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(共16套)最新人教版高中生物選修1(全冊(cè))配套PPT課件匯總?cè)绻麜簳r(shí)不需要,請(qǐng)您把我收藏一下。因?yàn)橐坏╆P(guān)閉本頁(yè),可能就永遠(yuǎn)失去我了哦!請(qǐng)別問(wèn)我是怎么知道的!一次小下載安逸一整年!小魔方站作品盜版必究目錄2■高中生物課件(人教課標(biāo)版)課題1:果酒和果醋的制作涼州詞
唐朝——王翰葡萄美酒夜光杯,欲飲琵琶馬上催。醉臥沙場(chǎng)君莫笑,古來(lái)征戰(zhàn)幾人回。
果酒果醋在釀造過(guò)程中,水果中富含的維生素、礦物質(zhì)、氨基酸等被很好地保存,大大提高了原醋液的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。實(shí)驗(yàn)表明,果醋中的醋酸、乳酸、氨基酸甘油和醛類化合物,對(duì)人的皮膚有柔和的刺激作用,能使血管擴(kuò)張,增加血液循環(huán),從而起到延緩衰老的作用。
以蘋果、葡萄、山楂等為原料生產(chǎn)的果酒果醋飲料迎合了現(xiàn)代都市人綠色、健康的消費(fèi)理念,也同時(shí)滿足了現(xiàn)代都市女性保健、美容的需求。
學(xué)習(xí)目標(biāo)1、說(shuō)明果酒和果醋的制作原理2、設(shè)計(jì)果酒和果醋的發(fā)酵裝置3、了解制作果酒和果醋的過(guò)程1、果酒的制作原理(1)果酒制作的原理是什么?寫出反應(yīng)式。(2)制作果酒的原料是什么?如果制作葡萄酒,取材時(shí)你認(rèn)為應(yīng)先沖洗還是先除去枝梗?(3)制作葡萄酒的酵母菌主要來(lái)源于哪里?其它雜菌會(huì)不會(huì)引起發(fā)酵液的污染?你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?(4)果酒制作時(shí)應(yīng)給予怎樣的溫度、空氣條件?(5)關(guān)于酵母菌的生物學(xué)特性你知道哪些?一、基礎(chǔ)知識(shí)分析1、果酒的制作原理(1)果酒制作的原理是什么?寫出反應(yīng)式。
酵母是兼性厭氧微生物,有氧時(shí)進(jìn)行有氧呼吸;在厭氧條件下,將雙糖或單糖進(jìn)行糖酵解,并進(jìn)行乙醇發(fā)酵,產(chǎn)生乙醇。條件:酶和溫度
C6H12O6
+6O2CO2+6H2OC6H12O62CH3CH2OH+2CO21、果酒的制作原理(2)制作果酒的原料是什么?如果制作葡萄酒,取材時(shí)你認(rèn)為應(yīng)先沖洗還是先除去枝梗?一、基礎(chǔ)知識(shí)分析制作果酒的原料是鮮果。制作葡萄酒時(shí),應(yīng)先沖洗葡萄,然后再除去枝梗,從而避免除去枝梗時(shí),引起葡萄損壞,增加被雜菌感染的機(jī)會(huì)。1、果酒的制作原理(3)制作葡萄酒的酵母菌主要來(lái)源于哪里?其它雜菌會(huì)不會(huì)引起發(fā)酵液的污染?你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?
制作葡萄酒的酵母菌來(lái)源于附著在葡萄皮上的野生酵母菌。雜菌不會(huì)引起發(fā)酵液的污染,因?yàn)槭紫?,葡萄在榨汁前要清洗;其次,在缺氧、酸性的發(fā)酵液中,絕大多數(shù)微生物無(wú)法適應(yīng)環(huán)境而被抑制。對(duì)發(fā)酵瓶、紗布、榨汁器等用具進(jìn)行清洗并消毒。每次排氣時(shí)只要擰松瓶蓋,不要完全揭開瓶蓋等。1、果酒的制作原理(4)果酒制作時(shí)應(yīng)給予怎樣的時(shí)間、溫度、空氣條件?思考時(shí)間:10-12天溫度:18-25℃空氣:缺氧厭氧制酒
1、果酒的制作原理(5)關(guān)于酵母菌的生物學(xué)特性你知道哪些?同化作用類型:異養(yǎng)異化作用類型:兼性厭氧型主要分布:土壤結(jié)構(gòu):?jiǎn)渭?xì)胞分類:真核生物生殖(主要方式):出芽生殖2、果醋的制作原理(1)果醋制作的原理是什么?寫出反應(yīng)式。(2)制作果醋的原料是什么?如果制作葡萄醋應(yīng)先如何處理鮮葡萄?為什么要加入果膠酶?(3)制作葡萄醋的醋酸菌主要來(lái)源于哪里?(4)果醋制作時(shí)應(yīng)給予怎樣的時(shí)間、溫度、空氣等條件?(5)關(guān)于醋酸菌的生物學(xué)特性你知道哪些?一、基礎(chǔ)知識(shí)分析2、果醋的制作原理(1)果醋制作的原理是什么?寫出反應(yīng)式。
乙醇轉(zhuǎn)變成乙酸的氧化過(guò)程是由醋酸桿菌完成的,這一過(guò)程是需氧過(guò)程。條件:酶和溫度C2H5OH+O2CH3COOH+H2O2、果醋的制作原理(2)制作果醋的原料是什么?如果制作葡萄醋應(yīng)先如何處理鮮葡萄?為什么要加入果膠酶?將葡萄洗凈、蒸煮、榨汁,并加入一些果膠酶使細(xì)胞壁溶解,獲取更多的果汁。2、果醋的制作原理(3)制作葡萄醋的醋酸菌主要來(lái)源于哪里?
