中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則nn課件

藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究及分析方法驗(yàn)證等有關(guān)問(wèn)題探討

四川省食品藥品檢驗(yàn)所伍丕娥2005年11月30日藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究及分析方法驗(yàn)證等有關(guān)問(wèn)題探討

四川省食品藥1主要內(nèi)容

一、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及標(biāo)準(zhǔn)提高行動(dòng)計(jì)劃二、藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則三、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證四、微生物限度檢查的方法驗(yàn)證五、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中的常見(jiàn)問(wèn)題

主要內(nèi)容2一、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及標(biāo)準(zhǔn)

提高行動(dòng)計(jì)劃1、我國(guó)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的沿革及概況●公元659年（唐，新修本草）●公元1151年（宋，太平惠民和劑局方）●公元1930年（中華藥典、化學(xué)藥）●公元1950年至今共出版8版中國(guó)藥典：53、63（分為一、二部）、77、85、90、95、2000、2005（分為一、二、三部）●公元1950年至今：局（部）頒標(biāo)準(zhǔn)數(shù)十冊(cè)●公元1950年至2002年：省級(jí)地方標(biāo)準(zhǔn)一、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及標(biāo)準(zhǔn)

提高行動(dòng)計(jì)劃1、我國(guó)藥品質(zhì)32、國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)制定的基本原則●科學(xué)、實(shí)用、規(guī)范原則●質(zhì)量可控性原則●標(biāo)準(zhǔn)先進(jìn)性原則2、國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)制定的基本原則●科學(xué)、實(shí)用、規(guī)范原則43、標(biāo)準(zhǔn)提高行動(dòng)計(jì)劃

背景：2002年12月1日，我國(guó)已完成全部上市藥品的國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)的制定工作，取消了地方標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)了《藥品管理法》所規(guī)定的藥品必須符合國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)這一目標(biāo)。然而，改革開(kāi)放二十多年來(lái)，隨著醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)和藥品檢測(cè)技術(shù)水平的發(fā)展，以及加入WTO所面臨的新形勢(shì)，我國(guó)早期制定的國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)已嚴(yán)重滯后于藥品生產(chǎn)現(xiàn)狀和藥品檢測(cè)技術(shù)水平的發(fā)展，一些藥品標(biāo)準(zhǔn)已不足以控制藥品的質(zhì)量，難以保證人民用藥安全有效，亦給3、標(biāo)準(zhǔn)提高行動(dòng)計(jì)劃背景：2002年125一些假冒偽劣藥品擾亂市場(chǎng)、危害百姓生命健康以可乘之機(jī)。因此2004年2月，根據(jù)國(guó)務(wù)院“食品藥品放心工程”的總體要求，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局頒布了國(guó)食藥監(jiān)注[2004]35號(hào)文，啟動(dòng)了提高國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)行動(dòng)計(jì)劃。計(jì)劃用3～5年時(shí)間，實(shí)現(xiàn)國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)技術(shù)達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平。一些假冒偽劣藥品擾亂市場(chǎng)、危害百姓生命健康以可乘之機(jī)。6標(biāo)準(zhǔn)提高行動(dòng)計(jì)劃的總體目標(biāo)(1)在5年內(nèi)(2004年～2008年)分期、分批地完成中藥1～20冊(cè)的4000余個(gè)品種，化學(xué)藥品(9冊(cè)及歷版藥典遺留品種)500個(gè)品種；

(2)早期新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)（99、2000年前轉(zhuǎn)正）約300種品種的標(biāo)準(zhǔn)提高工作；

(3)常用藥用輔料約50種的標(biāo)準(zhǔn)制定工作；

(4)完成《中國(guó)藥典》(2005年版)附錄檢測(cè)方法的科研和提高工作；實(shí)現(xiàn)國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)量可控性及與國(guó)際先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)的接軌。標(biāo)準(zhǔn)提高行動(dòng)計(jì)劃的總體目標(biāo)(1)在5年內(nèi)(20047二、藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則

為促進(jìn)我國(guó)藥品的研究開(kāi)發(fā)，指導(dǎo)藥物研究單位用科學(xué)規(guī)范的方法開(kāi)展藥品研究工作，國(guó)家局自2003年啟動(dòng)了藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則的起草和修訂工作。指導(dǎo)原則的修訂是以《中華人民共和國(guó)藥品管理法》和《藥品注冊(cè)管理辦法》為依據(jù)，以科學(xué)性、前瞻性、可操作性為指導(dǎo)思想，充分借鑒了ICH等技術(shù)指導(dǎo)原則。

二、藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則

8●今年3月18日國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局（國(guó)食藥監(jiān)注[2005]106號(hào)文）發(fā)布了16個(gè)有關(guān)化學(xué)藥物研究的技術(shù)指導(dǎo)原則，其中涉及藥學(xué)研究的有8個(gè)，涉及藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究與分析方法驗(yàn)證有2個(gè)：化學(xué)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的規(guī)范化過(guò)程技術(shù)指導(dǎo)原則化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法驗(yàn)證技術(shù)指導(dǎo)原則

●今年3月18日國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局（國(guó)9●今年7月1日國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局（國(guó)食藥監(jiān)注[2005]331號(hào)文）發(fā)布了12個(gè)有關(guān)中藥、天然藥物研究的技術(shù)指導(dǎo)原則，其中涉及藥學(xué)研究的有4個(gè)，目前暫無(wú)涉及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范研究和分析方法驗(yàn)證技術(shù)的指導(dǎo)原則

●今年7月1日國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局（國(guó)食10三、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證

方法學(xué)研究包含方法的選擇及驗(yàn)證（一）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證的技術(shù)指導(dǎo)文件有：

1、化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法驗(yàn)證技術(shù)指導(dǎo)原則（編號(hào)[H]GPH5-1)

三、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證112、中國(guó)藥典2005年版二部附錄《藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則》3、中國(guó)藥典2005年版一部附錄《中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則》4、1999年11月12日國(guó)家藥品監(jiān)督管理局（國(guó)藥管注[1999]363號(hào)文）發(fā)布了《中藥新藥研究的技術(shù)要求》

2、中國(guó)藥典2005年版二部附錄《藥品質(zhì)125、《化學(xué)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的規(guī)范化過(guò)程技術(shù)指導(dǎo)原則》要求質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中建立的分析方法必須經(jīng)過(guò)驗(yàn)證

6、藥品注冊(cè)的國(guó)際技術(shù)要求（ICH)Q2a和Q2b

（1、2、3、5、6中要求驗(yàn)證的項(xiàng)目和內(nèi)容基本一致）5、《化學(xué)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的規(guī)范化過(guò)程13

（二）關(guān)于ICH的簡(jiǎn)介：

?人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)（InternationalConferenceonHamonisationTechnicalRequirementsforRejistrationofPharmaceuticalsforHumanUse)（二）關(guān)于ICH的簡(jiǎn)介：14?ICH是1990年由美國(guó)、日本、歐盟三方的政府藥品管理部門和制藥行業(yè)共同發(fā)起，旨在協(xié)調(diào)各國(guó)藥品注冊(cè)的技術(shù)要求，制定了一系列有關(guān)藥品質(zhì)量（Q)、療效(E)、安全性(s)的技術(shù)指導(dǎo)原則,迄今已舉行了六次會(huì)議，共制定了60多個(gè)文件。

?ICH目前共有17個(gè)成員國(guó)，我國(guó)不是，但是WHO要求各非成員國(guó)積極推廣應(yīng)用ICH。

?ICH是1990年由美國(guó)、日本、歐盟15?我國(guó)目前藥品注冊(cè)的技術(shù)要求自成體系，國(guó)家局要求將ICH作為主要借鑒和參考依據(jù)。

?ICH中的Q2a和Q2b是分析方法驗(yàn)證的專門章節(jié)。?我國(guó)目前藥品注冊(cè)的技術(shù)要求自成體系，國(guó)16（三）現(xiàn)將中藥新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的技術(shù)要求（1999年11月執(zhí)行）與現(xiàn)行的分析方法驗(yàn)證的內(nèi)容作一比較（見(jiàn)下表）（三）現(xiàn)將中藥新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的技術(shù)要求（1999年11月執(zhí)1799年中藥標(biāo)準(zhǔn)研究“技術(shù)要求”與現(xiàn)行的分析方法驗(yàn)證項(xiàng)目比較表

標(biāo)準(zhǔn)研究技術(shù)要求（99年11月）現(xiàn)行的方法驗(yàn)證要求回收率準(zhǔn)確度精密度重復(fù)性精密度重復(fù)性（同一個(gè)人在較短的間隔時(shí)間內(nèi)）中間精密度（不同人、不同設(shè)備、不同時(shí)間）重現(xiàn)性（不同實(shí)驗(yàn)室、不同人）空白干擾試驗(yàn)（專屬性）專屬性檢測(cè)限定量限線性和線性范圍線性耐用性范圍穩(wěn)定性99年中藥標(biāo)準(zhǔn)研究“技術(shù)要求”與現(xiàn)行的分析方法驗(yàn)證項(xiàng)目比181、現(xiàn)行的分析方法“驗(yàn)證指導(dǎo)原則”，各驗(yàn)證內(nèi)容更為科學(xué)，方法更為細(xì)化，可操作性更強(qiáng)，但仍有難于理解和掌握之處：（1）關(guān)于“范圍”中藥怎樣考察，有待探討（2）中藥樣品的前處理與檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度、精密度直接相關(guān)，“耐用性”能否完全評(píng)價(jià)樣品前處理的合理性？應(yīng)怎樣與各項(xiàng)驗(yàn)證有機(jī)結(jié)合，有待探討

