抗真菌藥物的近況與開(kāi)發(fā)課件

抗真菌藥物的研究進(jìn)展

藥物化學(xué)教研室2007．10一．抗真菌藥物的簡(jiǎn)介二.

目前臨床上應(yīng)用的抗真菌藥物三.近年發(fā)現(xiàn)的具有抗真菌潛力的其它抗真菌化合物結(jié)構(gòu)四.有關(guān)真菌的耐藥性問(wèn)題五.硫色(滿)酮類抗真菌化合物的研究六.硫色(滿)酮縮氨基(硫)脲類抗真菌化合物的研究

主要內(nèi)容

ThebriefintroductionaboutFungiFungiareplant-like,eukaryoticorganisms.Mostfungiliveassaprophytesinsoilorondeadplantmaterialsandareimportantinthemineralizationoforganicmatter.Thereare300,000kindsoffungi,butonly270ofwhichproducediseaseinhumansandanimals.Thesefungiaredividedintotwosectionsaccordingmycoticillnessesinhuamnstheyproduced.Mucocutaneous(shallow)Fungi:produceskinandhairinfectionsSystemic(Deep)Fungi:producevisceralinfetions

FungalinfectionsInrecentyear,theincidenceoffungalinfectionshasreachedalarmingproportions.Thisduotoanumberoffactors.Fungalinfections

Fungalinfectionsaretheseventhleadingcauseofinfection-relatedmortality,withnosocomialfungalinfectionsaffectingmorethan2millionpatientsannuallyatacostof$4.5billion.Moreover,thepatientpotentialforsystemicfungalinfectionsisexpectedtogrowby25%from2000to2008.

有關(guān)真菌病的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果表明：1996年以前，皮膚癬?。t色毛癬?。┚邮孜?，占47%，1996年以后，下降到34%，而以白念珠菌、酵母樣真菌等深部真菌所引起的真菌病比例顯著增加。這主要是由于臨床上廣譜抗生素、皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、等藥物的大量使用；器官移植及導(dǎo)管插管手術(shù)的普遍開(kāi)展；某些免疫缺陷病如AIDS的出現(xiàn)等有關(guān)統(tǒng)計(jì)資料表明，近20年來(lái)深部真菌感染率上升了約40倍，而且死亡病率高，占住院病人的29%。有報(bào)告稱，在AIDS病患中，三分之一以上HIV（HumanImmunodeficiencyVirus)陽(yáng)性患者死亡的原因是由于機(jī)會(huì)性卡氏肺囊蟲(chóng)真菌感染所引起的。所以真菌病已經(jīng)成為嚴(yán)重危害人類健康的疾病之一。

抗真菌藥物市場(chǎng)現(xiàn)狀

抗真菌藥物在全球抗感染藥市場(chǎng)中排列第三位，總銷售額約為40億～42億美元。來(lái)自輝瑞公司的一份資料顯示，近20年來(lái)，深部真菌感染呈持續(xù)增多趨勢(shì)，2006年第一季度其抗真菌藥物伏立康唑的銷售額已高達(dá)8000上漲38%。。在我國(guó)，對(duì)抗真菌藥物的需求也逐年攀升，全身用抗真菌藥物的市場(chǎng)份額2005年已超過(guò)8億元，并且以年均10%以上的速度遞增。業(yè)內(nèi)人士預(yù)測(cè)：在相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)，全身用抗真菌藥物市場(chǎng)將會(huì)保持這種增長(zhǎng)勢(shì)頭。。目前我國(guó)抗真菌藥生產(chǎn)廠雖有60多家，形成規(guī)模經(jīng)濟(jì)效益的企業(yè)較少，而且多數(shù)是以生產(chǎn)皮膚外用制劑為主，競(jìng)爭(zhēng)雖然激烈，但相比都很薄弱。

。

MechanismofactionTheclassificationofantifungalagents:Antimycoticantibiotics:SyntheticantifungalAgents:Polyenes(Amphotericin)BOthers(Griseofulvin)Fluorinatedpyrimidines(Fluorocytosine)AzolesImidazoles(ketoconazole)Triazoles(Fluoconazole)Allyamines(Terbinafine)Thioureas(Tolnafate)Others(Ciclopirox)抗真菌藥物的研究和臨床應(yīng)用的發(fā)展階段WorldwideSalesofAntifungalDrugs,byCategory:2001,2002and2007($Millions)

Thedisadvantagesofdrugsincurrentuse

AntifungalDrugResistance

AntifungaldrugresistanceIthasresultedinadrasticincreaseintheincidenceofopportunisticandsystemicfungalinfections.Increaseduseoftheazoles,coupledwiththefactthattheyarefungistaticdrugs,haslikelyresultedintheemergenceofresistancetoazoles.2.toxictothehostcellsTodevelopmentthenewclassesofantifungalagentsshouldtotakeaccounttheselectivitybetweenhostcellsandinfectedcells.Thefutureantifungaldrugs2.1抗真菌抗生素2.1.1作用于真菌細(xì)胞膜的抗真菌抗生素兩性霉素B(AmphotericinB,AMB)自50年代兩性霉素B問(wèn)世以來(lái)，一直是治療各種嚴(yán)重真菌感染的首選藥物，也是唯一可供靜注使用的多烯類抗真菌抗生素類藥物.

