河北省石家莊市正定縣弘文2023學(xué)年高三二診模擬考試生物試卷含解析

2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項(xiàng)1．考生要認(rèn)真填寫考場(chǎng)號(hào)和座位序號(hào)。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列有關(guān)種群和群落的說法，正確的是（）A．群落的物種組成是區(qū)別不同群落的重要特征B．種群的數(shù)量變化就是“J”型和“S”型增長C．群落演替總是由低等到高等，由簡(jiǎn)單到復(fù)雜方向發(fā)展D．噴灑農(nóng)藥來防治害蟲，可以達(dá)到從根本上消滅害蟲的目的2．單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（MCT1）是哺乳動(dòng)物細(xì)胞膜上同向轉(zhuǎn)運(yùn)乳酸和H+的跨膜蛋白。在癌細(xì)胞中，MCT1基因顯著高表達(dá)，呼吸作用會(huì)產(chǎn)生大量的乳酸；當(dāng)葡萄糖充足時(shí)，MCT1能將乳酸和H+運(yùn)出細(xì)胞，當(dāng)葡萄糖缺乏時(shí)則運(yùn)進(jìn)細(xì)胞。下列表述或推測(cè)錯(cuò)誤的是A．合成與運(yùn)輸MCT1，體現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)各結(jié)構(gòu)之間的協(xié)調(diào)配合B．乳酸被MCT1運(yùn)進(jìn)細(xì)胞，可作為替代葡萄糖的能源物質(zhì)C．癌細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中乳酸產(chǎn)生較多，使細(xì)胞內(nèi)pH顯著降低D．MCT1會(huì)影響癌細(xì)胞增殖，其基因可作癌癥治療新靶點(diǎn)3．細(xì)胞呼吸是重要的新陳代謝反應(yīng)，其原理廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐，下列相關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是（）A．使用具有透氣性的創(chuàng)可貼可避免傷口感染B．給盆栽花卉適時(shí)松土可促進(jìn)根系的生長C．稻田及時(shí)排水能防止幼根的細(xì)胞產(chǎn)生乳酸D．利用酵母菌和醋酸桿菌生產(chǎn)時(shí)應(yīng)控制通氣4．如圖所示，某一化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行到t1時(shí)，加入一定量的酶，該反應(yīng)在最適條件下進(jìn)行直到終止。以下敘述不正確的是A．酶可降低該反應(yīng)的活化能 B．t1～t2反應(yīng)速率逐漸減慢C．t2時(shí)酶失去活性 D．適當(dāng)降低反應(yīng)溫度t2右移5．下列有關(guān)細(xì)胞的物質(zhì)基礎(chǔ)和結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)的敘述中，正確的是（）A．細(xì)胞中可以找到多糖與其他分子相結(jié)合的大分子B．向酶溶液中加入雙縮脲試劑，一定能產(chǎn)生紫色反應(yīng)C．核糖體能合成多種蛋白質(zhì)，溶酶體能合成多種水解酶D．原核細(xì)胞沒有線粒體，只能進(jìn)行無氧呼吸6．已知某種鳥（2N=40）的羽毛顏色由位于Z染色體上的三種基因控制，分別用A+、A、a表示，且A+對(duì)A為顯性。研究人員做如下兩組實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)親本子代1灰紅色（甲）×藍(lán)色（乙）2灰紅色∶1藍(lán)色∶1巧克力色2藍(lán)色（丙）×藍(lán)色（丁）3藍(lán)色：1巧克力色下列有關(guān)分析錯(cuò)誤的是A．A+、A、a的出現(xiàn)是基因突變的結(jié)果，其遺傳遵循基因的分離定律B．A基因控制的羽毛顏色為藍(lán)色，親本甲的基因型為ZA+W或ZA+ZaC．該種鳥體內(nèi)某細(xì)胞進(jìn)行分裂時(shí)，細(xì)胞內(nèi)最多含4個(gè)染色體組，40條染色體D．讓實(shí)驗(yàn)2子代中的藍(lán)色鳥隨機(jī)交配，其后代中雌鳥藍(lán)色∶巧克力色=3∶17．現(xiàn)有甲和乙兩個(gè)不同的生態(tài)系統(tǒng)，兩個(gè)生態(tài)系統(tǒng)生產(chǎn)者同化的總能量相同。甲生態(tài)系統(tǒng)含有7個(gè)營養(yǎng)級(jí)，乙生態(tài)系統(tǒng)含有7個(gè)營養(yǎng)級(jí)。下表為甲生態(tài)系統(tǒng)第二、三營養(yǎng)級(jí)的能量生產(chǎn)情況。營養(yǎng)級(jí)攝取量(J/hm6?a)糞便量(J/hm6?a)呼吸散失量(J/hm6?a)第二個(gè)營養(yǎng)級(jí)1．87×10116．77×10107．17×1010第三個(gè)營養(yǎng)級(jí)1．07×10107．70×1097．77×109下列敘述正確的是（）A．甲生態(tài)系統(tǒng)第三個(gè)營養(yǎng)級(jí)用于生長和繁殖的能量為6．77×109J/hm6?aB．甲生態(tài)系統(tǒng)的次級(jí)生產(chǎn)量為7．777×1010J/hm6?aC．甲生態(tài)系統(tǒng)的能量利用率高于乙生態(tài)系統(tǒng)D．若傳遞效率相同，則甲、乙兩個(gè)生態(tài)系統(tǒng)的次級(jí)生產(chǎn)量相同8．（10分）下列有關(guān)生命現(xiàn)象及其生物學(xué)意義的敘述，不正確的是（）A．明顯縮短DNA分子復(fù)制所需要的時(shí)間主要是依靠半保留復(fù)制方式B．基因突變、基因重組和染色體變異都可為生物進(jìn)化提供原材料C．捕食者捕食個(gè)體數(shù)量多的物種，能避免生態(tài)系統(tǒng)中出現(xiàn)占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)的物種D．