夏盛葡萄糖氧化酶介紹課件

飼用葡萄糖氧化酶作用機(jī)理及功效葡萄糖氧化酶介紹葡萄糖氧化酶應(yīng)用研究內(nèi)容提綱總結(jié)夏盛葡萄糖氧化酶使用案例1

飼用葡萄糖氧化酶作用機(jī)理及功效葡萄糖氧化酶介紹葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶簡介葡萄糖氧化酶是一種氧化還原酶，在分子氧的存在下，專一地氧化β-D-葡萄糖生成D-葡萄糖酸內(nèi)酯，同時消耗氧，生成過氧化氫；過氧化氫在過氧化氫酶作用下，分解生成水和1/2氧，而后水又與葡萄糖酸內(nèi)酯結(jié)合產(chǎn)生葡萄糖酸。在此過程中，葡萄糖氧化酶的特點(diǎn)是能夠消耗氧氣，催化葡萄糖氧化，最終產(chǎn)物是葡萄糖酸。GOD催化β-D-葡萄糖的速度是催化α-D-葡萄糖的150倍.反應(yīng)方程式：2葡萄糖氧化酶簡介葡萄糖氧化酶是一種氧化還原酶，在分子氧的存在葡萄糖氧化酶的來源

1904年發(fā)現(xiàn)于黑曲霉菌絲；1928年確定它是一種氧化還原酶，也是成功應(yīng)用于工業(yè)的少數(shù)幾種非水解酶之一；

1960年Kusai等、1964年P(guān)azur和Swobodda分別從青霉和黑曲霉中提純葡萄糖氧化酶。1995年,Petruccioli等用青霉的突變株生產(chǎn)出葡萄糖氧化酶。1999年農(nóng)業(yè)部將其定為12種允許使用的飼用酶制劑之一；目前生產(chǎn)上一般采用的霉菌是黑曲霉和青霉屬菌株。

葡萄糖氧化酶的來源1904年發(fā)現(xiàn)于黑曲霉菌絲；《允許使用的飼料添加劑目錄》青霉黑曲霉4《允許使用的飼料添加劑目錄》青霉黑曲霉4不同菌種來源對比

菌種特異青霉黑曲霉分子量150kD152kD碳?xì)浠衔?1%16%氨基酸（賴氨酸、苯丙氨酸）較多（組氨酸、精氨酸、酪氨酸）較多Km(米氏常數(shù))1130Vmax

值925458Km表示酶和底物之間的親和能力，Km值越大，親和能力越弱，反之亦然。在同等底物濃度的條件下，Km值越大，其所需的酶濃度越大，即所需添加量也越大。（引自?BiotechnologyAdvance?

27(2009):489-501）不同菌種來源對比菌種特異青霉黑曲霉分子量150kD152kD反應(yīng)時間pH值剩余葡萄糖值（%）特異青霉黑曲霉特異青霉黑曲霉0h8.018.21h6.336.817.117.73h6.216.5615.516.36h6.146.3714.415.48h5.716.057.99.1目的：比較特異青霉和黑曲霉的產(chǎn)物生成量及底物消耗量步驟：配制18%葡萄糖溶液，測定初始葡萄糖含量，加入一定量碳酸鈣，調(diào)試pH值，分別加入同等活力不同來源葡萄糖氧化酶，以及過量過氧化氫酶，磁力攪拌器，用鼓風(fēng)機(jī)通入一個大氣壓的空氣，保持氧氣充足。6反應(yīng)時間pH值剩余葡萄糖值（%）特異青霉黑曲霉特異青霉黑曲霉葡萄糖氧化酶—酶學(xué)特性在pH為4.0～8.0之間具有很好的穩(wěn)定性，最適pH值為6.0葡萄糖氧化酶—酶學(xué)特性在pH為4.0～8.0之間具有很好的穩(wěn)88葡萄糖氧化酶—酶學(xué)特性枯草桿菌蛋白酶(pH6.0)、胰蛋白酶(pH6.8)和胃蛋白酶(pH4.5)不能分解葡萄糖氧化酶—酶學(xué)特性枯草桿菌蛋白酶(pH6.0)、胰蛋白酶葡萄糖氧化酶—酶學(xué)特性作用溫度為20℃～60℃,最適溫度35℃耐溫性能良好，經(jīng)85℃處理1min,酶活保持在80%以上耐溫性能15%濕度條件下，混合葡萄糖氧化酶和飼料后制粒結(jié)果葡萄糖氧化酶—酶學(xué)特性作用溫度為20℃～60℃,最適溫度3存儲穩(wěn)定性良好，避光、干燥處保存12個月活力不低于90%。11存儲穩(wěn)定性良好，避光、干燥處保存12個月活力不低于90%。1在畜禽機(jī)體內(nèi)的作用機(jī)理及功效清除過量自由基保持腸道上皮完整減少病原入侵耗氧，抗氧化有機(jī)弱酸、提供酸性環(huán)境過氧化氫、強(qiáng)氧化性β-D葡萄糖＋H2O2葡萄糖酸O2＋H2OGOD過氧化氫酶消除腸道病原菌生存環(huán)境，保持腸道菌群生態(tài)平衡提高消化酶活，改善飼料品質(zhì)，提高飼料消化率緩解霉菌毒素中毒保護(hù)腸道健康維護(hù)腸道健康、提高免疫功能，促進(jìn)消化吸收、替代抗生素、預(yù)防霉菌毒素中毒1/2O2＋在畜禽機(jī)體內(nèi)的作用機(jī)理及功效清除過量自由基耗氧，抗氧化有機(jī)弱（一）保持腸道上皮細(xì)胞的完整，抑制球蟲和病原菌的入侵1994年趙文等在《氧自由基與腸道損傷》中表明：機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的氧自由基會破壞腸道上皮細(xì)胞的完整性造成腸道損傷。在葡萄糖氧化酶催化的反應(yīng)過程中，可以清除氧自由基，保護(hù)腸道健康，從而抑制病原菌入侵。GOD的還原過程13（一）保持腸道上皮細(xì)胞的完整，抑制球蟲和病原菌的入侵GOD的GOD組0~15日齡0.20%GOD拌料；16~60日齡用0.12%~0.16%GOD拌料，如有球蟲則飲水添地克珠利1~3d。

