鞭毛染色法及活細(xì)菌活動(dòng)性的觀察課件_第1頁
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實(shí)驗(yàn)四鞭毛染色法及活細(xì)菌活動(dòng)性的觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康募耙?、了解細(xì)菌鞭毛染色的原理，掌握鞭毛染色的方法；

2、學(xué)習(xí)懸滴法觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性。二、實(shí)驗(yàn)原理細(xì)菌的鞭毛很纖細(xì)，只有用電子顯微鏡才能觀察到。但是，如采用特殊的染色法，則在普通光學(xué)顯微鏡下也能看到它。鞭毛染色的基本原理是：即在染色前先用媒染劑處理，讓它沉積在鞭毛上，使鞭毛直徑加粗，然后再進(jìn)行染色。常用的媒染劑由丹寧酸和氯化高鐵等配制而成。三、實(shí)驗(yàn)器材1、菌種：普通變形桿菌（Proteusvulgaris）、金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）2、染色液：硝酸銀染色液，3、其他：顯微鏡，載玻片，蓋玻片，），擦鏡紙，吸水紙，記號(hào)筆，鑷子，接種環(huán)等。四、實(shí)驗(yàn)方法（一）鞭毛染色（硝酸銀染色法）1.清洗玻片：選擇光滑無裂痕的玻片，置洗衣粉過濾液中（洗衣粉煮沸后用濾紙過濾，以除去粗顆粒），煮沸20min。取出用清水沖洗，瀝干水后，置95%乙醇中浸泡，用時(shí)取出在火焰上燒去酒精。2.菌液的制備：菌齡較老的細(xì)菌容易失落鞭毛，所以在染色前應(yīng)將待染細(xì)菌在新配制的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基斜面上連續(xù)移接3-5代，以增強(qiáng)細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)力。最后一代菌種放恒溫箱中培養(yǎng)12-16h。然后，用接種環(huán)挑取斜面與冷凝水交接處的菌液數(shù)環(huán)，移至盛有1-2mL無菌水的試管中，使菌液呈輕度混濁。將該試管放在37℃恒溫箱中靜置10min（放置時(shí)間不宜太長(zhǎng)，否則鞭毛會(huì)脫落），讓幼齡菌的鞭毛松展開。3.制片：取蒸餾水一滴，吸取少量菌液滴在潔凈玻片的水滴里立即將玻片傾斜，使菌液緩慢地流向另一端，吸去多余。涂片放空氣中自然干燥。4.染色：①滴加A液，染3-5min；②用蒸餾水充分洗凈A液；③用B液沖去殘水，再加B液于玻片上覆蓋染色數(shù)秒至1min，必要時(shí)在酒精燈微火加熱直至顯褐色，立即用蒸餾水洗，自然干燥。5.鏡檢：先低倍，再高倍，最后用油鏡檢查。結(jié)果：菌體呈深褐色，鞭毛呈淺褐色。（二）運(yùn)動(dòng)性的觀察五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告繪圖表示鞭毛細(xì)菌的形態(tài)特

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