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文檔簡介
中藥藥理實踐教學講義第一頁,共51頁。一、實驗須知二、炮制對延胡索鎮(zhèn)痛作用的影響〔熱板法〕三、附子炮制前后對小鼠中毒情況的影響四、天麻對小鼠睡眠的影響五、天南星抗小鼠驚厥作用六、茵陳蒿湯對家兔的利膽作用〔插管法〕七、麻黃對正常大鼠足跖部汗液分泌的影響〔著色法〕八、人參對小鼠抗疲勞作用的觀察目錄第二頁,共51頁。實驗前應掌握受試藥物的現(xiàn)代中藥藥理學研究內容;結合中醫(yī)藥理論分析實驗結果,評價其對中醫(yī)藥理論的論證和說明作用;思考中藥藥理實驗設計的一般思路。實驗須知第三頁,共51頁。一、炮制對延胡索鎮(zhèn)痛作用的影響〔熱板法〕實驗原理與目的可溶性生物堿第四頁,共51頁。水煎醇沉液(4g原藥材/ml)水煎醇沉液(4g原藥材/ml)醋制延胡索生延胡索ipip雌性藥品、動物與給藥方法第五頁,共51頁。小鼠的選擇及正常痛閾的測定延胡索組醋制延胡索組生理鹽水組55±0.5oC15~20oC5-30秒給藥后15分鐘測定給藥后45分鐘測定給藥后60分鐘測定痛閾值操作流程第六頁,共51頁。痛閾提高百分率(%)=
給藥后平均痛閾值–給藥前平均痛閾值給藥前平均痛閾值
×100%
各時間點組間檢驗生理鹽水組延胡索組醋制延胡索組藥物有無作用作用有無強弱差異觀察指標與統(tǒng)計方法第七頁,共51頁。給藥后假設放入燒杯內小鼠60秒仍無反響,應將小鼠取出,痛閾值以60秒計。正常小鼠放入熱板后易出現(xiàn)不安、舉前肢、舔前足、踢后肢等現(xiàn)象,這些動作不能作為疼痛指標,只有舔后足才作為疼痛指標。本卷須知第八頁,共51頁。思考題延胡索的鎮(zhèn)痛主要和嗎啡有哪些區(qū)別?炮制對藥物作用的影響?????第九頁,共51頁。二、附子炮制前后致小鼠中毒表現(xiàn)的影響實驗原理與目的有毒生物堿炮制第十頁,共51頁。水煎液(1g原藥材/ml)水煎液(1g原藥材/ml)生附子
制附子
igig藥品、動物與給藥方法 第十一頁,共51頁。小鼠的稱重、標記、分組生附子組制附子組給藥后30分鐘內一般狀態(tài)活動能力死亡只數(shù)操作流程第十二頁,共51頁。死亡率(%)=
本組死亡數(shù)本組動物總數(shù)
×100%
組間檢驗生附子組制附子組毒性表現(xiàn)是什么毒性大小有無差異直觀觀察觀察指標與統(tǒng)計方法第十三頁,共51頁。生附子和制附子水煎液制備時均應煎煮4小時以上。本卷須知第十四頁,共51頁。思考題中藥經炮制后對臨床用藥有何意義?為預防附子中毒,應如何降低其毒性?????第十五頁,共51頁。三、天麻對小鼠睡眠的影響
實驗原理與目的天麻素天麻苷元天麻多糖天麻水提液天麻水提醇沉液想睡了?。∥彀捅韧租c閾下劑量ipip對側腹腔ip以翻正反射消失為指標記第十六頁,共51頁。水煎液(1g原藥材/ml)天麻
生理鹽水ipip藥品、動物與給藥方法第十七頁,共51頁。小鼠的稱重、標記、分組天麻組生理鹽水組給藥后30分鐘ip4mg/ml戊巴比妥鈉32mg/kg一般狀態(tài)活動能力入睡只數(shù)操作流程第十八頁,共51頁。入睡率(%)=
本組入睡數(shù)本組動物總數(shù)
×100%
組間檢驗天麻組生理鹽水組活動能力有無差異有無鎮(zhèn)靜作用直觀觀察觀察指標與統(tǒng)計方法第十九頁,共51頁。戊巴比妥鈉溶液新鮮配制;戊巴比妥的閾下劑量每次實驗前需預試找出;天麻飲片要預先蒸軟或浸泡使成分煎出完全.本卷須知第二十頁,共51頁。思考題結合本實驗分析天麻的藥理作用?為何不直接觀察天麻對小鼠的中樞抑制作用?????第二十一頁,共51頁。四、天南星抗小鼠驚厥作用
實驗原理與目的祛風止痙鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛抗驚厥電痙攣閾值小鼠驚厥發(fā)生率第二十二頁,共51頁。水煎液(0.5g原藥材/ml)天南星