對照組15日齡起飲水添加地克珠利至60日齡出舍，發(fā)生球蟲病則飲三維治球粉3d。(引自《湖北畜牧獸醫(yī)》,2004(1):31-33)備注：GOD酶活15u/g14GOD組0~15日齡0.20%GOD拌料；16~60日齡用0(引自《河北農(nóng)業(yè)大學(xué)》，1997,1(4))空白對照：不攻毒攻毒對照和試驗(yàn)組：進(jìn)行雞白痢沙門氏菌攻毒，其中試驗(yàn)組，攻毒后進(jìn)行治療。備注：GOD酶活15u/g15(引自《河北農(nóng)業(yè)大學(xué)》，1997,1(4))空白對照：不攻毒（二）改善胃腸道酸性環(huán)境，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收

催化葡萄糖生成葡萄糖酸，在腸道內(nèi)發(fā)揮酸化劑的作用，創(chuàng)造酸性環(huán)境；降低胃中的pH值，激活胃蛋白酶，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收；；（引自《河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報》，2009:34（4））Ⅰ—對照組Ⅱ—添加0.15%GODⅢ—添加0.3%GODⅣ—添加0.4%GODⅤ—添加0.5%GOD備注：GOD酶活15u/g16（二）改善胃腸道酸性環(huán)境，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收（引自《河（三）促進(jìn)腸道益生菌的定殖，清除有害菌的繁殖。生成的葡萄糖酸可降低胃腸內(nèi)PH值，為乳酸菌生長制造酸性環(huán)境；葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖去除腸道內(nèi)氧氣，為厭氧有益菌雙歧桿菌的增殖制造厭氧環(huán)境；（引自《畜牧與獸醫(yī)雜志》，2011:43（6））Ⅰ—對照組Ⅱ—添加0.1%GODⅢ—添加0.2%GODⅣ—添加0.3%GOD備注：GOD酶活15u/g17（三）促進(jìn)腸道益生菌的定殖，清除有害菌的繁殖。（引自《畜牧與（四）生成的過氧化氫通過破壞霉菌毒素的結(jié)構(gòu)解除毒性。葡萄糖氧化酶可抑制黃曲霉、黑根霉、青霉等多種霉菌，對黃曲霉毒素B中毒癥有很好的預(yù)防效果；葡萄糖氧化酶作用生成一定量的過氧化氫，使如黃曲霉毒素這種具備氧雜萘鄰?fù)鶊F(tuán)的霉菌毒素被氧化脫氫，分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，解除毒性?；蛲ㄟ^氧化作用破壞呋喃環(huán)結(jié)構(gòu)，使環(huán)打開，毒性消失，從而達(dá)到脫毒的作用；(引自：馮定遠(yuǎn),左建軍著《飼料酶制劑的應(yīng)用技術(shù)體系》,31-25)18（四）生成的過氧化氫通過破壞霉菌毒素的結(jié)構(gòu)解除毒性。18（引自《生物學(xué)雜志》，2014，31(2)）

表2.添加葡萄糖氧化酶對解除霉菌毒素小雞存活率的比較（引自《動物營養(yǎng)學(xué)報》，2014，26(11)）

表1.葡萄糖氧化酶對飼喂霉變玉米小鼠體重的影響75000u/t備注：GOD酶活15u/g19（引自《生物學(xué)雜志》，2014，31(2)）

表2.葡萄糖氧化酶使用案例—夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗生素使用20葡萄糖氧化酶使用案例—夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗葡萄糖氧化酶使用案例—夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗生素使用21葡萄糖氧化酶使用案例—夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗（一）提高動物生產(chǎn)性能

安徽雨潤集團(tuán)滁州沃得養(yǎng)豬場應(yīng)用實(shí)例斷奶仔豬試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康钠咸烟茄趸笇嗄套胸i生長的影響試驗(yàn)時間2015/09/12-2015/10/13試驗(yàn)地點(diǎn)安徽滁州（雨潤集團(tuán)-滁州沃得利養(yǎng)殖場）試驗(yàn)對象24日齡斷奶仔豬，試驗(yàn)組和對照組各103頭試驗(yàn)過程實(shí)驗(yàn)組仔豬飼喂過程中按照333g/t添加葡萄糖氧化酶(GOD200),對照組飼喂相同的飼料但不添加葡萄糖氧化酶。飼喂30天后比較兩組豬的料肉比、腹瀉率和日增重。22試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康钠咸烟茄趸笇嗄套胸i生長的影響試驗(yàn)時間20232310.6%2410.6%24試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康牟煌砑恿科咸烟茄趸福?00u/g)對蛋種雞性能的影響試驗(yàn)時間2013年9月22日至10月27日試驗(yàn)地點(diǎn)鄭州滎陽蛋種雞養(yǎng)殖場，試驗(yàn)期35d試驗(yàn)對象25-28周齡的羅曼褐蛋種雞試驗(yàn)過程選取A、B、C、D4組雞作為實(shí)驗(yàn)對象，其中A組（對照）僅僅飼喂基礎(chǔ)日糧，B組（300g/tGOD）、C組（500g/tGOD）、D組（700g/tGOD）在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上添加了不同劑量的葡萄糖氧化酶。通過連續(xù)35日的持續(xù)跟蹤試驗(yàn)

