飲食行業(yè)益生菌制品的質(zhì)量控制與審批程序課件

益生菌制品的

質(zhì)量控制與審批程序

中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所益生菌制品的

質(zhì)量控制與審批程序

1益生菌ProbioticsPRO-BIOTICS

meansForlife

益生菌意味著“為了生命”益生菌Probiotics2FAO/WHO益生菌的定義

益生菌是活的微生物，通過攝入足夠數(shù)量，對宿主起有益健康的作用。FAO/WHO益生菌的定義3FAO/WHO—Probioticsare:“

Livemicroorganismswhichwhenadministeredinadequateamountsconferahealthbenefitonthehost

”FAO/WHO—Probioticsare:“Li4益生菌－益生菌是活的微生物，通過攝入足夠數(shù)量，對宿主產(chǎn)生一種或多種特殊且經(jīng)論證的功能性健康益處。（歐洲食品與飼料菌種協(xié)會2002）益生菌－5PROBIOTICS－Probioticsarelivingmicroorganisms,whichwheningestedorlocallyappliedsufficientnumbers,haveoneormorespecifieddemonstratedfunctionalhealthbenefits

forthehost(EFFCA2002)PROBIOTICS－6我國有關(guān)益生菌的定義：益生菌是指對人和動植物有益的菌。由益生菌生產(chǎn)的產(chǎn)品稱為益生菌制品，包括活菌體、死菌體、菌體成分及代謝產(chǎn)物。我國有關(guān)益生菌的定義：益7益生菌的應(yīng)用食品、功能性食品、膳食補充劑藥品、飼料、化妝品益生菌制品作為膳食補充劑（foodsupplements）有粉劑、膠囊或片劑益生菌的應(yīng)用8乳酸菌Lacticacidbacteria是指能發(fā)酵糖和其它碳水化合物，產(chǎn)生大量乳酸的細(xì)菌的通稱。乳酸菌Lacticacidbacteria9美國功能性食品市場每年以15~20%的速度增長,產(chǎn)值達33億美元。日本保健食品銷售額20世紀(jì)90年代初達4000億日元。（Berner&O’Donnell,1998）美國功能性食品市場每年以15~20%的速度增長,產(chǎn)值達10美國主要的功能食

（Berner&O’Donnell,1998）美國主要的功能食11添加植物成分或植物提取物

抗氧化、降低心血管疾病的危險、降低癌癥發(fā)生的危險、降低高血壓的危險添加生物活性肽

提高免疫系統(tǒng)的功能、提高礦物質(zhì)的活性等添加植物成分或植物提取物12添加膳食纖維預(yù)防便秘、降低腸癌發(fā)生的危險、降低血中膽固醇添加ω-3多不飽和脂肪酸

降低心臟病發(fā)作的危險、降低某些癌癥發(fā)生的危險、提高免疫系統(tǒng)功能等；添加膳食纖維13添加益生菌(probiotics)

改善胃腸道功能、提高免疫系統(tǒng)功能、降低腸癌發(fā)生的危險添加益生原（prebiotics）

改善胃腸道功能、提高免疫系統(tǒng)功能、降低腸癌發(fā)生的危險添加益生菌(probiotics)

改善胃腸道功能、提高14常用的益生菌雙歧桿菌（Bifidobacterium）乳桿菌（Lactobacillus）常用的益生菌15世界上有70多種含雙歧桿菌和乳桿菌的產(chǎn)品，包括酸奶、奶粉和冷凍甜點等。日本有50多種含有益生菌的不同形式的奶制品歐洲酸奶世界上有70多種含雙歧桿菌和乳桿菌的產(chǎn)品，包括酸奶、奶粉和冷16對益生菌菌種的基本要求1首先而且最重要的是安全性必須來自人體或食品有長期安全使用歷史2生產(chǎn)菌種的質(zhì)量控制3有實驗證明具有聲稱的功能對益生菌菌種的基本要求17中國的益生菌類保健食品調(diào)節(jié)腸道菌群增強免疫力中國的益生菌類保健食品18從1997年至2004年一共做了28個產(chǎn)品，16個含雙歧桿菌、9個含乳桿菌。劑型包括粉劑、膠囊、片劑、口服液。大部分產(chǎn)品聲稱菌數(shù)可達108~1011cfu/g(ml)，經(jīng)檢測菌數(shù)可以達到108cfu/g(ml)，液體產(chǎn)品也可達到106cfu/g(ml)