它的作用機(jī)制是與真菌細(xì)胞膜中的麥角甾醇結(jié)合形成甾醇-多烯絡(luò)合物,損傷膜的通透性,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的重要物質(zhì)外泄,而起到殺菌作用.該藥抗菌譜廣且較少出現(xiàn)耐藥性,但40余年的廣泛臨床應(yīng)用中因其嚴(yán)重的腎度性而限制了它的使用.近年來(lái)通過(guò)對(duì)其劑型的改進(jìn)減輕了它的毒性.目前上市的有3種主要的脂質(zhì)體劑型:(1)兩性霉素B脂質(zhì)體劑型(AmBisome),由美國(guó)明日之星公司研制開(kāi)發(fā)，1991年首先在英國(guó)和愛(ài)爾蘭上市，而后相繼進(jìn)入歐洲13個(gè)國(guó)家以及北美和亞洲市場(chǎng)，1997年8月11日獲得FDA批準(zhǔn)。.主要經(jīng)營(yíng)廠商是GileadSciences和日本藤澤公司，2004年的銷售額分別為2.4億美元和1.7億美元。所有這些藥物的設(shè)計(jì)都是為了降低兩性霉素B的毒性，最主要的是大大降低腎毒性。雖然仍有發(fā)燒、寒戰(zhàn)及惡心等輸液反應(yīng)，但比兩性霉素B的發(fā)生率小。這些脂質(zhì)復(fù)合物每天劑量范圍為3～5mg/kg。該劑量大大超過(guò)兩性霉素B的劑量，副作用很輕微。曾有報(bào)道肝藥酶增長(zhǎng)、嗜睡、食欲不振以及低血鉀，但發(fā)生率不到5%。.但是目前該類劑型的價(jià)格較高,在一定程度上限制了其使用制霉菌素(Nystain,NYS)能結(jié)合麥角甾醇,降低細(xì)胞膜的穩(wěn)定性,對(duì)多種真菌有效,但在胃腸道不易吸收,有毒副作用,臨床應(yīng)用受到限制.目前,其脂質(zhì)體制劑Nyotran已由Aronex公司研制,進(jìn)入注冊(cè)階段.單酰甘油酯類抗生素:AKD-2A,B,C,DAKD-2AAKD-2B1AKD-2B2AKD-2CAKD-2D由日本科學(xué)家從Steptomycessp,OCU-42815菌株中分離純化而得到的,通過(guò)對(duì)酵母細(xì)胞膜的作用而起抑制真菌作用2.1.2作用于真菌細(xì)胞壁的抗真菌抗生素真菌細(xì)胞壁具有許多殺真局菌活性的靶位.參與真菌細(xì)胞壁的合成的許多合成酶是真菌特有的,如1,3-β-葡聚糖合成酶;聚乙酰氨基葡糖合成酶等.脂肽類抗生素-棘白霉素（Echinocandin）對(duì)白色念珠菌，煙曲霉菌，新型隱球菌等深部真菌有特效卡泊芬凈（Caspofungin,Cancidas?)）2001年在美國(guó)上市,卡泊芬凈能抑制1，3－β－D－葡聚糖合成酶,抑制該酶可使細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)異常，致使細(xì)胞破壞，細(xì)胞內(nèi)容物滲漏?？ú捶覂艟哂袕V譜抗真菌活性，對(duì)耐氟康唑的念珠菌、曲霉菌、孢子菌等真菌均有較好的活性。

Table2.Averagewholesaleprice(AWP)costcomparisonofantifungaltreatmentregimens.AntifungalDoseCostperday(AWP)Costper20days(AWP)Caspofungin(Cancidas?)70mgloadingdose

50mg$463.75

$360.00$7,303.75AmphotericinB(Fungizone?)1mg/kg(70mg)IV*$16.30$326.00AmphotericinBlipidcomplex(Abelcet?)5mg/kg(350mg)IV*$700.00$14,000.00AmphotericinBliposome(Ambisome?)3mg/kg(210mg)IV*$791.28$15,825.60AmphotericinBcolloidaldispersion(Amphotec?)3mg/kg(210mg)IV*$336.00$6,720.00Itraconazole(Sporanox?)Injection200mgIV$148.17$2,963.40*Doseisbasedona70kgperson米卡芬凈(Micaungin)阿尼芬凈(Micaungin)尼克霉素(Nikkomycin,SP-920704,幾丁質(zhì)合成酶抑劑,哺乳動(dòng)物細(xì)胞中不含合成乙酰氨基葡糖,因此本品幾乎沒(méi)有毒性化學(xué)合成抗真菌藥:1.2.烯丙胺/硫代氨基甲酸鹽類:萘替芬、特比萘芬、托萘酯、托西拉酯3.嘧啶類：氟胞嘧啶4.吡啶酮類：環(huán)吡酮胺5.嗎啉類：阿莫羅芬一.氮唑類抗真菌藥:

氮唑類抗真菌藥物是目前臨床上主要的治療真菌感染藥物,該類藥物具有代謝穩(wěn)定,既可口服又可注射,對(duì)淺部真菌和深部真菌都有療效等優(yōu)點(diǎn).其中酮康唑等芳乙基環(huán)狀縮酮類化合物是治療淺部真菌感染的首選藥物,以氟康唑和伊曲康唑?yàn)榇淼牡谌拐婢幬锸侵委熒畈空婢腥镜氖走x.

該類藥物的作用機(jī)制是通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性抑制真菌羊毛甾醇14a-去甲基化(P450-14DM),使羊毛甾醇蓄積,細(xì)胞結(jié)構(gòu)功能組成成份麥角甾醇的生物合成缺乏,導(dǎo)致膜通透性和膜上許多酶活性改變,從而抑制真菌生長(zhǎng).由于人體內(nèi)普遍存在P450酶系,該類藥物也可以與人體內(nèi)其他的P450酶系的血紅蛋白輔基Fe原子配位結(jié)合,這是該類藥物普遍存在一定肝腎毒性的重要原因.SARofAzoles唑類抗真菌藥物的構(gòu)效關(guān)系:分子中的氮唑環(huán)(咪唑或三氮唑)是必須的,咪唑環(huán)的3位,三氮唑的4位氮原子與血紅素鐵原子形成配位鍵,競(jìng)爭(zhēng)抑制酶的活性,當(dāng)被其他基團(tuán)取代時(shí),活性喪失.比較咪唑和三氮唑類化合物可以發(fā)現(xiàn)三氮唑類化合物的治療指數(shù)明顯優(yōu)于咪唑類化合物.氮唑的取代基必須與氮雜環(huán)的1位上的氮原子相連.Ar基團(tuán)上取代基中苯環(huán)的4位取代基有一定的體積和電負(fù)性,苯環(huán)的2位有電負(fù)性取代基對(duì)抗真菌活性有利.(4)R1、R2上取代基結(jié)構(gòu)類型變化較大,其中活性最好的有兩大類:R1、R2形成取代二氧戊環(huán)結(jié)構(gòu),成為芳乙基氮唑環(huán)狀縮酮類化合物,代表性的藥物有酮康唑、伊曲康唑.該類藥物的抗真菌活性很強(qiáng),但由于體內(nèi)治療是肝毒性較大,而成為目前臨床上首選的外用藥;R1為醇羥基,代表性藥物為氟康唑,該類藥物體外無(wú)活性,但體內(nèi)活性非常強(qiáng),是治療深部真菌病的首選藥.(5)該類化合物的立體化學(xué):多相研究結(jié)果表明,氮唑類抗真菌藥對(duì)立體化學(xué)要求十分嚴(yán)格.一般情況是3-三唑基-2-芳基-1-甲基-2-丙醇類化合物中,(1R,2R)立體異構(gòu)與抗真菌活性有關(guān).酮康唑(Ketoconozole)