，對比產(chǎn)蛋率、受精率和健雛率。（一）提高動物生產(chǎn)性能

鄭州滎陽某蛋種雞場應(yīng)用實(shí)例羅曼褐蛋種雞25試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康牟煌砑恿科咸烟茄趸福?00u/g)對蛋種文章《日糧中添加葡萄糖氧化酶對羅曼褐蛋種雞產(chǎn)蛋性能的影響》中國飼料添加劑

2014（2）26文章《日糧中添加葡萄糖氧化酶對羅曼褐蛋種雞產(chǎn)蛋性能的影響》中試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康腉OD200的使用對蛋雞產(chǎn)蛋率和蛋殼品質(zhì)的影響試驗(yàn)時間2015/10/30-2015/12/02試驗(yàn)地點(diǎn)湖北馬鞍山（鑫欣禽業(yè)有限公司）試驗(yàn)對象48周齡海蘭褐商品代蛋雞，實(shí)驗(yàn)組（3455只)、對照組（3463只）。試驗(yàn)過程選取335日齡的產(chǎn)蛋雞，其中實(shí)驗(yàn)組按照250g/t的比例在飲水中添加葡萄糖氧化酶，對照組飲水中不添加葡萄糖氧化酶，每日統(tǒng)計實(shí)驗(yàn)組和對照組的產(chǎn)蛋率及蛋殼品質(zhì)。海蘭褐蛋雞（一）提高動物生產(chǎn)性能安徽馬鞍山鑫欣禽業(yè)商品蛋雞應(yīng)用實(shí)例27試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康腉OD200的使用對蛋雞產(chǎn)蛋率和蛋殼品質(zhì)的影2.3%月平均282.3%月平均2855.6%

2955.6%29每日產(chǎn)蛋率對比30每日產(chǎn)蛋率對比30試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康钠咸烟茄趸缚箲?yīng)激作用試驗(yàn)時間2015/09/03-2015/09/30試驗(yàn)地點(diǎn)安徽郎溪（郎溪立大養(yǎng)殖場）試驗(yàn)對象42周齡櫻桃谷種鴨，試驗(yàn)組（306）、對照組（402）、對照組（500）、對照組（506），每組2000只，共計8000只。試驗(yàn)過程實(shí)驗(yàn)組飼料按照300g/t的量添加GOD200(不溶)，3個對照組飼喂同一基礎(chǔ)日糧不添加GOD。飼喂4周，每日統(tǒng)計產(chǎn)蛋率進(jìn)行比較。（一）提高動物生產(chǎn)性能

安徽郎溪立大肉種鴨場應(yīng)用實(shí)例櫻桃谷種鴨31試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康钠咸烟茄趸缚箲?yīng)激作用試驗(yàn)時間2015/092.786.346.5419.63延緩后期產(chǎn)蛋率的降低322.786.346.5419.63延緩后期產(chǎn)蛋率的降低32葡萄糖氧化酶使用案例—夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗生素使用33葡萄糖氧化酶使用案例—夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康钠咸烟茄趸柑娲股卦囼?yàn)試驗(yàn)時間2015年12月-2016年2月，試驗(yàn)期為61天

試驗(yàn)地點(diǎn)溫氏肉雞場試驗(yàn)對象1日齡黃羽肉雞試驗(yàn)過程選取三群雞作為試驗(yàn)對象，其中A組作為對照組正常按照飼養(yǎng)程序添加抗生素，B組、C組作為試驗(yàn)組，其中B組添加200g/t的GOD200，C組添加300g/t的GOD200。整個養(yǎng)殖期結(jié)束后對比A、B、C三組肉雞的日增重、料肉比和死淘率。（二）降低抗生素的使用廣東溫氏青年雞34試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康钠咸烟茄趸柑娲股卦囼?yàn)試驗(yàn)時間2015年不同濃度葡萄糖氧化酶對肉雞1~61天齡生長性能的影響35不同濃度葡萄糖氧化酶對肉雞1~61天齡生長性能的影響35試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康牟煌腉OD200添加量對青年雞性能的影響。試驗(yàn)時間2015年6月27日-2015年8月27日，試驗(yàn)期為60天

試驗(yàn)地點(diǎn)南陽市華東禽業(yè)青年雞場試驗(yàn)對象1日齡青年雞，每組10000羽。試驗(yàn)過程雛雞從1日齡開始試驗(yàn)，其中對照組僅僅飼喂基礎(chǔ)日糧，3個試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加不同濃度的GOD，A組（250g/t)、B組（200g/t)、C組（150g/t)。試驗(yàn)結(jié)束后（青年雞60日齡),對比分析4組雞群的體重、死淘率和用藥費(fèi)用。（二）降低抗生素的使用

南陽市華東禽業(yè)青年雞應(yīng)用實(shí)例青年雞36試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康牟煌腉OD200添加量對青年雞性能的影響。文章《葡萄糖氧化酶在青年雞中應(yīng)用效果分析》中獸醫(yī)學(xué)雜志

2015（10）37文章《葡萄糖氧化酶在青年雞中應(yīng)用效果分析》中獸醫(yī)學(xué)雜志

20試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康腉OD200對肉雞生長的促進(jìn)作用試驗(yàn)時間2015/09/16-2015/10/24試驗(yàn)地點(diǎn)安徽蕪湖（明瑋生態(tài)科技園有限公司）試驗(yàn)對象3日齡817商品肉雞，實(shí)驗(yàn)組和對照組各12000只。試驗(yàn)過程3日齡開始實(shí)驗(yàn)組全群飲用葡萄糖氧化酶，全程除開口藥外不添加任何藥物（全程成本550元）；對照組從3日齡開始按照原用藥程序飲用（全程成本7200元），不添加葡萄糖氧化酶。出欄時比較兩組雞的出欄體重、料肉比和死淘率。817商品肉雞（二）降低抗生素的使用安徽蕪湖某肉雞養(yǎng)殖場應(yīng)用實(shí)例38試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康腉OD200對肉雞生長的促進(jìn)作用試驗(yàn)時間203939試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康腉OD100對肉鴨生長性能的影響試驗(yàn)時間2014年7月14日-2014年8月25日，試驗(yàn)期為42天