高等動(dòng)物體內(nèi)性激素的分泌存在負(fù)反饋調(diào)節(jié)，能使性激素的含量不至于過高二、非選擇題9．（10分）癌細(xì)胞表面蛋白“PDL-1”與T細(xì)胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后，可抑制T細(xì)胞活性并啟動(dòng)其凋亡，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對(duì)“PD-1”基因進(jìn)行克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性鑒定，為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識(shí)別序列與酶切位點(diǎn)見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細(xì)胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板；設(shè)計(jì)含有不同的限制酶切點(diǎn)的α和β序列為引物，通過____________________技術(shù)擴(kuò)增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進(jìn)行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建表達(dá)載體。該表達(dá)載體的組成，除了目的基因、標(biāo)記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴(kuò)增重組DNA。（4）將擴(kuò)增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達(dá)外源基因的原代293T細(xì)胞。一段時(shí)間后，為確定PD-1基因是否表達(dá)，檢測(cè)細(xì)胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，則可裂解293T細(xì)胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號(hào)通路”。研究中還會(huì)有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞，其目的是_________________________。10．（14分）某同學(xué)在做微生物實(shí)驗(yàn)時(shí)，不小心把硝化細(xì)菌和酵母菌混在一起，他欲通過實(shí)驗(yàn)將兩種微生物分離?；卮鹣铝袉栴}：（1）微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有____________________（答出兩點(diǎn)即可）。氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與合成的生物大分子有__________、__________等。（2）培養(yǎng)基常用__________滅菌；玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具常用__________滅菌。（3）該同學(xué)配制了無碳培養(yǎng)基，用于篩選出__________，其實(shí)驗(yàn)原理是__________。（4）在微生物培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮__________（答出兩點(diǎn)即可）和滲透壓等條件。11．（14分）P53基因是正常細(xì)胞內(nèi)重要的抑癌基因，研究表明P53基因突變可導(dǎo)致肝臟細(xì)胞癌變?？茖W(xué)家研究發(fā)現(xiàn)P53基因?qū)w外培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞生長有抑制作用，請(qǐng)回答下列問題：（1）切下新鮮的肝癌組織，在37℃下用_____消化30～40分鐘，用培養(yǎng)液制成_____在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在培養(yǎng)基中加入一定量的抗生素，其目的是_______________________。（2）若P53基因兩側(cè)的一段核苷酸序列是已知的，則獲取P53基因的方法通常是_____。（3）將P53基因經(jīng)過一系列的處理并與脂質(zhì)體混合，將混合物滴加至肝癌細(xì)胞上，輕輕混勻。最后篩選出含有P53基因的肝癌細(xì)胞。脂質(zhì)體在這個(gè)操作中的作用是_____。（4）為證明P53基因?qū)Ω伟┘?xì)胞有抑制作用，需將兩種細(xì)胞接入多孔板中，并從次日開始檢測(cè)每孔的細(xì)胞總數(shù)，繪制成如圖所示的生長曲線。請(qǐng)分析兩條曲線分別是哪種細(xì)胞，曲線1是_____細(xì)胞，曲線2是_____細(xì)胞。12．下圖1表示某綠色植物葉肉細(xì)胞中進(jìn)行的兩個(gè)相關(guān)的生理過程，其中a～f表示物質(zhì)，甲和乙表示兩種細(xì)胞器；圖2表示在不同條件下測(cè)定該植物葉片質(zhì)量變化情況(均考慮為有機(jī)物的重量變化)。請(qǐng)據(jù)圖分析回答：（1）甲是光合作用的場(chǎng)所，光合作用的過程可用反應(yīng)式概括為：_______________。甲中色素吸收的光能有兩方面用途：①_______________、②_______________。（2）甲和乙內(nèi)部增加膜面積的方式分別是：甲_______________、乙_______________。（3）物質(zhì)e被徹底分解的場(chǎng)所是乙中的_______________。（4）圖2中，影響A、B兩點(diǎn)光合速率的主要因素都是_______________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】