酮康唑是1981年美國(guó)研制的第一個(gè)口服咪唑類抗真菌藥物，它抑制真菌細(xì)胞膜麥角甾醇的合成，影響細(xì)胞膜通透性而阻止真菌生長(zhǎng)?？诜糜谥委煴砥ず蜕畈棵咕〉妮^好藥物。也作為預(yù)防全身真菌病和慢性粘膜、皮膚念珠菌病復(fù)發(fā)的維持治療藥。用于免疫機(jī)能減退者的預(yù)防真菌感染藥至今發(fā)現(xiàn)以下副作用：藥物相互作用和吸收問(wèn)題，如腸道pH升高時(shí)吸收差，與食物有關(guān)的吸收變化以及在骨髓移植和艾滋病人中生物利用度小；不能進(jìn)入腦脊液；尿中濃度很低；沒(méi)有靜注的劑型；肝毒性大，可致肝壞列。酮康唑作為兩性霉素B的替代品廣泛用于各種非腦膜性的、非致命性的真菌感染，目前已被氟康唑和伊曲康唑取代。氟康唑(Fluconazole)1990年在美國(guó)上市,用于治療各種真菌病.為治療念珠菌,球孢子菌的首選藥,其口服生物利用度高,也能靜注給藥,能通過(guò)血腦屏障,目前是治療深部真菌病的首選.但目前有報(bào)道氟康唑可能導(dǎo)致出生缺陷,故不能用于孕婦.輝瑞公司的氟康唑2000年的世界性銷售額為10.14億美元，2001年增長(zhǎng)到10.66億美元，同比增長(zhǎng)了5.13％，在全球暢銷藥品中排名第43位，2002年的業(yè)績(jī)表明比上一年增長(zhǎng)4.3％，為11.12億美元，其專利于2004年1月29日到期。氟康唑已經(jīng)在全球30多個(gè)國(guó)家上市，位居全球及中國(guó)抗真菌藥物市場(chǎng)銷售額榜首。1990年上市時(shí)，氟康唑曾被譽(yù)為“抗真菌感染的最后一道防線”，市場(chǎng)和產(chǎn)品開(kāi)發(fā)得都比較深入。國(guó)內(nèi)能夠生產(chǎn)各種劑型的氟康唑，市場(chǎng)表現(xiàn)突出的是上海三維制藥生產(chǎn)的三維康和大連輝瑞制藥生產(chǎn)的大扶康，杭州民生、海南曼克星和常州二藥等廠家也生產(chǎn)銷售。氟康唑的合成路線:伊曲康唑(Itraconazole)1992年在美國(guó)上市,目前只有一種口服膠囊劑型.伊曲康唑?qū)φ婢?xì)胞(比哺乳動(dòng)物)的細(xì)胞色素P450更具特異結(jié)合力,因此療效更好、毒性更小.現(xiàn)已成為非腦膜炎、非致命性牙生菌病和組織胞漿菌病的首選藥.伊曲康唑具有較氟康唑更寬的抗菌譜，2003年上市的注射劑型彌補(bǔ)了其膠囊劑吸收不規(guī)則、血藥濃度不穩(wěn)定的缺陷，同時(shí)，該產(chǎn)品靈活的序貫療法應(yīng)用于預(yù)防和治療，大大改善了深部真菌感染高危人群的預(yù)后，并且有效地降低了治療費(fèi)用，給深部真菌治療提供了又一種新的選擇。伊曲康唑已被列為國(guó)家基本藥物，銷售金額和市場(chǎng)份額均有顯著增長(zhǎng)。目前伊曲康唑的國(guó)內(nèi)生產(chǎn)廠家主要有成都倍特藥業(yè)（商品名易啟康）、西安楊森制藥（商品名斯皮仁諾）和天津力生制藥（商品名美扶）。伊曲康唑的合成：伊曲康唑合成中的異構(gòu)體IIIa：伊曲康唑合成中的異構(gòu)體IIIb：活力康唑(Voriconazole，UK-109496)Pfizer公司中心研究院于2001年開(kāi)發(fā)的新型三氮唑類抗真菌新藥,大量的臨床數(shù)據(jù)表明,它是目前氟康唑結(jié)構(gòu)改造中最成功的化合物.其化學(xué)結(jié)構(gòu)與氟康唑類似,即用氟嘧啶基取代了氟康唑中的三唑環(huán)部分,并增加了一個(gè)甲基.對(duì)深部真菌的療效優(yōu)于氟康唑和兩性霉素B對(duì)耐氟康唑的多種條件性真菌如：曲霉菌、克柔念珠菌、光滑念珠菌等有效。目前尚無(wú)國(guó)產(chǎn)產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)使用均需進(jìn)口輝瑞公司的伏立康唑。SFDA已批準(zhǔn)了國(guó)內(nèi)廠商關(guān)于伏立康唑的臨床注冊(cè)申請(qǐng)。合成路線:泊沙康唑(Posaconazole,Noxafil）由先令-保雅（Schering-plough）公司開(kāi)發(fā)的新型廣譜抗真菌藥.2007由美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市。為伊曲康唑的類似物,體外抑真菌研究中發(fā)現(xiàn)泊沙康唑?qū)Υ蠖鄶?shù)菌的活性高于氟康唑、伊曲康唑、酮康唑。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，該藥在延長(zhǎng)生存期，降低肝、肺真菌負(fù)擔(dān)，縮短治療時(shí)間等方面明顯優(yōu)于氟康唑。對(duì)曲霉菌的活性與兩性霉素B相當(dāng)，優(yōu)于氟康唑、酮康唑；對(duì)兩性霉素B耐藥菌株的活性優(yōu)于伊曲康唑。