制作葡萄醋的醋酸菌可以直接購(gòu)買,或用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)2、果醋的制作原理(4)果醋制作時(shí)應(yīng)給予怎樣的時(shí)間、溫度、空氣等條件?時(shí)間:7-8天溫度:30-35℃空氣:充足的氧有氧制醋
2、果醋的制作原理(5)關(guān)于醋酸菌的生物學(xué)特性你知道哪些?同化作用類型:異養(yǎng)異化作用類型:需氧主要分布:酸性環(huán)境結(jié)構(gòu):?jiǎn)渭?xì)胞分類:原核生物生殖:分裂生殖二、果酒和果醋的發(fā)酵裝置(1)實(shí)驗(yàn)室制作果酒、果醋的基本裝置是什么?排氣口、沖氣口、出料口各有什么作用?(2)為什么排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接?(3)如果進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)果酒、果醋時(shí),需要解決哪些問(wèn)題?探究(1)實(shí)驗(yàn)室制作果酒、果醋的基本裝置是什么?排氣口、沖氣口、出料口各有什么作用?(2)為什么排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接?排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是防止空氣中的微生物污染。思考(3)如果進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)果酒、果醋時(shí),需要解決哪些問(wèn)題?大規(guī)模生產(chǎn)果酒、果醋時(shí),需要解決全面考慮,如:a:原料的來(lái)源和選擇b:菌種的培養(yǎng)c:發(fā)酵設(shè)備、發(fā)酵條件的自動(dòng)化控制d:嚴(yán)格控制雜菌污染等e:實(shí)際生產(chǎn)中還要考慮沉淀、消毒包裝、保存,風(fēng)味色澤等左:葡萄酒窖;中:啤酒酒窖;右:白酒酒窖
大規(guī)模生產(chǎn)果酒的發(fā)酵和保存三、了解制作果酒和果醋的過(guò)程(1)簡(jiǎn)述果酒、果醋制作的基本過(guò)程。(2)如何檢驗(yàn)果酒、果醋的制作是否成功?(1)簡(jiǎn)述果酒、果醋制作的基本過(guò)程。1.對(duì)發(fā)酵瓶、紗布、榨汁器等用具進(jìn)行清洗并消毒。2.取葡萄500g,去除枝梗和腐爛的葉子。3.用清水沖洗葡萄1-2次除去污物。(注意沖洗次數(shù)不宜太多)4.榨汁后裝入發(fā)酵瓶。5.將發(fā)酵瓶置于適宜的溫度(18-25℃)下發(fā)酵。6.簡(jiǎn)易裝置2-4天排氣一次。(擰松瓶蓋)7.10天后,取樣檢驗(yàn)。8.加入醋酸菌或醋曲,然后移至30-35℃條件下發(fā)酵,適時(shí)充氣。(2)如何檢驗(yàn)果酒、果醋的制作是否成功?果酒的制作是否成功的鑒定方法是:嗅味和品嘗、顯微鏡觀察、用重鉻酸鉀檢驗(yàn)酒精的存在果醋的制作是否成功的鑒定方法是:觀察菌膜的形成、嗅味和品嘗、比較發(fā)酵前后的PH值顯微鏡觀察鞏固練習(xí)1.下列關(guān)于果醋的制作,錯(cuò)誤的是()A.果醋的制作需用醋酸菌,醋酸菌是一種好氧菌,所以在制作過(guò)程中需通氧氣B.醋酸菌是一種嗜溫菌,溫度要求較高,一般在50℃左右C.醋酸菌能將果酒變成果醋D.當(dāng)氧氣、糖源充足時(shí),醋酸菌可將葡萄中的糖分解成醋酸2.在制作果酒時(shí)如果一直往發(fā)酵罐中通入充足的氧氣,會(huì)發(fā)生何種現(xiàn)象?()A酵母菌死亡,不產(chǎn)生酒精B酵母菌大量繁殖,長(zhǎng)生較多酒精C酵母菌大量繁殖,不產(chǎn)生酒精D酵母菌數(shù)目較少,不長(zhǎng)生酒精3.下列微生物屬于嚴(yán)格厭氧的是:()酵母菌B.醋酸桿菌C.乳酸菌D.曲霉4.酵母菌在氧氣充足的條件下,主要的生殖方式為()A出芽生殖B分裂生殖C孢子生殖D卵式生殖5.在釀酒的過(guò)程中,溫度對(duì)酒精的發(fā)酵過(guò)程起到重要的作用,應(yīng)把發(fā)酵溫度控制在()A0-10℃B25-35℃C18-25℃D40℃以上6.在釀酒和釀醋的過(guò)程中都要涉及各種微生物,在上述兩個(gè)過(guò)程中所涉及的微生物在結(jié)構(gòu)上有什么本質(zhì)區(qū)別?A前者有細(xì)胞結(jié)構(gòu),后者沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)B前者沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu),后者有細(xì)胞結(jié)構(gòu)C前者有成形的細(xì)胞核,后者沒(méi)有成形細(xì)胞核D前者沒(méi)有成形的細(xì)胞核,后者有成形細(xì)胞核7.在制造葡萄醋時(shí)為什么要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣A醋酸菌的新陳代謝類型為自養(yǎng)需氧型B醋酸菌的新陳代謝類型為異養(yǎng)需氧型C醋酸菌的新陳代謝類型為自養(yǎng)厭氧型D醋酸菌的新陳代謝類型為異養(yǎng)厭氧型8.在果酒制作實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)我們要檢測(cè)試驗(yàn)是否成功,通常用重鉻酸鉀來(lái)檢測(cè)酒精的有無(wú),原理是在酸性條件下,重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)是()A藍(lán)色B磚紅色C灰綠色D深紫并帶金屬光澤
在酒的制作中,依種類分大體上可有白酒、果酒、啤酒和黃酒四類。制作方法各不相同,但相同部分是它們都是由酵母完成的。酵母在自然界中廣泛分布,已知有幾百種之多,也是應(yīng)用最廣的一類微生物。如面包制作、酒精制造、藥用酵母片、釀酒等。酒的種類“干”是葡萄酒中的糖分要在一定的水平之下(低于4g/升),幾乎全部被降解發(fā)酵,甜葡萄酒(每升總糖50g以上)。
干紅與干白都可以是由紅色葡萄制作的,但白葡萄酒在葡萄榨汁時(shí),不使皮和子中的色素出來(lái),因此得白葡萄酒,而紅葡萄酒是將皮和子部分搗碎,有了紅色素而得紅葡萄酒,紅葡萄酒和白葡萄酒思考制作葡萄酒和葡萄醋的過(guò)程中,發(fā)酵液分別有哪些變化?其中最明顯的變化發(fā)生在發(fā)酵后多少天?你能分析引起變化的原因嗎?葡萄酒制作圖片學(xué)習(xí)知識(shí)動(dòng)手實(shí)踐收獲美酒體會(huì)樂(lè)趣美味美妙享受生活謝謝大家■高中生物課件(人教課標(biāo)版)
腐乳作為一種發(fā)酵的大豆食品,它的制作工藝在我國(guó)有著悠遠(yuǎn)的歷史。腐乳根據(jù)顏色,可分為青方、紅方和白方三類。導(dǎo)入新課紅方腐乳白方腐乳青方腐乳課題2:腐乳的制作
以制作腐乳為例了解傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用,說(shuō)明腐乳制作過(guò)程的科學(xué)原理,設(shè)計(jì)并完成腐乳的制作,分析影響腐乳品質(zhì)的條件。教學(xué)目標(biāo)
課題重點(diǎn):說(shuō)明腐乳制作過(guò)程的科學(xué)原理,設(shè)計(jì)并完成腐乳的制作。
