微生物學(xué)和衛(wèi)生學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)課件

微生物學(xué)和衛(wèi)生學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)

新版GMP總則第三條：本規(guī)范作為質(zhì)量管理體系的一部分，是藥品生產(chǎn)管理和質(zhì)量管理的基本要求，旨在最大限度地降低藥品生產(chǎn)過程中污染、交叉污染、以及混淆、差錯(cuò)等風(fēng)險(xiǎn)，確保持續(xù)穩(wěn)定地生產(chǎn)出符合預(yù)訂用途和注冊(cè)要求的藥品。歐盟GMP附錄Ⅰ無菌藥品的生產(chǎn)原則：為降低微生物、微粒和熱原污染的風(fēng)險(xiǎn)，無菌藥品的生產(chǎn)應(yīng)有各種特殊要求。這在很大程度上取決于生產(chǎn)人員的技能、所接受的培訓(xùn)及其工作態(tài)度……。微生物安全防護(hù)基礎(chǔ)知識(shí)微生物的分類：1.非細(xì)胞型：病毒（＜0.15微米）；2.原核細(xì)胞型：⑴衣原體（0.2~0.4微米）、⑵細(xì)菌（0.7~10微米）、*⑶支原體（0.2~0.3微米）、⑷立克次氏體（0.3~2.0微米）、⑸螺旋體、⑹放線菌；3.真核細(xì)胞型：真菌二、細(xì)菌1.外形與結(jié)構(gòu)：

細(xì)菌是一種具有細(xì)胞壁的單細(xì)胞生物。外形：有球菌、桿菌、螺形菌三種大?。呵蚓睆?.8—1.2微米桿菌長(zhǎng)約0.7—10.0微米基本結(jié)構(gòu)：有細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞漿及核質(zhì)，無核膜和核仁、缺乏細(xì)胞器；特殊結(jié)構(gòu)—芽胞，莢膜，鞭毛，菌毛等；芽胞：某些細(xì)菌在一定的環(huán)境條件下，由于細(xì)胞漿脫水濃縮，在菌體內(nèi)形成一個(gè)折光性強(qiáng)的橢圓形小體，稱為芽胞?！靶菝郀顟B(tài)”，對(duì)外環(huán)境有強(qiáng)大的抵抗力，僅高壓蒸汽滅菌有效。莢膜：在部分細(xì)菌的細(xì)胞壁外面，包圍一層黏液性的物質(zhì)，能保護(hù)細(xì)胞壁免受殺菌物質(zhì)的損傷和抗吞噬作用，稱為莢膜。鞭毛，菌毛：在某些桿菌的菌體上，一般能運(yùn)動(dòng)，可鑒別細(xì)菌。二者都是一種抗原物質(zhì)。

