細(xì)胞與顯微技術(shù)實(shí)驗(yàn)課程考核大綱

細(xì)胞與顯微技術(shù)實(shí)驗(yàn)課程考核大綱課程編碼：07210081課程總學(xué)時(shí)：48學(xué)時(shí)課程學(xué)分：1.5學(xué)分開課學(xué)期：第3學(xué)期適用專業(yè)：生物科學(xué)/生物技術(shù)說(shuō)明細(xì)胞與顯微技術(shù)實(shí)驗(yàn)是一門實(shí)驗(yàn)科學(xué)，是生物學(xué)相關(guān)專業(yè)的主修課程之一。通過操作和直觀的感性認(rèn)識(shí)，不僅可以加深學(xué)生對(duì)理論知識(shí)的理解，同時(shí)還能使學(xué)生開拓思路，鍛煉實(shí)驗(yàn)動(dòng)手能力。掌握基本的細(xì)胞生物學(xué)研究方法，有助于形成正確的科學(xué)研究思路和觀念。該課程是生物學(xué)2個(gè)本科專業(yè)的必修課之一，也是開展生命科學(xué)領(lǐng)域和農(nóng)林醫(yī)藥等專業(yè)相關(guān)研究的重要基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)課的核心是實(shí)驗(yàn)?zāi)芰头治鼋鉀Q問題能力的培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)課的考核也是以能力的考察為主旨，不能以理論考核為唯一標(biāo)準(zhǔn)。細(xì)胞和顯微技術(shù)實(shí)驗(yàn)采用“多方位綜合評(píng)價(jià)”體系進(jìn)行考核，平時(shí)考核形式以隨堂實(shí)驗(yàn)技能考核與實(shí)驗(yàn)報(bào)告相結(jié)合、實(shí)驗(yàn)規(guī)范和創(chuàng)新能力相結(jié)合，期末以實(shí)驗(yàn)操作考試與筆試等靈活多樣的形式進(jìn)行多層次考核。實(shí)驗(yàn)考核成績(jī)由實(shí)驗(yàn)平時(shí)成績(jī)和期末考試成績(jī)兩部分組成，平時(shí)成績(jī)考核主要包括實(shí)驗(yàn)態(tài)度、實(shí)驗(yàn)室常識(shí)、操作規(guī)范和效果、實(shí)驗(yàn)技能的掌握和實(shí)驗(yàn)報(bào)告等方面，占實(shí)驗(yàn)總成績(jī)的40%。期末考試采取實(shí)驗(yàn)操作考試或筆試，占實(shí)驗(yàn)總成績(jī)的60%，主要考核學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)原理掌握情況、關(guān)鍵步驟和注意事項(xiàng)、預(yù)期結(jié)果和異常結(jié)果的分析，獨(dú)立實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和動(dòng)手能力，獨(dú)立分析問題解決問題能力的能力。一、各實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目考點(diǎn)實(shí)驗(yàn)一顯微技術(shù)總論1．理解各類光學(xué)顯微鏡的基本構(gòu)件和工作原理，掌握常用的幾種光學(xué)顯微鏡的基本操作方法和注意事項(xiàng)，了解光學(xué)顯微鏡在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用。2．考點(diǎn)（1）．普通復(fù)式光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造、光路原理與使用方法，光路合軸及光闌的調(diào)節(jié)；（2）．暗視野顯微鏡的成像原理、特殊光學(xué)構(gòu)件和調(diào)節(jié)使用，主要應(yīng)用領(lǐng)域；（3）．相差顯微鏡的成像原理、特殊光學(xué)構(gòu)件和調(diào)節(jié)使用，主要應(yīng)用領(lǐng)域；（4）．偏光顯微鏡的成像原理、特殊光學(xué)構(gòu)件和調(diào)節(jié)使用，主要應(yīng)用領(lǐng)域；（5）．微分干涉差顯微鏡的成像原理、特殊光學(xué)構(gòu)件和調(diào)節(jié)使用，主要應(yīng)用領(lǐng)域；（6）．熒光顯微鏡的成像原理、特殊光學(xué)構(gòu)件和調(diào)節(jié)使用，主要應(yīng)用領(lǐng)域，注意事項(xiàng)；（7）．倒置顯微鏡的成像原理、特殊光學(xué)構(gòu)件和調(diào)節(jié)使用，主要應(yīng)用領(lǐng)域；（8）．電子顯微鏡的成像原理、特殊成像構(gòu)件，主要應(yīng)用領(lǐng)域。實(shí)驗(yàn)二葉綠體的提取分離和熒光觀察1．