。從1997年至2004年一共做了28個產(chǎn)品，16個含雙19常用的益生菌菌種（Berner&O’Donnel1998）常用的益生菌菌種20

菌種菌株嗜酸乳桿菌LactobacillusacidophilusLa1等保加利亞乳桿菌LactobacillusbulgaricusLb12乳乳桿菌LactobacilluslactisLa1植物乳桿菌Lactobacillusplatarum299v,LpO1鼠李糖乳桿菌LactobacillusrhamnosusGG,GR-1羅伊氏乳桿菌LactobacillusreuteriSD2112干酪乳桿菌LactobacilluscaseiShirota,744類干酪乳桿菌LactobacillusparacaseiCRL431發(fā)酵乳桿菌LactobacillusfermentumRC-IRC瑞士乳桿菌LactobacillushelvertiucsBO2菌種21菌種菌株青春雙歧桿菌-Bifidobacteriumadolescents長雙歧桿菌B.longumB536,SBT-2928短雙歧桿菌B.breveYakult兩雙歧桿菌B.bifidusBb-11乳雙歧桿菌B.lactisBb-02嬰兒雙歧桿菌B.infantisShirotaImmunitassB.EssensisDanone,(BioActivia)B.LaterosporusCRL431枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis-菌種22雙歧桿菌和乳桿菌的安全性問題認(rèn)為是安全的理由健康人體的腸道和泌尿-生殖道粘膜中數(shù)量相當(dāng)高極罕見與疾病有關(guān)雙歧桿菌和乳桿菌的安全性問題23認(rèn)為有安全性問題的理由除干酪乳桿菌（LactobacillusceseiShirota）和嗜酸乳桿菌（L.acidophilusNCFM）有幾百年的安全使用歷史外，大部分益生菌沒有安全使用歷史。認(rèn)為有安全性問題的理由24

2001年10月1日-10月4日FAO/WHO專家委員會在阿根廷科爾多瓦就評價食品中含活的益生菌有關(guān)健康及營養(yǎng)問題召開會議。會議認(rèn)為有必要建立評價食品用益生菌的系統(tǒng)方法指南，以確定其健康聲稱。

2001年10月1日-10月4日25

為建立益生菌的評價指南、推薦指標(biāo)和方法成立FAO/WHO聯(lián)合專家工作組規(guī)定了確定健康聲稱應(yīng)提供的資料目的是制定對益生菌的最低要求主要指食品用益生菌，排除治療用生物制劑和基因修飾的生物為建立益生菌的評價指南、推薦指標(biāo)和方法26

2002年4月30日-5月1日在加拿大安大略省倫敦市FAO/WHO聯(lián)合專家工作組起草了《食品中益生菌的評價指南

GuidelinesfortheEvaluationofProbioticinFood》2002年4月30日-5月1日在加拿大安大略省倫敦市27

1確定益生菌的屬/種/株用表型和基因分型方法進行株的鑒別益生菌的有益作用有株的特異性按國際菌種保藏法保存菌株

1確定益生菌的屬/種/株282功能學(xué)特征體外試驗胃酸耐受試驗、膽汁耐受性、粘膜粘附性和／或人上皮細(xì)胞粘附性對條件致病菌的抗菌活性降低致病菌表面粘附能力膽鹽水解酶活性動物試驗2功能學(xué)特征29益生菌的安全性問題

全身感染有毒代謝活性易感人群過度的免疫刺激基因轉(zhuǎn)移益生菌的安全性問題30

FAO/WHO專家工作組對益生菌進行安全性評價的建議

31抗菌素耐藥性類型的測定某些代謝活性（D-乳酸鹽的產(chǎn)生、膽鹽非共價鍵結(jié)合）的評價

抗菌素耐藥性類型的測定32

對人體副作用的評價售后消費者不良反應(yīng)的流行病學(xué)調(diào)查對人體副作用的評價33如待評價的菌株屬于已知對哺乳動物有毒性的產(chǎn)毒菌種，必須測定其產(chǎn)毒能力待評價的菌株屬于已知具有溶血性，必須測定其溶血活性

如待評價的菌株屬于已知對哺乳動物有毒性的產(chǎn)毒菌種，必須測定34我國益生菌產(chǎn)品安全性評價與質(zhì)量控制我國益生菌產(chǎn)品35益生菌作為一類生物活性制品，必須安全、有效、穩(wěn)定，益生菌類保健食品的生產(chǎn)加工有其自身的特殊性，如為了使終產(chǎn)品中存在一定數(shù)量的益生菌活菌體，產(chǎn)品不能進行消毒滅菌。因此加強其質(zhì)量管理確保產(chǎn)品質(zhì)量尤為重要。益生菌作為一類生物活性制品，36菌種安全性要求生物學(xué)、遺傳學(xué)、功效學(xué)特性明確和穩(wěn)定。菌種及其代謝產(chǎn)物必須無毒無害。來源及國內(nèi)外安全食用資料。安全性評價資料（包括毒力試驗）。菌種安全性要求37生產(chǎn)菌種的質(zhì)量控制建立種子庫一旦確定某一菌種作為生產(chǎn)用菌種，應(yīng)建立菌種庫以確保為每次生產(chǎn)提供充足的、性狀穩(wěn)定的菌種，以避免或減少菌種的污染及因菌種傳代過多而導(dǎo)致遺傳變異。一般需要建立三級菌種庫，即原代（原始）種子庫、主代（主）種子庫和生產(chǎn)（工作）種子庫。