其另外一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是它能較好地透過(guò)血腦屏障，在腦中具有較高的生物利用度，在不同動(dòng)物體內(nèi)的半衰期為7-23小時(shí)。合成通式:泊沙康唑的合成：側(cè)鏈合成路線:環(huán)合立體化學(xué):＞拉夫康唑（Ravuconazole，BMS207147)由日本Eisai公司開(kāi)發(fā)的抗真菌藥,III期臨床已經(jīng)結(jié)束.大范圍的對(duì)比實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,拉夫康唑?qū)δ钪榫幕钚愿哂诜颠?、伊曲康?并且對(duì)氟康唑耐藥的白色念珠菌和克魯斯念珠菌具有較高的活性,對(duì)煙曲霉菌的活性與兩性霉素B相當(dāng),但高于伊曲康唑.3.SCH51048由Schering-Plough研究所研制,為伊曲康唑的類似物,體外抗真菌實(shí)驗(yàn)表明,本品對(duì)淺部和深部真菌都有一定療效,在對(duì)250種菌株的測(cè)試中發(fā)現(xiàn),它對(duì)44種特異真菌的活性都優(yōu)于伊曲康唑,對(duì)酵母菌的活性優(yōu)于氟康唑.,且對(duì)許多耐氟康唑藥的真菌有效,可口服,目前已進(jìn)入III期臨床階段.Genaconazole(SCH39304)長(zhǎng)效抗真菌藥,臨床實(shí)驗(yàn)中的半衰期為72小時(shí).目前為III期臨床.5．D0870SCH39304本品有Zenneca和Mochida開(kāi)發(fā)研制，對(duì)臨床上的假絲菌和隱球菌，包括耐氟康唑和伊曲康唑藥的白色念珠菌有很高活性，藥效高于兩性霉素、B5-氟尿嘧啶及其他臨床上使用的三唑化合物。目前該藥為III期臨床。D0870Syn-2869由Synphar公司發(fā)現(xiàn)的新型三唑類抗真菌藥物,可口服,對(duì)多種致病真菌具有體外和體內(nèi)活性.體外抗菌活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該藥對(duì)耐伊曲康唑、氟康唑和兩性霉素B的易桿菌（C．a(chǎn)lbicans）酵母菌、絲狀曲霉菌等均有較高活性。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，該藥與伊曲康唑、氟康唑和兩性霉素B相比可不同程度地延長(zhǎng)動(dòng)物的存活時(shí)間。目前該藥已進(jìn)入I期臨床。6．TAK-187由日本Takeda化學(xué)研究所開(kāi)發(fā),為III期臨床狀態(tài).體外抗真菌活性測(cè)試表明,TAK-187對(duì)各種致病真菌的活性和抗菌譜明顯優(yōu)于它的三個(gè)光學(xué)異構(gòu)體.對(duì)白色念珠菌有特效,明顯高于氟康唑,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明該藥在腦脊液中有較高的濃度。7.其它：Sch51048（±）Sch42536（+）Sch45449（－）Sch45450SperoconazoleX=Cl，Y=Z=OSch45019X=F，Y=O，Z=CH2Sch45012X=F，Y=CH2，Z=O氮唑類抗真菌化合物研發(fā)方向:擴(kuò)大抗菌譜,提高對(duì)深部真菌感染的療效,方便給藥途徑提高生物利用度.蛋白質(zhì)晶體學(xué)、分子生物學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)等相關(guān)學(xué)科的迅速發(fā)展,將有助于進(jìn)一步闡明羊毛甾醇P450去甲基化酶與氮唑類藥物的相互作用機(jī)制,以設(shè)計(jì)出作用特異性的新型抗真菌藥物.將組合化學(xué)技術(shù)應(yīng)用與抗真菌藥物研究,可實(shí)現(xiàn)大量合成并快速篩選氮唑類化合物.光學(xué)活性氮唑類抗真菌藥物也是未來(lái)研究的一個(gè)趨勢(shì).其他:咪康唑(Miconazole)硫康唑(Sulconazole)克霉唑(Clotrimazole)益康唑(Econazole)二.烯丙胺/硫代氨基甲酸鹽類:與咪唑類一樣通過(guò)影響麥角甾醇的合成發(fā)揮殺菌作用,但他它作用于比咪唑更早一些的代謝過(guò)程,是角鯊烯環(huán)氧化酶的抑制劑,能引起角鯊烯的聚集,從而導(dǎo)致真菌死亡.臨床實(shí)驗(yàn)表明改類化合物治療皮膚真菌病比咪唑類更有效.1.萘替芬(Natifine)1985年在美國(guó)上市,主要為外用藥Natifine20世紀(jì)90年代上市的七個(gè)新合成抗真菌藥物之一。特比萘芬是瑞士諾華公司研制的新產(chǎn)品，1992年12月獲美國(guó)FDA批準(zhǔn)后上市。1999年后已轉(zhuǎn)為非處方藥品銷售，國(guó)內(nèi)市場(chǎng)主要有口服片劑和乳膏劑，商品名蘭美抒，分別由北京諾華和天津中美史克進(jìn)行市場(chǎng)開(kāi)發(fā)。

