experiment霉菌形態(tài)觀察

一、目的要求

1.學(xué)習(xí)并掌握觀察霉菌形態(tài)的基本方法。2.了解四類常見霉菌的基本形態(tài)特征。

第1頁(yè)/共20頁(yè)二、基本原理（1）霉菌可產(chǎn)生復(fù)什分枝的菌絲體，分基內(nèi)菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲生長(zhǎng)到一定階段分化產(chǎn)生繁殖菌絲，由繁殖菌絲產(chǎn)生孢子。霉菌菌絲體（尤其是繁殖菌絲）及孢子的形態(tài)特征是識(shí)別不同種類霉菌的重要依據(jù)。霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細(xì)菌和放線菌粗得多（約3~10μm），常是細(xì)菌菌體寬度的幾倍至幾十倍，因此，用低倍顯微鏡即可觀察。觀察霉菌的形態(tài)有多種方法，常用的有直接制片觀察法、載玻片培養(yǎng)觀察法和玻璃培養(yǎng)觀察法三種方法，本節(jié)課用載玻片培養(yǎng)觀察法。第2頁(yè)/共20頁(yè)二、基本原理（2）載玻片培養(yǎng)觀察法：用無(wú)菌操作將培養(yǎng)基瓊脂薄層置于載玻片上，接種后蓋上蓋玻片培養(yǎng)，霉菌即在載玻片和蓋玻片之間的有限空間內(nèi)沿蓋玻片橫向生長(zhǎng)。培養(yǎng)一定時(shí)間后，將載玻片上的培養(yǎng)物置于顯微鏡下觀察。這種方法既可以保持霉菌自然生長(zhǎng)狀態(tài)，還便于觀察不同發(fā)育期的培養(yǎng)物。

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三、實(shí)驗(yàn)器材1.菌種曲霉(Aspergillussp.)，青霉，根霉(Rhizopussp.)和毛霉（Mucorsp.）培養(yǎng)2~5d的馬鈴薯瓊脂平板培養(yǎng)物。2.培養(yǎng)基土豆瓊脂或察氏瓊脂。3.儀器或其他用具無(wú)菌吸管，平皿，載玻片，蓋玻片，U型玻棒，解剖針，解剖刀，鑷子，50%乙醇，20%的甘油以及顯微鏡等。第4頁(yè)/共20頁(yè)

四、操作步驟——載玻片培養(yǎng)觀察法

培養(yǎng)小室的滅菌在平皿皿底鋪一張略小于皿底的圓濾紙片，再放一U形玻棒，其上放一潔凈載玻片和兩塊蓋玻片，蓋上皿蓋、包扎后于121℃滅菌30min，烘干備用。瓊脂塊的制作取已滅菌的馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基6~7ml注入另一滅菌平皿中，使之凝固成薄層。用解剖刀切成0.5~1cm2

的瓊脂塊，并將其移至上述培養(yǎng)室中的載玻片上（每片放兩塊)。（注：制作過程應(yīng)注意無(wú)菌操作。）

接種用尖細(xì)的接種針挑取很少量的孢子接種于瓊脂塊的邊緣上，用無(wú)菌鑷子將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上。（注：接種量要少，盡可能將分散的孢子接種在瓊脂塊邊緣上，否則培養(yǎng)后菌絲過于稠密影響觀察。）

培養(yǎng)先在平皿的濾紙上加3～5ml滅菌的20％甘油（用于保持平皿內(nèi)的濕度)

，蓋上皿蓋，28℃培養(yǎng)一周。鏡檢根據(jù)需要可以在不同的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)取出載玻片置低倍鏡下觀察，必要時(shí)換高倍鏡。第5頁(yè)/共20頁(yè)五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1.結(jié)果繪圖說明四種霉菌的形態(tài)特征。

2.思考題（1）你主要根據(jù)哪些形態(tài)特征來(lái)區(qū)分上述四種霉菌（2）你認(rèn)為在顯微鏡下，細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌的主要區(qū)別是什么？第6頁(yè)/共20頁(yè)曲霉圖片——24h曲霉第7頁(yè)/共20頁(yè)曲霉圖片——24h曲霉足細(xì)胞第8頁(yè)/共20頁(yè)

曲霉圖片第9頁(yè)/共20頁(yè)根霉圖片（1）第10頁(yè)/共20頁(yè)根霉圖片（2）第11頁(yè)/共20頁(yè)根霉圖片（3）第12頁(yè)/共20頁(yè)根霉圖片（4）第13頁(yè)/共20頁(yè)青霉圖片（1）第14頁(yè)/共20頁(yè)青霉圖片（2）第15頁(yè)/共20頁(yè)青霉圖片（3）第16頁(yè)/共20頁(yè)青霉圖片（4）第17頁(yè)/