2.生長(zhǎng)繁殖：1）生長(zhǎng)條件：(1)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：水、無機(jī)鹽類、氮和碳化合物、氣體（氧氣.二氧化碳、氮?dú)猓┖蜕L(zhǎng)因子等；（2）酸堿度：大多數(shù)病原菌PH7.2~7.6；（3）溫度：適宜溫度15~55℃；病原菌最適宜溫度與人體溫相同，實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)細(xì)菌均采用37℃。2）生長(zhǎng)繁殖：方式：為無性二分裂法；規(guī)律：分四期Ⅰ.遲緩期（0~3h）：數(shù)目不增，代謝活躍，體積增大；Ⅱ.對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期（3~7h）：細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)與時(shí)間呈直線增長(zhǎng)關(guān)系,生長(zhǎng)速度最快；Ⅲ.穩(wěn)定期：（7~12h）活菌數(shù)下降，死亡數(shù)上升，總數(shù)穩(wěn)定。由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗及代謝產(chǎn)物積聚，PH值亦下降；Ⅳ.衰退期：(12~….h)死亡數(shù)大大超過活菌數(shù)（細(xì)菌自溶）。細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線110細(xì)菌數(shù)的對(duì)數(shù)5小時(shí)10小時(shí)15小時(shí)20小時(shí)總菌數(shù)活菌數(shù)4.細(xì)菌的分布：1).土壤：細(xì)菌種類和數(shù)量最多，有良好生長(zhǎng)環(huán)境；主要在離地面10~20厘米。2).水中：病原菌主要來源人和動(dòng)物的糞便污染;污染指標(biāo)：我國(guó)生活飲用水新標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌總數(shù)不超過100個(gè)/ml；大腸桿菌數(shù)0個(gè)/100ml.3).空氣：細(xì)菌很少。主要來自：人、動(dòng)物活動(dòng)；土壤隨風(fēng)散布。室內(nèi)空氣細(xì)菌數(shù)大于室外,人群活動(dòng)表現(xiàn)：大聲說話、深呼吸、咳嗽、打噴嚏及走動(dòng)等;微生物附著在1.0um左右的塵埃、飛沫為核心的氣溶膠上，懸浮在空氣中，可存活幾周?？諝鈾z測(cè)：空氣集菌器,平皿法,塵埃粒子計(jì)數(shù)器等.4).正常人體菌群的分布：正常菌群：指寄居人體的皮膚、粘膜及和外界相通的腔道中對(duì)人無損害的細(xì)菌。①皮膚：以葡萄球菌多見，多在手部、面部等；（一雙未洗的手上大約有80萬個(gè)細(xì)菌）②口腔：存在大量細(xì)菌—有適宜生長(zhǎng)條件：溫度、食物殘?jiān)⑺莸?；③呼吸道、鼻咽腔?nèi)，以及消化道內(nèi)；④頭發(fā)：分泌油脂是細(xì)菌良好的培養(yǎng)基；——潔凈區(qū)內(nèi)，由于人體活動(dòng)，是造成空氣污染的最大來源。3).化學(xué)因素：化學(xué)消毒劑：是一類殺菌力強(qiáng)，價(jià)格低，可長(zhǎng)期保存，無腐蝕性，對(duì)人畜無毒或低毒的藥品。---種類繁多，按殺菌抑菌機(jī)理分類.常用：乙醇—75%濃度，使菌體蛋白變性；對(duì)芽胞無效。過氧乙酸—強(qiáng)氧化劑，對(duì)芽胞菌.真菌.病毒有高效殺滅作用；0.2~0.5%皮膚消毒（洗手）新潔爾滅—表面活性劑，改變細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性；對(duì)芽胞無效。0.05~0.1%皮膚粘膜消毒。甲醛—與細(xì)菌蛋白質(zhì)結(jié)合使之變性；10%蒸熏消毒房間空氣。龍膽紫—染料，影響細(xì)菌的代謝而抑菌作用；皮膚淺表創(chuàng)傷消毒。一般消毒劑濃度愈大，作用時(shí)間愈長(zhǎng)，殺菌效果愈強(qiáng)。4).生物因素：共生：兩種微生物在一起表現(xiàn)相互有利的作用時(shí)，稱為共生。桔抗：如上相反時(shí)。⑴抗菌素：是某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生的一種化學(xué)物質(zhì)，能殺滅或抑制其他病原微生物。狹譜抗菌素：如青霉素---G+菌，多黏霉素---G-菌等；廣譜抗菌素：如四環(huán)素，土霉素，金霉素，頭孢菌素等。⑵細(xì)菌素：是某些細(xì)菌產(chǎn)生的一類抗菌物質(zhì)，但作用范圍狹窄，有一定的特異性。