國(guó)產(chǎn)特比萘芬乳膏劑“丁克”，在1997年已由山東齊魯制藥生產(chǎn)。

該藥口服吸收好，吸收率可達(dá)70％，親脂性和親角質(zhì)性強(qiáng)，在皮下脂肪、皮膚、毛發(fā)組織中濃度較高，能滲入并儲(chǔ)存于皮膚角質(zhì)層和新生的毛發(fā)根部、甲板角質(zhì)部分，臨床常用于甲真菌病、手足癬及股癬的治療。

Terbinafine2.特比萘芬(Terbinafine)3.托萘酯(Tolnaftate)1964年上市,局部外用藥.4.托西拉酯(Tolciclate)1979年上市,外用藥.三.其他:嘧啶類：氟胞嘧啶（5-Flucytosine）1972年上市，為真菌的核酸合成抑制劑，透過(guò)胞嘧啶透過(guò)酶被真菌吸收，經(jīng)胞嘧啶脫氨酶轉(zhuǎn)化為5-氟尿嘧啶，最后轉(zhuǎn)化成三磷酸脲苷，代替尿嘧啶進(jìn)入核糖核酸，抑制正常的核酸合成。起抗菌譜繳窄僅對(duì)酵母菌、酵母樣菌、及部分著色霉菌有效，它主要用于尿泌系統(tǒng)的真菌病。但有耐藥性，與兩性霉素B合用可增加療效。吡啶酮類：環(huán)吡酮胺（Ciclopiroxolamine）1985年上市，可改變細(xì)胞膜的通透性，用于皮膚念珠菌病、花斑病、足癬病等。嗎啉類：阿莫羅芬（Amorolfine）1991年上市，為麥角甾醇合成抑制劑，主要用于皮膚的癬病。三.近年發(fā)現(xiàn)的具有抗真菌潛力的的其它結(jié)構(gòu)：1．多肽類和氨基酸類：

Histatin5是RajPA等人1998年首次從人唾液中分離到的一種堿性多肽，其結(jié)構(gòu)中有24個(gè)氨基酸（D-S-H-A-K-R-H-H-G-Y-K-R-K-F-H-E-K-H-H-S-H-R-G-Y），兼有親水性和親脂性，具有較強(qiáng)的殺真菌活性。它的作用機(jī)制不同于干擾麥角甾醇合成的唑類抗真菌藥，其殺菌作用與其穿過(guò)真菌細(xì)胞膜的性質(zhì)有關(guān)，其殺菌活性和膜的破壞力可被高鹽環(huán)境或代謝抑制劑所抑制。認(rèn)為其殺菌作用在于：與真菌細(xì)胞膜相互作用，穿過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，與先，與線粒體結(jié)合并進(jìn)入。但其如何穿過(guò)細(xì)胞膜到達(dá)細(xì)胞器這一過(guò)程尚不清晰。Helmerhost等認(rèn)為具有跨膜電壓的線粒體是Histatin5的作用靶點(diǎn)，而且著一機(jī)制可能是堿性抗真菌多肽的普遍作用方式。其主要有以下優(yōu)點(diǎn)：（1）幾乎沒(méi)有毒性；（2）對(duì)唑類產(chǎn)生耐藥性的真菌也有殺傷作用；（3）其殺菌強(qiáng)度與唑類藥物相當(dāng)。RI-331〔（S）-2-氨基-5-羥基-4-氧代戊氨酸〕，為鏈球菌屬細(xì)菌產(chǎn)生的一種氨基酸，其抗真菌機(jī)制為對(duì)某些氨基酸的消耗，如：蘇氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、絲氨酸等來(lái)抑制真菌蛋白質(zhì)的合成。2．金屬絡(luò)合物類：磺胺嘧啶銀Wells等人證實(shí)其結(jié)構(gòu)中的銀離子對(duì)念珠菌細(xì)胞壁合成的關(guān)鍵酶—磷酸甘露糖異構(gòu)酶具有不可逆抑制作用，而有機(jī)基團(tuán)的加入可增加化合物與酶的親和力。該類化合物已申請(qǐng)進(jìn)入臨床。2-甲基-3-氨基（3H）-喹唑啉-4-酮與銅（II）形成的復(fù)合物Ramadan等發(fā)現(xiàn)該類化合物有較強(qiáng)抗真菌和抗病毒活性。其機(jī)制被認(rèn)為是結(jié)構(gòu)中的銅（II）離子在細(xì)胞內(nèi)被還原成銅（I）離子，后者催化O2到O2-的還原過(guò)程而銅（II）離子催化O2-到H2O2的岐化反應(yīng)過(guò)程。O2-和H2O2對(duì)細(xì)胞膜上的成分有細(xì)胞毒性，同時(shí)銅（I）離子還可以通過(guò)抑制線粒體的呼吸和破壞細(xì)胞變形性來(lái)抑制DNA的合成以及ATP的產(chǎn)生。

3．天然產(chǎn)物中的抗真菌成分：

萜類，Tan等從Artemisiasieversiana的地上部分中分離得到一個(gè)倍半萜內(nèi)酯（isoalantolactone），對(duì)各種人類致病真菌有較好的活性，如對(duì)黃曲霉菌、黑曲霉菌、白地霉菌、熱帶念珠菌、白色念珠菌的抑菌濃度分別為：50、50、25、25、25、25mg/ml。此外，還從其他植物中發(fā)現(xiàn)了多種具有抗真菌作用的單萜和倍半萜。R=OAc,Hisoalantolactone單萜、倍半萜:酰胺類:吡咯烷酰胺:醌類:拉帕醌類化合物（Lapachone）異香豆素：Chalcone：皂類：大蒜素（Allicin）：大蒜油的主要成分，其抗菌機(jī)理是與真菌的醇脫氫酶、巰基氧化還原酶、RNA對(duì)聚酶等多種酶上的巰基結(jié)合，影響這些酶的功能及活性而產(chǎn)生抗真菌作用。大蒜素用于治療隱球菌性腦炎、系統(tǒng)性念珠菌病，真菌對(duì)大蒜素的耐藥性目前還未見(jiàn)報(bào)道。海洋生物提取物從海綿中分離得到的大環(huán)內(nèi)酯類化合物,有廣譜抗真菌活性抗真菌中藥開(kāi)發(fā)研究新進(jìn)展