試驗(yàn)地點(diǎn)高唐六和榮達(dá)下屬肉鴨養(yǎng)殖場試驗(yàn)對象1日齡櫻桃谷鴨，每組6000羽。試驗(yàn)過程選擇同一批24000羽的1日齡雛鴨分為4組，飼喂同一基礎(chǔ)日糧。3個試驗(yàn)組在飲水中添加500g/t的葡糖糖氧化酶的同時按照表1對用藥計劃進(jìn)行修改。試驗(yàn)結(jié)束后對比4組出欄肉鴨的體重、死淘率、料肉比。表1：

各組用藥情況對照組ABC日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧葡萄糖氧化酶——500g/t500g/t500g/t抗球蟲藥正常添加正常添加減半正常添加腸炎藥正常添加正常添加正常添加減半（二）降低抗生素使用山東高唐榮達(dá)某肉鴨養(yǎng)殖場應(yīng)用實(shí)例40試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康腉OD100對肉鴨生長性能的影響試驗(yàn)時間204141（二）降低抗生素使用西北農(nóng)林科技大學(xué)試驗(yàn)場應(yīng)用實(shí)例AA肉雞試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康牟煌N來源GOD200對肉雞性能的影響試驗(yàn)時間2015年11月-2015年12月，試驗(yàn)期為42d試驗(yàn)地點(diǎn)西北農(nóng)林科技大學(xué)試驗(yàn)場試驗(yàn)對象AA肉雞試驗(yàn)過程選取840只雞分為4個組，其中陰、陽性對照各1組，試驗(yàn)組2個，按照表1在飼料或飲水中添加不同的產(chǎn)品。每個組設(shè)7個重復(fù)。試驗(yàn)結(jié)束后對比各組雞群的體重和料肉比。42（二）降低抗生素使用AA肉雞試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康牟煌N來源GON組P組A組B組日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧GOD(黑曲霉）00300g/t0GOD（特異青霉）000300g/t抗生素組--+----備注：抗生素組包含硫酸粘桿菌素20g/t，恩拉霉素6g/t，鹽霉素鈉60g/t。不同菌種來源添加活力一致。表1.各組藥物使用情況43N組P組A組B組日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧GOD(44444545總結(jié)葡萄糖氧化酶催化的反應(yīng)通過消耗氧氣制造厭氧環(huán)境、清除氧自由基；通過產(chǎn)生葡萄糖酸制造腸道酸性環(huán)境促進(jìn)益生菌的占位和營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收；通過產(chǎn)生的過氧化氫消除霉菌毒素的毒性。應(yīng)用過程中添加葡萄糖氧化酶后可以有效的降低仔豬腹瀉；延長蛋雞產(chǎn)蛋高峰、減少軟殼蛋和白殼蛋；減少甚至消除肉雞養(yǎng)殖過程中抗生素的使用。當(dāng)下食品安全問題日益得到重視，葡萄糖氧化酶必將為健康養(yǎng)殖提供新的突破口。46總結(jié)葡萄糖氧化酶催化的反應(yīng)通過消耗氧氣制造厭氧環(huán)境、清除氧自貴公司葡萄糖氧化酶與其它廠家的區(qū)別：夏盛葡萄糖氧化酶的基因來源為青霉，而其它廠家的產(chǎn)品來源于黑曲霉，青霉源的葡萄糖氧化酶擁有更高的底物結(jié)合能力，反應(yīng)速率更快。菌種特異青霉黑曲霉分子量150kD152kD碳?xì)浠衔?1%16%氨基酸（賴氨酸、苯丙氨酸）較多（組氨酸、精氨酸、酪氨酸）較多Km(米氏常數(shù))1130Vmax

值925458（引自?BiotechnologyAdvance?

27(2009):489-501）酶學(xué)小知識貴公司葡萄糖氧化酶與其它廠家的區(qū)別：菌種特異青霉黑曲霉分子量預(yù)混料中含有高濃度的礦物元素（金屬離子），會不會導(dǎo)致酶失活？在酶促反應(yīng)中，酶的活性受到金屬離子的影響。但是，酶促反應(yīng)要在水溶液中才能進(jìn)行，也就是說只有水分含量達(dá)到一定程度后才可以。預(yù)混料雖然含有大量的金屬離子，但是水分含量很低（≤12%），酶促反應(yīng)難以發(fā)生，所以不會導(dǎo)致酶失活。預(yù)混料中含有高濃度的礦物元素（金屬離子），會不會導(dǎo)致酶失活？顆粒型的酶制劑是不是耐高溫性能更好？使用效果是不是更好？酶制劑能否耐高溫并不決定于是否是顆?；蚴欠蹱?，而是受到多種因素的影響（菌種、載體等等），首先是菌種的影響最大，如果是耐高溫的菌種，那么即使是粉狀酶，其耐高溫性能也不錯，如高溫淀粉酶。作為同一種酶，如果經(jīng)過了包被，包被材料合格，其耐溫性有一定的提高，但提高的程度受到包被工藝和包被材料的影響。就使用效果而言，顆粒酶并不一定比粉狀酶好，第一，顆粒酶粒度和比重與飼料不完全一致，導(dǎo)致混合不均勻，或分層，從而導(dǎo)致效果不穩(wěn)定或不明顯。顆粒型的酶制劑是不是耐高溫性能更好？使用效果是不是更好？酶的耐高溫性能你們是怎么檢測的？可信度怎樣？酶活的耐高溫性能測定方法有很多，一般采用將一定量的酶樣品放置在一定溫度的恒溫箱內(nèi)，過2、5、10分鐘，將樣品取出，測定酶活。也可模擬制粒過程，或直接在飼料中添加幾倍酶制劑，經(jīng)過調(diào)制制粒后測定酶活損失，此方法更能代表酶的耐高溫性能。酶的耐高溫性能你們是怎么檢測的？可信度怎樣？僅僅測定和比較酶活，不能確定哪種酶好，而做動物試驗(yàn)又很麻煩；有沒有比較可靠而簡單的方法？

