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文檔簡介
紅細胞及白細胞計數(shù)實驗目的掌握顯微鏡下紅細胞和白細胞計數(shù)方法實驗原理用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù),沖入計數(shù)池后,在顯微鏡下計數(shù)一定體積內(nèi)的紅細胞數(shù)量,經(jīng)換算求出每升血液中的紅細胞數(shù)。用白細胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù),同時破壞溶解紅細胞。將稀釋的血液沖入計數(shù)池后,在顯微鏡下計數(shù)一定體積內(nèi)的白細胞數(shù),經(jīng)換算求出每升血液中的白細胞數(shù)。1mm 3mm 白細胞計數(shù)區(qū)域白細胞計數(shù)區(qū)域白細胞計數(shù)區(qū)域
白細胞計數(shù)區(qū)域紅細胞和血小板計數(shù)區(qū)域大方格鏡下示意圖 中方格鏡下示意圖 器材:顯微鏡、改良計數(shù)板、試管、微量吸管、移液管、洗耳球、試管架試劑:生理鹽水、紅細胞、白細胞稀釋液標本:EDTA抗凝血實驗器材實驗操作(一):紅細胞計數(shù)1.加稀釋液:
取小試管1支,加紅細胞稀釋液1.99ml。2.加血:
用清潔干燥微量吸管吸取抗凝血10μl,擦去管外余血,輕輕加至紅細胞稀釋液底部,再輕吸上清液清洗吸管2~3次,立即混勻。3.充池:
混勻后用微量吸管將紅細胞懸液沖入計數(shù)池,室溫下平放3~5分鐘,待細胞下沉后于顯微鏡下計數(shù)。4.計數(shù):
用高倍鏡依次計數(shù)中央大方格內(nèi)4角和正中共5個中方格內(nèi)的紅細胞數(shù)。5.計算:
紅細胞/L=N×25/5×10×106×200=N×1010=N/100×1012
N:表示5個中方格內(nèi)數(shù)得的紅細胞數(shù)。
×25/5:將5個中方格紅細胞數(shù)換算成1個大方格紅細胞數(shù)。
×10:將1個大方格紅細胞數(shù)換算成1μl血液內(nèi)紅細胞數(shù)。
106:1L=106μl200:為血液的稀釋倍數(shù)實驗操作(二):白細胞計數(shù)1.加白細胞稀釋液:
用吸管吸取白細胞稀釋液0.38ml于小試管中。2.加血:
用清潔干燥微量吸管吸取抗凝血20μl,擦去管外余血,輕輕加至白細胞稀釋液底部,再輕吸上清液清洗吸管2~3次,混勻。3.充池:
混勻后用微量吸管將完全變?yōu)樽睾稚募毎麘乙簺_入計數(shù)池,室溫下平放3~5分鐘,待細胞下沉后于顯微鏡下計數(shù)。4.計數(shù):
用低倍鏡依次計數(shù)4個大方格內(nèi)的白細胞數(shù)。5.計算:
白細胞/L=N/4×10×106×20=N/20×109/LN:表示4個大方格內(nèi)數(shù)得的白細胞總數(shù)。
×10:將1個大方格白細胞數(shù)換算成1μl血液內(nèi)白細胞數(shù)
106:1L=1
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