人們?cè)陬A(yù)防和治療真菌的研究特別是淺表真菌病方面取得了極大的進(jìn)展，然而由于深部真菌感染率的逐年上升，加上治療的難度、真菌的抗藥性、現(xiàn)有藥物的毒副作用等因素存在，使得人們?nèi)栽诓粩鄬ふ腋咝У投镜目拐婢幬?。目前在開(kāi)發(fā)抗真菌中藥方面也取得了很大進(jìn)展。

山蒼子

山蒼子

山蒼子:山蒼子油乳劑可抑制胞壁和胞膜成分的合成，引起菌體破裂，內(nèi)容物滲出可致真菌死亡。

丁香:掃描電鏡和透視電鏡可觀察到丁香醇作用于真菌后超微結(jié)構(gòu)的改變，推測(cè)了香醇可能首先作用于真菌細(xì)胞膜，引起膜的損傷、破壞和通透性改變。這樣一方面藥物進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使線粒體膜受到損傷，引起細(xì)胞能量代謝障礙，又可影響到細(xì)胞壁的合成更新，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。對(duì)紫丁香的抗菌有效成分３，４－二羥基苯乙醇的衍生物ＳＹ－０１的抗真菌活性及其機(jī)理研究發(fā)現(xiàn)，隨著藥物作用時(shí)間的延長(zhǎng)，質(zhì)膜改變更加明顯，線粒體膜、核膜破損，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物滲漏，破壞細(xì)胞的正常代謝而致細(xì)胞死亡。

肉桂:

在對(duì)肉桂醛的抗黃曲霉作用及超微結(jié)構(gòu)的研究中發(fā)現(xiàn)，肉桂醛有明顯的抗黃曲霉作用。主要是通過(guò)破壞真菌細(xì)胞壁，使藥物滲人真菌細(xì)胞內(nèi)，破壞細(xì)胞器而起到殺菌作用。

在檸檬中提取的檸檬醛有抗真菌作用。檸檬:應(yīng)用生化化學(xué)方法并結(jié)合電鏡，觀察檸檬醛作用于黃曲霉后線粒體形態(tài)的變化。結(jié)果顯示，檸檬醛處理組線粒體發(fā)生不規(guī)則增加，形態(tài)不規(guī)則，結(jié)構(gòu)無(wú)序，表面粗糙；同時(shí)線粒體氧化還原酶以及線粒體呼吸速率均較對(duì)照組明顯降低，認(rèn)為檸檬醛一方面減少能量的合成和利用，同時(shí)還通過(guò)降低還原型輔酶Ｄ合成量而減少還原力，不可逆的抑制核酸、蛋白質(zhì)、脂類及糖的合成而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

紫蘇:

紫蘇油對(duì)自然污染的霉菌有明顯抑制作用，明顯優(yōu)于尼泊金乙酸，且具有用量小、安全，不受ｐＨ值因素影響的特點(diǎn)。臨床應(yīng)用表明，紫蘇煎劑坐浴對(duì)治療霉菌性陰道炎效果較好，有較好抑制瘙癢的作用。茴香:用３Ｈ－ＴｄＲ摻入法實(shí)驗(yàn)表明，茴香醛對(duì)白色念球菌核酸代謝有顯著抑制作用。臨床應(yīng)用表明，茴香水煎液對(duì)女性霉茵性陰道炎的瘙癢有較好的抑制作用。

四.有關(guān)真菌的耐藥性問(wèn)題真菌耐藥菌株日益增多，已成為糾正真菌病治療中的一大難題。從分子生物學(xué)和細(xì)胞學(xué)研究看，真菌耐藥的原因包括：l、對(duì)咪唑類藥耐藥：

第一，念珠菌細(xì)胞膜固醇類成分的改變導(dǎo)致抗真菌藥物的通透性降低。第二，唑類藥物的靶酶一P450LIAI基因突變導(dǎo)致唑類藥物對(duì)其親和力降低。第三，唑類藥物的靶酶一細(xì)胞色素P450LIAI產(chǎn)生過(guò)多。真菌基因發(fā)生突變?cè)蛏胁磺宄?，可能與真菌外環(huán)境的誘導(dǎo)及廣泛應(yīng)用抗真菌藥物有關(guān)。這三種機(jī)制可單獨(dú)起作用或共同起作用，導(dǎo)致真菌在各種不同的水平對(duì)各種結(jié)構(gòu)各異的相互沒(méi)有聯(lián)系的抗真菌藥物產(chǎn)生不同的耐藥性。

2、對(duì)二性霉素B產(chǎn)生耐藥性：

英國(guó)學(xué)者認(rèn)為真菌產(chǎn)生對(duì)二性霉素B耐藥性的主要原因是由于基因突變產(chǎn)生別的固醇代替了細(xì)胞膜上的固有的麥角固醇因而使藥物失去結(jié)合靶位而不能發(fā)揮抗菌作用。他們的研究有一定的說(shuō)服力，但有別的研究室分離出了與麥角固醇無(wú)關(guān)的突變耐藥菌株，因此真菌對(duì)二性毒素B耐藥的機(jī)制遠(yuǎn)未得到明確的解釋。3、對(duì)氟胞嘧啶產(chǎn)生耐藥性：