可以采用體外降解試驗(yàn)的方法來比較不同酶的效果。夏盛公司在同行業(yè)中率先推出體外和體內(nèi)酶解作用的關(guān)聯(lián)系數(shù)和相關(guān)性，即體外降解效果好的酶制劑在動物飼養(yǎng)試驗(yàn)中也能表現(xiàn)出較好效果。僅僅測定和比較酶活，不能確定哪種酶好，而做動物試驗(yàn)又很麻煩；目前飼料中添加的酶都包括哪些酶種？目前飼料中添加的酶種主要包括消化性酶和非消化性酶，消化性酶指的是動物體內(nèi)能分泌的酶種，主要有：淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、脂肪酶等；非消化性酶指的是動物體內(nèi)分泌很少或缺少的酶，主要是非淀粉多糖酶（NSP酶）：木聚糖酶、纖維素酶、甘露聚糖酶、β－葡聚糖酶、果膠酶、α－半乳糖苷酶等。市場上的飼料復(fù)合酶并不是都含有上述九種酶，一般根據(jù)飼料原料和畜禽種類及生理狀態(tài)不同，產(chǎn)品所含酶種不同。目前飼料中添加的酶都包括哪些酶種？飼料中為什么要使用NSP酶？因?yàn)轱暳显现泻卸喾N非淀粉多糖（NSP），這些非淀粉多糖有很強(qiáng)的抗?fàn)I養(yǎng)作用。比如：在腸道內(nèi)吸水變粘，增加食糜和糞便粘度；共同構(gòu)成原料細(xì)胞壁，包裹營養(yǎng)物質(zhì)，影響飼料的消化吸收。使用NSP復(fù)合酶，能提高飼料原料的營養(yǎng)養(yǎng)分的利用率，降低NSP的抗?fàn)I養(yǎng)作用，減小不同批次飼料原料質(zhì)量的變異，穩(wěn)定飼料產(chǎn)品品質(zhì)。

飼料中為什么要使用NSP酶？夏盛葡萄糖氧化酶介紹課件夏盛葡萄糖氧化酶介紹課件歡迎蒞臨我司參觀指導(dǎo)56歡迎蒞臨我司參觀指導(dǎo)56

飼用葡萄糖氧化酶作用機(jī)理及功效葡萄糖氧化酶介紹葡萄糖氧化酶應(yīng)用研究內(nèi)容提綱總結(jié)夏盛葡萄糖氧化酶使用案例57

飼用葡萄糖氧化酶作用機(jī)理及功效葡萄糖氧化酶介紹葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶簡介葡萄糖氧化酶是一種氧化還原酶，在分子氧的存在下，專一地氧化β-D-葡萄糖生成D-葡萄糖酸內(nèi)酯，同時消耗氧，生成過氧化氫；過氧化氫在過氧化氫酶作用下，分解生成水和1/2氧，而后水又與葡萄糖酸內(nèi)酯結(jié)合產(chǎn)生葡萄糖酸。在此過程中，葡萄糖氧化酶的特點(diǎn)是能夠消耗氧氣，催化葡萄糖氧化，最終產(chǎn)物是葡萄糖酸。GOD催化β-D-葡萄糖的速度是催化α-D-葡萄糖的150倍.反應(yīng)方程式：58葡萄糖氧化酶簡介葡萄糖氧化酶是一種氧化還原酶，在分子氧的存在葡萄糖氧化酶的來源

1904年發(fā)現(xiàn)于黑曲霉菌絲；1928年確定它是一種氧化還原酶，也是成功應(yīng)用于工業(yè)的少數(shù)幾種非水解酶之一；

1960年Kusai等、1964年P(guān)azur和Swobodda分別從青霉和黑曲霉中提純葡萄糖氧化酶。1995年,Petruccioli等用青霉的突變株生產(chǎn)出葡萄糖氧化酶。1999年農(nóng)業(yè)部將其定為12種允許使用的飼用酶制劑之一；目前生產(chǎn)上一般采用的霉菌是黑曲霉和青霉屬菌株。

葡萄糖氧化酶的來源1904年發(fā)現(xiàn)于黑曲霉菌絲；《允許使用的飼料添加劑目錄》青霉黑曲霉60《允許使用的飼料添加劑目錄》青霉黑曲霉4不同菌種來源對比

菌種特異青霉黑曲霉分子量150kD152kD碳?xì)浠衔?1%16%氨基酸（賴氨酸、苯丙氨酸）較多（組氨酸、精氨酸、酪氨酸）較多Km(米氏常數(shù))1130Vmax

值925458Km表示酶和底物之間的親和能力，Km值越大，親和能力越弱，反之亦然。在同等底物濃度的條件下，Km值越大，其所需的酶濃度越大，即所需添加量也越大。（引自?BiotechnologyAdvance?