課題難點(diǎn):在實(shí)踐中摸索影響腐乳品質(zhì)的條件。重點(diǎn)與難點(diǎn)一、基礎(chǔ)知識(shí)
據(jù)史料記載,早在公元5世紀(jì)魏代古籍中,就有腐乳生產(chǎn)工藝的記載,到了明代我國(guó)就大量加工腐乳,而今腐乳已成長(zhǎng)為具現(xiàn)代化工藝的發(fā)酵食品。小資料1.你能利用所學(xué)的知識(shí),解釋豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事嗎?想一想2.王致和為什么要撒許多鹽,將長(zhǎng)毛的豆腐腌起來(lái)?答:豆腐上生長(zhǎng)的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說(shuō)是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。答:鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。腐乳制作的原理1、參與腐乳制作的主要微生物主要作用青霉曲霉酵母毛霉1、關(guān)于毛霉:(1)毛霉是一種絲狀真菌。繁殖方式為孢子生殖,新陳代謝類型為異養(yǎng)需氧型。(2)毛霉在腐乳制作中的作用:在豆腐的發(fā)酵過(guò)程中,毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸.在多種微生物的協(xié)同作用下,普通的豆腐轉(zhuǎn)變成我們愛吃的腐乳.發(fā)酵的溫度為15~18℃。毛霉菌落形態(tài)總狀毛霉菌落形態(tài)思考題1.我們平常吃的豆腐,哪種適合用來(lái)做腐乳?答:含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過(guò)高的豆腐制腐乳,不易成形。2.吃腐乳時(shí),你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對(duì)人體有害嗎?它的作用是什么?答:“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長(zhǎng)的菌絲(匍匐菌絲),它能形成腐乳的“體”,使腐乳成形?!捌ぁ睂?duì)人體無(wú)害。2、微生物的作用機(jī)理
釀造腐乳的主要工序是將豆腐進(jìn)行前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。
前期發(fā)酵過(guò)程中,毛霉在豆腐(毛坯)上生長(zhǎng)。毛霉生長(zhǎng)大約5天后使白坯變成毛坯。豆腐表面被一層菌膜包住,形成腐乳的“體”。同時(shí)毛霉分解以蛋白質(zhì)為主的蛋白酶,將豆腐所含有的蛋白質(zhì)分解為各種氨基酸。
在后期發(fā)酵過(guò)程中,酶與微生物協(xié)同作用,通過(guò)研制并配入各種輔料(紅曲、面曲、酒釀),是蛋白酶作用緩慢,促進(jìn)其他生化作用,生成腐乳的香氣。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制溫度保持在15-18℃;豆腐水分控制在70%左右。逐層加鹽,隨層數(shù)的加高而增加鹽量,腌制大約8天左右。鹵湯由酒及各種香辛料配制而成。封瓶時(shí)瓶口通過(guò)酒精燈火焰防止瓶口污染。腐乳制作的具體操作步驟:將豆腐切成3cm×3cm×1cm的若干塊;將豆腐塊平放在鋪有干粽葉的盤內(nèi),粽葉可以提供菌種,并能起到保溫的作用,每塊豆腐等距離排放,周圍留有一定距離,豆腐上面再鋪上干凈的粽葉;將平盤放入溫度保持在15-18℃的地方;4.當(dāng)毛霉生長(zhǎng)旺盛,并呈淡黃色時(shí),去除包裹平盤的保鮮膜以及撲在上面的粽葉,使豆腐塊的熱量和水分能夠迅速散失,同時(shí)散去霉味;5.當(dāng)豆腐涼透后,將豆腐塊間連接在一起的菌絲拉斷,并整齊排列在容器內(nèi),準(zhǔn)備腌制;6.長(zhǎng)滿毛霉的毛坯與鹽的質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為5:1,分層加鹽,在瓶口表面鹽要鋪厚些,大約腌制8天;7.將黃酒、米酒和糖,按口味不同而配以各種香辛料(如胡椒、花椒、八角茴香、桂皮、姜、辣椒等)混合制成鹵湯;8.將廣口玻璃瓶洗凈,用高壓鍋在100℃蒸氣滅菌,將腐乳咸坯擺入瓶中,加入鹵湯和輔料,密封放置,常溫六個(gè)月可以成熟。三、操作提示1、控制好材料的用量
腌制時(shí)注意控制鹽的用量
鹽的濃度過(guò)低不足以抑制微生物生長(zhǎng),可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì);濃度過(guò)高會(huì)影響腐乳的口味。鹵湯中酒的含量應(yīng)控制在12%左右
酒精含量過(guò)高將會(huì)延長(zhǎng)腐乳成熟的時(shí)間;含量過(guò)低不足以抑制微生物生長(zhǎng),可能導(dǎo)致豆腐腐敗。2、防止雜菌污染用來(lái)腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干凈后要用沸水消毒。裝瓶時(shí),操作要迅速小心。封瓶時(shí),最好將瓶口通過(guò)酒精燈的火焰,防止瓶口被污染。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)A是否完成腐乳的制作
能夠合理的選擇實(shí)驗(yàn)材料與用具;
前期發(fā)酵后豆腐的表面長(zhǎng)有菌絲,后期發(fā)酵制作基本沒(méi)有雜菌的污染。B腐乳質(zhì)量的評(píng)價(jià)成功的腐乳應(yīng)具有以下特點(diǎn):
色澤基本一致、味道鮮美、咸淡適口、無(wú)異味、塊形整齊、厚薄均勻、質(zhì)地細(xì)膩、無(wú)雜質(zhì)。C能否總結(jié)不同條件對(duì)腐乳風(fēng)味和質(zhì)量的影響
從鹽、酒的用量、發(fā)酵的溫度、發(fā)酵時(shí)間的長(zhǎng)短、以及香辛料等因素中的某一因素說(shuō)明其對(duì)腐乳風(fēng)味或質(zhì)量的影響。
腐乳的制作根據(jù)發(fā)酵類型不同可以分為四種:腌制腐乳毛霉腐乳根霉腐乳細(xì)菌腐乳五、相關(guān)鏈接
根霉型腐乳:
采用耐高溫的根霉菌,經(jīng)純菌培養(yǎng),人工接種,在夏季高溫季節(jié)也能生產(chǎn)腐乳,但根霉菌絲稀疏,淺灰色,蛋白酶和肽酶活性低,生產(chǎn)的腐乳,其形狀、色澤、風(fēng)味及理化質(zhì)量都不如毛霉腐乳。
腌制腐乳:
豆腐坯加水煮沸后,加鹽腌制,裝壇加入輔料,發(fā)酵成腐乳。特點(diǎn):豆腐坯不經(jīng)前期發(fā)酵,直接裝壇,進(jìn)行后發(fā)酵,依靠輔料中帶入的微生物而成熟。缺點(diǎn):蛋白酶不足,后期發(fā)酵時(shí)間長(zhǎng),氨基酸含量低,色香味欠佳。制作原理實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)主要微生物根霉酵母結(jié)果分析與評(píng)價(jià)毛霉蛋白酶蛋白質(zhì)小分子肽和氨基酸腐乳的制作曲霉機(jī)理脂肪酶脂肪甘油和脂肪酸讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制操作提示控制鹽酒的用量防止雜菌污染課堂小結(jié)1.使腐乳味道鮮美,易于消化、吸收的營(yíng)養(yǎng)成分主要是()A.多肽、氨基酸、甘油和脂肪酸