生產(chǎn)菌種的質(zhì)量控制38原代種子庫—

指經(jīng)研究、篩選、鑒定后確定為食品用益生菌制品生產(chǎn)用菌種，經(jīng)擴大一代后冷凍干燥一定數(shù)量的單支菌種作為種子，2～8℃保存，一般定0代。主代種子庫—

原代種子經(jīng)擴大培養(yǎng)得到均勻的，冷凍干燥制成一定數(shù)量的單支菌種，作為制備生產(chǎn)種子庫的菌種，2～8℃保存。主代種子一般采用1～3代。原代種子庫—指經(jīng)研究、篩選、鑒定后39生產(chǎn)種子庫—

主代種子經(jīng)擴大培養(yǎng)得到的均勻培養(yǎng)物，冷凍干燥制成一定數(shù)量的單支菌種，2～8℃保存，或懸浮于特定培養(yǎng)液（保護液），分裝安培置–70℃以下保存。每生產(chǎn)一批產(chǎn)品用一只菌種，用于生產(chǎn)之前要進行部分項目的檢定，合格后方可使用，生產(chǎn)種子一般采用3～5代。生產(chǎn)種子庫—主代種子經(jīng)擴大培養(yǎng)得40《益生菌類保健食品審評規(guī)定（試行）》

第二條益生菌類保健食品系指能夠促進腸內(nèi)菌群生態(tài)平衡，對人體起有益作用的微生態(tài)產(chǎn)品。

《益生菌類保健食品審評41第三條益生菌菌種必須是人體正常菌群的成員，可利用其活菌、死菌及其代謝產(chǎn)物。益生菌類保健食品必須安全可靠，即食用安全，無不良反應(yīng)；生產(chǎn)用菌種的生物學(xué)、遺傳學(xué)、功效學(xué)特性明確和穩(wěn)定。第三條益生菌菌種必須是人體正常菌群的成員，可利用其活菌42

第四條可用于保健食品的益生菌菌種名單由國家食品藥品監(jiān)督管理局公布。第五條國家食品藥品監(jiān)督管理局對保健食品的益生菌菌種鑒定單位進行認(rèn)定或認(rèn)可，菌種鑒定單位的名單由國家食品藥品監(jiān)督管理局公布。益生菌類保健食品的菌種鑒定工作應(yīng)在國家食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)定或認(rèn)可的鑒定單位進行。第四條可用于保健食品的益生菌菌種43

第六條申請益生菌類保健食品，除按保健食品有關(guān)規(guī)定提交申報資料外，還應(yīng)提供以下資料：

1、產(chǎn)品配方及配方依據(jù)中應(yīng)包括確定的菌種屬名、種名及菌株號。菌種的屬名、種名應(yīng)有對應(yīng)的拉丁學(xué)名。舉例：長雙歧桿菌Bifidobacterium.longumB536

第六條申請益生菌類保健食品，除按442、菌種的培養(yǎng)條件（培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度等）。3、菌種來源及國內(nèi)外安全食用資料4、國家食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)定或認(rèn)可的鑒定機構(gòu)出具的菌種鑒定報告。5、菌種的安全性評價資料（包括毒力試驗）。2、菌種的培養(yǎng)條件（培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度等）。456、菌種的保藏方法7、對經(jīng)過馴化、誘變的菌種，應(yīng)提供馴化、誘變的方法及馴化劑、誘變劑等資料。8、以死菌和／或其代謝產(chǎn)物為主要功能因子的保健食品應(yīng)提供功能因子或特征成分的名稱和檢驗方法。9、生產(chǎn)企業(yè)的技術(shù)規(guī)范和技術(shù)保證。6、菌種的保藏方法46