種群是指生活在一定區(qū)域的同種生物的全部個(gè)體，種群特征包括種群的數(shù)量特征（種群密度）、年齡結(jié)構(gòu)、性別比例、遷入率和遷出率、出生率和死亡率、空間特征等。群落的概念：在一定空間內(nèi)所有生物種群的集合體，它具有一定的結(jié)構(gòu)、一定的種類構(gòu)成和一定的種間相互關(guān)系。群落演替是指隨著時(shí)間的推移一個(gè)群落被另一個(gè)群落代替的過程。【詳解】A、群落的物種組成是區(qū)別不同群落的重要特征，A正確；B、種群的數(shù)量變化是一個(gè)復(fù)雜的動(dòng)態(tài)變化過程，常見的數(shù)量變化有“J”型和“S”型增長，也有其他增長形式，B錯(cuò)誤；C、群落演替一般來說，由低等到高等，由簡(jiǎn)單到復(fù)雜方向發(fā)展，但在自然災(zāi)害或人為干預(yù)下，可能會(huì)朝著反方向發(fā)展，C錯(cuò)誤；D、噴灑農(nóng)藥來防治害蟲，可以殺滅大部分害蟲，但仍有少部分帶抗性的個(gè)體存活，D錯(cuò)誤。故選A。2、C【解析】

據(jù)題文和選項(xiàng)的描述可知：該題考查學(xué)生對(duì)細(xì)胞癌變等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力，以及獲取信息、分析問題的能力?！驹斀狻繂昔人徂D(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（MCT1）是一種跨膜蛋白，其合成與運(yùn)輸過程與分泌蛋白類似，即在核糖體上合成后，經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工，需要線粒體提供能量，因此合成與運(yùn)輸MCT1，體現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)各結(jié)構(gòu)之間的協(xié)調(diào)配合，A正確；當(dāng)葡萄糖缺乏時(shí)，乳酸被MCT1運(yùn)進(jìn)細(xì)胞，說明乳酸可作為替代葡萄糖的能源物質(zhì)，B正確；當(dāng)葡萄糖充足時(shí)，MCT1能將乳酸和H+運(yùn)出細(xì)胞，當(dāng)葡萄糖缺乏時(shí)則乳酸運(yùn)進(jìn)細(xì)胞，說明癌細(xì)胞存在乳酸代謝機(jī)制，因此癌細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中乳酸產(chǎn)生較多，細(xì)胞內(nèi)的pH不會(huì)顯著降低，C錯(cuò)誤；在癌細(xì)胞中，MCT1顯著高表達(dá)，說明MCT1會(huì)影響癌細(xì)胞增殖，其基因可作癌癥治療新靶點(diǎn)，D正確?！军c(diǎn)睛】本題是一道信息題。解答此題的關(guān)鍵是從題意中提取有效信息，如MCT1是一種跨膜蛋白、控制其合成的基因在癌細(xì)胞中顯著高表達(dá)等，據(jù)此結(jié)合所學(xué)的細(xì)胞癌變等相關(guān)知識(shí)展開聯(lián)想，進(jìn)行知識(shí)的整合和遷移。3、C【解析】