可能是由于基因突變使尿嘧啶核苷酸焦磷酸酶、胞嘧啶透酶及胞嘧啶脫氫酶的產(chǎn)生出現(xiàn)量和質(zhì)的改變，影響氟胞嘧啶進(jìn)入真菌細(xì)胞后脫氨基而形成5一氟尿嘧啶，不能干擾真菌DNA的合成，常常是由于患者不規(guī)則服用抗真菌藥而誘發(fā)了真菌的基因突變。真菌的耐藥性問(wèn)題目前仍是一個(gè)未完全解決的問(wèn)題，以上機(jī)制亦未得到進(jìn)一步的證實(shí)，很多工作仍有待于進(jìn)行。因念珠菌對(duì)吐類藥耐藥而導(dǎo)致的治療失敗越來(lái)越常見(jiàn)，盡管目前還局限于接受長(zhǎng)期治療的患者，但由于越來(lái)越多的患者需要進(jìn)行長(zhǎng)期治療，而這種療法明顯地具有促發(fā)耐藥性產(chǎn)生的可能，因此，認(rèn)清這一問(wèn)題的嚴(yán)重性，弄清其耐藥機(jī)制,，研究和改進(jìn)治療方法已成為當(dāng)務(wù)之急。五.硫色(滿)酮類化合物的抗真菌活性研究:我教研室1981年在“新農(nóng)抗”的研究中發(fā)現(xiàn)了一類天然產(chǎn)物具有抗真菌活性,經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定為硫色(滿)酮類化合物.硫色酮硫色滿酮與此同時(shí),文獻(xiàn)報(bào)道了一系列黃酮類化合物具有較強(qiáng)的抗真菌活性,例如:Thiochrom(an)oneDerivativesbasedontheleadscaffold2-Substituted-thiochroman-4-one(dioxide)2,3-bis(substituted)-thiochrom-4-one(dioxide)3-Mannichbasesofthiochroman-4-one(dioxide)3-AromaticMannichbasesofthiochroman-4-one(dioxide)3-benzylidene-thiochroman-4-one(dioxide)3-Bromo-thiochroman-4-one(dioxide)2-Imdizolyl-thiochroman-4-one(dioxide)硫色(滿)酮類化合物的合成與結(jié)構(gòu)改造:硫色滿酮的合成:取代苯硫酚的合成:乙基荒原酸鉀的合成:硫色酮的合成:硫色酮衍生物的合成:Thesyntheticroutesofthiochrom-4-onederivativesThesyntheticroutesof2-Imdizolyl-thiochroman-4-one(dioxide)

Antifungalactivitytest

Method:progressivedoubledilutionmethod,Theminimuminhibitoryconcentration(MIC)ofthetestedcompoundswereevaluated.Controldrugs:KetoconazoleandClotrimazole

Testedfungi:(wereoriginallyclinicalisolatesobtainedfromsomehospitalsinChina)C.Albicans(C.a)E.floccosum(E.f)C.Neoformans(C.n)T.gypsum(T.g)S.Schenckii(S.s)T.rubrum(T.r)H.Pedrosoi(H.p)M.ferrugincum(M.f)A.Fumigatus(A.f)M.gypsum(M.g)

CompoundsMIC(μM）R1R2XC.aC.nS.sH.pA.fE.fT.gT.rM.fM.g6-FHS2.5＞

102.5＞

105.0105.0

5.0

100.313

6-ClHS0.625

5.0

5.05.0＞

105.010

2.5＞

1010

6-BrHS10＞

10105.01.252.5

2.50.625

10107-CF3HS0.625

2.5105.0＞

102.5＞

10

＞

10

1.251.256-CH3HS105.0

5.0＞

105.05.02.5

2.5＞

1010

6-F7-ClS2.510105.01.252.5

2.5

0.625

1.250.313

6-Cl8-ClS1.25

10

2.5

101.255.0

10

2.51.250.625

6-FHSO2＞

10

101.255.02.510＞

10100.625＞

106-ClHSO22.5

5.0＞

10＞

105.05.02.5＞

101010

6-BrHSO22.5＞

105.01.25＞

105.05.02.510＞

107-CF3HSO210＞

10＞

101.252.55.0＞

101.2510＞

106-CH3HSO2＞

10

1010105.05.0＞102.52.51.25

6-F7-ClSO22.5＞

105.01.25＞

105.01.252.510＞

106-Cl8-ClSO210.0

105.0105.05.0＞10＞

10

5.0＞

10Ketoconazole1.252.52.51.251.252.50.6250.6251.250.313Chotrimazole10.05.05.01.255.01.251.250.6252.52.5

CompoundsMIC(μM）R1R2R3C.aC.nS.sH.pA.fE.fT.gT.rM.fM.gHCH3H＞

10

＞

1010＞

10＞

10＞

10＞

10

＞

10

1.250.313

CH3H8-CH3105.0

5.0＞

105.05.02.5

2.5＞

1010

HCH37-CH3＞

10

10＞

105.0＞

10＞

10

＞

10

＞

10

1.25＞

10HCH36-OEt10＞

10

5.0＞

105.05.0＞

10

1.25＞

102.5

HCH36-Cl＞

10

10＞

105.02.510＞

1010＞

10＞

10HPhCH26-CH32.5

＞

10＞

10＞

105.0＞

102.5＞

101010

HPhCH28-CH3＞

10＞

105.0＞

105.0＞

10

5.05.010＞

10HH6-F10＞

10＞

10＞

102.55.0＞

10＞

10

10＞

10HH6-Cl2.5

10＞

1010＞

10＞

10

＞10＞

10

2.5＞

10

HH6-Br2.5＞

105.0＞

10＞

105.05.0＞

1010＞

10HH6-CF310.0

105.0105.05.0＞10＞

10

5.0＞

10Ketoconazole1.252.52.51.251.252.50.6250.6251.250.313Chotrimazole10.05.05.01.255.01.251.250.6252.52.5CompoundsMIC(μM）R1R2R3,R4C.aC.nS.sH.pA.fE.fT.gT.rM.fM.gHHCH3,CH32.51.252.510105.0