B.NaCl、水、蛋白質(zhì)C.蛋白質(zhì)、脂肪、NaCl、水
D.無(wú)機(jī)鹽、維生素
答案:A課堂練習(xí)2.食鹽在豆腐坯腌制中起到的作用是()①滲透鹽分,析出水分②給腐乳以必要的咸味③防止毛霉繼續(xù)生長(zhǎng)和污染的雜菌繁殖④浸提毛霉菌絲上的蛋白酶A.①②③
B.③④C.①②③④
D.①③
答案:C3.鹵湯中香辛料的作用是()①調(diào)味②促進(jìn)發(fā)酵③殺菌防腐A.①②
B.①②③C.②③
D.①③答案:B1.答:越接近瓶口,雜菌污染的可能性越大,因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量,在接近瓶口的表面,鹽要鋪厚一些,以有效防止雜菌污染。習(xí)題答案■高中生物課件(人教課標(biāo)版)課題3:制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量
泡菜是一種以發(fā)酵加工制成的浸制品,為泡酸菜類的一種。泡菜制作容易,成本低廉,營(yíng)養(yǎng)衛(wèi)生,風(fēng)味可口,利于貯存。在我國(guó)四川、東北、湖南、湖北、河南、廣東、廣西等地民間均有自制泡菜的習(xí)慣。目前較受歡迎的是川味和韓味泡菜,在許多風(fēng)味餐館里,都有其蹤影,它鮮嫩清脆,可以增進(jìn)食欲,幫助消化與吸收。如果自己在家也做一些這樣的泡菜,做為每天飯前小菜,或以它配菜,烹成各種菜肴,不失為一件美事。但是泡菜含亞硝酸鹽具致癌作用危害身體健康,所以不易多吃一、課題目標(biāo)嘗試制作泡菜,并嘗試用比色法測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽含量的變化。討論與此相關(guān)的食品安全問(wèn)題。二、課題重點(diǎn)與難點(diǎn)課題重點(diǎn):制作泡菜并測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽含量。課題難點(diǎn):泡菜中亞硝酸鹽含量的測(cè)定。乳酸鏈球菌1、泡菜制作基礎(chǔ)知識(shí)(1)乳酸菌
種類:常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌,乳酸桿菌常用于制作酸奶。乳酸桿菌一、泡菜的制作分布:空氣、土壤、植物體表、人或動(dòng)物腸道代謝類型及產(chǎn)物(發(fā)酵原理):乳酸菌是異養(yǎng)厭氧型細(xì)菌,在無(wú)氧條件下,將葡萄糖分解成乳酸。C6H12O62C3H6O3酶+能量制作泡菜制作酸奶含有抗生素的牛奶能不能發(fā)酵成酸奶?為什么?不能。因?yàn)樗崮痰闹谱饕揽康氖侨樗峋陌l(fā)酵作用??股啬軌驓⑺阑蛞种迫樗峋纳L(zhǎng),因此含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。(2)亞硝酸鹽蔬菜
性質(zhì):在食品生產(chǎn)中的作用:分布在蔬菜、咸菜和豆粉中的含量如何?
我國(guó)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的亞硝酸鹽含量標(biāo)準(zhǔn):亞硝酸鹽(包括亞硝酸鉀和亞硝酸鈉)為白色粉末,易溶于水。當(dāng)人體攝入的亞硝酸鹽總量達(dá)到0.3~0.5g時(shí),會(huì)引起中毒,達(dá)3g時(shí)會(huì)引起死亡。豆粉中的平均含量可以達(dá)到10毫克/千克,而咸菜中的平均含量也在7毫克/千克以上。蔬菜中平均含量為4毫克/千克50毫克/千克泡菜優(yōu)點(diǎn)制作容易成本低廉營(yíng)養(yǎng)衛(wèi)生利于貯存風(fēng)味可口鮮嫩清脆增進(jìn)食欲容易消化
膳食中的絕大多數(shù)亞硝酸鹽在人體內(nèi)以“過(guò)客”的形式隨尿排出,只有在特定的條件下(適宜的PH、溫度和一定的微生物作用),才會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物——亞硝胺。大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,亞硝胺具有致癌作用,同時(shí)對(duì)動(dòng)物具有致畸和致突變作用。研究表明,人類的某些癌癥可能與亞硝胺有關(guān)。
泡菜中的亞硝酸鹽怎樣生成的?發(fā)酵初期,泡菜中的微生物生長(zhǎng)很快,微生物將蔬菜中的硝酸鹽還原成亞硝酸鹽,與此同時(shí),蔬菜中的酚類物質(zhì)和維生素C等物質(zhì)也會(huì)將亞硝酸鹽氧化,但總體來(lái)說(shuō),生成的亞硝酸鹽大于被還原的亞硝酸鹽,亞硝化細(xì)菌可將發(fā)酵過(guò)程產(chǎn)生的氨氧化成亞硝酸,其與金屬離子生成亞硝酸鹽,因此,隨著發(fā)酵時(shí)間的進(jìn)行,亞硝酸鹽的含量會(huì)逐步上升。隨著微生物代謝活動(dòng)的持續(xù),氧氣被消耗殆盡,泡菜壇中的環(huán)境不利于除乳酸菌以外的其他微生物的生長(zhǎng)。與此同時(shí),蔬菜中的亞硝酸鹽含量由于被氧化而減少,因此,亞硝酸鹽的含量會(huì)逐漸下降并趨于一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的數(shù)值。問(wèn)題:亞硝酸鹽是由乳酸菌產(chǎn)生的嗎?只有泡菜中有亞硝酸鹽,其他的醬菜中含有亞硝酸鹽嗎?硝酸鹽亞硝酸鹽還原氧化細(xì)菌等微生物維生素C、E和酚類物質(zhì)亞硝胺
一、基本原理
1.制作泡菜的原理。利用乳酸菌在無(wú)氧的環(huán)境下大量繁殖制作泡菜。
根據(jù)微生物的活動(dòng)情況和乳酸積累量,可以將泡菜發(fā)酵過(guò)程分為三個(gè)階段:
發(fā)酵初期:大腸桿菌和酵母菌較為活躍,它們進(jìn)行同型乳酸發(fā)酵和微弱的酒精發(fā)酵,發(fā)酵產(chǎn)物為乳酸、乙醇、醋酸和二氧化碳,一方面消耗掉壇中的氧氣,另一方面產(chǎn)生較多的二氧化碳,產(chǎn)生厭氧環(huán)境。乳酸菌和乳酸的量都較少,而由于硝酸鹽還原菌的活動(dòng),亞硝酸鹽含量有所增加。此時(shí)為泡菜初熟階段,菜質(zhì)咸而不酸、有生味。
發(fā)酵中期:由于乳酸不斷積累和缺氧的形成,乳酸桿菌開始活躍,并進(jìn)行同型乳酸發(fā)酵(產(chǎn)物只有兩分子乳酸)這時(shí)乳酸的積累量可達(dá)0.6%-0.8%,PH為3.5-3.8,其他的微生物的活動(dòng)受到抑制,這時(shí)泡菜完全成熟,菜有酸味而清香。發(fā)酵后期:乳酸含量繼續(xù)增加,可達(dá)1.0%以上,當(dāng)超過(guò)1.2%以上時(shí),乳酸菌的活性受到抑制,發(fā)酵速度變緩甚至停止,此時(shí)泡菜酸度過(guò)高、風(fēng)味不協(xié)調(diào)。泡菜的制作過(guò)程中,許多乳酸菌產(chǎn)生大量乳酸,共同抑制其它菌的生長(zhǎng),乳酸積累過(guò)多,又會(huì)抑制乳酸菌自身的生長(zhǎng),以上體現(xiàn)出的生物關(guān)系依次是A.種內(nèi)互助、種內(nèi)斗爭(zhēng)、種間斗爭(zhēng)
B.種內(nèi)互助、種間斗爭(zhēng)、種內(nèi)斗爭(zhēng)
C.種內(nèi)斗爭(zhēng)、種間斗爭(zhēng)、種內(nèi)互助