三.免疫學(xué)基礎(chǔ)免疫學(xué)：指人體對(duì)病原微生物、寄生蟲、腫瘤等，以至異體或自身物質(zhì)所產(chǎn)生的有利或不利的一切免疫反應(yīng)的研究。簡(jiǎn)言之，免疫是機(jī)體識(shí)別和排除抗原性異物的一種功能。免疫反應(yīng)（三大功能、七種表現(xiàn)）功能正常反應(yīng)異常反應(yīng)1.免疫防護(hù)抗病原體的侵襲過敏反應(yīng)（↑）免疫缺陷?。ā?.自身穩(wěn)定清除自身?yè)p傷或衰退細(xì)胞自身免疫病3.免疫監(jiān)視清除癌變細(xì)胞腫瘤1.非特異性免疫：是物種在進(jìn)化過程中形成的防御機(jī)能，出生時(shí)就有。包括：（1）屏障結(jié)構(gòu)：有皮膚、粘膜、血腦屏障和胎盤屏障；（2）吞噬作用：分兩類—組織中為大吞噬細(xì)胞（巨噬細(xì)胞），血液中為小吞噬細(xì)胞（中性粒細(xì)胞）；（3）抗微生物物質(zhì)；存在體液、組織中的如補(bǔ)體，溶菌酶等，有殺菌.溶菌.溶解細(xì)胞等作用；2.特異性免疫：是個(gè)體在生活過程中與病原微生物等抗原物質(zhì)接觸后所產(chǎn)生的免疫，為后天形成的。包括：*體液免疫：B細(xì)胞----分化、增值為漿細(xì)胞----產(chǎn)生大量抗體；反應(yīng)快（幾分鐘~數(shù)小時(shí)）；產(chǎn)生各種抗毒素，可對(duì)化膿性球菌和少數(shù)病毒進(jìn)行免疫；*細(xì)胞免疫：T細(xì)胞----致敏T細(xì)胞----直接殺傷再次進(jìn)入的抗原.反應(yīng)慢（1~2天）；活性物質(zhì)為淋巴因子?？蓪?duì)寄生蟲、真菌、多數(shù)病毒及腫瘤進(jìn)行免疫。3.抗體—是一類在抗原物質(zhì)刺激下所形成的，具有與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白，存在于人體的血液、淋巴液和組織液中。人體血液中含有數(shù)百種不同特性的抗體，主要因氨基酸排列順序不同而特異性各異。1）分類：⑴抗毒素：能中和細(xì)菌外毒素的抗體。⑵抗菌抗體：能與相應(yīng)細(xì)菌結(jié)合的抗體。⑶抗病毒抗體：能與相應(yīng)病毒結(jié)合的抗體。⑷親細(xì)胞抗體：能吸附在參與I型變態(tài)反應(yīng)的細(xì)胞膜上的抗體。2）產(chǎn)生的一般規(guī)律：a.初次反應(yīng)：當(dāng)抗原首次進(jìn)入時(shí)機(jī)體所產(chǎn)生的抗體，數(shù)量不多，維持時(shí)間短；b.再次反應(yīng)：第二次同樣抗原再進(jìn)入時(shí)機(jī)體所產(chǎn)生的抗體，數(shù)量大增、迅速，留存的時(shí)間也較長(zhǎng)；c.回憶反應(yīng)：經(jīng)一定時(shí)間后抗體逐漸消失，若再次接觸該抗原后，消失的抗體快速上升，稱為“回憶反應(yīng)”。主要是由于體內(nèi)保留相應(yīng)的“回憶細(xì)胞”。d.免疫耐受：機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)抗原不能執(zhí)行正常的免疫應(yīng)答現(xiàn)象。4.抗體的生物活性：（1）特異性：一種抗體只能和相應(yīng)的抗原相結(jié)合，與其它的抗原不能結(jié)合；（2）激活補(bǔ)體：當(dāng)抗體與抗原結(jié)合后，才有激活補(bǔ)體的作用；（3）調(diào)理作用：能促進(jìn)細(xì)菌等顆粒性抗原被吞噬細(xì)胞所吞噬的作用；（4）IgG可通過胎盤進(jìn)入到胎兒的血液中；（5）組織結(jié)合：當(dāng)抗原再次進(jìn)入機(jī)體后，促使靶細(xì)胞釋放組胺等活性物質(zhì)，引起Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)。5.特異性免疫獲得方式：自動(dòng)免疫：自然性：因患傳染病,隱性感染。人工性：接種疫苗,類毒素。被動(dòng)免疫：自然性：來自胎盤,初乳。人工性：注射抗毒素,免疫球蛋白等。6.影響免疫反應(yīng)的因素：（1）抗原方面：a.抗原的性質(zhì)；b.進(jìn)入途徑；c.抗原的劑量，（2）機(jī)體方面：a.遺傳；b.神經(jīng)系統(tǒng)和精神狀態(tài)；c.內(nèi)分泌；d.年齡；e.營(yíng)養(yǎng)方面；f.身體鍛煉等。（3）自然因素：氣候、溫度、濕度等。四.病毒㈡、對(duì)外界因素的抵抗力滅活—用理化因素使病毒失去傳染性，仍保留其它生物活性。1.物理因素：多數(shù)病毒耐冷不耐熱，在室溫中一般僅存活數(shù)小時(shí)；有的可數(shù)日達(dá)數(shù)月；一般對(duì)熱，對(duì)x線敏感；加熱50℃30分鐘即被滅活。在-20℃以下或凍干后保存數(shù)年。2.化學(xué)因素：一般可耐受PH5-9；對(duì)各種氧化劑甚敏感（如過氧乙酸、漂白粉等）；50%甘油殺細(xì)菌不殺病毒，可保存含病毒的送檢材料；抗菌素均無效。有些中草藥有抑制作用（如板藍(lán)根、金銀花、大青葉）干擾素：具有廣譜的抗病毒作用，毒性較小，耐受性低。㈢、傳染途徑，類型：進(jìn)入途徑：皮膚、粘膜（呼吸道、消化道、泌尿生殖道及眼結(jié)膜等）；靜脈注射,皮膚傷口；垂直感染（進(jìn)入胎兒血液或分娩時(shí)）。