1.250.6250.6252.56-FHCH3,CH31.252.5

1.251.255.01.251.250.625

2.52.56-ClHCH3,CH32.5

2.5101.252.52.50.6250.6255.01.25

6-BrHCH3,CH310.0

5.0

5.0105.010

1.25

2.52.52.57-CF3HCH3,CH31.251.250.6251.251.251.25

1.250.625102.56-Cl8-ClCH3,CH31.251.252.50.6250.6251.252.5

1.25

1.250.3136-F7-ClCH3,CH32.5

2.5100.6252.52.50.625

1.25

0.6251.256-CH3HCH3,CH32.51.252.510105.01.250.6250.6252.58-CH3HCH3,CH31.255.01.251.251.255.01.250.625

2.52.56-Cl8-ClC2H5,C2H52.55.02.52.51.252.50.6251.25

1.250.3137-CF3HC2H5,C2H51.2510100.6252.52.52.5

1.25

0.6251.256-BrHC2H5,C2H52.51.252.5101.255.01.250.6250.6252.56-CH3HC2H5,C2H51.255.01.252.55.010

1.252.52.52.58-CH3HC2H5,C2H52.5

2.5101.252.52.55.05.05.01.25

HHC2H5,C2H510.0

5.05.0105.010

1.252.52.52.5

Ketoconazole1.252.52.51.251.252.50.6250.6251.250.313Clotrimazole10.05.05.01.255.01.251.250.6252.52.5CompoundsMIC(μM）R1R2R3C.aC.nS.sH.pA.fE.fT.gT.rM.fM.g6-FH1-Piperazine102.55.0105.05.0

10102.55.06-ClH1-Piperazine2.52.52.5105.010101010106-BrH1-Piperazine1.252.5102.52.55.05.00.6255.00.6257-CF3H1-Piperazine1.255.0

5.0101.2510

1010100.3136-Cl8-Cl1-Piperazine2.5102.510102.5

0.625101.25106-F7-Cl1-Piperazine10

5.01.252.55.01.252.55.0105.06-CH3H1-Piperazine10

10

101.252.52.55.01.255.01.258-CH3H1-Piperazine10.0

10

10105.010

2.52.52.52.56-Cl8-Cl1-Morpholine2.52.52.5101.255.0

0.6251.250.6251.257-CF3H1-Morpholine1.255.010101.2510101010106-BrH1-Morpholine2.5

5.0101.252.5105.05.01.25106-CH3H1-Morpholine10

5.0

5.0105.0102.52.52.52.58-CH3H1-Morpholine2.5

2.5105.02.5101010101.256-CH3H1-Imidazole10.0

5.0

2.5105.0102.5105.05.06-CH3H2-Methy1-imidazole5.0

10

101.252.55.05.02.51.25106-CH3Htriazloe10.0

5.05.0105.010

1010102.5Ketoconazole1.252.52.51.251.252.50.6250.6251.250.313Clotrimazole10.05.05.01.255.01.251.250.6252.52.5CompoundsMIC(μM）R1R2R3C.aC.nS.sH.pA.fE.fT.gT.rM.fM.g6-FH4'-F＞

10105.0105.0

2.51.25105.0

＞

107-CF3H4'-F5.0

5.05.0

5.0＞

102.5

10101.255.0

6-F7-Cl4'-F1.251010105.0＞

105.00.6255.0＞

106-Cl8-Cl4'-F2.52.5102.55.0

5.0

10105.0

5.0

6-FH4'-Br5.0

＞

105.0

＞

1010.010

1.25102.51.257-CF3H4'-Br＞

105.0

2.55.0

5.02.55.0

＞

10105.06-F7-Cl4'-Br5.0

5.02.5

5.02.55.0＞

105.0

5.01.256-Cl8-Cl4'-Br102.5102.55.05.0

5.0

＞

102.52.56-FH4'-SO2NH22.5102.5101.2510.0105.0

101.256-FH4'-NO25.0

5.05.0

5.01.25101.255.010106-F7-Cl4'-NO2＞

1010＞

10102.5105.0

5.01.25106-Cl8-Cl4'-NO25.0

＞

105.0

＞

105.01.25＞

102.55.0

＞

106-FH2'-NO2＞

105.0

＞

105.0

2.5101010＞

105.0

7-CF3H4'-CH3＞

10＞

105.0＞

105.0＞

102.5101.251.256-FH4'-OCH35.0

5.0

5.0

5.0

2.55.0

5.0105.0

5.0

6-FHH10.05.02.5

5.05.0＞

101.251010.01.25Ketoconazole1.252.52.51.251.252.50.6250.6251.250.313Clotrimazole10.05.05.01.255.01.251.250.6252.52.5CompoundsMIC(μM）R1R2R3C.aC.nS.sH.pA.fE.fT.gT.rM.fM.g6-FHH＞

10

10105.02.5＞

10＞

10102.52.5

7-CF3HH10

5.0＞102.55.05.02.5＞

10＞

1010

6-F7-ClH2.52.5

5.010＞

10＞

105.02.5＞

10＞

106-Cl8-ClH10＞

10＞10101.255.01.25105.05.0

6-FH4'-NO2＞

10

102.5105.02.5＞10＞

101.251.25

7-CF3H4'-NO22.5＞

105.02.5＞

10101.255.010＞

106-F7-Cl4'-NO22.52.5

2.5＞

10＞

105.01.25＞

1010＞

106-Cl8-Cl4'-NO210.0

105.05.05.010＞10＞

10

5.05.07-CF3H2'-NO22.5＞

105.0＞

10＞

105.01.252.5102.56-Cl8-Cl2'-NO2＞

10

101.255.02.510＞

10100.62510

7-CF3H4'-OCH32.5

5.0＞

10＞105.05.02.5＞

101010

6-Cl8-Cl4'-OCH3＞

10＞

105.05.0＞

10＞

105.0＞

1010＞

106-FH2'-NO2＞

10＞

10＞

105.02.55.0＞

10＞

10102.5

6-Cl8-Cl2'-Cl5.0

10102.55.0＞

10＞105.02.51.25

6-Cl8-Cl4'-Br＞

10＞

105.02.51.255.01.25＞

1010＞

106-Cl8-Cl4'-F10.0

105.0105.02.5

2.5105.0＞

10Ketoconazole1.252.52.51.251.252.50.6250.6251.250.313Clotrimazole10.05.05.01.255.01.251.250.6252.52.5Theresultsofacutetoxi