D.種間斗爭(zhēng)、種內(nèi)斗爭(zhēng)、種內(nèi)互助答案B制作泡菜的流程?需要的原料?泡菜壇應(yīng)具備的條件?如何檢測(cè)泡菜壇是否合格?使用不合格泡菜壇有什么后果?鹽水應(yīng)該按什么比例配制才較好?為什么要將鹽水煮沸后又冷卻?加鹽有何作用?哪些因素會(huì)導(dǎo)致泡菜腌制過(guò)程中的亞硝酸鹽含量?測(cè)定原理及其步驟?(2)添加的調(diào)味品,如花椒、八角等。(3)白酒。(4)食鹽和糖。(1)各種蔬菜均可,一般用白菜、洋白菜、黃瓜、柿子椒、胡蘿卜、白蘿卜等。原料①觀型體:
以火候老、釉質(zhì)好、無(wú)裂紋、無(wú)砂眼、形體美觀的為佳。②看內(nèi)壁:
將壇壓在水內(nèi),看內(nèi)壁,以無(wú)砂眼、無(wú)裂紋、無(wú)滲水現(xiàn)象的為佳。④聽聲音:
用手擊壇,聽其聲,鋼音的質(zhì)量則好,空響、砂響、音破的質(zhì)次。
腌制條件
腌制過(guò)程中,要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量。溫度過(guò)高、食鹽用量不足10%、腌制時(shí)間過(guò)短,容易造成細(xì)菌大量繁殖,亞硝酸鹽含量增加。一般在腌制10天后,亞硝酸鹽的含量開始下降。結(jié)球甘藍(lán)(簡(jiǎn)稱甘藍(lán)),別名洋白菜、圓白菜、包心菜、蓮花白菜等,在上海地區(qū)又叫卷心菜。
步驟
(1)各種菜洗凈并切成3~4cm長(zhǎng)的小塊。(2)將泡菜壇洗凈,并用熱水洗壇內(nèi)壁兩次。(3)將各種蔬菜、鹽水、糖及調(diào)味品放入壇,混合均勻。如果希望發(fā)酵快些,可將蔬菜在開水中浸1分鐘后入壇,再加上一些白酒。(4)將壇口用水封好,防止外界空氣進(jìn)入。(5)泡菜發(fā)酵①準(zhǔn)備白菜、蘿卜、蔥、辣椒、蒜等材料。
②切好蘿卜、蔥、蒜泥、辣椒末等,準(zhǔn)備往白菜芯里放。
③白菜切成兩半后,放在鹽里(水鹽比4:1)一夜,第二天,用流動(dòng)的水清洗,再甩干水分。⑤用外層的白菜葉子包好里面的,放上一周。
④往鹽腌過(guò)的白菜里添加第2項(xiàng)的材料,要均勻涂抹。⑥切開發(fā)酵的泡菜,放在盤子里。
原料加工修整、洗滌、晾曬、切分成條狀或片狀加調(diào)味料裝壇加鹽鹽水冷卻泡菜鹽水發(fā)酵成品測(cè)亞硝酸鹽含量制作泡菜實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程如果加入一些已經(jīng)腌制過(guò)的泡菜汁更好,這相當(dāng)于接種已經(jīng)擴(kuò)增的發(fā)酵菌,可減少腌制時(shí)間。1、加入白酒有什么作用?白酒可抑制泡菜表面雜菌的生長(zhǎng),它也是一種調(diào)味劑,可增加醇香感。思考:2、用水封閉壇口起什么作用?不封閉有什么結(jié)果?水封閉壇口起著使壇內(nèi)與壇外空氣隔絕的作用,空氣中21%是氧氣,這是最簡(jiǎn)易的造成無(wú)氧環(huán)境的方法。這樣,壇內(nèi)可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌進(jìn)行乳酸發(fā)酵。如不封閉,則會(huì)有許多需氧菌生長(zhǎng),蔬菜會(huì)腐爛。
3、為什么泡菜壇內(nèi)有時(shí)會(huì)長(zhǎng)一層白膜,這層白膜是怎么形成的?形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物,泡菜發(fā)酵液營(yíng)養(yǎng)豐富,其表面氧氣含量也很豐富,適合酵母菌的繁殖。
4、為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜,不吃存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、變質(zhì)的蔬菜?有些蔬菜,如小白菜和蘿卜等含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過(guò)久時(shí)發(fā)生變質(zhì)(發(fā)黃、腐爛)或者煮熟后存放太久時(shí),蔬菜中的硝酸鹽會(huì)被微生物還原成亞硝酸鹽,危害人體健康。二、亞硝酸鹽含量的測(cè)定1、測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,這一反應(yīng)物再與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián),結(jié)合生紫色產(chǎn)物。將經(jīng)過(guò)反應(yīng)顯色后的待測(cè)樣品與標(biāo)準(zhǔn)液比色,即可計(jì)算出樣品中的亞硝酸鹽含量。
測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理和比色的原理。
(2)重氮反應(yīng)形成的產(chǎn)物與N—1—萘基乙二胺結(jié)合形成紫紅色染料。將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測(cè)比較,可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。(也可使用比色儀)(1)在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮反應(yīng)偶聯(lián)
(2)配制標(biāo)準(zhǔn)液
用移液管吸取0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml、1.50ml亞硝酸鈉溶液,分別置于50ml比色管中,再取1支比色管作為空白對(duì)照。并分別加入2.0ml對(duì)氨基苯磺酸溶液,混勻,靜置3~5分鐘后,再分別加入1.0mlN-1-萘基乙二胺鹽酸鹽溶液,加蒸餾水至50ml,混勻,觀察亞硝酸鈉溶液顏色的梯度變化。提取劑:分別稱取50克氯化鎘、氯化鋇,溶解于1000ml蒸餾水中,用鹽酸調(diào)節(jié)pH至1。氫氧化鋁乳液和2.5mol/l的氫氧化鈉溶液。
(3)制備樣品處理液
將3壇樣品做好標(biāo)記后,分別稱取0.4千克泡菜,榨汁過(guò)濾得200ml汁液。取其中100ml至500ml容量瓶中,加200ml蒸餾水、100ml提取劑,混勻,再加入40ml氫氧化鈉溶液,用蒸餾水定容至500ml后,立即過(guò)濾。將60ml濾液轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中,加入氫氧化鋁(吸附脫色)乳液,定容至100ml,過(guò)濾。(4)比色
吸取40ml透明澄清的濾液,轉(zhuǎn)移到50ml比色管中,將比色管做好標(biāo)記。按步驟2的方法分別加入對(duì)氨基苯磺酸溶液和N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽溶液,并定容至50ml,混勻,靜置15分鐘。
觀察樣品顏色的變化,并與標(biāo)準(zhǔn)顯色液比較,找出與標(biāo)準(zhǔn)液最相近的顏色,記錄對(duì)應(yīng)的亞硝酸鈉含量,并計(jì)算。每隔2天測(cè)一次,將結(jié)果記錄下來(lái)。計(jì)算:如測(cè)試液與標(biāo)準(zhǔn)比色液的3微克相當(dāng),則亞硝酸鹽的含量計(jì)算為3/1000/0.00960.4千克x100/200x60/500x40/100=0.0096取材得濾液200毫升取100毫升500毫升取60毫升100毫升取40毫升3.無(wú)機(jī)大分子顆粒吸附有機(jī)雜質(zhì)的原理和方法。