了解葉綠體等細(xì)胞器分離的一般原理和方法，掌握用普通光學(xué)顯微鏡觀察在體和離體葉綠體形態(tài)、數(shù)量及分布；熟悉熒光顯微鏡的使用方法，觀察理解葉綠體的自發(fā)熒光和間接熒光。2．考點(diǎn)（1）．差速離心分離葉綠體的原理和方法；（2）．勻漿操作與葉綠體得率的關(guān)系；（3）．葉片徒手切片或葉面下表皮鋪片制作方法及操作要領(lǐng)；（4）．普通光學(xué)顯微鏡下葉綠體的形態(tài)和分布；（5）．熒光顯微鏡激發(fā)濾鏡選用原則，葉綠體的自發(fā)熒光和間接熒光；（6）．葉綠體熒光的產(chǎn)生原理；（7）．繪圖識(shí)圖。實(shí)驗(yàn)三線粒體和液泡系的超活染色和觀察1．學(xué)習(xí)掌握線粒體和液泡系的超活染色技術(shù)，觀察了解活體細(xì)胞內(nèi)的線粒體及液泡系的形態(tài)、分布和數(shù)量，理解超活染色與常規(guī)染色的異同。2．考點(diǎn)（1）．超活染色對(duì)染色液的要求及線粒體和液泡系的著色原理；（2）．人口腔上皮細(xì)胞線粒體分布、數(shù)量及其與細(xì)胞活性的關(guān)系；（3）．洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細(xì)胞線粒體的數(shù)量和分布；（4）．洋蔥和小麥根尖液泡的大小、數(shù)量和分布；（5）．各種試劑的作用；（6）．繪圖識(shí)圖。實(shí)驗(yàn)四細(xì)胞凝集反應(yīng)及細(xì)胞膜滲透性1.觀察細(xì)胞的凝集反應(yīng)和滲透溶血現(xiàn)象，加深理解細(xì)胞凝集反應(yīng)發(fā)生的分子水平原理以及滲透溶血原理，溶血的判識(shí)。2.考點(diǎn)（1）．紅細(xì)胞凝集的分子基礎(chǔ)，凝集現(xiàn)象；（2）．各種等滲液溶血與否及其機(jī)理；（3）．溶血程度鑒別，異常實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析；（4）．繪圖識(shí)圖。實(shí)驗(yàn)五巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象觀察和吞噬功能檢測(cè)1．觀察小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的現(xiàn)象和過程，理解巨噬細(xì)胞的作用對(duì)生物體的意義；理解機(jī)體非特異性免疫現(xiàn)象；掌握小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分離方法及體外吞噬異物的功能檢測(cè)方法；掌握小白鼠的固定和腹腔注射技術(shù)，以及小白鼠脫臼處死的方法。2．考點(diǎn)（1）．小鼠徒手抓取、固定和處死的操作要領(lǐng)，腹腔注射的技術(shù)要點(diǎn)；（2）．小白鼠腹腔注射含臺(tái)盼藍(lán)的淀粉肉湯和LPS的作用；（3）．注射雞紅細(xì)胞的作用及選用雞紅細(xì)胞的原因；（4）．小鼠解剖結(jié)構(gòu)，腹腔液取得方法；（5）．巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象，對(duì)吞噬對(duì)象的選擇性；（6）．NO探針的作用，巨噬細(xì)胞發(fā)射熒光的原理，操作中的注意事項(xiàng)；（7）．繪圖識(shí)圖。實(shí)驗(yàn)六四膜蟲纖毛再生1．鞏固使用相差顯微鏡和血球計(jì)數(shù)器方法；了解微管組裝的基本原理，觀察纖毛再生現(xiàn)象，理解纖毛再生原理。2．考點(diǎn)（1）．四膜蟲的生活習(xí)性和培養(yǎng)方法；（2）．四膜蟲的纖毛去除方法和運(yùn)動(dòng)形式改變的觀察，操作技術(shù)要領(lǐng)；（3）．四膜蟲的纖毛再生現(xiàn)象，纖毛再生情況的判定；（4）．藥物脫纖毛的措施及操作方法、注意事項(xiàng)。實(shí)驗(yàn)七動(dòng)物（植物）細(xì)胞微絲束的光學(xué)顯微鏡觀察1．熟悉體外培養(yǎng)細(xì)胞的接種方法；掌握體外培養(yǎng)細(xì)胞透化、固定，染色和觀察方法，理解微絲束顯示原理和現(xiàn)象。2．考點(diǎn)（1）．培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的技術(shù)要領(lǐng)；（2）．張力纖維與細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的關(guān)系；（3）．微絲的染色原理和染色方法；（4）．操作中的注意事項(xiàng)；（5）．繪圖識(shí)圖。實(shí)驗(yàn)八植物染色體標(biāo)本制作和組型分析學(xué)習(xí)掌握植物染色體標(biāo)本制作技術(shù)和染色體組型分析的常規(guī)方法，并對(duì)指定材料進(jìn)行組型分析。