生理鹽水ipip藥品、動物與給藥方法第二十三頁,共51頁。小鼠的稱重、標記、分組天南星組生理鹽水組一般狀態(tài)驚厥潛伏期驚厥只數(shù)操作流程第二十四頁,共51頁。組間檢驗天南星組生理鹽水組潛伏期有無差異發(fā)生只數(shù)的差異組間檢驗天南星組生理鹽水組潛伏期有無差異發(fā)生只數(shù)的差異藥物作用???觀察指標與統(tǒng)計方法第二十五頁,共51頁。士的寧的的驚厥劑量每次實驗前需預試找出本卷須知第二十六頁,共51頁。思考題結合本實驗分析天南星的藥理作用?天南星抗士的寧小鼠驚厥在臨床上的意義?????第二十七頁,共51頁。五、茵陳蒿湯對家兔的利膽作用
解毒退黃保肝利膽膽汁分泌膽汁排泄膽汁固體物實驗原理與目的茵陳蒿湯茵陳蒿梔子大黃第二十八頁,共51頁。水煎醇沉液(2g原藥材/ml)菌陳蒿湯十二指腸給藥藥品、動物與給藥方法第二十九頁,共51頁。操作流程第三十頁,共51頁。扎線牽引扎線導管膽管十二指腸端膽汁示意圖第三十一頁,共51頁。前后對照總流量有無差異藥物作用???觀察指標與統(tǒng)計方法第三十二頁,共51頁。膽總管引流膽汁的塑料導管可用頭皮針上的半透明塑料管制成。管的尖端剪成斜口,離管口2—3mm處加熱拉成稍細的頸部,以便結扎膽總管而固定之。開腹手術中通有出血點,用絲線結扎止血。膽總管比較細,切勿用力拉牽引線而拉斷,故操作必須細心輕巧。膽總管切口應一次成功,正好剪斷膽總管的1/3-1/2。注意一定要剪斷內膜,使膽汁引流導管插在內膜下,見有膽汁流出便易插入導管。本卷須知第三十三頁,共51頁。思考題茵陳蒿湯的利膽作甩的機制有哪些?為什么不設空白對照組來進行實驗驗證?????第三十四頁,共51頁。六、麻黃對正常大鼠足跖部汗液分泌的影響實驗原理與目的麻黃湯麻黃桂枝杏仁、甘草發(fā)汗解表麻黃發(fā)汗以麻黃湯作用最強第三十五頁,共51頁。水煎液(1.5g原藥材/ml)麻黃湯
生理鹽水igig麻黃湯〔去麻黃桂枝組〕ig藥品、動物與給藥方法第三十六頁,共51頁。和田-高垣氏試劑
A液:取碘2g溶于100ml無水乙醇即成;B液:取可溶性淀粉50g、蓖麻油100ml,兩者均勻混合即成試劑第三十七頁,共51頁。大鼠的稱重標記、分組麻黃湯組麻黃湯(去麻黃桂枝組)生理鹽水組給藥后30分鐘,固定,足跖部A液+B液,1h內放大鏡觀察汗液出現(xiàn)時間汗滴數(shù)量汗液顏色ig1ml/100g25-27oC操作流程第三十八頁,共51頁。組間檢驗麻黃湯(去麻黃桂枝組)生理鹽水組汗滴數(shù)量的差異藥物作用???組間檢驗生理鹽水組汗液出現(xiàn)時間有無差異麻黃湯組觀察指標與統(tǒng)計方法第三十九頁,共51頁。本實驗宜在恒溫、恒濕條件下進展,室溫控制在26+1℃。實驗前最好將大鼠進展固定器訓練,固定大鼠時,操作應輕柔,盡量防止掙扎出汗。在一次實驗中,觀察汗點出現(xiàn)時間應一致。大鼠足跖部汗腺主要分布在足跖肉墊上,足跖關節(jié)也有分布,足掌心那么無。本實驗也可以用小鼠。本卷須知第四十頁,共51頁。思考題從實驗結果分析麻黃湯組方原理?如何準確記錄汗點出現(xiàn)數(shù)?????第四十一頁,共51頁。七、人參對小鼠抗疲勞作用的觀察
實驗原理與目的扶正益氣增強造血提高免疫抗應激游泳時間耐缺氧耐高溫耐低溫第四十二頁,共51頁。水煎液(5g原藥材/ml)人參
生理鹽水igig雄性藥品、動物與給藥方法第四十三頁,共51頁。小鼠的稱重、標記、分組人參組生理鹽水組給藥后45分鐘,5%體重負荷,置水中活動能力溺斃時間20±0.5oC20cm鼻孔浸入水面下15s以上操作流程I第四十四頁,共51頁。組間檢驗人參組生理鹽水組溺斃時間組間檢驗生理鹽水組藥物作用???觀察指標與統(tǒng)計方法I第四十五頁,共51頁。要嚴格控制水溫,水溫差異太大會影響實驗結果。動物單個游泳,集體游泳會影響實驗結果。本卷須知I第四十六頁,共51頁。小鼠的稱重、標記、分組人參組生理鹽水組給藥后45分鐘,置入含鈉石灰的密閉廣口瓶中死亡時間操作流程II第四十七頁,共51頁。組間檢驗人參組生理鹽
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