提取劑:氯化鎘和氯化鋇作為提取劑的作用是提取樣品處理液中的大分子有機(jī)雜質(zhì),增加亞硝酸鹽溶解度(1)提取劑在配制時(shí)為什么要加入濃鹽酸調(diào)節(jié)PH至1?氫氧化鋁乳液:吸附泡菜汁液中的雜質(zhì),使泡菜汁透明澄清,以便進(jìn)行顯色反應(yīng)(2)為什么需要用處理樣品與提取劑在搖床上振蕩提取1小時(shí)?(3)為什么振蕩后還需要加入氫氧化鈉溶液?防止形成氫氧化鋁氫氧化鉻沉淀為使沉淀沉在容器底部中和乳酸和其他酸(4)為什么加氫氧化鋁?2001年1月4日(封壇前)2001年1月8日2001年1月12日2001年1月15日2001年1月19日0.15
0.600.200.100.101號(hào)壇2號(hào)壇0.15
0.200.100.050.053號(hào)壇0.15
0.800.600.200.20泡菜腌制過(guò)程中亞硝酸鹽含量的變化每隔2天測(cè)一次,將結(jié)果記錄下來(lái)。三、問(wèn)題討論:計(jì)算:P57亞硝酸鹽含量發(fā)酵時(shí)間(d)
(1)亞硝酸鹽含量在第
4天達(dá)到最高峰。(2)亞硝酸鹽含量升高的原因是蔬菜組織和細(xì)菌內(nèi)的
硝酸還原酶的活性增強(qiáng),將硝酸鹽還原為亞硝酸。(3)亞硝酸鹽含量降低的原因是蔬菜組織和細(xì)菌內(nèi)的硝酸還原酶的活性減弱,硝酸鹽還原減少
例:泡菜是人們?nèi)粘I钪斜容^喜歡的一種食品,但是泡菜中卻含有亞硝酸鹽。當(dāng)人體攝入的亞硝酸鹽總量達(dá)到0.3g—0.5g時(shí),會(huì)引起中毒;達(dá)到3g時(shí),會(huì)引起死亡。我國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,亞硝酸鹽的殘留量在醬菜中不得超過(guò)20mg/kg。膳食中的絕大部分亞硝酸鹽在人體內(nèi)以“過(guò)客”的形式隨尿液排出,只有在特定的條件下才會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物——亞硝胺。針對(duì)泡菜在發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽的事實(shí),某中學(xué)生物活動(dòng)小組設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),探究不同食鹽濃度和發(fā)酵時(shí)間對(duì)亞硝酸鹽含量變化的影響。(1)請(qǐng)補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的空缺內(nèi)容:①制作泡菜的原理:
。②測(cè)量指標(biāo)及方法:亞硝酸鹽與某些化學(xué)物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)后形成玫瑰紅色染料。先使泡菜樣品及一系列已知濃度的亞硝酸鹽溶液分別與化學(xué)物質(zhì)發(fā)生顯色反應(yīng),然后對(duì)比顏色,可以估測(cè)出泡菜液樣品中亞硝酸鹽的含量。③確定濃度梯度:經(jīng)過(guò)查找資料和初步實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)當(dāng)食鹽濃度為3%以下時(shí),制作的泡菜容易發(fā)生腐敗,而當(dāng)食鹽濃度在8%以上時(shí),制作的泡菜又容易成為咸腌菜。因此,分別設(shè)計(jì)了3%、5%、7%的食鹽濃度梯度來(lái)制作泡菜。利用乳酸菌在無(wú)氧的環(huán)境下大量繁殖制作泡菜④選擇實(shí)驗(yàn)材料:紅蘿卜和白蘿卜,哪種更適合于用做實(shí)驗(yàn)材料?白蘿卜
。其原因是:避免植物中的色素對(duì)顯色反應(yīng)的干擾
⑤制作泡菜:將實(shí)驗(yàn)材料分成3組制作泡菜,除了實(shí)驗(yàn)材料的重量相同外,還要保證每組泡菜的制作(或培養(yǎng)、發(fā)酵)條件
相同。(2)下圖是該生物活動(dòng)小組記錄的三種食鹽濃度的泡菜中的亞硝酸鹽含量與發(fā)酵天數(shù)的關(guān)系圖。根據(jù)此圖實(shí)驗(yàn)結(jié)果,請(qǐng)你給出制作和食用泡菜的最佳指導(dǎo)建議:用5%的食鹽濃度制作泡菜比較適合食用(1分),但要在發(fā)酵時(shí)間達(dá)11天(或9天)以后食用才比較適宜(1分)。
⑥從第三天開始,定期測(cè)定泡菜中的亞硝酸鹽含量。請(qǐng)幫該小組設(shè)計(jì)一個(gè)用于實(shí)驗(yàn)記錄的表格。你給出此建議的理由是:食鹽濃度為3%的泡菜中亞硝酸鹽含量總體上是3壇泡菜中最高;食鹽濃度為5%的泡菜中亞硝酸鹽含量變化最快,它的最高值是三壇中最高的,說(shuō)明乳酸菌代謝最旺盛,但從發(fā)酵11天后亞硝酸鹽降到最低值;而食鹽濃度為7%的泡菜中亞硝酸鹽含量變化不大,雖一直處于較低數(shù)值,但容易成為咸腌菜。(3分)果酒果醋腐乳泡菜微生物類型原理反應(yīng)條件檢測(cè)方法酵母菌,真菌,兼性厭氧醋酸菌,細(xì)菌,好氧菌毛霉,真菌,兼性厭氧乳酸菌,細(xì)菌,厭氧菌酵母菌的無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精20℃無(wú)氧重鉻酸鉀與其反應(yīng)呈灰綠色醋酸菌的有氧呼吸產(chǎn)生醋酸30~35℃通入氧氣品嘗、pH試紙檢測(cè)毛霉產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶15~18℃接種,酒精含量控制在12%左右乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸常溫,無(wú)氧條件■高中生物課件(人教課標(biāo)版)專題2:微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2:
微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)特點(diǎn):結(jié)構(gòu)都相當(dāng)簡(jiǎn)單,個(gè)體多數(shù)十分微小.通常要用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡才能看到,有的甚至沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu).且體內(nèi)一般不含有葉綠素.不能進(jìn)行光合作用.微生物包括哪五類:病毒細(xì)菌放線菌真菌原生動(dòng)物
原核生物界
原生生物界真菌界病毒界一、基礎(chǔ)知識(shí):
(一)微生物:是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱.病毒的結(jié)構(gòu)病毒
SARS冠狀病毒、禽流感病毒朊病毒(蛋白質(zhì)病毒)病毒的增殖:細(xì)菌的外形與大小圖1-1常見的三種細(xì)菌典型形態(tài)A.球菌
B.桿菌C.弧菌芽孢