27(2009):489-501）不同菌種來源對比菌種特異青霉黑曲霉分子量150kD152kD反應(yīng)時間pH值剩余葡萄糖值（%）特異青霉黑曲霉特異青霉黑曲霉0h8.018.21h6.336.817.117.73h6.216.5615.516.36h6.146.3714.415.48h5.716.057.99.1目的：比較特異青霉和黑曲霉的產(chǎn)物生成量及底物消耗量步驟：配制18%葡萄糖溶液，測定初始葡萄糖含量，加入一定量碳酸鈣，調(diào)試pH值，分別加入同等活力不同來源葡萄糖氧化酶，以及過量過氧化氫酶，磁力攪拌器，用鼓風(fēng)機(jī)通入一個大氣壓的空氣，保持氧氣充足。62反應(yīng)時間pH值剩余葡萄糖值（%）特異青霉黑曲霉特異青霉黑曲霉葡萄糖氧化酶—酶學(xué)特性在pH為4.0～8.0之間具有很好的穩(wěn)定性，最適pH值為6.0葡萄糖氧化酶—酶學(xué)特性在pH為4.0～8.0之間具有很好的穩(wěn)648葡萄糖氧化酶—酶學(xué)特性枯草桿菌蛋白酶(pH6.0)、胰蛋白酶(pH6.8)和胃蛋白酶(pH4.5)不能分解葡萄糖氧化酶—酶學(xué)特性枯草桿菌蛋白酶(pH6.0)、胰蛋白酶葡萄糖氧化酶—酶學(xué)特性作用溫度為20℃～60℃,最適溫度35℃耐溫性能良好，經(jīng)85℃處理1min,酶活保持在80%以上耐溫性能15%濕度條件下，混合葡萄糖氧化酶和飼料后制粒結(jié)果葡萄糖氧化酶—酶學(xué)特性作用溫度為20℃～60℃,最適溫度3存儲穩(wěn)定性良好，避光、干燥處保存12個月活力不低于90%。67存儲穩(wěn)定性良好，避光、干燥處保存12個月活力不低于90%。1在畜禽機(jī)體內(nèi)的作用機(jī)理及功效清除過量自由基保持腸道上皮完整減少病原入侵耗氧，抗氧化有機(jī)弱酸、提供酸性環(huán)境過氧化氫、強(qiáng)氧化性β-D葡萄糖＋H2O2葡萄糖酸O2＋H2OGOD過氧化氫酶消除腸道病原菌生存環(huán)境，保持腸道菌群生態(tài)平衡提高消化酶活，改善飼料品質(zhì)，提高飼料消化率緩解霉菌毒素中毒保護(hù)腸道健康維護(hù)腸道健康、提高免疫功能，促進(jìn)消化吸收、替代抗生素、預(yù)防霉菌毒素中毒1/2O2＋在畜禽機(jī)體內(nèi)的作用機(jī)理及功效清除過量自由基耗氧，抗氧化有機(jī)弱（一）保持腸道上皮細(xì)胞的完整，抑制球蟲和病原菌的入侵1994年趙文等在《氧自由基與腸道損傷》中表明：機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的氧自由基會破壞腸道上皮細(xì)胞的完整性造成腸道損傷。在葡萄糖氧化酶催化的反應(yīng)過程中，可以清除氧自由基，保護(hù)腸道健康，從而抑制病原菌入侵。GOD的還原過程69（一）保持腸道上皮細(xì)胞的完整，抑制球蟲和病原菌的入侵GOD的GOD組0~15日齡0.20%GOD拌料；16~60日齡用0.12%~0.16%GOD拌料，如有球蟲則飲水添地克珠利1~3d。

對照組15日齡起飲水添加地克珠利至60日齡出舍，發(fā)生球蟲病則飲三維治球粉3d。(引自《湖北畜牧獸醫(yī)》,2004(1):31-33)備注：GOD酶活15u/g70GOD組0~15日齡0.20%GOD拌料；16~60日齡用0(引自《河北農(nóng)業(yè)大學(xué)》，1997,1(4))空白對照：不攻毒攻毒對照和試驗(yàn)組：進(jìn)行雞白痢沙門氏菌攻毒，其中試驗(yàn)組，攻毒后進(jìn)行治療。備注：GOD酶活15u/g71(引自《河北農(nóng)業(yè)大學(xué)》，1997,1(4))空白對照：不攻毒（二）改善胃腸道酸性環(huán)境，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收

催化葡萄糖生成葡萄糖酸，在腸道內(nèi)發(fā)揮酸化劑的作用，創(chuàng)造酸性環(huán)境；降低胃中的pH值，激活胃蛋白酶，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收；；（引自《河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報》，2009:34（4））Ⅰ—對照組Ⅱ—添加0.15%GODⅢ—添加0.3%GODⅣ—添加0.4%GODⅤ—添加0.5%GOD備注：GOD酶活15u/g72（二）改善胃腸道酸性環(huán)境，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收（引自《河（三）促進(jìn)腸道益生菌的定殖，清除有害菌的繁殖。生成的葡萄糖酸可降低胃腸內(nèi)PH值，為乳酸菌生長制造酸性環(huán)境；葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖去除腸道內(nèi)氧氣，為厭氧有益菌雙歧桿菌的增殖制造厭氧環(huán)境；（引自《畜牧與獸醫(yī)雜志》，2011:43（6））Ⅰ—對照組Ⅱ—添加0.1%GODⅢ—添加0.2%GODⅣ—添加0.3%GOD備注：GOD酶活15u/g73（三）促進(jìn)腸道益生菌的定殖，清除有害菌的繁殖。（引自《畜牧與（四）生成的過氧化氫通過破壞霉菌毒素的結(jié)構(gòu)解除毒性。葡萄糖氧化酶可抑制黃曲霉、黑根霉、青霉等多種霉菌，對黃曲霉毒素B中毒癥有很好的預(yù)防效果；葡萄糖氧化酶作用生成一定量的過氧化氫，使如黃曲霉毒素這種具備氧雜萘鄰?fù)鶊F(tuán)的霉菌毒素被氧化脫氫，分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，解除毒性?；蛲ㄟ^氧化作用破壞呋喃環(huán)結(jié)構(gòu)，使環(huán)打開，毒性消失，從而達(dá)到脫毒的作用；(引自：馮定遠(yuǎn),左建軍著《飼料酶制劑的應(yīng)用技術(shù)體系》,31-25)74（四）生成的過氧化氫通過破壞霉菌毒素的結(jié)構(gòu)解除毒性。18（引自《生物學(xué)雜志》，2014，31(2)）