2、應(yīng)根據(jù)不同檢測(cè)項(xiàng)目的具體情況，有針對(duì)性的進(jìn)行方法驗(yàn)證（見(jiàn)下表）1、現(xiàn)行的分析方法“驗(yàn)證指導(dǎo)原則”，各驗(yàn)證19

檢驗(yàn)項(xiàng)目和驗(yàn)證內(nèi)容

項(xiàng)目?jī)?nèi)容鑒別限量檢查含量測(cè)定及溶出度測(cè)定定量限度準(zhǔn)確度－＋－＋重復(fù)性－＋－＋中間精密度－＋①－＋①重現(xiàn)性②＋＋＋＋專屬性③＋＋＋＋檢測(cè)限－－＋－定量限－＋－－線性－＋－＋范圍－＋－＋耐用性＋＋＋＋

檢驗(yàn)項(xiàng)目和驗(yàn)證內(nèi)容

項(xiàng)目鑒別20▉準(zhǔn)確度（真實(shí)度）：準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般用回收率（%）表示，準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍測(cè)試。用于定量測(cè)定的分析方法均需做準(zhǔn)確度驗(yàn)證。▉準(zhǔn)確度（真實(shí)度）：準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)211、準(zhǔn)確度的考察方法中藥含量分析一般用已知純度的對(duì)照品做加樣回收測(cè)定（化學(xué)藥品作直接回收實(shí)驗(yàn)），即于已知被測(cè)成分含量的供試品（化學(xué)藥品為空白樣品）中精密加入一定量的已知純度的被測(cè)成分對(duì)照品，依法測(cè)定。用實(shí)測(cè)值與供試品中含有量之差，除以加入對(duì)照品量計(jì)算回收率。1、準(zhǔn)確度的考察方法22

在加樣回收實(shí)驗(yàn)中須注意對(duì)照品的加入量與供試品中被測(cè)成分含有量之和必須在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍之內(nèi)；加入的對(duì)照品的量要適當(dāng)，過(guò)小則引起較大的相對(duì)誤差，過(guò)大則干擾成分相對(duì)減少，真實(shí)性差。加入對(duì)照品的操作過(guò)程必須有可操作性。在加樣回收實(shí)驗(yàn)中須注意對(duì)照品的加入量與供試品23

式中A為供試品所含被測(cè)成分量（化學(xué)藥品A值為零）；

B為加入對(duì)照品量；

C為實(shí)測(cè)值。

回收率%=C-A×100%B式中A為供試品所含被測(cè)成分量（化學(xué)藥品A值為零）；242、數(shù)據(jù)要求在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度的供試品，用6個(gè)（原至少5個(gè)）測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)；或設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度各分別制備3份（原兩份）供試品溶液進(jìn)行測(cè)定，用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，一般中間濃度加入量與所取供試品含量之比控制在1：1左右（化學(xué)藥品為100%濃度）。應(yīng)報(bào)告供試品取樣量、供試品中含有量（化學(xué)藥品無(wú)此項(xiàng)）、對(duì)照品加入量、測(cè)定結(jié)果和回收率（%）計(jì)算值，以及回收率（%）的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD%）。2、數(shù)據(jù)要求25▉精密度：指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。精密度包括：重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性。用于定量測(cè)定的分析方法均應(yīng)考察方法的精密度。▉精密度：指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻供試品261、重復(fù)性（間歇測(cè)量精密度）在相同的操作條件下，較短的時(shí)間間隔精密度。（1）用100%濃度水平至少測(cè)定6次（5次）進(jìn)行評(píng)價(jià)，（2）在規(guī)定的范圍內(nèi)，設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度水平，每個(gè)濃度制備3份供試液，每份測(cè)定3次，共9個(gè)結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2、中間精密度為考察隨即變動(dòng)因素對(duì)精密度的影響，應(yīng)進(jìn)行中間精密度試驗(yàn)。變動(dòng)因素為不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備等。

(ICH認(rèn)為中間精密度沒(méi)有必要逐個(gè)考察每個(gè)因素，鼓勵(lì)使用較為簡(jiǎn)化的矩陣試驗(yàn)設(shè)計(jì))1、重復(fù)性（間歇測(cè)量精密度）在相同的操作條件下，較273、當(dāng)分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時(shí)，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。例如，建立藥典分析方法時(shí)通過(guò)不同實(shí)驗(yàn)室的復(fù)核檢驗(yàn)得出重現(xiàn)性結(jié)果。

4、數(shù)據(jù)要求重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性均應(yīng)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和可信限。目前，分析方法研究中一般只作了“重復(fù)性”，藥檢所的技術(shù)復(fù)核相當(dāng)于是“重現(xiàn)性”考察，經(jīng)“重現(xiàn)性”驗(yàn)證的分析方法，可不考察“中間精密度”。3、當(dāng)分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時(shí)，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。28▉專屬性：專屬性系指在其他成分可能存在下，采用的方法能正確測(cè)定出被測(cè)成分的特性。鑒別實(shí)驗(yàn)、限量檢查、含量測(cè)定等方法均應(yīng)考察其專屬性。▉專屬性：專屬性系指在其他成分可能存在下，291、鑒別實(shí)驗(yàn)應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)（如輔料）或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分。不含被測(cè)成分的供試品（空白樣品）以及結(jié)構(gòu)相似或組分中的有關(guān)化合物，均不得干擾測(cè)定。顯微鑒別、色譜及光譜鑒別等應(yīng)附相應(yīng)的代表性圖象或圖譜。1、鑒別實(shí)驗(yàn)302、含量測(cè)定和限量檢查以不含被測(cè)成分的供試品（除去含待測(cè)成分藥材或不含待測(cè)成分的模擬處方）實(shí)驗(yàn)說(shuō)明方法的專屬性。色譜法、光譜法等應(yīng)附代表性圖譜，并標(biāo)明相關(guān)成分在圖中的位置，色譜法中的分離度應(yīng)符合要求。必要時(shí)可采用二極管陣列檢測(cè)和質(zhì)譜檢測(cè)，進(jìn)行峰純度檢查。2、含量測(cè)定和限量檢查31▉檢測(cè)限：指供試品中被測(cè)物能被檢出的最低量。該指標(biāo)的意義在于考察方法是否具備靈敏的檢測(cè)能力，特別是微量有害雜質(zhì)的檢查應(yīng)證明其方法具有足夠低的檢測(cè)限，以保證檢出需控制的雜質(zhì)。如化學(xué)原料藥中的有機(jī)溶劑殘留量、中藥中馬兜鈴酸的檢查等，均應(yīng)對(duì)檢測(cè)限進(jìn)行考察。確定檢測(cè)限有兩種方法：（1）、直觀法用一系列已知濃度的供試品進(jìn)行分析，試驗(yàn)出能被可靠檢出的最低濃度或量。儀器或非儀器方法均可使用。▉檢測(cè)限：指供試品中被測(cè)物能被檢出的最低量。32

（2）、信噪比法僅適用于能顯示基線噪音的分析方法，即把已知低濃度供試品測(cè)出的信號(hào)與空白樣品測(cè)出的信號(hào)進(jìn)行比較，算出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。一般以信噪比為3：1或2：1時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測(cè)限。（3）、數(shù)據(jù)要求應(yīng)附測(cè)試圖譜，說(shuō)明測(cè)試過(guò)程和檢測(cè)限結(jié)果。

（2）、信噪比法僅適用于能顯示基33▉定量限：定量限系指供試品中被測(cè)成分能被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度。用于限量檢查的定量測(cè)定的分析方法（如以5-羥甲基糠醛為對(duì)照品測(cè)定葡糖糖注射液中5-羥甲基糠醛的量、以馬兜鈴酸A為對(duì)照測(cè)定含量等）應(yīng)確定定量限。常用信噪比法確定定量限。一般以信噪比為10：1時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量進(jìn)行確定。▉定量限：定量限系指供試品中被測(cè)成分34▉線性：線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與供試品中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。▉線性：線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試35

應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測(cè)定線性關(guān)系?？捎靡粌?chǔ)備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列供試品的方法進(jìn)行測(cè)定，至少制備5個(gè)濃度的供試品。以測(cè)得的響應(yīng)信號(hào)作為被測(cè)物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。必要時(shí)，響應(yīng)信號(hào)可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進(jìn)行線性回歸計(jì)算（如采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器需取響應(yīng)值的對(duì)數(shù)）。應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測(cè)定線性關(guān)系。可用一儲(chǔ)36

數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。▉范圍：范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。