10、企業(yè)生產(chǎn)條件符合《保健食品生產(chǎn)良好規(guī)范》的證明文件。申請注冊的保健食品，使用《可用于保健食品的益生菌菌種名單》之外的益生菌菌種的，還應(yīng)提供菌種具有功效作用的研究報告、相關(guān)文獻資料和菌種及其代謝產(chǎn)物不產(chǎn)生任何有毒有害作用的資料。由國家食品藥品監(jiān)督管理局組織相關(guān)專業(yè)的專家對菌種的食用安全性和功能依據(jù)進行評價后，在按保健食品的評審程序進行評審。10、企業(yè)生產(chǎn)條件符合《保健食品生產(chǎn)良好47第七條申請人夠買活菌種凍干粉直接生產(chǎn)保健食品，生產(chǎn)加工工藝只是混合、灌裝過程，本規(guī)定第六條第5項至第10項的資料可由菌種凍干粉原料供應(yīng)商提供復(fù)印件（加蓋原料供應(yīng)商公章）并提供購銷憑證。第七條申請人夠買活菌種凍干粉直接生產(chǎn)保健食品，生產(chǎn)48經(jīng)過長期保藏的菌種，由于種種原因常易發(fā)生變異、衰退或死亡。變異是生物基本特性之一，當(dāng)菌種處在新陳代謝水平最低的生活環(huán)境之中，生長繁殖受到外界抑制變?yōu)橥顟B(tài)，往往更容易發(fā)生變異。因此各類菌種在保藏期間必須定期檢查，采取措施防止衰退、變異或死亡，發(fā)現(xiàn)變異或衰退時能及時恢復(fù)。經(jīng)過長期保藏的菌種，由于種種原因常易發(fā)生變49第八條申請注冊的用于益生菌類保健食品生產(chǎn)的菌種應(yīng)滿足以下條件：第八條申請注冊的用于益生菌類保健食品生產(chǎn)的菌種應(yīng)滿足以501、保健食品生產(chǎn)用菌種應(yīng)采用種子批系統(tǒng)。原始種子批應(yīng)驗明其記錄、歷史、來源和生物學(xué)特性。從原始種子批傳代、擴增后保存的為主種子批。從主種子傳代、擴增后保存的為工作種子批。工作種子批的生物學(xué)性狀應(yīng)與原始種子批一致，每批主種子批和工作種子批均應(yīng)按規(guī)程要求保管、檢定和使用。在適宜的培養(yǎng)基上主種子傳代不超過10代，工作種子傳代不超過5代。1、保健食品生產(chǎn)用菌種應(yīng)采用種子批系統(tǒng)。原始種子批應(yīng)驗明其記512、試制單位應(yīng)有專門的部門和人員管理生產(chǎn)菌種，建立菌種檔案資料，內(nèi)容包括菌種的來源、歷史、篩選、檢定、保存方法、數(shù)量、開啟使用、等完整的記錄。每年向所在地省級食品藥品監(jiān)督管理部門書面匯報管理情況。2、試制單位應(yīng)有專門的部門和人員管理生產(chǎn)菌種，建立菌種檔案資523、菌種及其代謝產(chǎn)物必須無毒無害，不得在生產(chǎn)用培養(yǎng)基內(nèi)加入有毒有害物質(zhì)和致敏性物質(zhì)。4、從活菌類益生菌保健食品中應(yīng)能分離出與報批和標(biāo)識菌種一致的活菌。3、菌種及其代謝產(chǎn)物必須無毒無害，不得在生產(chǎn)用培養(yǎng)基內(nèi)加入有53第九條試制益生菌類保健食品的場所應(yīng)具備以下條件：1、建立良好生產(chǎn)規(guī)范（GMP），并逐步建立危害分析關(guān)鍵控制典（HACCP）質(zhì)量保證體系。2、具備中試生產(chǎn)規(guī)模，即每日至少可生產(chǎn)500L3的生產(chǎn)能力，并以中試產(chǎn)品報批。第九條試制益生菌類保健食品的場所應(yīng)具備以下條件：543、必須有專門的廠房或車間、有專用的生產(chǎn)設(shè)備和設(shè)施；必須配備益生菌實驗室，菌種必須有專人管理，應(yīng)由具有中級以上技術(shù)職稱的細(xì)菌專業(yè)的技術(shù)人員負(fù)責(zé)；制訂相應(yīng)的詳細(xì)技術(shù)規(guī)范和技術(shù)保證。3、必須有專門的廠房或車間、有專用的生產(chǎn)設(shè)備和設(shè)施；必須配備55第十條生產(chǎn)用菌種及生產(chǎn)工藝不得變更。第十一條不提倡以液態(tài)形式生產(chǎn)益生菌類保健食品活菌產(chǎn)品。第十二條活菌類益生菌保健食品在其保質(zhì)期內(nèi)活菌數(shù)不得少于106cfu/mL(g)。第十條生產(chǎn)用菌種及生產(chǎn)工藝不得變更。56第十三條益生菌類保健食品如需在特殊條件下保存，應(yīng)在標(biāo)簽和說明書中標(biāo)示。第十四條所用益生菌菌種在其發(fā)酵過程中，除培養(yǎng)基外，不得加入具有功效成分的動植物及其它物質(zhì)。第十三條益生菌類保健食品如需在特殊條件下保存，應(yīng)在標(biāo)簽57第十五條經(jīng)過基因修飾的菌種不得用于保健食品。第十六條本規(guī)定由國家食品藥品監(jiān)督管理局負(fù)責(zé)解釋。第十七條本規(guī)定自發(fā)布之日起實施。以往發(fā)布的規(guī)定，與本規(guī)定不符的，以本規(guī)定為準(zhǔn)。第十五條經(jīng)過基因修飾的菌種不得用于保健食品。58可用于保健食品的菌種名單