?？嫉募?xì)胞呼吸原理的應(yīng)用：1、用透氣紗布或“創(chuàng)可貼”包扎傷口：增加通氣量，抑制致病菌的無氧呼吸。2、釀酒時(shí)：早期通氣--促進(jìn)酵母菌有氧呼吸，利于菌種繁殖，后期密封發(fā)酵罐--促進(jìn)酵母菌無氧呼吸，利于產(chǎn)生酒精。3、食醋、味精制作：向發(fā)酵罐中通入無菌空氣，促進(jìn)醋酸桿菌、谷氨酸棒狀桿菌進(jìn)行有氧呼吸。4、土壤松土，促進(jìn)根細(xì)胞呼吸作用，有利于主動(dòng)運(yùn)輸，為礦質(zhì)元素吸收供應(yīng)能量。5、稻田定期排水：促進(jìn)水稻根細(xì)胞有氧呼吸。6、提倡慢跑：促進(jìn)肌細(xì)胞有氧呼吸，防止無氧呼吸產(chǎn)生乳酸使肌肉酸脹?！驹斀狻緼、由于氧氣的存在能抑制厭氧病菌的繁殖，所以使用具有透氣性的創(chuàng)可貼可以避免厭氧病菌的繁殖，從而有利于傷口的痊愈，A正確；B、給盆栽花卉適時(shí)松土，可增加土壤的氧氣含量，促進(jìn)根系的有氧呼吸，為礦質(zhì)元素吸收供應(yīng)能量，有利于根的生長，B正確；C、稻田需要定期排水，如果稻田中的氧氣不足，水稻根部會(huì)因細(xì)胞無氧呼吸產(chǎn)生大量的酒精而不是乳酸，對(duì)根有毒害作用，C錯(cuò)誤；D、酵母菌通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精，醋酸菌是好氧菌，因此利用酵母菌和醋酸桿菌生產(chǎn)時(shí)應(yīng)控制通氣，D正確。故選C。4、C【解析】

酶的作用機(jī)理是降低化學(xué)反應(yīng)的活化能，反應(yīng)物濃度降低的速率可表示化學(xué)反應(yīng)的速率，由圖可知，t1～t2反應(yīng)物濃度減小的速率由大到小，說明反應(yīng)速率逐漸減慢?！驹斀狻棵傅淖饔脵C(jī)理是降低化學(xué)反應(yīng)的活化能，A正確；加入酶以后，t1～t2的開始階段，反應(yīng)物濃度降低較快，說明反應(yīng)速率大，隨著時(shí)間的延長，反應(yīng)物濃度降低減慢，說明反應(yīng)速率逐漸減慢，可能是反應(yīng)物的濃度限制了反應(yīng)速率，B正確；根據(jù)題意“加入一定量的酶，該反應(yīng)在最適條件下進(jìn)行”，說明酶沒有失活，t2時(shí)反應(yīng)物濃度為0，說明反應(yīng)物被完全分解了，C錯(cuò)誤；適當(dāng)降低反應(yīng)溫度，酶的活性降低，反應(yīng)速率減慢，反應(yīng)物完全被分解所需要的時(shí)間要延長，故t2右移，D正確。故選C。5、A【解析】

A、細(xì)胞膜表面的多糖可以和蛋白質(zhì)結(jié)合形成糖蛋白，A正確；B、向化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)的酶溶液中加入雙縮脲試劑能產(chǎn)生紫色反應(yīng)，而向化學(xué)本質(zhì)是RNA的酶溶液中加入雙縮脲試劑不能產(chǎn)生紫色反應(yīng)，B錯(cuò)誤；C、核糖體能合成多種蛋白質(zhì)，而溶酶體不能合成多種水解酶，C錯(cuò)誤；D、原核細(xì)胞中的醋酸菌細(xì)胞沒有線粒體，但含有與有氧呼吸有關(guān)的酶，能進(jìn)行有氧呼吸，D錯(cuò)誤。故選A。6、C【解析】