表2.添加葡萄糖氧化酶對解除霉菌毒素小雞存活率的比較（引自《動物營養(yǎng)學(xué)報》，2014，26(11)）

表1.葡萄糖氧化酶對飼喂霉變玉米小鼠體重的影響75000u/t備注：GOD酶活15u/g75（引自《生物學(xué)雜志》，2014，31(2)）

表2.葡萄糖氧化酶使用案例—夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗生素使用76葡萄糖氧化酶使用案例—夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗葡萄糖氧化酶使用案例—夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗生素使用77葡萄糖氧化酶使用案例—夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗（一）提高動物生產(chǎn)性能

安徽雨潤集團(tuán)滁州沃得養(yǎng)豬場應(yīng)用實(shí)例斷奶仔豬試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康钠咸烟茄趸笇嗄套胸i生長的影響試驗(yàn)時間2015/09/12-2015/10/13試驗(yàn)地點(diǎn)安徽滁州（雨潤集團(tuán)-滁州沃得利養(yǎng)殖場）試驗(yàn)對象24日齡斷奶仔豬，試驗(yàn)組和對照組各103頭試驗(yàn)過程實(shí)驗(yàn)組仔豬飼喂過程中按照333g/t添加葡萄糖氧化酶(GOD200),對照組飼喂相同的飼料但不添加葡萄糖氧化酶。飼喂30天后比較兩組豬的料肉比、腹瀉率和日增重。78試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康钠咸烟茄趸笇嗄套胸i生長的影響試驗(yàn)時間20792310.6%8010.6%24試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康牟煌砑恿科咸烟茄趸福?00u/g)對蛋種雞性能的影響試驗(yàn)時間2013年9月22日至10月27日試驗(yàn)地點(diǎn)鄭州滎陽蛋種雞養(yǎng)殖場，試驗(yàn)期35d試驗(yàn)對象25-28周齡的羅曼褐蛋種雞試驗(yàn)過程選取A、B、C、D4組雞作為實(shí)驗(yàn)對象，其中A組（對照）僅僅飼喂基礎(chǔ)日糧，B組（300g/tGOD）、C組（500g/tGOD）、D組（700g/tGOD）在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上添加了不同劑量的葡萄糖氧化酶。通過連續(xù)35日的持續(xù)跟蹤試驗(yàn)

，對比產(chǎn)蛋率、受精率和健雛率。（一）提高動物生產(chǎn)性能

鄭州滎陽某蛋種雞場應(yīng)用實(shí)例羅曼褐蛋種雞81試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康牟煌砑恿科咸烟茄趸福?00u/g)對蛋種文章《日糧中添加葡萄糖氧化酶對羅曼褐蛋種雞產(chǎn)蛋性能的影響》中國飼料添加劑

2014（2）82文章《日糧中添加葡萄糖氧化酶對羅曼褐蛋種雞產(chǎn)蛋性能的影響》中試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康腉OD200的使用對蛋雞產(chǎn)蛋率和蛋殼品質(zhì)的影響試驗(yàn)時間2015/10/30-2015/12/02試驗(yàn)地點(diǎn)湖北馬鞍山（鑫欣禽業(yè)有限公司）試驗(yàn)對象48周齡海蘭褐商品代蛋雞，實(shí)驗(yàn)組（3455只)、對照組（3463只）。試驗(yàn)過程選取335日齡的產(chǎn)蛋雞，其中實(shí)驗(yàn)組按照250g/t的比例在飲水中添加葡萄糖氧化酶，對照組飲水中不添加葡萄糖氧化酶，每日統(tǒng)計實(shí)驗(yàn)組和對照組的產(chǎn)蛋率及蛋殼品質(zhì)。海蘭褐蛋雞（一）提高動物生產(chǎn)性能安徽馬鞍山鑫欣禽業(yè)商品蛋雞應(yīng)用實(shí)例83試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康腉OD200的使用對蛋雞產(chǎn)蛋率和蛋殼品質(zhì)的影2.3%月平均842.3%月平均2855.6%

8555.6%29每日產(chǎn)蛋率對比86每日產(chǎn)蛋率對比30試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康钠咸烟茄趸缚箲?yīng)激作用試驗(yàn)時間2015/09/03-2015/09/30試驗(yàn)地點(diǎn)安徽郎溪（郎溪立大養(yǎng)殖場）試驗(yàn)對象42周齡櫻桃谷種鴨，試驗(yàn)組（306）、對照組（402）、對照組（500）、對照組（506），每組2000只，共計8000只。試驗(yàn)過程實(shí)驗(yàn)組飼料按照300g/t的量添加GOD200(不溶)，3個對照組飼喂同一基礎(chǔ)日糧不添加GOD。飼喂4周，每日統(tǒng)計產(chǎn)蛋率進(jìn)行比較。（一）提高動物生產(chǎn)性能

