正比∝年比耳)提出了光的吸收程度和吸收物濃度之間也具有成正比的關(guān)系：∝二者的結(jié)合稱為朗伯比定律：當(dāng)一束平行的單色光通均、非射的稀液時(shí)，液對(duì)光的吸收程度與溶液的濃度及液層厚度的乘積成正比。朗伯比耳定律朗伯—耳定律是吸光光度法的理論基礎(chǔ)和定量測(cè)定的依據(jù)。應(yīng)用于各種光度法的吸收測(cè)量。它不僅適用于可見光，也適用于紫外光和紅外光。不僅適用于均勻非散射的液體，也適用于固體和氣體。朗伯比耳定律，數(shù)學(xué)表達(dá)式其數(shù)學(xué)表達(dá)式為式中：吸光度。描述溶液對(duì)光的吸收程度：液層厚(程長度)，通常以為單位。：溶液的摩爾濃度，單位。ε：爾吸光系數(shù)，單位。摩爾吸光系ε的討論

摩爾吸光系ε在數(shù)值上等于濃度為、液厚度為,溶液在某一波長下的吸光度。摩爾吸光系ε的討論（）摩爾吸光系數(shù)是吸收物質(zhì)在一定波長和溶劑條件下的特征常數(shù)。（）不隨濃度和光程長度的改變而改變。在溫度和波長等條件一定時(shí)，ε僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān)，與待測(cè)物濃度無關(guān)。（）可作為定性鑒定的參數(shù)。（）同一吸收物質(zhì)在不同波長下的ε值是不同的。在最大吸收波長λ處的摩爾吸光系數(shù)，常以表。表了該吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力，也反映了光度法測(cè)定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。摩爾吸光系ε的討論

（）越表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)，用光度法測(cè)定該物質(zhì)的靈敏度越高。ε>：超高靈敏。ε(）×：高靈敏。ε<×：不靈敏。摩爾吸收系數(shù)和桑德爾靈敏度

桑德爾靈敏度數(shù)：（）在λ時(shí)下，位截面積光程內(nèi)所能檢測(cè)出來的吸光物質(zhì)的最低含量。/

建工最佳讀數(shù)范圍與最佳值吸光度與透光度的關(guān)系＝－用儀器測(cè)定時(shí)應(yīng)盡量使溶液透光度值在～最佳讀數(shù)范圍：～可求出濃度相對(duì)誤差最小時(shí)的透光度為：＝,第二節(jié)儀器結(jié)構(gòu)儀器基本組成光

＝在整個(gè)紫外光或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足的輻射度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命?？梢姽鈪^(qū)：鎢燈作為光源，其輻射波長范圍在～。紫外區(qū)：氫、燈。發(fā)射～的續(xù)光譜。單色器將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光并可從中選出任一波長單色光的光學(xué)系統(tǒng)。①入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器。②準(zhǔn)光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束。③色散元件：將復(fù)合光分解成單色光。棱鏡或光柵。④聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫。⑤出射狹縫。樣室（吸收池）樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和相應(yīng)的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池兩種。在紫外區(qū)須采用石英池（玻璃能夠吸收紫外光見區(qū)一般用玻璃池。檢器利用光電效應(yīng)將透過吸收池的光信號(hào)變成可測(cè)的電信號(hào)，常用的有光電池、光電管或光電倍增管。結(jié)顯示記錄系統(tǒng)

檢流計(jì)（）數(shù)字顯示（）微機(jī)進(jìn)行儀器自動(dòng)控制和結(jié)果處理（是帶微電腦智能化的分光光度計(jì)）第三節(jié)顯色與測(cè)量條件的選擇顯色反應(yīng)：將待測(cè)組分轉(zhuǎn)化成有色化合物的的反應(yīng)。＋＝顯色反應(yīng)要求：（）選擇性好。（）靈敏度高ε>（）有色化合物要穩(wěn)定，不分解。（）的組要一定（只無（）與顏差別大,吸收峰波長差Δλ>.選擇合適的參比溶液

為什么需要使用參比溶液？測(cè)得的的吸光度真正反映待測(cè)溶液吸光強(qiáng)度。

參比溶液的選擇一般遵循以下原則：參比溶液的選擇均色，可用蒸餾水作參比。.無，有，可用不加顯色劑的被測(cè)試液作參比溶液。.有，無，可選擇不加試樣溶液的試劑空白作參比溶液。/

建工均色，可將一份試液加入適當(dāng)掩蔽劑，將被測(cè)組分掩蔽起來，使之不再與顯色劑作用，而顯色劑及其他試劑均按試液測(cè)定方法加入，以此作為參比溶液。．改變加入試劑的順序，使被測(cè)組分不發(fā)生顯色反應(yīng)，可以此溶液作為參比溶液消除于擾。第四節(jié)型光光度計(jì)操作維護(hù)

開機(jī)操作、開啟主機(jī)電源，儀器自動(dòng)完成初始化，顯示主菜單。、儀器預(yù)熱分鐘。（要不要打開樣品室蓋子？）停機(jī)操作

、分析完畢，按菜單”鍵，返回主菜單。（是否一定要返回主菜單，才能關(guān)電源？）

、按電源開關(guān)鍵，關(guān)閉儀器，切斷電源。、檢查樣品室是否有溢出的溶液。清掃儀器內(nèi)外衛(wèi)生，作好儀器使用登記，罩上防塵罩。日常維護(hù)

每次使用后應(yīng)檢查樣品室是否積存有溢出溶液，經(jīng)常擦拭樣品室，以防廢液對(duì)部件或光路系統(tǒng)的腐蝕。

儀器使用完畢后，應(yīng)蓋好防塵罩，可在樣品室及光源室內(nèi)放置硅膠袋防潮，但開機(jī)時(shí)一定要取出。

長期不用儀器時(shí)，尤其要關(guān)注環(huán)境的溫度、濕度，定期更換硅膠。常見故障和處理定量分析分為兩大部分：1，化分析法容分析法：酸堿滴定法，氧化還原滴定法，絡(luò)合滴定法，沉淀滴定法（）重量分析法