有些細(xì)菌在一定的條件下,細(xì)胞里面形成一個(gè)橢圓形的休眠體,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,對(duì)干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。例如,有的細(xì)菌的芽孢,煮沸3小時(shí)以后才死亡。芽孢又小又輕,可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜(如溫度、水分適宜)的時(shí)候,芽孢又可以萌發(fā),形成一個(gè)細(xì)菌.菌落:?jiǎn)蝹€(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí),就會(huì)形成一個(gè)肉眼可見的,具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體,叫做菌落。菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)類型根據(jù)細(xì)菌所利用的能源和碳源的不同,將細(xì)菌分為兩大營(yíng)養(yǎng)類型。自養(yǎng)菌:分類,舉例?異養(yǎng)菌:腐生菌寄生菌大部分病原菌光合自養(yǎng)型:光合細(xì)菌化能自養(yǎng)型:硝化細(xì)菌,鐵細(xì)菌,硫細(xì)菌菌落細(xì)菌的菌落特征因種而異放線菌1、結(jié)構(gòu):?jiǎn)渭?xì)胞原核分支狀的菌絲(基內(nèi)菌絲、氣生菌絲)鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素、慶大霉素
微生物中發(fā)現(xiàn)了幾千種抗生素,其中2/3是由放線菌產(chǎn)生的
應(yīng)用:真菌如圖是酵母菌電子顯微鏡下的形態(tài)結(jié)構(gòu)酵母菌和霉菌青霉生殖直立菌絲營(yíng)養(yǎng)菌絲腐生生活孢子生殖(二)培養(yǎng)基
培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)是由人工方法配制而成的,專供微生物生長(zhǎng)繁殖使用的混合營(yíng)養(yǎng)液。(1)按物理狀態(tài)分:固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。(2)按功能分:選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。(3)按成分分:天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。1.培養(yǎng)基的類型固體培養(yǎng)基:菌落液體培養(yǎng)基:表面生長(zhǎng)均勻混濁生長(zhǎng)沉淀生長(zhǎng)半固體培養(yǎng)基:無(wú)動(dòng)力有動(dòng)力(彌散)2.不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方3.不管哪種培養(yǎng)基,一般都含有水、碳源、和氮源、無(wú)機(jī)鹽、等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),另外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求.4.培養(yǎng)基的用途液體培養(yǎng)基:增菌、工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基:純化(分離),鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種半固體培養(yǎng)基:動(dòng)力檢測(cè)(三)無(wú)菌技術(shù)1.無(wú)菌技術(shù)的概念
無(wú)菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中,所有防止雜菌污染的方法。成功地培養(yǎng)微生物的關(guān)鍵。(1)消毒定義:2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別
(2)滅菌的定義:3.常用的消毒與滅菌的方法1、灼燒滅菌滅菌的方法:2、干熱滅菌:160-170℃下加熱1-2h。3、高壓蒸氣滅菌:100kPa、121℃下維持15-30min.1.無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外,還有什么目的?2.請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要,請(qǐng)選擇合適的方法。(1)培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿(2)玻棒、試管、燒瓶和吸管(3)實(shí)驗(yàn)操作者的雙手答:無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。答:(1)、(2)需要滅菌;(3)需要消毒。旁欄思考微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的基本操作程序1、器具的滅菌2、培養(yǎng)基的配制3、培養(yǎng)基的滅菌4、倒平板5、微生物接種6、恒溫箱中培養(yǎng)7、菌種的保存三、實(shí)驗(yàn)操作
(一)制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(用于培養(yǎng)細(xì)菌)1.計(jì)算、稱量2.溶化3.調(diào)pH:pH7.6
4.過(guò)濾:這一步可以省去。5.分裝:分裝過(guò)程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。分裝三角燒瓶的量以不超過(guò)三角燒瓶容積的一半為宜。6.加塞7.包扎操作步驟8.滅菌:
將50ml培養(yǎng)基用玻棒轉(zhuǎn)移至三角錐瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮紙,再放入高壓蒸氣滅菌鍋,在壓力為100kPa、溫度為121℃,滅菌15~30min。將培養(yǎng)基用舊報(bào)紙包裹,放入干熱滅菌箱內(nèi),在160~170℃下滅菌2h。
9.倒平板:
待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時(shí),在酒精燈附近倒平板。(倒平板操作見課本)2d后觀察平板,無(wú)雜菌污染才可用來(lái)接種.10.無(wú)菌檢查:將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃的溫室中培養(yǎng)24—48小時(shí),以檢查滅菌是否徹底。(二)純化大腸桿菌接種方法有:平板劃線法和稀釋涂布平板法微生物的接種技術(shù):
平板劃線的操作方法交叉劃線法連續(xù)劃線法
平板劃線的操作一旦劃破,會(huì)造成劃線不均勻,難以達(dá)到分離單菌落的目的;二是存留在劃破處的單個(gè)細(xì)胞無(wú)法形成規(guī)矩的菌落,菌落會(huì)沿著劃破處生長(zhǎng),會(huì)形成一個(gè)條狀的菌落。問(wèn)題討論
1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?
