實九、網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)課件

網(wǎng)織紅細(xì)胞（Ret）

是晚幼紅細(xì)胞脫核后到成熟紅細(xì)胞間的過渡細(xì)胞，是尚未完全成熟的紅細(xì)胞，其胞漿內(nèi)殘存有嗜堿性的RNA物質(zhì)。嗜堿性物質(zhì)與染料凝聚成藍(lán)色顆粒，顆粒與顆粒連綴成線，線連接成網(wǎng)，故而得名。分型：絲球型、網(wǎng)型、破網(wǎng)型、點粒型。（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型）2022/12/181臨床檢驗技術(shù)計數(shù)方法1、普通光學(xué)顯微鏡法：活體染色后推片鏡檢2、網(wǎng)織細(xì)胞計數(shù)儀法：熒光染色后用流式細(xì)胞術(shù)計數(shù)2022/12/182臨床檢驗技術(shù)實驗九網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)一、實驗原理

網(wǎng)織紅細(xì)胞胞漿內(nèi)殘存有嗜堿性的RNA物質(zhì)，經(jīng)煌焦油藍(lán)或新亞甲藍(lán)活體染色后RNA中負(fù)電荷基團(tuán)與帶正電荷的有色基團(tuán)結(jié)合，凝聚成顆粒呈淺藍(lán)或藍(lán)黑色的點狀、絲狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，可在顯微鏡下識別。計數(shù)1000個紅細(xì)胞中所有的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)直接報告其百分比，或×紅細(xì)胞計數(shù)結(jié)果報告其絕對值。2022/12/183臨床檢驗技術(shù)三、操作步驟1.染色：（試管法）取染液2滴入試管，加血2滴混勻，封閉好，待15分鐘以上時間，2.推片：取混合液1小滴于載玻片的一端，推制成薄而均勻的血膜，3.低倍鏡瀏覽，選取紅細(xì)胞分布均勻網(wǎng)織紅細(xì)胞染色較好的部分（體尾交界處），滴香柏油轉(zhuǎn)換至油鏡，在Miller窺盤下計數(shù)小方格中的RBC數(shù)和大方格中的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)（或數(shù)出整個視野中的RBC總數(shù)和其中的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，換一視野同法計數(shù)至幾個視野RBC總數(shù)>1000為止）。2022/12/185臨床檢驗技術(shù)

Miller窺盤

A31B將Miller窺盤放在顯微鏡目鏡中,通過窺盤中大小方格間的9比1比例關(guān)系計算RBC數(shù)和Ret數(shù)。2022/12/186臨床檢驗技術(shù)2022/12/187臨床檢驗技術(shù)四、計算

1.Miller窺盤法：網(wǎng)織紅細(xì)胞（Retic）百分率(%)=（大方格內(nèi)Retic總數(shù)）/（小方格內(nèi)RBC總數(shù)×9）×100%2.直接計數(shù)法：網(wǎng)織紅細(xì)胞（Retic）百分率(%)=多個視野內(nèi)Retic總數(shù)/多個視野內(nèi)RBC總數(shù)×100%2022/12/188臨床檢驗技術(shù)六、參考值成人：0.005-0.015（0.5%-1.5%）新生兒：0.02-0.06（2%-6%）兒童：0.005-0.075（