數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性37

范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果及要求確定。一般來(lái)說(shuō)，線性范圍窄、精密度要求高，范圍就相應(yīng)較窄。對(duì)于有毒的、具特殊功效或藥理作用的成分，其范圍應(yīng)大于被限定含量的區(qū)間。溶出度或釋放度中的溶出量測(cè)定，范圍應(yīng)為限度的±20%。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確38

范圍不是線性關(guān)系考察的濃度范圍，而是測(cè)定方法應(yīng)能達(dá)到的準(zhǔn)確測(cè)定的范圍。范圍是規(guī)定值，對(duì)于化學(xué)藥品，是根據(jù)測(cè)定項(xiàng)目和精密度要求規(guī)定的，如制劑規(guī)定含量為標(biāo)示量的90%~110%，即方法的范圍考察規(guī)定應(yīng)為80%~120%。對(duì)于中藥分析方法，范圍的確定較為困難，但可從以下幾方面考慮：范圍不是線性關(guān)系考察的濃度范圍，而是測(cè)定391、含量限度有高、低限時(shí)，可參照化學(xué)藥品；

2、中藥往往只規(guī)定下限，限度值為1~10%時(shí)，考察范圍建議為低限-30%，高限50%；限度值小于1%時(shí)，考察范圍建議為低限-50%，高限在條件允許的情況下盡量做得更寬。1、含量限度有高、低限時(shí)，可參照化學(xué)藥品；40▉耐用性：耐用性系指在測(cè)定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度，為使方法用于常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)。開(kāi)始研究分析方法時(shí)，就應(yīng)考慮其耐用性。如果測(cè)試條件要求苛刻，則應(yīng)在方法中寫(xiě)明。▉耐用性：耐用性系指在測(cè)定條件有小的變41

典型的變動(dòng)因素有：被測(cè)溶液的穩(wěn)定性，樣品提取次數(shù)（中藥的提取次數(shù)考察不屬于耐用性）、時(shí)間等。液相色譜法中典型的變動(dòng)因素有：流動(dòng)相的組成比例或pH值，不同廠牌或不同批號(hào)的同類型色譜柱，柱溫，流速及檢測(cè)波長(zhǎng)等。氣相色譜法變動(dòng)因素有：不同廠牌或批號(hào)的色譜柱、固定相，不同類型的擔(dān)體，柱溫，進(jìn)樣口和檢測(cè)器溫度等。薄層色譜的變動(dòng)因素有：不同廠牌的薄層板，點(diǎn)樣方式及薄層展開(kāi)時(shí)溫度及相對(duì)濕度的變化等。典型的變動(dòng)因素有：被測(cè)溶液的穩(wěn)定性，樣品42

經(jīng)實(shí)驗(yàn)，應(yīng)說(shuō)明小的變動(dòng)能否通過(guò)設(shè)計(jì)的系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)，以確保方法有效。▉穩(wěn)定性：為“中藥新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的技術(shù)要求”中對(duì)供試品溶液和對(duì)照品溶液的要求，可納入新版藥典分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則的“耐用性”中。經(jīng)實(shí)驗(yàn)，應(yīng)說(shuō)明小的變動(dòng)能否通過(guò)設(shè)計(jì)的系統(tǒng)43

四、微生物限度或無(wú)菌檢查的方法驗(yàn)證

背景：（1）今年7月1日正式執(zhí)行的中國(guó)藥典2005年版附錄規(guī)定：建立微生物限度或無(wú)菌檢查方法時(shí)必須進(jìn)行方法驗(yàn)證。（2）國(guó)藥典發(fā)（2005）98號(hào)文（10月11日）強(qiáng)調(diào)了驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的重要性和必要性，同時(shí)作出以下規(guī)定：進(jìn)口檢驗(yàn)—必須提供方法驗(yàn)證資料或詳細(xì)的SOP資料，經(jīng)審核后在標(biāo)準(zhǔn)正文中要明確檢查方法的關(guān)鍵操作點(diǎn)注冊(cè)檢驗(yàn)—必須提供方法驗(yàn)證資料，并在標(biāo)準(zhǔn)正文中寫(xiě)明檢查方法的關(guān)鍵操作點(diǎn)，否則，審核意見(jiàn)中要明確指出“方法學(xué)未經(jīng)驗(yàn)證，無(wú)法檢驗(yàn)”，并建議重新建立檢查方法。監(jiān)督檢驗(yàn)—也應(yīng)請(qǐng)企業(yè)提供方法驗(yàn)證資料，未經(jīng)驗(yàn)證的品種，決不能給出“符合2005年版《中國(guó)藥典》的規(guī)定”的結(jié)論。

四、微生物限度或無(wú)菌檢查的方法驗(yàn)證

背景：（1）今年744

（3）2005年11月14日中國(guó)藥品生物制品檢定所對(duì)各省市藥檢所發(fā)出《關(guān)于征集2005年版中國(guó)藥典“微生物限度檢查法”和“無(wú)菌檢查法”方法驗(yàn)證結(jié)果的通知，要求將完成驗(yàn)證的品種及所收集的企業(yè)完成的驗(yàn)證品種按要求于05年11月30日以前以電子文檔的形式寄予中檢所抗生素室，將在抗生素工作網(wǎng)站組建“藥品無(wú)菌檢查和微生物限度檢查方法驗(yàn)證品種信息交流平臺(tái)”，目的為減少重復(fù)工作，實(shí)現(xiàn)資源共享，加快驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程。（3）2005年11月14日中國(guó)藥品生物制品檢定所45有以下建議供參考：

（1）中國(guó)藥典2005年版二部附錄通則項(xiàng)下未規(guī)定作微生物限度檢查的化學(xué)藥品的四種普通口服固體制劑即丸劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑不要求作微生物限度檢查，如果發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，可進(jìn)行檢查，不符合規(guī)定發(fā)不合格報(bào)告。有以下建議供參考：（1）中國(guó)藥典2005年版二46

（2）除以上四種劑型以外的所有劑型，均應(yīng)要求進(jìn)行微生物限度檢查，并要求通過(guò)方法驗(yàn)證確立合適的微生物限度檢查法（應(yīng)將確定的方法在標(biāo)準(zhǔn)正文中寫(xiě)明），若申報(bào)單位的申報(bào)資料中缺驗(yàn)證資料，藥檢所按98號(hào)文的規(guī)定辦。

（2）除以上四種劑型以外的所有劑型，均應(yīng)要求進(jìn)行微生47

（3）許多需進(jìn)行微生物限度檢查和無(wú)菌檢查的上市老品種，企業(yè)應(yīng)持積極主動(dòng)的態(tài)度，有計(jì)劃地分期分批完成驗(yàn)證工作，若是多家生產(chǎn)的老品種企業(yè)可通過(guò)共同協(xié)商，合理分工，實(shí)行資源共享，在較短時(shí)間內(nèi)完成驗(yàn)證工作。中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則nn課件48

（4）目前注冊(cè)檢驗(yàn)申報(bào)資料中的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)有造假現(xiàn)象，申報(bào)單位應(yīng)認(rèn)真對(duì)待，嚴(yán)格按藥典的要求進(jìn)行驗(yàn)證。造假在經(jīng)藥檢所復(fù)核檢驗(yàn)，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)，藥檢所會(huì)提出“方法驗(yàn)證不符合要求”的意見(jiàn)。是否有抑菌作用，一可通過(guò)處方分析，二可通過(guò)檢驗(yàn)結(jié)果判定。

中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則nn課件49

五、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中的常見(jiàn)問(wèn)題

近年來(lái)，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，高新分析技術(shù)的日益普及，年輕人才的飛速成長(zhǎng)，我省新藥（含仿制藥）研究整體水平普遍提高，但由于未有效把握“科學(xué)、合理、規(guī)范”的標(biāo)準(zhǔn)研究的基本原則。出現(xiàn)一些問(wèn)題值得我們思考并加以重視。針對(duì)一些在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中常見(jiàn)的共性問(wèn)題進(jìn)行以下探討。

五、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中的常見(jiàn)問(wèn)題

近年來(lái)，50（一）、中藥的常見(jiàn)問(wèn)題1、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制內(nèi)容不全或定性與定量目標(biāo)成分重復(fù)控制，致使標(biāo)準(zhǔn)缺乏完整的可控性，非常典型的例子為金剛藤系列制劑，斷血流系列制劑等，標(biāo)準(zhǔn)中僅收載同時(shí)以菝葜皂苷元為對(duì)照品進(jìn)行薄層鑒別和高效夜相色譜法測(cè)定含量，檢驗(yàn)方法看似有專屬性，方法驗(yàn)證也作得很完整，但標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容覆蓋不全，可控性較差，且還提供了絕好的造假機(jī)會(huì)。趕黃草等單味藥制劑均有類似情況。正確的設(shè)計(jì)應(yīng)怎樣做？（一）、中藥的常見(jiàn)問(wèn)題1、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制內(nèi)容512、關(guān)注05版藥典將部分藥材按不同基源作了分別收載的情況，如五味子南五味子；粉萆薢、綿萆薢；寒水石、北寒水石；大青葉、蓼大青葉；黃柏、關(guān)黃柏；金銀花山銀花；葛根粉葛；土木香藏木香；山楂、南山楂；敗醬草、北敗醬草；劉寄奴、北劉寄奴；板藍(lán)根、南板藍(lán)根；牛膝、懷牛膝；金錢草、廣金錢草；山豆根、北豆根。