鳥的性別決方式是ZW型，其中雄鳥的性染色體組成是ZZ，雌鳥的性染色體組成是ZW?！驹斀狻緼、該種鳥羽毛顏色的遺傳受位于Z染色體上的復(fù)等位基因A+、A、a控制，A+、A、a的出現(xiàn)是基因突變的結(jié)果，其遺傳遵循基因的分離定律，A正確；B、分析實(shí)驗(yàn)2親本都是藍(lán)色子代中出現(xiàn)了巧克力色，說明巧克力對(duì)于藍(lán)色是隱性性狀。根據(jù)實(shí)驗(yàn)1親本是灰紅色和藍(lán)色，子代中灰紅色占2/4，說明灰紅色針對(duì)藍(lán)色是顯性，根據(jù)題干中A+對(duì)A為顯性，說明A+控制的是灰紅色，A控制的是藍(lán)色，a控制的是巧克力色。親本甲是灰紅色，后代出現(xiàn)了藍(lán)色和巧克力色，所以親本甲的基因型是ZA+W或ZA+Za，而乙基因型是ZAZa或ZAW，B正確；C、在進(jìn)行有絲分裂后期時(shí)染色體數(shù)目最多的是體細(xì)胞的兩倍，該鳥有40條染色體，所以最多時(shí)有80條，4個(gè)染色體組，C錯(cuò)誤；D、組2中親本是ZAZa和ZAW，子代中的藍(lán)色雄鳥有1/2ZAZA，1/2ZAZa，藍(lán)色雌鳥是ZAW，隨機(jī)交配后，后代中雌鳥藍(lán)色和巧克力色為3∶1，D正確。故選C?！军c(diǎn)睛】本題考查伴性遺傳的相關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生掌握伴性遺傳的特點(diǎn)，能根據(jù)題干信息及表格數(shù)據(jù)判斷各種表現(xiàn)型的相應(yīng)的基因型在利用分離定律進(jìn)行計(jì)算。7、A【解析】

攝入量=糞便量+同化量；同化量=呼吸散失量+生物用于生長、發(fā)育和繁殖的能量?！驹斀狻緼、甲生態(tài)系統(tǒng)第三個(gè)營養(yǎng)級(jí)用于生長和繁殖的能量=同化量-呼吸散失的能量=（攝入量-糞便量）－呼吸散失的能量=（1.07×1010－7.70×109）－7.77×109=6.77×109J/hm6?a，A正確；

B、次級(jí)生產(chǎn)量（動(dòng)物和其它異養(yǎng)生物靠消耗植物的初級(jí)生產(chǎn)量制造的有機(jī)物質(zhì)或固定的能量）=同化量-呼吸散失的能量=（攝入量-糞便量）－呼吸散失的能量=（1.87×1011-6.77×1010）－7.17×1010=7×1010J/hm6?a，B錯(cuò)誤；

C、題干中沒有乙生態(tài)系統(tǒng)的相關(guān)數(shù)據(jù)，故無法判斷甲、乙兩個(gè)生態(tài)系統(tǒng)的能量利用率的高低，C錯(cuò)誤；

D、次級(jí)生產(chǎn)量（動(dòng)物和其它異養(yǎng)生物靠消耗植物的初級(jí)生產(chǎn)量制造的有機(jī)物質(zhì)或固定的能量）=同化量-呼吸散失的能量，兩個(gè)生態(tài)系統(tǒng)生產(chǎn)者同化的總能量相同，若傳遞效率相同，則甲、乙兩個(gè)生態(tài)系統(tǒng)中第二營養(yǎng)級(jí)同化的能量相同，但不知道呼吸消耗能量值，因此無法進(jìn)行比較，D錯(cuò)誤。

故選A。【點(diǎn)睛】解答此題要求考生識(shí)記能量傳遞效率，掌握其中的相關(guān)計(jì)算，能結(jié)合表中和題中信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。8、A【解析】

