細(xì)菌性陰道病(BV)簡介課件

細(xì)菌性陰道病(BV)簡介及麗珠BV檢測產(chǎn)品李生主要內(nèi)容介紹BV的基礎(chǔ)知識BV檢測的臨床意義

BV檢測常見方法分析

麗珠公司BV檢測產(chǎn)品介紹BV基礎(chǔ)知識介紹BV的基本定義細(xì)菌性陰道病（BacterialVaginosis,BV)

是指一種陰道內(nèi)微生態(tài)平衡失調(diào)，在細(xì)菌學(xué)上表現(xiàn)為生殖道正常菌群(產(chǎn)H2O2的乳酸桿菌)數(shù)量減少,代之以一組厭氧菌群(類桿菌屬、加德納菌屬等)數(shù)量增加,引起的陰道分泌物增多，白帶有魚腥臭味等陰道生化性質(zhì)發(fā)生明顯變化而導(dǎo)致的臨床癥侯。正常菌群對人體的重要作用乳酸桿菌是正常陰道的最主要的優(yōu)勢菌，占陰道菌群的90%以上。陰道上皮細(xì)胞中含有豐富的糖原，在陰道乳酸桿菌的作用下，分解為乳酸，維持陰道正常的酸性環(huán)境，抑制堿性環(huán)境中繁殖的病原體，也稱為陰道的自凈作用。乳酸桿菌黏附于黏膜，形成保護(hù)屏障，競爭黏附，阻止病原微生物定植。乳酸桿菌提高機(jī)體的免疫功能，刺激巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞活性，維持陰道局部的抗感染能力。BV的發(fā)病機(jī)理圖示乳酸桿菌數(shù)量減少H2O2加德納菌/類桿菌等數(shù)量陰道內(nèi)源性感染陰道菌群失調(diào)功能減退產(chǎn)乳酸

致病因素各類陰道炎癥BV的致病病原體

陰道加德納菌（GardnerVaginalis）

類桿菌屬（Bacteridesspp.）

普氏桿菌屬（Prevotillaspp.）

動彎桿菌屬（MobilucusSPP.）

其它:人型支原體等BV與常見陰道炎的區(qū)別正常陰道BV霉菌性陰道炎滴蟲性陰道炎陰道pH值≤4.5≥4.5≤4.5

≥4.5優(yōu)勢微生物乳酸桿菌陰道加德納菌等厭氧菌霉菌滴蟲分泌物異味無有有有分泌物量不定，一般少中等多多分泌物外觀無色或白色絮狀，非均一性變稀如奶狀，粘度低呈奶酪樣凝塊，粘度高黃綠色泡沫樣，粘度低外陰、陰道上皮炎癥 無無有有胺試驗(yàn) 陰性(無魚腥味)陽性（有魚腥味）陰性(無魚腥味)陽性（有魚腥味）顯微鏡檢查 正常上皮細(xì)胞,乳酸桿菌占優(yōu)勢線索細(xì)胞,大量混雜菌落,乳酸桿菌較少無線索細(xì)胞，可見假菌絲和芽孢無線索細(xì)胞，可見滴蟲BV的發(fā)病率患病率隨種族及人群而異

一般人群:10%～30%

STD診所患者:30%～37%

美國每年估計有300萬有癥狀病例和300萬無癥狀者

國內(nèi)報道的BV患病率：

健康婦女：6.9%

婦科門診有異常陰道分泌物的患者：9.7%

性亂人群：36.7%

孕婦：10%-25%BV檢測的臨床意義（二）產(chǎn)科

---是造成早產(chǎn)、胎膜早破、低體重兒的主要原因。BV陽性

的妊娠婦女中40-50%易在37周前早產(chǎn)或分娩低出生體

重兒，比正常婦女高3-4倍，她們的孩子也可能受到直接

感染，患新生兒肺炎、腦膜炎等，并帶來各種后遺癥；

---是導(dǎo)致絨毛膜炎、剖腹產(chǎn)術(shù)后子宮炎的危險因素。BV患

者產(chǎn)后或剖宮產(chǎn)后發(fā)生產(chǎn)褥期子宮內(nèi)膜炎的是正常人群的

10倍；

---是導(dǎo)致某些妊娠不良和妊娠并發(fā)癥的危險因素；

BV檢測的現(xiàn)實(shí)狀況該病的臨床癥狀不明顯，常被忽視治療不徹底，容易反復(fù)發(fā)作現(xiàn)實(shí)患者認(rèn)識不足，檢測率不高醫(yī)院目前檢測方法不完善BV檢測常用方法分析BV常見檢測技術(shù)介紹

革蘭氏染色法

(少用)陰道加德納菌檢測(如PCR/培養(yǎng)法等)(少用)

脯氨酸氨基肽酶法(PIP)(少用)

Amsel四項(xiàng)法

(少用)

pH值+胺試驗(yàn)/多胺快速檢測法

(常用)

常規(guī)鏡檢法

(常用)

唾液酸酶法

(常用)