8號(hào)資料與申報(bào)標(biāo)準(zhǔn)有矛盾，如葛根。2、關(guān)注05版藥典將部分藥材按不同基源作523、關(guān)注國(guó)家局有關(guān)牛黃與人工牛黃的替代、麝香與人工麝香的替代的有關(guān)規(guī)定，在處方中應(yīng)明確表示。

4、關(guān)注國(guó)家局關(guān)于含馬兜鈴酸藥材的有關(guān)規(guī)定，該替換的必須替換。

5、地方標(biāo)準(zhǔn)收載的藥材與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)同名必須使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，如黃芪、柴胡等。

3、關(guān)注國(guó)家局有關(guān)牛黃與人工牛黃的替代、麝香536、改變劑型的新藥或仿制藥中的提取物不能等同于單一化學(xué)成分，如某中成藥用黃芩提取物（以黃芩苷計(jì)）投料，此處的“以黃芩苷計(jì)”在原標(biāo)準(zhǔn)中，用的是紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定黃芩苷的含量，而申報(bào)單位所附的標(biāo)準(zhǔn)為采用高效液相色譜法測(cè)定黃芩苷含量，這兩種方法提供的測(cè)定信息是有差異的。6、改變劑型的新藥或仿制藥中的提取物不能等同于547、樣品的前處理設(shè)計(jì)不盡合理，特別復(fù)雜樣品的前處理申報(bào)單位往往設(shè)計(jì)不合理。操作也不具可操作性。一個(gè)科學(xué)合理的復(fù)雜樣品的前處理方法需設(shè)計(jì)者具有扎實(shí)的理論基礎(chǔ)知識(shí)和豐富的工作經(jīng)驗(yàn)，應(yīng)在盡可能排除雜質(zhì)的干擾同時(shí)，確保待測(cè)成分在每一部操作環(huán)節(jié)中均不能丟失，而每一個(gè)操作細(xì)節(jié)均應(yīng)有可操作性，要注意整體的合理適用。7、樣品的前處理設(shè)計(jì)不盡合理，特別復(fù)雜樣558、由于中藥的特殊情況，含量測(cè)定往往只規(guī)定下限，導(dǎo)致個(gè)別研究者錯(cuò)誤地將中藥的含量測(cè)定看作是一種限度檢查，在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)上缺乏“量”的意識(shí)，對(duì)照品的取用量小于10mg是其通病，所制定的操作步驟極為粗放，完全無(wú)微量分析的概念。8、由于中藥的特殊情況，含量測(cè)定往往只規(guī)定569、含量測(cè)定選擇的對(duì)象應(yīng)首先為有效成分，且此成分應(yīng)具有專屬性，如山茱萸應(yīng)測(cè)定馬錢苷、丹參除測(cè)定丹參同酮ⅡA還應(yīng)測(cè)定丹參酚酸B、黃連或黃柏若選擇鹽酸小檗堿為測(cè)定對(duì)象，薄層色譜必須以對(duì)照藥材為對(duì)照，以使標(biāo)準(zhǔn)整體可控。

9、含量測(cè)定選擇的對(duì)象應(yīng)首先為有效成分，且5710、若中藥的有效成分不明，應(yīng)對(duì)所采用的指標(biāo)成分作初步的論證，即選擇該成分的意義何在等等。

11、同一色譜條件下若能同時(shí)測(cè)定多個(gè)成分，應(yīng)盡可能多測(cè)，如大黃、人參等，若有干擾應(yīng)提供排除干擾但仍不成功的研究資料。

10、若中藥的有效成分不明，應(yīng)對(duì)所采用的指5812、關(guān)于大類化學(xué)成分（如總黃酮、總皂苷、總氨基酸等）的含量測(cè)定存在的有關(guān)問(wèn)題

（1）一般來(lái)說(shuō)，大類化學(xué)成分（如總黃酮、總皂苷等）的含量測(cè)定不具專屬性，但如果薄層鑒別使用的是對(duì)照藥材，所建立的定量方法經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，可以認(rèn)為標(biāo)準(zhǔn)基本可控，無(wú)必要再采用高效液相色譜法對(duì)單一化學(xué)成分進(jìn)行含量測(cè)定（同時(shí)采用“總”和“單”當(dāng)然提倡，但應(yīng)該考慮其必要性）。

12、關(guān)于大類化學(xué)成分（如總黃酮、總皂苷、總氨基59

（2）在諸多的藥品注冊(cè)申報(bào)標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)常可見(jiàn)，總的大類化學(xué)成分含量高，而單一組分含量低，如果為黃酮類成分，單一化學(xué)成分含量測(cè)定的色譜圖僅呈現(xiàn)較為單一的色譜峰，說(shuō)明為“大類化學(xué)成分含量高”作出貢獻(xiàn)的還有其他類成分，但申報(bào)資料所附的空白樣品圖譜顯示，空白樣品無(wú)干擾，這樣的研究資料水分太重，應(yīng)加強(qiáng)樣品的前處理，有效排除干擾，最大限度地富集待測(cè)成分。（3）樣品的光譜圖與對(duì)照品無(wú)相似性，最大吸收波長(zhǎng)（或波長(zhǎng)范圍）相差2nm以上，除考慮前處理是否合理外，有時(shí)還應(yīng)考慮所選用的對(duì)照品是否合適？（2）在諸多的藥品注冊(cè)申報(bào)標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)?？梢?jiàn)，總的大60

（4）個(gè)別情況下，總的大類成分的定量測(cè)定比單一成分的定量測(cè)定更具專屬性，如有一以某藥材為原料生產(chǎn)的單味制劑，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)同時(shí)收有總的大類成分的含量測(cè)定和兩個(gè)單一化學(xué)成分的含量測(cè)定，如果投料的藥材中混有與該藥材同科同屬但不同種的藥材，兩種單一化學(xué)成分的含量測(cè)定符合規(guī)定，但采用紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定總的大類成分時(shí)，對(duì)照品與樣品的最大吸收波長(zhǎng)相差非常大，光譜圖的相似度也較差，在此情況下，總的大類成分的含量測(cè)定是不可替代的。（4）個(gè)別情況下，總的大類成分的定量測(cè)定比單6113、多糖的含量測(cè)定方法普遍無(wú)專屬性，有以下建議加以彌補(bǔ)

（1）加強(qiáng)薄層色譜研究，設(shè)置相應(yīng)特征糖對(duì)照品，將經(jīng)水解和未水解的樣品點(diǎn)于同一張板上；（2）多糖的分子量及其分布檢測(cè)能較大程度地反映專屬性的信息，應(yīng)對(duì)其研究，并納入標(biāo)準(zhǔn)正文；（3）有條件的情況下，可采取HPCE測(cè)定法。

13、多糖的含量測(cè)定方法普遍無(wú)專屬性，有以下建議加6214、應(yīng)提倡大量使用對(duì)照藥材及對(duì)照提取物作為薄層鑒別的對(duì)照物質(zhì)。因?yàn)槠湫畔⒘扛鼮樨S富，使用成本也較低。但需注意：僅用“與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)”進(jìn)行描述，缺乏完整性與嚴(yán)謹(jǐn)性，應(yīng)描述個(gè)數(shù)或描述為“主斑點(diǎn)”。14、應(yīng)提倡大量使用對(duì)照藥材及對(duì)照提取物作為6315、薄層鑒別所用的另一展開(kāi)系統(tǒng)驗(yàn)證與前面講的方法“驗(yàn)證”的含義完全不同，采用另一展開(kāi)系統(tǒng)，實(shí)際上屬于方法選擇，而且有時(shí)還不止選擇一個(gè)展開(kāi)系統(tǒng)。薄層鑒別的方法驗(yàn)證應(yīng)對(duì)選定的色譜條件，進(jìn)行驗(yàn)證。

15、薄層鑒別所用的另一展開(kāi)系統(tǒng)驗(yàn)證與前面講的6416、在雜質(zhì)控制方面，與國(guó)外藥典相比我們存在理念上的差異，如英國(guó)藥典收載的大黃，含量測(cè)定采用紫外-可見(jiàn)分光光度法（以大黃酸作對(duì)照）測(cè)定總蒽醌的含量，但對(duì)酸不溶性灰份的控制非常嚴(yán)格，我國(guó)目前上市的含原藥粉的中藥制劑極少見(jiàn)對(duì)酸不溶性灰份進(jìn)行控制，這是極為不妥的！有害雜質(zhì)（如農(nóng)殘、有害金屬、生物毒素等）的控制更是空白！16、在雜質(zhì)控制方面，與國(guó)外藥典相比我們存在理6517、采用高效液相色譜法測(cè)定含量時(shí)，不能將色譜條件的選擇與方法耐用性驗(yàn)證相混淆。實(shí)際上我們目前研發(fā)的新藥大多為低水平重復(fù)，有許多可借鑒的成熟方法，是否有必要走過(guò)場(chǎng)似地選擇多種流動(dòng)相，值得考慮。若色譜條件一經(jīng)選定，應(yīng)對(duì)多色譜柱的變更、流動(dòng)相各組分比例的小變化、柱溫及流速的小變化做耐用性驗(yàn)證。17、采用高效液相色譜法測(cè)定含量時(shí)，不能將色譜6618、制劑浸出物的含量限度用百分含量表示，合理嗎？