兩歧雙歧桿菌Bifidobacteriumbifidum嬰兒雙歧桿菌B.infantis長雙歧桿菌B.longum短雙歧桿菌B.breve青春雙歧桿菌B.adolescentis可用于保健食品的菌種名單兩歧雙歧桿菌Bifidoba59保加利亞乳桿菌Lactobacillusbulgaricus嗜酸乳桿菌L.acidophilus干酪乳桿菌干酪亞種

L.caseisubsp.casei嗜熱鏈球菌

Streptococcusthermophilus羅伊氏乳桿菌L.reuteri

保加利亞乳桿菌Lactobacillusbulgaric60益生菌菌種鑒定單位名單中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所中國科學(xué)院微生物研究所益生菌菌種鑒定單位名單61不得使用致病菌不得使用產(chǎn)毒及可能產(chǎn)生其他活性物質(zhì)的菌種菌種有安全使用歷史目前基因修飾的菌種不得用于生產(chǎn)保健食品。不得使用致病菌62參考文獻1.ReportofaJointFAO/WHOWorkinggrouponDraftingGuidelinesfortheEvaluationofProbioticsinFood,LondonOntario,Canada,April30andMay1,20022.ReportofaJointFAO/WHOExpertConsultationonEvaluationofHealthandNutritionalPropertiesofProbioticsinFoodincludingPowderMilkwithLiveLacticAcidBacteria,Cordoba,Argentina,1-4October2001參考文獻633.NPN(Natuur&gezondheidsproductenNederland)PositionPaperonProbiotics,May20034.郭興華主編，益生菌基礎(chǔ)與應(yīng)用，北京科學(xué)出版社，2002年5.NagendraP.Shah,FunctionalFoodsfromProbioticsandPrebiotics,FoodTechnology,Vol.55,No.11,November2001.3.NPN(Natuur&gezondheids64謝謝大家！飲食行業(yè)益生菌制品的質(zhì)量控制與審批程序課件65益生菌制品的

質(zhì)量控制與審批程序

中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所益生菌制品的

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66益生菌ProbioticsPRO-BIOTICS

meansForlife

益生菌意味著“為了生命”益生菌Probiotics67FAO/WHO益生菌的定義

益生菌是活的微生物，通過攝入足夠數(shù)量，對宿主起有益健康的作用。FAO/WHO益生菌的定義68FAO/WHO—Probioticsare:“

Livemicroorganismswhichwhenadministeredinadequateamountsconferahealthbenefitonthehost

”FAO/WHO—Probioticsare:“Li69益生菌－益生菌是活的微生物，通過攝入足夠數(shù)量，對宿主產(chǎn)生一種或多種特殊且經(jīng)論證的功能性健康益處。（歐洲食品與飼料菌種協(xié)會2002）益生菌－70PROBIOTICS－Probioticsarelivingmicroorganisms,whichwheningestedorlocallyappliedsufficientnumbers,haveoneormorespecifieddemonstratedfunctionalhealthbenefits

forthehost(EFFCA2002)PROBIOTICS－71我國有關(guān)益生菌的定義：益生菌是指對人和動植物有益的菌。由益生菌生產(chǎn)的產(chǎn)品稱為益生菌制品，包括活菌體、死菌體、菌體成分及代謝產(chǎn)物。我國有關(guān)益生菌的定義：益72益生菌的應(yīng)用食品、功能性食品、膳食補充劑藥品、飼料、化妝品益生菌制品作為膳食補充劑（foodsupplements）有粉劑、膠囊或片劑益生菌的應(yīng)用73乳酸菌Lacticacidbacteria是指能發(fā)酵糖和其它碳水化合物，產(chǎn)生大量乳酸的細(xì)菌的通稱。乳酸菌Lacticacidbacteria74美國功能性食品市場每年以15~20%的速度增長,產(chǎn)值達33億美元。日本保健食品銷售額20世紀(jì)90年代初達4000億日元。（Berner&O’Donnell,1998）美國功能性食品市場每年以15~20%的速度增長,產(chǎn)值達75美國主要的功能食

（Berner&O’Donnell,1998）美國主要的功能食76添加植物成分或植物提取物

抗氧化、降低心血管疾病的危險、降低癌癥發(fā)生的危險、降低高血壓的危險添加生物活性肽

提高免疫系統(tǒng)的功能、提高礦物質(zhì)的活性等添加植物成分或植物提取物77添加膳食纖維預(yù)防便秘、降低腸癌發(fā)生的危險、降低血中膽固醇添加ω-3多不飽和脂肪酸