多聯(lián)檢測法(常用)Amsel四項(xiàng)法目前檢測BV的“金標(biāo)準(zhǔn)”，由以下四項(xiàng)指標(biāo)構(gòu)成：1）外觀：陰道分泌物增多變稀如奶狀2）pH值：陰道分泌物pH≥4.53）胺試驗(yàn)（嗅試驗(yàn)）：陰道分泌物中加入10%的氫氧化鉀溶液,出現(xiàn)魚腥味4）線索細(xì)胞：分泌物鏡檢有線索細(xì)胞。若鏡下線索細(xì)胞占陰道復(fù)磷狀上皮細(xì)胞的比例≥20%，則更具有診斷價值凡4項(xiàng)中3項(xiàng)同時陽性，即可診斷BV陽性線索細(xì)胞檢查/鏡檢濕片法：在一載玻片上加一滴生理鹽水，將陰道拭子分泌物與生理鹽水混合成懸液，加上蓋玻片后，在高倍（400倍）鏡下檢查。結(jié)果：線索細(xì)胞為陰道鱗狀上皮細(xì)胞表面覆蓋著許多球桿菌（主要是加特納菌，有時合并有厭氧菌），使細(xì)胞呈斑點(diǎn)狀、顆粒狀外觀，細(xì)胞邊緣模糊不清呈鋸齒狀。意義：當(dāng)線索細(xì)胞占全部上皮細(xì)胞的20%以上時一般認(rèn)為BV陽性。正常的上皮細(xì)胞線索細(xì)胞線索細(xì)胞檢查/鏡檢多胺快速檢測實(shí)驗(yàn)多胺快速試驗(yàn)原理：

感染細(xì)菌性陰道病時，陰道加特納菌、類桿菌、普氏桿菌、動彎桿菌等相關(guān)厭氧菌侵蝕陰道上皮細(xì)胞過程中產(chǎn)生的主要代謝物，氨基酸代謝生成胺（主要為丁二胺、戊二胺、三甲胺等揮發(fā)性胺），胺在陰道酸性環(huán)境下以鹽的形式存在，加10%KOH置換出氨，以氣體形式揮發(fā)，可以使溴甲酚紫試紙變紫色胺實(shí)驗(yàn)的缺點(diǎn)

胺試驗(yàn)的特異性差，結(jié)果影響因素多，滴蟲、宮頸糜爛等都可影響導(dǎo)致結(jié)果陽性；眾多醫(yī)院的臨床對照實(shí)驗(yàn)評估證實(shí)BV胺實(shí)驗(yàn)試劑假陽性率分別為25%--35%，通過與BV確診結(jié)果對照發(fā)現(xiàn)，BV胺實(shí)驗(yàn)試劑結(jié)果符合率分別60%--70%，符合率不高。假陽性的結(jié)果將導(dǎo)致患者接受抗厭氧菌治療，殺滅陰道正常菌群，造成陰道生態(tài)環(huán)境的失調(diào)，損害身心健康。BV多聯(lián)試劑檢測法

多項(xiàng)指標(biāo)綜合檢測，在對BV診斷的同時，也可以評價女性陰道微生態(tài)的狀態(tài)，理論意義上更具有優(yōu)勢；可能會成為BV診斷的主流方法，目前已逐漸獲得很多省份的收費(fèi)認(rèn)可，全國范圍已經(jīng)逐漸開展，部分省份和地區(qū)已經(jīng)相當(dāng)成熟；

BV多聯(lián)檢測目前包括三聯(lián)檢測（過氧化氫，白細(xì)胞酯酶，唾液酸苷酶），四聯(lián)檢測（pH值，過氧化氫，白細(xì)胞酯酶，唾液酸苷酶），甚至五聯(lián)（過氧化氫，白細(xì)胞酯酶，唾液酸苷酶，脯氨酸氨肽酶，氨基葡萄糖苷酶);麗珠BV檢測產(chǎn)品介紹BVCombine-TestKIT粵食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2009第2400191號BVCombine-TestKIT組成BVCombine-TestKITpH值比色卡LivzonBV四聯(lián)各項(xiàng)指標(biāo)含義1、pH值

異常：pH值≥4.5正常：

pH值≤4.52、過氧化氫濃度測定：

陰性：乳酸菌減少，生態(tài)破壞；陽性：生態(tài)恢復(fù)或正常3、唾液酸酶活性測定：陽性：致病菌、條件致病菌增加，生態(tài)破壞；陰性：正常，生態(tài)恢復(fù)