19、標(biāo)準(zhǔn)研究中，應(yīng)盡量避免使用苯、三氯甲烷等有害溶劑。

20、標(biāo)準(zhǔn)正文的書(shū)寫(xiě)極不規(guī)范，特別是制法。建議最好不必寫(xiě)出藥材的炮制過(guò)程、制搖設(shè)備的名稱、噴霧干燥的壓力及溫度等，簡(jiǎn)單扼要描述主要工藝步驟、關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)即可。

21、建議性狀項(xiàng)下的描述最好顏色有一個(gè)幅度，膠囊若有制粒過(guò)程，最好描述為顆粒及粉末。

18、制劑浸出物的含量限度用百分含量表示67（二）化學(xué)藥品的常見(jiàn)問(wèn)題1、有關(guān)物質(zhì)的研究不到位，所建立的檢測(cè)方法不能真實(shí)反映雜質(zhì)的存在情況，應(yīng)按有關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則進(jìn)行，并對(duì)方法進(jìn)行驗(yàn)證。

2、氣相色譜法檢測(cè)有機(jī)溶劑殘留量、氨基酸分析儀測(cè)定氨基酸含量、原子吸收分光光度法測(cè)定金屬離子含量、分子排阻色譜法（凝膠柱）測(cè)定分子量及其分布等，缺乏方法學(xué)研究資料，往往以某個(gè)單位的委托檢驗(yàn)（或代測(cè)）報(bào)告代替。

（二）化學(xué)藥品的常見(jiàn)問(wèn)題1、有關(guān)物質(zhì)683、溶出度檢查方法的研究不到位，缺乏方法選擇和驗(yàn)證資料，應(yīng)按有關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則進(jìn)行，并對(duì)方法進(jìn)行驗(yàn)證。

4、抗生素類藥品需按毫克效價(jià)單位投料的，按重量單位投料，特別是青霉素V鉀類系列制劑，沒(méi)有認(rèn)真研究藥典的相關(guān)規(guī)定。

5、細(xì)菌類毒素檢查缺乏干擾實(shí)驗(yàn)。

3、溶出度檢查方法的研究不到位，缺乏696、供靜脈注射的100ml以下注射劑，研究資料缺乏不溶性微粒的考察。

7、生化藥品的命名不規(guī)范，特別是一些仿制進(jìn)口生化藥品的名稱不規(guī)范。

8、pH值、溶液的顏色等項(xiàng)目缺乏所配置濃度的依據(jù)。

9、“無(wú)水物”與“干燥品”的概念混淆。

6、供靜脈注射的100ml以下注射劑，研究7010、雜質(zhì)控制項(xiàng)目設(shè)置不全，應(yīng)根據(jù)工藝過(guò)程中可能引入的雜質(zhì)設(shè)置控制項(xiàng)目。

11、標(biāo)準(zhǔn)正文的書(shū)寫(xiě)極不規(guī)范，特別是有機(jī)殘留溶劑的書(shū)寫(xiě)五花八門，建議參照中國(guó)藥典（頂空進(jìn)樣、程序升溫）書(shū)寫(xiě)。熱原的檢查標(biāo)準(zhǔn)正文中往往無(wú)家兔的每公斤注射量。10、雜質(zhì)控制項(xiàng)目設(shè)置不全，應(yīng)根據(jù)工藝過(guò)程中可71

實(shí)際上，在藥品標(biāo)準(zhǔn)研究中，遠(yuǎn)不止存在上述問(wèn)題，希望大家在今后的研究工作中，認(rèn)真學(xué)習(xí)藥品研究的各種政策法規(guī)、技術(shù)指導(dǎo)原則、中國(guó)藥典、標(biāo)準(zhǔn)工作手冊(cè)等，關(guān)注和研究藥品研究的新問(wèn)題和新情況，全方位提高藥品研發(fā)的技術(shù)水平，以滿足新形勢(shì)下對(duì)藥品研究的要求。實(shí)際上，在藥品標(biāo)準(zhǔn)研究中，遠(yuǎn)不止存在上述問(wèn)題72謝謝大家謝謝大家73藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究及分析方法驗(yàn)證等有關(guān)問(wèn)題探討

四川省食品藥品檢驗(yàn)所伍丕娥2005年11月30日藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究及分析方法驗(yàn)證等有關(guān)問(wèn)題探討

四川省食品藥74主要內(nèi)容

一、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及標(biāo)準(zhǔn)提高行動(dòng)計(jì)劃二、藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則三、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證四、微生物限度檢查的方法驗(yàn)證五、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中的常見(jiàn)問(wèn)題

主要內(nèi)容75一、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及標(biāo)準(zhǔn)

提高行動(dòng)計(jì)劃1、我國(guó)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的沿革及概況●公元659年（唐，新修本草）●公元1151年（宋，太平惠民和劑局方）●公元1930年（中華藥典、化學(xué)藥）●公元1950年至今共出版8版中國(guó)藥典：53、63（分為一、二部）、77、85、90、95、2000、2005（分為一、二、三部）●公元1950年至今：局（部）頒標(biāo)準(zhǔn)數(shù)十冊(cè)●公元1950年至2002年：省級(jí)地方標(biāo)準(zhǔn)一、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及標(biāo)準(zhǔn)

提高行動(dòng)計(jì)劃1、我國(guó)藥品質(zhì)762、國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)制定的基本原則●科學(xué)、實(shí)用、規(guī)范原則●質(zhì)量可控性原則●標(biāo)準(zhǔn)先進(jìn)性原則2、國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)制定的基本原則●科學(xué)、實(shí)用、規(guī)范原則773、標(biāo)準(zhǔn)提高行動(dòng)計(jì)劃

背景：2002年12月1日，我國(guó)已完成全部上市藥品的國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)的制定工作，取消了地方標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)了《藥品管理法》所規(guī)定的藥品必須符合國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)這一目標(biāo)。然而，改革開(kāi)放二十多年來(lái)，隨著醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)和藥品檢測(cè)技術(shù)水平的發(fā)展，以及加入WTO所面臨的新形勢(shì)，我國(guó)早期制定的國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)已嚴(yán)重滯后于藥品生產(chǎn)現(xiàn)狀和藥品檢測(cè)技術(shù)水平的發(fā)展，一些藥品標(biāo)準(zhǔn)已不足以控制藥品的質(zhì)量，難以保證人民用藥安全有效，亦給3、標(biāo)準(zhǔn)提高行動(dòng)計(jì)劃背景：2002年1278一些假冒偽劣藥品擾亂市場(chǎng)、危害百姓生命健康以可乘之機(jī)。因此2004年2月，根據(jù)國(guó)務(wù)院“食品藥品放心工程”的總體要求，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局頒布了國(guó)食藥監(jiān)注[2004]35號(hào)文，啟動(dòng)了提高國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)行動(dòng)計(jì)劃。計(jì)劃用3～5年時(shí)間，實(shí)現(xiàn)國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)技術(shù)達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平。一些假冒偽劣藥品擾亂市場(chǎng)、危害百姓生命健康以可乘之機(jī)。79標(biāo)準(zhǔn)提高行動(dòng)計(jì)劃的總體目標(biāo)(1)在5年內(nèi)(2004年～2008年)分期、分批地完成中藥1～20冊(cè)的4000余個(gè)品種，化學(xué)藥品(9冊(cè)及歷版藥典遺留品種)500個(gè)品種；

(2)早期新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)（99、2000年前轉(zhuǎn)正）約300種品種的標(biāo)準(zhǔn)提高工作；

(3)常用藥用輔料約50種的標(biāo)準(zhǔn)制定工作；

(4)完成《中國(guó)藥典》(2005年版)附錄檢測(cè)方法的科研和提高工作；實(shí)現(xiàn)國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)量可控性及與國(guó)際先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)的接軌。標(biāo)準(zhǔn)提高行動(dòng)計(jì)劃的總體目標(biāo)(1)在5年內(nèi)(200480二、藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則

為促進(jìn)我國(guó)藥品的研究開(kāi)發(fā)，指導(dǎo)藥物研究單位用科學(xué)規(guī)范的方法開(kāi)展藥品研究工作，國(guó)家局自2003年啟動(dòng)了藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則的起草和修訂工作。指導(dǎo)原則的修訂是以《中華人民共和國(guó)藥品管理法》和《藥品注冊(cè)管理辦法》為依據(jù)，以科學(xué)性、前瞻性、可操作性為指導(dǎo)思想，充分借鑒了ICH等技術(shù)指導(dǎo)原則。