降低心臟病發(fā)作的危險、降低某些癌癥發(fā)生的危險、提高免疫系統(tǒng)功能等；添加膳食纖維78添加益生菌(probiotics)

改善胃腸道功能、提高免疫系統(tǒng)功能、降低腸癌發(fā)生的危險添加益生原（prebiotics）

改善胃腸道功能、提高免疫系統(tǒng)功能、降低腸癌發(fā)生的危險添加益生菌(probiotics)

改善胃腸道功能、提高79常用的益生菌雙歧桿菌（Bifidobacterium）乳桿菌（Lactobacillus）常用的益生菌80世界上有70多種含雙歧桿菌和乳桿菌的產(chǎn)品，包括酸奶、奶粉和冷凍甜點等。日本有50多種含有益生菌的不同形式的奶制品歐洲酸奶世界上有70多種含雙歧桿菌和乳桿菌的產(chǎn)品，包括酸奶、奶粉和冷81對益生菌菌種的基本要求1首先而且最重要的是安全性必須來自人體或食品有長期安全使用歷史2生產(chǎn)菌種的質(zhì)量控制3有實驗證明具有聲稱的功能對益生菌菌種的基本要求82中國的益生菌類保健食品調(diào)節(jié)腸道菌群增強免疫力中國的益生菌類保健食品83從1997年至2004年一共做了28個產(chǎn)品，16個含雙歧桿菌、9個含乳桿菌。劑型包括粉劑、膠囊、片劑、口服液。大部分產(chǎn)品聲稱菌數(shù)可達108~1011cfu/g(ml)，經(jīng)檢測菌數(shù)可以達到108cfu/g(ml)，液體產(chǎn)品也可達到106cfu/g(ml)

。從1997年至2004年一共做了28個產(chǎn)品，16個含雙84常用的益生菌菌種（Berner&O’Donnel1998）常用的益生菌菌種85

菌種菌株嗜酸乳桿菌LactobacillusacidophilusLa1等保加利亞乳桿菌LactobacillusbulgaricusLb12乳乳桿菌LactobacilluslactisLa1植物乳桿菌Lactobacillusplatarum299v,LpO1鼠李糖乳桿菌LactobacillusrhamnosusGG,GR-1羅伊氏乳桿菌LactobacillusreuteriSD2112干酪乳桿菌LactobacilluscaseiShirota,744類干酪乳桿菌LactobacillusparacaseiCRL431發(fā)酵乳桿菌LactobacillusfermentumRC-IRC瑞士乳桿菌LactobacillushelvertiucsBO2菌種86菌種菌株青春雙歧桿菌-Bifidobacteriumadolescents長雙歧桿菌B.longumB536,SBT-2928短雙歧桿菌B.breveYakult兩雙歧桿菌B.bifidusBb-11乳雙歧桿菌B.lactisBb-02嬰兒雙歧桿菌B.infantisShirotaImmunitassB.EssensisDanone,(BioActivia)B.LaterosporusCRL431枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis-菌種87雙歧桿菌和乳桿菌的安全性問題認(rèn)為是安全的理由健康人體的腸道和泌尿-生殖道粘膜中數(shù)量相當(dāng)高極罕見與疾病有關(guān)雙歧桿菌和乳桿菌的安全性問題88認(rèn)為有安全性問題的理由除干酪乳桿菌（LactobacillusceseiShirota）和嗜酸乳桿菌（L.acidophilusNCFM）有幾百年的安全使用歷史外，大部分益生菌沒有安全使用歷史。認(rèn)為有安全性問題的理由89

2001年10月1日-10月4日FAO/WHO專家委員會在阿根廷科爾多瓦就評價食品中含活的益生菌有關(guān)健康及營養(yǎng)問題召開會議。會議認(rèn)為有必要建立評價食品用益生菌的系統(tǒng)方法指南，以確定其健康聲稱。

2001年10月1日-10月4日90

為建立益生菌的評價指南、推薦指標(biāo)和方法成立FAO/WHO聯(lián)合專家工作組規(guī)定了確定健康聲稱應(yīng)提供的資料目的是制定對益生菌的最低要求主要指食品用益生菌，排除治療用生物制劑和基因修飾的生物為建立益生菌的評價指南、推薦指標(biāo)和方法91

2002年4月30日-5月1日在加拿大安大略省倫敦市FAO/WHO聯(lián)合專家工作組起草了《食品中益生菌的評價指南

GuidelinesfortheEvaluationofProbioticinFood》2002年4月30日-5月1日在加拿大安大略省倫敦市92

1確定益生菌的屬/種/株用表型和基因分型方法進行株的鑒別益生菌的有益作用有株的特異性按國際菌種保藏法保存菌株

1確定益生菌的屬/種/株932功能學(xué)特征體外試驗胃酸耐受試驗、膽汁耐受性、粘膜粘附性和／或人上皮細(xì)胞粘附性對條件致病菌的抗菌活性降低致病菌表面粘附能力膽鹽水解酶活性動物試驗2功能學(xué)特征94益生菌的安全性問題