安徽郎溪立大肉種鴨場應(yīng)用實(shí)例櫻桃谷種鴨87試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康钠咸烟茄趸缚箲?yīng)激作用試驗(yàn)時間2015/092.786.346.5419.63延緩后期產(chǎn)蛋率的降低882.786.346.5419.63延緩后期產(chǎn)蛋率的降低32葡萄糖氧化酶使用案例—夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗生素使用89葡萄糖氧化酶使用案例—夏盛（一）提高動物生產(chǎn)性能（二）降低抗試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康钠咸烟茄趸柑娲股卦囼?yàn)試驗(yàn)時間2015年12月-2016年2月，試驗(yàn)期為61天

試驗(yàn)地點(diǎn)溫氏肉雞場試驗(yàn)對象1日齡黃羽肉雞試驗(yàn)過程選取三群雞作為試驗(yàn)對象，其中A組作為對照組正常按照飼養(yǎng)程序添加抗生素，B組、C組作為試驗(yàn)組，其中B組添加200g/t的GOD200，C組添加300g/t的GOD200。整個養(yǎng)殖期結(jié)束后對比A、B、C三組肉雞的日增重、料肉比和死淘率。（二）降低抗生素的使用廣東溫氏青年雞90試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康钠咸烟茄趸柑娲股卦囼?yàn)試驗(yàn)時間2015年不同濃度葡萄糖氧化酶對肉雞1~61天齡生長性能的影響91不同濃度葡萄糖氧化酶對肉雞1~61天齡生長性能的影響35試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康牟煌腉OD200添加量對青年雞性能的影響。試驗(yàn)時間2015年6月27日-2015年8月27日，試驗(yàn)期為60天

試驗(yàn)地點(diǎn)南陽市華東禽業(yè)青年雞場試驗(yàn)對象1日齡青年雞，每組10000羽。試驗(yàn)過程雛雞從1日齡開始試驗(yàn)，其中對照組僅僅飼喂基礎(chǔ)日糧，3個試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加不同濃度的GOD，A組（250g/t)、B組（200g/t)、C組（150g/t)。試驗(yàn)結(jié)束后（青年雞60日齡),對比分析4組雞群的體重、死淘率和用藥費(fèi)用。（二）降低抗生素的使用

南陽市華東禽業(yè)青年雞應(yīng)用實(shí)例青年雞92試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康牟煌腉OD200添加量對青年雞性能的影響。文章《葡萄糖氧化酶在青年雞中應(yīng)用效果分析》中獸醫(yī)學(xué)雜志

2015（10）93文章《葡萄糖氧化酶在青年雞中應(yīng)用效果分析》中獸醫(yī)學(xué)雜志

20試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康腉OD200對肉雞生長的促進(jìn)作用試驗(yàn)時間2015/09/16-2015/10/24試驗(yàn)地點(diǎn)安徽蕪湖（明瑋生態(tài)科技園有限公司）試驗(yàn)對象3日齡817商品肉雞，實(shí)驗(yàn)組和對照組各12000只。試驗(yàn)過程3日齡開始實(shí)驗(yàn)組全群飲用葡萄糖氧化酶，全程除開口藥外不添加任何藥物（全程成本550元）；對照組從3日齡開始按照原用藥程序飲用（全程成本7200元），不添加葡萄糖氧化酶。出欄時比較兩組雞的出欄體重、料肉比和死淘率。817商品肉雞（二）降低抗生素的使用安徽蕪湖某肉雞養(yǎng)殖場應(yīng)用實(shí)例94試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康腉OD200對肉雞生長的促進(jìn)作用試驗(yàn)時間209539試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康腉OD100對肉鴨生長性能的影響試驗(yàn)時間2014年7月14日-2014年8月25日，試驗(yàn)期為42天

試驗(yàn)地點(diǎn)高唐六和榮達(dá)下屬肉鴨養(yǎng)殖場試驗(yàn)對象1日齡櫻桃谷鴨，每組6000羽。試驗(yàn)過程選擇同一批24000羽的1日齡雛鴨分為4組，飼喂同一基礎(chǔ)日糧。3個試驗(yàn)組在飲水中添加500g/t的葡糖糖氧化酶的同時按照表1對用藥計劃進(jìn)行修改。試驗(yàn)結(jié)束后對比4組出欄肉鴨的體重、死淘率、料肉比。表1：

各組用藥情況對照組ABC日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧葡萄糖氧化酶——500g/t500g/t500g/t抗球蟲藥正常添加正常添加減半正常添加腸炎藥正常添加正常添加正常添加減半（二）降低抗生素使用山東高唐榮達(dá)某肉鴨養(yǎng)殖場應(yīng)用實(shí)例96試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康腉OD100對肉鴨生長性能的影響試驗(yàn)時間209741（二）降低抗生素使用西北農(nóng)林科技大學(xué)試驗(yàn)場應(yīng)用實(shí)例AA肉雞試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康牟煌N來源GOD200對肉雞性能的影響試驗(yàn)時間2015年11月-2015年12月，試驗(yàn)期為42d試驗(yàn)地點(diǎn)西北農(nóng)林科技大學(xué)試驗(yàn)場試驗(yàn)對象AA肉雞試驗(yàn)過程選取840只雞分為4個組，其中陰、陽性對照各1組，試驗(yàn)組2個，按照表1在飼料或飲水中添加不同的產(chǎn)品。每個組設(shè)7個重復(fù)。試驗(yàn)結(jié)束后對比各組雞群的體重和料肉比。98（二）降低抗生素使用AA肉雞試驗(yàn)方案試驗(yàn)?zāi)康牟煌N來源GON組P組A組B組日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧GOD(黑曲霉）00300g/t0GOD（特異青霉）000300g/t抗生素組--+----備注：抗生素組包含硫酸粘桿菌素20g/t，恩拉霉素6g/t，鹽霉素鈉60g/t。不同菌種來源添加活力一致。表1.各組藥物使用情況99N組P組A組B組日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)日糧GO