二、藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則

81●今年3月18日國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局（國(guó)食藥監(jiān)注[2005]106號(hào)文）發(fā)布了16個(gè)有關(guān)化學(xué)藥物研究的技術(shù)指導(dǎo)原則，其中涉及藥學(xué)研究的有8個(gè)，涉及藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究與分析方法驗(yàn)證有2個(gè)：化學(xué)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的規(guī)范化過(guò)程技術(shù)指導(dǎo)原則化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法驗(yàn)證技術(shù)指導(dǎo)原則

●今年3月18日國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局（國(guó)82●今年7月1日國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局（國(guó)食藥監(jiān)注[2005]331號(hào)文）發(fā)布了12個(gè)有關(guān)中藥、天然藥物研究的技術(shù)指導(dǎo)原則，其中涉及藥學(xué)研究的有4個(gè)，目前暫無(wú)涉及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范研究和分析方法驗(yàn)證技術(shù)的指導(dǎo)原則

●今年7月1日國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局（國(guó)食83三、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證

方法學(xué)研究包含方法的選擇及驗(yàn)證（一）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證的技術(shù)指導(dǎo)文件有：

1、化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法驗(yàn)證技術(shù)指導(dǎo)原則（編號(hào)[H]GPH5-1)

三、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證842、中國(guó)藥典2005年版二部附錄《藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則》3、中國(guó)藥典2005年版一部附錄《中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則》4、1999年11月12日國(guó)家藥品監(jiān)督管理局（國(guó)藥管注[1999]363號(hào)文）發(fā)布了《中藥新藥研究的技術(shù)要求》

2、中國(guó)藥典2005年版二部附錄《藥品質(zhì)855、《化學(xué)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的規(guī)范化過(guò)程技術(shù)指導(dǎo)原則》要求質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中建立的分析方法必須經(jīng)過(guò)驗(yàn)證

6、藥品注冊(cè)的國(guó)際技術(shù)要求（ICH)Q2a和Q2b

（1、2、3、5、6中要求驗(yàn)證的項(xiàng)目和內(nèi)容基本一致）5、《化學(xué)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的規(guī)范化過(guò)程86

（二）關(guān)于ICH的簡(jiǎn)介：

?人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)（InternationalConferenceonHamonisationTechnicalRequirementsforRejistrationofPharmaceuticalsforHumanUse)（二）關(guān)于ICH的簡(jiǎn)介：87?ICH是1990年由美國(guó)、日本、歐盟三方的政府藥品管理部門和制藥行業(yè)共同發(fā)起，旨在協(xié)調(diào)各國(guó)藥品注冊(cè)的技術(shù)要求，制定了一系列有關(guān)藥品質(zhì)量（Q)、療效(E)、安全性(s)的技術(shù)指導(dǎo)原則,迄今已舉行了六次會(huì)議，共制定了60多個(gè)文件。

?ICH目前共有17個(gè)成員國(guó)，我國(guó)不是，但是WHO要求各非成員國(guó)積極推廣應(yīng)用ICH。

?ICH是1990年由美國(guó)、日本、歐盟88?我國(guó)目前藥品注冊(cè)的技術(shù)要求自成體系，國(guó)家局要求將ICH作為主要借鑒和參考依據(jù)。

?ICH中的Q2a和Q2b是分析方法驗(yàn)證的專門章節(jié)。?我國(guó)目前藥品注冊(cè)的技術(shù)要求自成體系，國(guó)89（三）現(xiàn)將中藥新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的技術(shù)要求（1999年11月執(zhí)行）與現(xiàn)行的分析方法驗(yàn)證的內(nèi)容作一比較（見(jiàn)下表）（三）現(xiàn)將中藥新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的技術(shù)要求（1999年11月執(zhí)9099年中藥標(biāo)準(zhǔn)研究“技術(shù)要求”與現(xiàn)行的分析方法驗(yàn)證項(xiàng)目比較表

標(biāo)準(zhǔn)研究技術(shù)要求（99年11月）現(xiàn)行的方法驗(yàn)證要求回收率準(zhǔn)確度精密度重復(fù)性精密度重復(fù)性（同一個(gè)人在較短的間隔時(shí)間內(nèi)）中間精密度（不同人、不同設(shè)備、不同時(shí)間）重現(xiàn)性（不同實(shí)驗(yàn)室、不同人）空白干擾試驗(yàn)（專屬性）專屬性檢測(cè)限定量限線性和線性范圍線性耐用性范圍穩(wěn)定性99年中藥標(biāo)準(zhǔn)研究“技術(shù)要求”與現(xiàn)行的分析方法驗(yàn)證項(xiàng)目比911、現(xiàn)行的分析方法“驗(yàn)證指導(dǎo)原則”，各驗(yàn)證內(nèi)容更為科學(xué)，方法更為細(xì)化，可操作性更強(qiáng)，但仍有難于理解和掌握之處：（1）關(guān)于“范圍”中藥怎樣考察，有待探討（2）中藥樣品的前處理與檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度、精密度直接相關(guān)，“耐用性”能否完全評(píng)價(jià)樣品前處理的合理性？應(yīng)怎樣與各項(xiàng)驗(yàn)證有機(jī)結(jié)合，有待探討

2、應(yīng)根據(jù)不同檢測(cè)項(xiàng)目的具體情況，有針對(duì)性的進(jìn)行方法驗(yàn)證（見(jiàn)下表）1、現(xiàn)行的分析方法“驗(yàn)證指導(dǎo)原則”，各驗(yàn)證92

檢驗(yàn)項(xiàng)目和驗(yàn)證內(nèi)容

項(xiàng)目?jī)?nèi)容鑒別限量檢查含量測(cè)定及溶出度測(cè)定定量限度準(zhǔn)確度－＋－＋重復(fù)性－＋－＋中間精密度－＋①－＋①重現(xiàn)性②＋＋＋＋專屬性③＋＋＋＋檢測(cè)限－－＋－定量限－＋－－線性－＋－＋范圍－＋－＋耐用性＋＋＋＋

檢驗(yàn)項(xiàng)目和驗(yàn)證內(nèi)容

項(xiàng)目鑒別93▉準(zhǔn)確度（真實(shí)度）：準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般用回收率（%）表示，準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍測(cè)試。用于定量測(cè)定的分析方法均需做準(zhǔn)確度驗(yàn)證。▉準(zhǔn)確度（真實(shí)度）：準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)941、準(zhǔn)確度的考察方法中藥含量分析一般用已知純度的對(duì)照品做加樣回收測(cè)定（化學(xué)藥品作直接回收實(shí)驗(yàn)），即于已知被測(cè)成分含量的供試品（化學(xué)藥品為空白樣品）中精密加入一定量的已知純度的被測(cè)成分對(duì)照品，依法測(cè)定。用實(shí)測(cè)值與供試品中含有量之差，除以加入對(duì)照品量計(jì)算回收率。1、準(zhǔn)確度的考察方法95

在加樣回收實(shí)驗(yàn)中須注意對(duì)照品的加入量與供試品中被測(cè)成分含有量之和必須在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍之內(nèi)；加入的對(duì)照品的量要適當(dāng)，過(guò)小則引起較大的相對(duì)誤差，過(guò)大則干擾成分相對(duì)減少，真實(shí)性差。加入對(duì)照品的操作過(guò)程必須有可操作性。在加樣回收實(shí)驗(yàn)中須注意對(duì)照品的加入量與供試品96

式中A為供試品所含被測(cè)成分量（化學(xué)藥品A值為零）；

B為加入對(duì)照品量；

C為實(shí)測(cè)值。

回收率%=C-A×100%B式中A為供試品所含被測(cè)成分量（化學(xué)藥品A值為零）；972、數(shù)據(jù)要求在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度的供試品，用6個(gè)（原至少5個(gè)）測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)；或設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度各分別制備3份（原兩份）供試品溶液進(jìn)行測(cè)定，用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，一般中間濃度加入量與所取供試品含量之比控制在1：1左右（化學(xué)藥品為100%濃度）。應(yīng)報(bào)告供試品取樣量、供試品中含有量（化學(xué)藥品無(wú)此項(xiàng)）、對(duì)照品加入量、測(cè)定結(jié)果和回收率（%）計(jì)算值，以及回收率（%）的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD%）。2、數(shù)據(jù)要求98▉精密度：指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。精密度包括：重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性。用于定量測(cè)定的分析方法均應(yīng)考察方法的精密度。▉精密度：指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻供試品991、重復(fù)性（間歇測(cè)量精密度）在相同的操作條件下，較短的時(shí)間間隔精密度。（1）用100%濃度水平至少測(cè)定6次（5次）進(jìn)行評(píng)價(jià)，（2）在規(guī)定的范圍內(nèi)，設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度水平，每個(gè)濃度制備3份供試液，每份測(cè)定3次，共9個(gè)結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2、中間精密度為考察隨即變動(dòng)因素對(duì)精密度的影響，應(yīng)進(jìn)行中間精密度試驗(yàn)。變動(dòng)因素為不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備等。