全身感染有毒代謝活性易感人群過度的免疫刺激基因轉(zhuǎn)移益生菌的安全性問題95

FAO/WHO專家工作組對益生菌進行安全性評價的建議

96抗菌素耐藥性類型的測定某些代謝活性（D-乳酸鹽的產(chǎn)生、膽鹽非共價鍵結(jié)合）的評價

抗菌素耐藥性類型的測定97

對人體副作用的評價售后消費者不良反應(yīng)的流行病學(xué)調(diào)查對人體副作用的評價98如待評價的菌株屬于已知對哺乳動物有毒性的產(chǎn)毒菌種，必須測定其產(chǎn)毒能力待評價的菌株屬于已知具有溶血性，必須測定其溶血活性

如待評價的菌株屬于已知對哺乳動物有毒性的產(chǎn)毒菌種，必須測定99我國益生菌產(chǎn)品安全性評價與質(zhì)量控制我國益生菌產(chǎn)品100益生菌作為一類生物活性制品，必須安全、有效、穩(wěn)定，益生菌類保健食品的生產(chǎn)加工有其自身的特殊性，如為了使終產(chǎn)品中存在一定數(shù)量的益生菌活菌體，產(chǎn)品不能進行消毒滅菌。因此加強其質(zhì)量管理確保產(chǎn)品質(zhì)量尤為重要。益生菌作為一類生物活性制品，101菌種安全性要求生物學(xué)、遺傳學(xué)、功效學(xué)特性明確和穩(wěn)定。菌種及其代謝產(chǎn)物必須無毒無害。來源及國內(nèi)外安全食用資料。安全性評價資料（包括毒力試驗）。菌種安全性要求102生產(chǎn)菌種的質(zhì)量控制建立種子庫一旦確定某一菌種作為生產(chǎn)用菌種，應(yīng)建立菌種庫以確保為每次生產(chǎn)提供充足的、性狀穩(wěn)定的菌種，以避免或減少菌種的污染及因菌種傳代過多而導(dǎo)致遺傳變異。一般需要建立三級菌種庫，即原代（原始）種子庫、主代（主）種子庫和生產(chǎn)（工作）種子庫。

生產(chǎn)菌種的質(zhì)量控制103原代種子庫—

指經(jīng)研究、篩選、鑒定后確定為食品用益生菌制品生產(chǎn)用菌種，經(jīng)擴大一代后冷凍干燥一定數(shù)量的單支菌種作為種子，2～8℃保存，一般定0代。主代種子庫—

原代種子經(jīng)擴大培養(yǎng)得到均勻的，冷凍干燥制成一定數(shù)量的單支菌種，作為制備生產(chǎn)種子庫的菌種，2～8℃保存。主代種子一般采用1～3代。原代種子庫—指經(jīng)研究、篩選、鑒定后104生產(chǎn)種子庫—

主代種子經(jīng)擴大培養(yǎng)得到的均勻培養(yǎng)物，冷凍干燥制成一定數(shù)量的單支菌種，2～8℃保存，或懸浮于特定培養(yǎng)液（保護液），分裝安培置–70℃以下保存。每生產(chǎn)一批產(chǎn)品用一只菌種，用于生產(chǎn)之前要進行部分項目的檢定，合格后方可使用，生產(chǎn)種子一般采用3～5代。生產(chǎn)種子庫—主代種子經(jīng)擴大培養(yǎng)得105《益生菌類保健食品審評規(guī)定（試行）》

第二條益生菌類保健食品系指能夠促進腸內(nèi)菌群生態(tài)平衡，對人體起有益作用的微生態(tài)產(chǎn)品。

《益生菌類保健食品審評106第三條益生菌菌種必須是人體正常菌群的成員，可利用其活菌、死菌及其代謝產(chǎn)物。益生菌類保健食品必須安全可靠，即食用安全，無不良反應(yīng)；生產(chǎn)用菌種的生物學(xué)、遺傳學(xué)、功效學(xué)特性明確和穩(wěn)定。第三條益生菌菌種必須是人體正常菌群的成員，可利用其活菌107

第四條可用于保健食品的益生菌菌種名單由國家食品藥品監(jiān)督管理局公布。第五條國家食品藥品監(jiān)督管理局對保健食品的益生菌菌種鑒定單位進行認(rèn)定或認(rèn)可，菌種鑒定單位的名單由國家食品藥品監(jiān)督管理局公布。益生菌類保健食品的菌種鑒定工作應(yīng)在國家食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)定或認(rèn)可的鑒定單位進行。第四條可用于保健食品的益生菌菌種108