考點(diǎn)（1）．材料選擇及預(yù)處理方法；（2）．材料的解離方法和后期制片方法，技術(shù)要領(lǐng)；（3）．染色體分散度與制片環(huán)節(jié)的關(guān)系，改善措施；（4）．組型分析的程序、方法以及染色體形態(tài)參數(shù)的計(jì)算；（5）．同源染色體的配對(duì)原則，貼圖原則；（6）．繪圖識(shí)圖。實(shí)驗(yàn)九動(dòng)物染色體標(biāo)本的制作與染色體G-帶的分離技術(shù)1．學(xué)習(xí)掌握小鼠精巢/骨髓細(xì)胞染色體制備方法；觀察骨髓細(xì)胞染色體，計(jì)數(shù)染色體。2．考點(diǎn)（1）．實(shí)驗(yàn)前小鼠腹腔注射秋水仙素的意義；（2）．小鼠的解剖結(jié)構(gòu)和及解剖技術(shù)；（3）．低滲處理的作用，以及后期操作的注意事項(xiàng)；（4）．冷凍滴片火焰干燥的操作要領(lǐng)和意義；（5）．染色體分布及異常制片分析；（6）．G帶分離操作要領(lǐng)，顯帶異常分析；（7）．識(shí)圖繪圖。實(shí)驗(yàn)十雞紅細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)1．掌握利用聚乙二醇為介導(dǎo)物對(duì)各類細(xì)胞的融合方法；融合細(xì)胞的識(shí)別，了解細(xì)胞融合的實(shí)踐意義。2．考點(diǎn)（1）．實(shí)驗(yàn)材料——雞紅細(xì)胞選擇原因；（2）．雞紅細(xì)胞融合原理和操作要領(lǐng)；（3）．PEG的作用；（4）．紅細(xì)胞懸液密度檢測(cè)，融合與否的判別依據(jù)；（5）．融合現(xiàn)象觀察和異?，F(xiàn)象分析；（6）．繪圖識(shí)圖。實(shí)驗(yàn)十一動(dòng)物細(xì)胞凋亡的雙熒光染色與觀察1．了解動(dòng)物細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)方法，掌握細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測(cè)方法。2．考點(diǎn)（1）．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)方法和注意事項(xiàng)；（2）．凋亡誘導(dǎo)劑的誘導(dǎo)原理和意義；（3）．細(xì)胞凋亡的典型特征；（4）．相差顯微鏡使用方法；（5）．凋亡率的意義；（6）．識(shí)圖。二、考核方法及基本題型實(shí)驗(yàn)課注重學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作、設(shè)計(jì)、觀察、協(xié)作等多種能力和分析解決問題能力的培養(yǎng)，細(xì)胞和顯微技術(shù)實(shí)驗(yàn)課的考核也是以能力考察為主，采用“多方位綜合評(píng)價(jià)”體系進(jìn)行考核，考核形式以隨堂實(shí)驗(yàn)技能考核與實(shí)驗(yàn)報(bào)告相結(jié)合、實(shí)驗(yàn)規(guī)范和創(chuàng)新能力相結(jié)合、實(shí)驗(yàn)操作考試與筆試相結(jié)合的形式進(jìn)行多層次考查。筆試基本題型主要有選擇、填空、簡(jiǎn)答、分析判斷、繪圖識(shí)圖、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)等。操作考試可自備解剖器械和自備材料。三、成績(jī)核算實(shí)驗(yàn)考核成績(jī)由實(shí)驗(yàn)平時(shí)成績(jī)和期末考試成績(jī)兩部分組成，分別占實(shí)驗(yàn)總成績(jī)的40%和60%。1．學(xué)生的平時(shí)成績(jī)。平時(shí)成績(jī)考核主要包括實(shí)驗(yàn)態(tài)度、實(shí)驗(yàn)室常識(shí)、操作規(guī)范和效果、實(shí)驗(yàn)技能的掌握和實(shí)驗(yàn)報(bào)告等方面，占實(shí)驗(yàn)總成績(jī)的40%。（1）課前預(yù)習(xí)：主要針對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理、選材依據(jù)、實(shí)驗(yàn)操作及細(xì)節(jié)、實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果和現(xiàn)象作詳細(xì)的理論認(rèn)識(shí)和分析。（2）課堂表現(xiàn)：包括課堂綜合表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)技能的掌握，設(shè)備器具的規(guī)范操作