(ICH認(rèn)為中間精密度沒(méi)有必要逐個(gè)考察每個(gè)因素，鼓勵(lì)使用較為簡(jiǎn)化的矩陣試驗(yàn)設(shè)計(jì))1、重復(fù)性（間歇測(cè)量精密度）在相同的操作條件下，較1003、當(dāng)分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時(shí)，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。例如，建立藥典分析方法時(shí)通過(guò)不同實(shí)驗(yàn)室的復(fù)核檢驗(yàn)得出重現(xiàn)性結(jié)果。

4、數(shù)據(jù)要求重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性均應(yīng)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和可信限。目前，分析方法研究中一般只作了“重復(fù)性”，藥檢所的技術(shù)復(fù)核相當(dāng)于是“重現(xiàn)性”考察，經(jīng)“重現(xiàn)性”驗(yàn)證的分析方法，可不考察“中間精密度”。3、當(dāng)分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時(shí)，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。101▉專屬性：專屬性系指在其他成分可能存在下，采用的方法能正確測(cè)定出被測(cè)成分的特性。鑒別實(shí)驗(yàn)、限量檢查、含量測(cè)定等方法均應(yīng)考察其專屬性。▉專屬性：專屬性系指在其他成分可能存在下，1021、鑒別實(shí)驗(yàn)應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)（如輔料）或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分。不含被測(cè)成分的供試品（空白樣品）以及結(jié)構(gòu)相似或組分中的有關(guān)化合物，均不得干擾測(cè)定。顯微鑒別、色譜及光譜鑒別等應(yīng)附相應(yīng)的代表性圖象或圖譜。1、鑒別實(shí)驗(yàn)1032、含量測(cè)定和限量檢查以不含被測(cè)成分的供試品（除去含待測(cè)成分藥材或不含待測(cè)成分的模擬處方）實(shí)驗(yàn)說(shuō)明方法的專屬性。色譜法、光譜法等應(yīng)附代表性圖譜，并標(biāo)明相關(guān)成分在圖中的位置，色譜法中的分離度應(yīng)符合要求。必要時(shí)可采用二極管陣列檢測(cè)和質(zhì)譜檢測(cè)，進(jìn)行峰純度檢查。2、含量測(cè)定和限量檢查104▉檢測(cè)限：指供試品中被測(cè)物能被檢出的最低量。該指標(biāo)的意義在于考察方法是否具備靈敏的檢測(cè)能力，特別是微量有害雜質(zhì)的檢查應(yīng)證明其方法具有足夠低的檢測(cè)限，以保證檢出需控制的雜質(zhì)。如化學(xué)原料藥中的有機(jī)溶劑殘留量、中藥中馬兜鈴酸的檢查等，均應(yīng)對(duì)檢測(cè)限進(jìn)行考察。確定檢測(cè)限有兩種方法：（1）、直觀法用一系列已知濃度的供試品進(jìn)行分析，試驗(yàn)出能被可靠檢出的最低濃度或量。儀器或非儀器方法均可使用。▉檢測(cè)限：指供試品中被測(cè)物能被檢出的最低量。105

（2）、信噪比法僅適用于能顯示基線噪音的分析方法，即把已知低濃度供試品測(cè)出的信號(hào)與空白樣品測(cè)出的信號(hào)進(jìn)行比較，算出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。一般以信噪比為3：1或2：1時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測(cè)限。（3）、數(shù)據(jù)要求應(yīng)附測(cè)試圖譜，說(shuō)明測(cè)試過(guò)程和檢測(cè)限結(jié)果。

（2）、信噪比法僅適用于能顯示基106▉定量限：定量限系指供試品中被測(cè)成分能被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度。用于限量檢查的定量測(cè)定的分析方法（如以5-羥甲基糠醛為對(duì)照品測(cè)定葡糖糖注射液中5-羥甲基糠醛的量、以馬兜鈴酸A為對(duì)照測(cè)定含量等）應(yīng)確定定量限。常用信噪比法確定定量限。一般以信噪比為10：1時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量進(jìn)行確定。▉定量限：定量限系指供試品中被測(cè)成分107▉線性：線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與供試品中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。▉線性：線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試108

應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測(cè)定線性關(guān)系?？捎靡粌?chǔ)備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列供試品的方法進(jìn)行測(cè)定，至少制備5個(gè)濃度的供試品。以測(cè)得的響應(yīng)信號(hào)作為被測(cè)物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。必要時(shí)，響應(yīng)信號(hào)可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進(jìn)行線性回歸計(jì)算（如采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器需取響應(yīng)值的對(duì)數(shù)）。應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測(cè)定線性關(guān)系。可用一儲(chǔ)109

數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。▉范圍：范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。

數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性110

范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果及要求確定。一般來(lái)說(shuō)，線性范圍窄、精密度要求高，范圍就相應(yīng)較窄。對(duì)于有毒的、具特殊功效或藥理作用的成分，其范圍應(yīng)大于被限定含量的區(qū)間。溶出度或釋放度中的溶出量測(cè)定，范圍應(yīng)為限度的±20%。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確111

范圍不是線性關(guān)系考察的濃度范圍，而是測(cè)定方法應(yīng)能達(dá)到的準(zhǔn)確測(cè)定的范圍。范圍是規(guī)定值，對(duì)于化學(xué)藥品，是根據(jù)測(cè)定項(xiàng)目和精密度要求規(guī)定的，如制劑規(guī)定含量為標(biāo)示量的90%~110%，即方法的范圍考察規(guī)定應(yīng)為80%~120%。對(duì)于中藥分析方法，范圍的確定較為困難，但可從以下幾方面考慮：范圍不是線性關(guān)系考察的濃度范圍，而是測(cè)定1121、含量限度有高、低限時(shí)，可參照化學(xué)藥品；

2、中藥往往只規(guī)定下限，限度值為1~10%時(shí)，考察范圍建議為低限-30%，高限50%；限度值小于1%時(shí)，考察范圍建議為低限-50%，高限在條件允許的情況下盡量做得更寬。1、含量限度有高、低限時(shí)，可參照化學(xué)藥品；113▉耐用性：耐用性系指在測(cè)定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度，為使方法用于常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)。開(kāi)始研究分析方法時(shí)，就應(yīng)考慮其耐用性。如果測(cè)試條件要求苛刻，則應(yīng)在方法中寫(xiě)明。▉耐用性：耐用性系指在測(cè)定條件有小的變114

典型的變動(dòng)因素有：被測(cè)溶液的穩(wěn)定性，樣品提取次數(shù)（中藥的提取次數(shù)考察不屬于耐用性）、時(shí)間等。液相色譜法中典型的變動(dòng)因素有：流動(dòng)相的組成比例或pH值，不同廠牌或不同批號(hào)的同類型色譜柱，柱溫，流速及檢測(cè)波長(zhǎng)等。氣相色譜法變動(dòng)因素有：不同廠牌或批號(hào)的色譜柱、固定相，不同類型的擔(dān)體，柱溫，進(jìn)樣口和檢測(cè)器溫度等。薄層色譜的變動(dòng)因素有：不同廠牌的薄層板，點(diǎn)樣方式及薄層展開(kāi)時(shí)溫度及相對(duì)濕度的變化等。典型的變動(dòng)因素有：被測(cè)溶液的穩(wěn)定性，樣品115

經(jīng)實(shí)驗(yàn)，應(yīng)說(shuō)明小的變動(dòng)能否通過(guò)設(shè)計(jì)的系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)，以確保方法有效。▉穩(wěn)定性：為“中藥新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的技術(shù)要求”中對(duì)供試品溶液和對(duì)照品溶液的要求，可納入新版藥典分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則的“耐用性”中。經(jīng)實(shí)驗(yàn)，應(yīng)說(shuō)明小的變動(dòng)能否通過(guò)設(shè)計(jì)的系統(tǒng)116

四、微生物限度或無(wú)菌檢查的方法驗(yàn)證

背景：（1）今年7月1日正式執(zhí)行的中國(guó)藥典2005年版附錄規(guī)定：建立微生物限度或無(wú)菌檢查方法時(shí)必須進(jìn)行方法驗(yàn)證。（2）國(guó)藥典發(fā)（2005）98號(hào)文（10月11日）強(qiáng)調(diào)了驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的重要性和必要性，同時(shí)作出以下規(guī)定：進(jìn)口檢驗(yàn)—必須提供方法驗(yàn)證資料或詳細(xì)的SOP資料，經(jīng)審核后在標(biāo)準(zhǔn)正文中要明確檢查方法的關(guān)鍵操作點(diǎn)注冊(cè)檢驗(yàn)—必須提供方法驗(yàn)證資料，并在標(biāo)準(zhǔn)正文中寫(xiě)明檢查方法的關(guān)鍵操作點(diǎn)，否則，審核意見(jiàn)中要明確指出“方法學(xué)未經(jīng)驗(yàn)證，無(wú)法檢驗(yàn)”，并建議重新建立檢查方法。監(jiān)督檢驗(yàn)—也應(yīng)請(qǐng)企業(yè)提供方法驗(yàn)證資料，未經(jīng)驗(yàn)證的品種，決不能給出“符合2005年版《中國(guó)藥典》的規(guī)定”的結(jié)論。