第六條申請益生菌類保健食品，除按保健食品有關(guān)規(guī)定提交申報資料外，還應(yīng)提供以下資料：

1、產(chǎn)品配方及配方依據(jù)中應(yīng)包括確定的菌種屬名、種名及菌株號。菌種的屬名、種名應(yīng)有對應(yīng)的拉丁學(xué)名。舉例：長雙歧桿菌Bifidobacterium.longumB536

第六條申請益生菌類保健食品，除按1092、菌種的培養(yǎng)條件（培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度等）。3、菌種來源及國內(nèi)外安全食用資料4、國家食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)定或認(rèn)可的鑒定機構(gòu)出具的菌種鑒定報告。5、菌種的安全性評價資料（包括毒力試驗）。2、菌種的培養(yǎng)條件（培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度等）。1106、菌種的保藏方法7、對經(jīng)過馴化、誘變的菌種，應(yīng)提供馴化、誘變的方法及馴化劑、誘變劑等資料。8、以死菌和／或其代謝產(chǎn)物為主要功能因子的保健食品應(yīng)提供功能因子或特征成分的名稱和檢驗方法。9、生產(chǎn)企業(yè)的技術(shù)規(guī)范和技術(shù)保證。6、菌種的保藏方法111

10、企業(yè)生產(chǎn)條件符合《保健食品生產(chǎn)良好規(guī)范》的證明文件。申請注冊的保健食品，使用《可用于保健食品的益生菌菌種名單》之外的益生菌菌種的，還應(yīng)提供菌種具有功效作用的研究報告、相關(guān)文獻資料和菌種及其代謝產(chǎn)物不產(chǎn)生任何有毒有害作用的資料。由國家食品藥品監(jiān)督管理局組織相關(guān)專業(yè)的專家對菌種的食用安全性和功能依據(jù)進行評價后，在按保健食品的評審程序進行評審。10、企業(yè)生產(chǎn)條件符合《保健食品生產(chǎn)良好112第七條申請人夠買活菌種凍干粉直接生產(chǎn)保健食品，生產(chǎn)加工工藝只是混合、灌裝過程，本規(guī)定第六條第5項至第10項的資料可由菌種凍干粉原料供應(yīng)商提供復(fù)印件（加蓋原料供應(yīng)商公章）并提供購銷憑證。第七條申請人夠買活菌種凍干粉直接生產(chǎn)保健食品，生產(chǎn)113經(jīng)過長期保藏的菌種，由于種種原因常易發(fā)生變異、衰退或死亡。變異是生物基本特性之一，當(dāng)菌種處在新陳代謝水平最低的生活環(huán)境之中，生長繁殖受到外界抑制變?yōu)橥顟B(tài)，往往更容易發(fā)生變異。因此各類菌種在保藏期間必須定期檢查，采取措施防止衰退、變異或死亡，發(fā)現(xiàn)變異或衰退時能及時恢復(fù)。經(jīng)過長期保藏的菌種，由于種種原因常易發(fā)生變114第八條申請注冊的用于益生菌類保健食品生產(chǎn)的菌種應(yīng)滿足以下條件：第八條申請注冊的用于益生菌類保健食品生產(chǎn)的菌種應(yīng)滿足以1151、保健食品生產(chǎn)用菌種應(yīng)采用種子批系統(tǒng)。原始種子批應(yīng)驗明其記錄、歷史、來源和生物學(xué)特性。從原始種子批傳代、擴增后保存的為主種子批。從主種子傳代、擴增后保存的為工作種子批。工作種子批的生物學(xué)性狀應(yīng)與原始種子批一致，每批主種子批和工作種子批均應(yīng)按規(guī)程要求保管、檢定和使用。在適宜的培養(yǎng)基上主種子傳代不超過10代，工作種子傳代不超過5代。1、保健食品生產(chǎn)用菌種應(yīng)采用種子批系統(tǒng)。原始種子批應(yīng)驗明其記1162、試制單位應(yīng)有專門的部門和人員管理生產(chǎn)菌種，建立菌種檔案資料，內(nèi)容包括菌種的來源、歷史、篩選、檢定、保存方法、數(shù)量、開啟使用、等完整的記錄。每年向所在地省級食品藥品監(jiān)督管理部門書面匯報管理情況。2、試制單位應(yīng)有專門的部門和人員管理生產(chǎn)菌種，建立菌種檔案資1173、菌種及其代謝產(chǎn)物必須無毒無害，不得在生產(chǎn)用培養(yǎng)基內(nèi)加入有毒有害物質(zhì)和致敏性物質(zhì)。4、從活菌類益生菌保健食品中應(yīng)能分離出與報批和標(biāo)識菌種一致的活菌。3、菌種及其代謝產(chǎn)物必須無毒無害，不得在生產(chǎn)用培養(yǎng)基內(nèi)加入有118第