生命現(xiàn)象的正常高效進(jìn)行與反饋調(diào)節(jié)、多種種間關(guān)系等有密切關(guān)系?！驹斀狻緼、半保留復(fù)制方式可以保證親子代間遺傳物質(zhì)的連續(xù)性，DNA多起點(diǎn)復(fù)制縮短了復(fù)制所需要的時(shí)間，A錯(cuò)誤；B、可遺傳變異（基因突變、基因重組和染色體變異）可為生物提供進(jìn)化的原材料，B正確；C、捕食者往往捕食個(gè)體數(shù)量多的物種，因此捕食者的捕食對(duì)被捕食種群的發(fā)展起促進(jìn)作用，能避免生態(tài)系統(tǒng)中出現(xiàn)占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)的物種，C正確；D、當(dāng)高等動(dòng)物體內(nèi)性激素含量偏高時(shí)，可通過負(fù)反饋調(diào)節(jié)使性激素水平降低，以保證性激素的含量不至于過高，D正確。故選A?！军c(diǎn)睛】解答此題需熟悉常見的生命活動(dòng)活動(dòng)及其調(diào)節(jié)過程和機(jī)制，并能結(jié)合選項(xiàng)分析作答。二、非選擇題9、cDNAPCRXhoIEoRI啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對(duì)照【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA；由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理，所以用該cDNA進(jìn)行PCR技術(shù)擴(kuò)增短時(shí)間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識(shí)別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識(shí)別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識(shí)別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進(jìn)行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構(gòu)建基因表達(dá)載體?；虮磉_(dá)載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。（4）基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，一段時(shí)間后，為確定PD-1基因是否表達(dá)，可以檢測(cè)細(xì)胞膜表面是否具有PD-1基因表達(dá)的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)，即從裂解293T細(xì)胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結(jié)合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號(hào)通路”。為了增加實(shí)驗(yàn)的可信度，還需要設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞，因?yàn)椴缓琍D-1基因，所以“PD-1與PDL-1信號(hào)通路”不會(huì)阻斷?！军c(diǎn)睛】題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)在新的情景材料下分析運(yùn)用。10、水、無機(jī)鹽、碳源和特殊營養(yǎng)物質(zhì)（生長因子）核酸（DNA、RNA）蛋白質(zhì)高壓蒸汽干熱硝化細(xì)菌硝化細(xì)菌是自養(yǎng)型生物能夠在無碳培養(yǎng)基上生長繁殖，酵母菌是異養(yǎng)型生物不能在無碳培養(yǎng)基上生長繁殖溫度、pH【解析】

微生物在生長的時(shí)候需要提供四種基本的營養(yǎng)物質(zhì)，即碳源、氮源、水和無機(jī)鹽。一般常見的滅菌方法包括灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌，其中培養(yǎng)基的滅菌主要使用高壓蒸汽滅菌，玻璃和金屬物品常常使用干熱滅菌的方法。選擇培養(yǎng)基的制備原理為通過營造目的菌株生長的特定條件，以便達(dá)到只允許目的菌株生長，而其它菌種無法生長的環(huán)境來篩選目的菌株?！驹斀狻浚?）微生物培養(yǎng)需要的基本營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽；氮源進(jìn)入細(xì)胞以后會(huì)用于合成一些含氮物質(zhì)，例如蛋白質(zhì)、核酸等；（2）培養(yǎng)基的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌；玻璃和金屬等物品的滅菌方法為干熱滅菌；（3）無碳培養(yǎng)基的特點(diǎn)為沒有碳源，因此依靠現(xiàn)成碳源生存的微生物都無法生長，但自養(yǎng)型生物由于可以應(yīng)用空氣中的二氧化碳作為碳源所以可以在該培養(yǎng)基中生長，硝化細(xì)菌屬于可以進(jìn)行化能合成的自養(yǎng)型微生物，所以可以在該培養(yǎng)基中生長；（4）微生物在培養(yǎng)的時(shí)候?qū)囟?、pH和滲透壓等培養(yǎng)環(huán)境都有較高的要求，因此需要控制較為嚴(yán)格的培養(yǎng)環(huán)境?！军c(diǎn)睛】該題主要考察了微生物的培養(yǎng)，難點(diǎn)為選擇培養(yǎng)基的理解和應(yīng)用，對(duì)比硝化細(xì)菌和酵母菌的代謝類型，推測(cè)無碳培養(yǎng)基的應(yīng)用原理應(yīng)該是篩選自養(yǎng)型微生物，從而確定選擇的是硝化細(xì)菌。11、胰蛋白酶細(xì)胞懸液防止雜菌污染利用PCR人工擴(kuò)增目的基因?qū)53（目的）基因?qū)敫伟┘?xì)胞肝癌轉(zhuǎn)入P53基因的肝癌【解析】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和應(yīng)用。分析曲線圖：P53基因是正常細(xì)胞內(nèi)重要的抑癌基因，所以導(dǎo)入P53基因的肝癌細(xì)胞數(shù)目會(huì)下降，即曲線2，而普通肝癌細(xì)胞能無限增殖，其數(shù)目不斷上升，即曲線1?！驹斀狻浚?）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前需要用胰蛋白酶處理組織，使細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞。用培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在培養(yǎng)基中加入一定量的抗生素，其目的是防止其他細(xì)菌等雜菌的污染。（2）若P53基因兩側(cè)的一段核苷