四、微生物限度或無(wú)菌檢查的方法驗(yàn)證

背景：（1）今年7117

（3）2005年11月14日中國(guó)藥品生物制品檢定所對(duì)各省市藥檢所發(fā)出《關(guān)于征集2005年版中國(guó)藥典“微生物限度檢查法”和“無(wú)菌檢查法”方法驗(yàn)證結(jié)果的通知，要求將完成驗(yàn)證的品種及所收集的企業(yè)完成的驗(yàn)證品種按要求于05年11月30日以前以電子文檔的形式寄予中檢所抗生素室，將在抗生素工作網(wǎng)站組建“藥品無(wú)菌檢查和微生物限度檢查方法驗(yàn)證品種信息交流平臺(tái)”，目的為減少重復(fù)工作，實(shí)現(xiàn)資源共享，加快驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程。（3）2005年11月14日中國(guó)藥品生物制品檢定所118有以下建議供參考：

（1）中國(guó)藥典2005年版二部附錄通則項(xiàng)下未規(guī)定作微生物限度檢查的化學(xué)藥品的四種普通口服固體制劑即丸劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑不要求作微生物限度檢查，如果發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，可進(jìn)行檢查，不符合規(guī)定發(fā)不合格報(bào)告。有以下建議供參考：（1）中國(guó)藥典2005年版二119

（2）除以上四種劑型以外的所有劑型，均應(yīng)要求進(jìn)行微生物限度檢查，并要求通過(guò)方法驗(yàn)證確立合適的微生物限度檢查法（應(yīng)將確定的方法在標(biāo)準(zhǔn)正文中寫(xiě)明），若申報(bào)單位的申報(bào)資料中缺驗(yàn)證資料，藥檢所按98號(hào)文的規(guī)定辦。

（2）除以上四種劑型以外的所有劑型，均應(yīng)要求進(jìn)行微生120

（3）許多需進(jìn)行微生物限度檢查和無(wú)菌檢查的上市老品種，企業(yè)應(yīng)持積極主動(dòng)的態(tài)度，有計(jì)劃地分期分批完成驗(yàn)證工作，若是多家生產(chǎn)的老品種企業(yè)可通過(guò)共同協(xié)商，合理分工，實(shí)行資源共享，在較短時(shí)間內(nèi)完成驗(yàn)證工作。中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則nn課件121

（4）目前注冊(cè)檢驗(yàn)申報(bào)資料中的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)有造假現(xiàn)象，申報(bào)單位應(yīng)認(rèn)真對(duì)待，嚴(yán)格按藥典的要求進(jìn)行驗(yàn)證。造假在經(jīng)藥檢所復(fù)核檢驗(yàn)，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)，藥檢所會(huì)提出“方法驗(yàn)證不符合要求”的意見(jiàn)。是否有抑菌作用，一可通過(guò)處方分析，二可通過(guò)檢驗(yàn)結(jié)果判定。

中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則nn課件122

五、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中的常見(jiàn)問(wèn)題

近年來(lái)，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，高新分析技術(shù)的日益普及，年輕人才的飛速成長(zhǎng)，我省新藥（含仿制藥）研究整體水平普遍提高，但由于未有效把握“科學(xué)、合理、規(guī)范”的標(biāo)準(zhǔn)研究的基本原則。出現(xiàn)一些問(wèn)題值得我們思考并加以重視。針對(duì)一些在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中常見(jiàn)的共性問(wèn)題進(jìn)行以下探討。

五、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中的常見(jiàn)問(wèn)題

近年來(lái)，123（一）、中藥的常見(jiàn)問(wèn)題1、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制內(nèi)容不全或定性與定量目標(biāo)成分重復(fù)控制，致使標(biāo)準(zhǔn)缺乏完整的可控性，非常典型的例子為金剛藤系列制劑，斷血流系列制劑等，標(biāo)準(zhǔn)中僅收載同時(shí)以菝葜皂苷元為對(duì)照品進(jìn)行薄層鑒別和高效夜相色譜法測(cè)定含量，檢驗(yàn)方法看似有專屬性，方法驗(yàn)證也作得很完整，但標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容覆蓋不全，可控性較差，且還提供了絕好的造假機(jī)會(huì)。趕黃草等單味藥制劑均有類似情況。正確的設(shè)計(jì)應(yīng)怎樣做？（一）、中藥的常見(jiàn)問(wèn)題1、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制內(nèi)容1242、關(guān)注05版藥典將部分藥材按不同基源作了分別收載的情況，如五味子南五味子；粉萆薢、綿萆薢；寒水石、北寒水石；大青葉、蓼大青葉；黃柏、關(guān)黃柏；金銀花山銀花；葛根粉葛；土木香藏木香；山楂、南山楂；敗醬草、北敗醬草；劉寄奴、北劉寄奴；板藍(lán)根、南板藍(lán)根；牛膝、懷牛膝；金錢草、廣金錢草；山豆根、北豆根。

8號(hào)資料與申報(bào)標(biāo)準(zhǔn)有矛盾，如葛根。2、關(guān)注05版藥典將部分藥材按不同基源作1253、關(guān)注國(guó)家局有關(guān)牛黃與人工牛黃的替代、麝香與人工麝香的替代的有關(guān)規(guī)定，在處方中應(yīng)明確表示。

4、關(guān)注國(guó)家局關(guān)于含馬兜鈴酸藥材的有關(guān)規(guī)定，該替換的必須替換。

5、地方標(biāo)準(zhǔn)收載的藥材與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)同名必須使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，如黃芪、柴胡等。

3、關(guān)注國(guó)家局有關(guān)牛黃與人工牛黃的替代、麝香1266、改變劑型的新藥或仿制藥中的提取物不能等同于單一化學(xué)成分，如某中成藥用黃芩提取物（以黃芩苷計(jì)）投料，此處的“以黃芩苷計(jì)”在原標(biāo)準(zhǔn)中，用的是紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定黃芩苷的含量，而申報(bào)單位所附的標(biāo)準(zhǔn)為采用高效液相色譜法測(cè)定黃芩苷含量，這兩種方法提供的測(cè)定信息是有差異的。6、改變劑型的新藥或仿制藥中的提取物不能等同于1277、樣品的前處理設(shè)計(jì)不盡合理，特別復(fù)雜樣品的前處理申報(bào)單位往往設(shè)計(jì)不合理。操作也不具可操作性。一個(gè)科學(xué)合理的復(fù)雜樣品的前處理方法需設(shè)計(jì)者具有扎實(shí)的理論基礎(chǔ)知識(shí)和豐富的工作經(jīng)驗(yàn)，應(yīng)在盡可能排除雜質(zhì)的干擾同時(shí)，確保待測(cè)成分在每一部操作環(huán)節(jié)中均不能丟失，而每一個(gè)操作細(xì)節(jié)均應(yīng)有可操作性，要注意整體的合理適用。7、樣品的前處理設(shè)計(jì)不盡合理，特別復(fù)雜樣1288、由于中藥的特殊情況，含量測(cè)定往往只規(guī)定下限，導(dǎo)致個(gè)別研究者錯(cuò)誤地將中藥的含量測(cè)定看作是一種限度檢查，在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)上缺乏“量”的意識(shí)，對(duì)照品的取用量小于10mg是其通病，所制定的操作步驟極為粗放，完全無(wú)微量分析的概念。8、由于中藥的特殊情況，含量測(cè)定往往只規(guī)定1299、含量測(cè)定選擇的對(duì)象應(yīng)首先為有效成分，且此成分應(yīng)具有專屬性，如山茱萸應(yīng)測(cè)定馬錢苷、丹參除測(cè)定丹參同酮ⅡA還應(yīng)測(cè)定丹參酚酸B、黃連或黃柏若選擇鹽酸小檗堿為測(cè)定對(duì)象，薄層色譜必須以對(duì)照藥材為對(duì)照，以使標(biāo)準(zhǔn)整體可控。

9、含量測(cè)定選擇的對(duì)象應(yīng)首先為有效成分，且13010、若中藥的有效成分不明，應(yīng)對(duì)所采用的指標(biāo)成分作初步的論證，即選擇該成分的意義何在等等。

11、同一色譜條件下若能同時(shí)測(cè)定多個(gè)成分，應(yīng)盡可能多測(cè)，如大黃、人參等，若有干擾應(yīng)提供排除干擾但仍不成功的研究資料。

10、若中藥的有效成分不明，應(yīng)對(duì)所采用的指13112、關(guān)于大類化學(xué)成分（如總黃酮、總皂苷、總氨基酸等）的含量測(cè)定存在的有關(guān)問(wèn)題

（1）一般來(lái)說(shuō)，大類化學(xué)成分（如總黃酮、總皂苷等）的含量測(cè)定不具專屬性，但如果薄層鑒別使用的是對(duì)照藥材，所建立的定量方法經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，可以認(rèn)為標(biāo)準(zhǔn)基本可控，無(wú)必要再采用高效液相色譜法對(duì)單一化學(xué)成分進(jìn)行含量測(cè)定（同時(shí)采用“總”和“單”當(dāng)然提倡，