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實(shí)驗(yàn)六抗生素抗菌譜及微生物的耐藥性的測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛢?nèi)容目的:
1、學(xué)習(xí)抗生素抗菌譜的測(cè)定方法,了解常見(jiàn)抗生素的抗菌譜。
2、學(xué)習(xí)微生物耐藥性的測(cè)定方法,了解微生物對(duì)抗生素耐藥性產(chǎn)生的原因及對(duì)策內(nèi)容:抗生素的抗菌譜確定微生物耐藥性的測(cè)定抗生素抗菌譜的測(cè)定抗生素——是一類由微生物或其它生物生命活動(dòng)中合成的次級(jí)代謝產(chǎn)物或其人工衍生物,在低濃度時(shí)就能抑制或干擾它種生物(包括病原菌、病毒、癌細(xì)胞等)的生命活動(dòng),可作為優(yōu)良的化學(xué)治療劑??股氐目咕V各種抗生素有其不同的制菌范圍,即抗菌譜青霉素、紅霉素:抗G+鏈霉素、新霉素:抗G-慶大霉素、萬(wàn)古霉素、頭孢菌素:兼抗G+和G-氯霉素、四環(huán)素、金霉素、土霉素等:G+和G-以及立克次氏體、衣原體、支原體等實(shí)驗(yàn)材料菌種:各種不同來(lái)源的細(xì)菌。培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基供試抗生素:卡那霉素(母液濃度50mg/mL,溶于水)
設(shè)備與用具:恒溫培養(yǎng)箱、接種環(huán)、培養(yǎng)皿。實(shí)驗(yàn)步驟1倒(牛肉膏蛋白胨+卡那霉素)平板,使培養(yǎng)基中卡那霉素得終濃度為30μg/mL。2將平板(皿底)劃分為6等份,每一等份內(nèi)標(biāo)明一種細(xì)菌的名稱;3用接種環(huán)分別接種不用來(lái)源的細(xì)菌至相應(yīng)的區(qū)域4將劃好線的細(xì)菌平板,置37℃倒置培養(yǎng)48h。5記錄細(xì)菌的生長(zhǎng)情況,根據(jù)細(xì)菌的生長(zhǎng)情況,可初步確定卡那霉素的抗菌譜。實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄各種不同來(lái)源的細(xì)菌的生長(zhǎng)情況耐藥性產(chǎn)生的原因1、產(chǎn)生一種使藥物失去活性的酶;2、把藥物作用的靶位加以修飾和改變;3、形成“救護(hù)”途徑4、使藥物不能透過(guò)細(xì)胞膜;5、通過(guò)主動(dòng)外排系統(tǒng)把進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的藥物泵出細(xì)胞外;濾紙片法測(cè)定微生物的耐藥性所需濃度抗生素溶液配制A氨芐青霉素(50μg/mL)
,B卡那霉素(50μg/mL)
,C四環(huán)素(50μg/mL)
,D氯霉素(50μg/mL)
,E
鏈霉素(50μg/mL)
,F(xiàn)壯觀霉素(50μg/mL)
,①青霉素②卡那霉素③四環(huán)素④氯霉素⑤鏈霉素⑥壯觀霉素⑦無(wú)菌水⑦抗生素抑(殺)菌圈直徑/mm抗生素抑(殺)菌圈直徑/mm氨芐青霉素氯霉素卡那霉素鏈霉素四環(huán)素壯觀霉素實(shí)驗(yàn)結(jié)果思考題1、什么叫抗生素?什么是抗菌譜?2、抗生素對(duì)微生物的作用機(jī)制有那幾種?試舉
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