4、白細(xì)胞酯酶測定：陽性：粘膜受損，各種陰道感染；陰性：粘膜修復(fù)，炎癥消失

產(chǎn)品的臨床應(yīng)用一STD門診女性病人二婦科、產(chǎn)科病人

1.有BV臨床癥狀

2.無BV臨床癥狀：有BV及其他婦科病感染史孕婦有早產(chǎn)史的婦女有婦科手術(shù)史的婦女定期婦科檢查疑有盆腔炎的婦女

3.BV患者治療后復(fù)查

4.手術(shù)前常規(guī)BV檢測：人流置換、取環(huán)通液其他宮腔操作等LivzonBV四聯(lián)操作程序1）取出檢測液及所需數(shù)量的反應(yīng)板,平衡至室溫；2）將新鮮樣本在試紙上擦拭(點(diǎn)印!),使試紙被分泌物浸潤,待試紙變色后立即對照比色卡判讀；3）在樣品抽提管中滴加6到8滴樣本抽提液約400ul；4）再將采樣拭子浸入到滴有抽提液的樣本抽提管中,反復(fù)攪動擠壓5-6次,擠干液體后,棄去拭子；5）蓋上抽提管滴頭,往反應(yīng)板上滴加樣本抽提液，每孔滴加一滴,約35ul;6）陰性對照孔只加樣本液，其它檢測孔中分別滴加各對應(yīng)項(xiàng)檢測液一滴,輕拍.置于35-37℃中溫育15分鐘,觀察反應(yīng)孔顏色變化。注:若樣本干燥,可先在樣本抽提管中滴入一到兩滴樣本抽提液,輕輕攪動潤濕拭子,在繼續(xù)進(jìn)行檢測操作步驟LivzonBV四聯(lián)操作程序LivzonBV四聯(lián)操作程序滴加樣品滴加反應(yīng)液PH值唾液酸酶過氧化氫白細(xì)胞酯酶陰性對照LivzonBV四聯(lián)操作程序結(jié)果判斷LivzonBV四聯(lián)結(jié)果判讀pH值的檢測對照所附比色卡進(jìn)行判讀,正常pH≤4.4;1）唾液酸酶項(xiàng):檢測孔顏色變藍(lán)或綠色,BV陽性，不變色BV陰性；2）過氧化氫項(xiàng):檢測孔顏色變藍(lán)色或綠色,H2O2≥2umol/l陰性,不變色,H2O2≤2umol/l陽性；3）白細(xì)胞酯酶:檢測孔顏色變藍(lán)色或綠色,白細(xì)胞酯酶陽性；

LivzonBV四聯(lián)結(jié)果判讀實(shí)例pH值的檢測對照所附比色卡進(jìn)行判讀,正常pH≤4.4;1）唾液酸酶項(xiàng):檢測孔不變色BV陰性；2）過氧化氫項(xiàng):檢測孔顏色變藍(lán),H2O2≥2umol/l陰性；3）白細(xì)胞酯酶:檢測孔不變色，白細(xì)胞酯酶陰性；pH值的檢測對照所附比色卡進(jìn)行判讀,正常pH≤4.4;1）唾液酸酶項(xiàng):檢測孔顏色變藍(lán),BV弱陽性；2）過氧化氫項(xiàng):檢測孔顏色不變色,H2O2≤2umol/l陽性；3）白細(xì)胞酯酶:檢測孔顏色變藍(lán),白細(xì)胞酯酶陽性；LivzonBV四聯(lián)結(jié)果判讀實(shí)例LivzonBV四聯(lián)操作注意事項(xiàng)樣本采集：用無菌棉拭子收集女性陰道壁

（陰道下部1/3處）盡可能多的分泌物；樣本運(yùn)輸：采集的樣本應(yīng)立即送樣檢測；請及時讀取結(jié)果,超過規(guī)定時間5分鐘以上讀取結(jié)果視為無效；在采樣前72小時內(nèi)使用過陰道栓劑、膏劑、乳劑等陰道藥物的婦女.經(jīng)期所取的樣本也會影響到檢測結(jié)果。部分樣本的檢測物含量很高,大量水解底物,可產(chǎn)生沉淀,屬于正常現(xiàn)象；Livzon

BVCombine-TestKIT優(yōu)勢最關(guān)鍵指標(biāo)--唾液酸酶敏感性,特異性最好進(jìn)口唾液酸酶原料選擇的底物穩(wěn)定性好，檢測結(jié)果不會受到本底干擾某些唾液酸酶試劑常常出現(xiàn)底物在包被的材質(zhì)上或在貯存過程中發(fā)生分解變色，有一定程度的本底干擾。如國內(nèi)某些試劑常常在試劑盒中提示，如有變色可正常使用等字樣。實(shí)際上顯色體系如果有可見的本底，很難保證不會對檢測結(jié)果的觀察造成一定程度的影響，出現(xiàn)可疑或難以判斷等問題。LivzonBVCombine-TestKIT優(yōu)勢

結(jié)果易于觀察,精準(zhǔn)性好.

反應(yīng)孔為“U”型孔，背景為白色，不受本底干擾,顯色結(jié)果顏色系統(tǒng)一致,陰陽性結(jié)果顯而易見。

獨(dú)特的陰性對照孔設(shè)計

麗珠BV聯(lián)合試劑獨(dú)有的陰性對照孔的設(shè)計，也可以解決一些本身帶有顏色的分泌物對反應(yīng)結(jié)果觀察的干擾。

pH值試紙選用內(nèi)滲型精密試紙

pH值的檢測試紙選用德國進(jìn)口的“Merk”內(nèi)滲型精密試紙，試紙對分泌物無干擾，不會對