答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端,從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?
答:劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。稀釋涂布平板法問(wèn)題討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作?
應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。微生物的恒溫培養(yǎng)微生物的恒溫培養(yǎng)微生物的恒溫培養(yǎng)菌種的保存1、臨時(shí)保藏:接種到固體斜面培養(yǎng)基,菌落長(zhǎng)成后置于4℃冰箱保存。2、長(zhǎng)期保存:甘油冷凍管藏法本課題知識(shí)小結(jié):四、課題成果評(píng)價(jià)
(一)培養(yǎng)基的制作是否合格如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1~2d后無(wú)菌落生長(zhǎng),說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需要重新制備。(二)接種操作是否符合無(wú)菌要求如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形狀、大小基本一致,并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn),則說(shuō)明接種操作是符合要求的;如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則說(shuō)明接種過(guò)程中,無(wú)菌操作還未達(dá)到要求,需要分析原因,再次練習(xí)。(三)是否進(jìn)行了及時(shí)細(xì)致的觀察與記錄培養(yǎng)12h與24h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同,及時(shí)觀察記錄的同學(xué)會(huì)發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn),并能觀察到其他一些細(xì)微的變化。這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣?!镜淅馕觥?/p>
例1.關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中,正確的A.是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的無(wú)機(jī)物只提供無(wú)機(jī)鹽D.無(wú)機(jī)氮源也能提供能量
解析:不同的微生物,所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有較大差別,要針對(duì)微生物的具體情況分析。對(duì)于A、B選項(xiàng),它的表達(dá)是不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;有的碳源可同時(shí)是氮源,如NH4HCO3;有的碳源同時(shí)是能源,如葡萄糖;有的碳源同時(shí)是氮源,也是能源,如蛋白胨。對(duì)于C選項(xiàng),除水以外的無(wú)機(jī)物種類繁多,功能也多樣。如二氧化碳,可作為自養(yǎng)型微生物的碳源;NaHCO3,可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和無(wú)機(jī)鹽;而NaCl則只能提供無(wú)機(jī)鹽。對(duì)于D選項(xiàng),無(wú)機(jī)氮源提供能量的情況還是存在的,如NH3可為硝化細(xì)菌提供能量和氮源。答案:D例2.下面對(duì)發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是A.防止雜菌污染B.消滅雜菌C.培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌D.滅菌必須在接種前答案:B
解析:滅菌是微生物發(fā)酵過(guò)程的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。A說(shuō)的是滅菌的目的,因?yàn)榘l(fā)酵所用的菌種大多是單一的純種,整個(gè)發(fā)酵過(guò)程不能混入其他微生物(雜菌),所以是正確的;B是錯(cuò)誤的,因?yàn)闇缇哪康氖欠乐闺s菌污染,但實(shí)際操作中不可能只消滅雜菌,而是消滅全部微生物。C是正確的,因?yàn)榕c發(fā)酵有關(guān)的所有設(shè)備和物質(zhì)都要滅菌;發(fā)酵所用的微生物是滅菌后專門接種的,滅菌必須在接種前,如果接種后再滅菌就會(huì)把所接菌種也殺死。編號(hào)成分含量①粉狀硫10g②(NH4)2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100ml例3.右表是某微生物培養(yǎng)基成分,請(qǐng)據(jù)此回答:(1)右表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類型是
。(2)若不慎將過(guò)量NaCl加入培養(yǎng)基中。如不想浪費(fèi)此培養(yǎng)基,可再加入
.自養(yǎng)型微生物
含碳有機(jī)物
(3)若除去成分②,加入(CH2O),該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)
。(4)表中營(yíng)養(yǎng)成分共有
類。(5)不論何種培養(yǎng)基,在各種成分都溶化后分裝前,要進(jìn)行的是
。(6)右表中各成分重量確定的原則是
。(7)若右表培養(yǎng)基用于菌種鑒定,應(yīng)該增加的成分
。固氮微生物
3調(diào)整pH
依微生物的生長(zhǎng)需要確定
瓊脂(或凝固劑)
了解有關(guān)微生物及培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí),進(jìn)行無(wú)菌技術(shù)的操作,進(jìn)行微生物的培養(yǎng)。
一、課題目標(biāo):
掌握培養(yǎng)基的制備、高壓蒸氣滅菌和平板劃線法等基本操作技術(shù),熟練、規(guī)范地進(jìn)行無(wú)菌操作,成功地培養(yǎng)微生物。
無(wú)菌技術(shù)的操作。二、課題重點(diǎn)和難點(diǎn):三、技能目標(biāo):倒平板技術(shù)1.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時(shí),才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?問(wèn)題討論
答:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰?
答:通過(guò)灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后,為什么要將平板倒置?4.在倒平板的過(guò)程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎?為什么?
答:平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。
答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物?!龈咧猩镎n件(人教課標(biāo)版)專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2
土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)課題背景
尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥。但是尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氮之后,才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素,是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕?。尿素最初是從人的尿液中發(fā)現(xiàn)的。
1828年,德國(guó)化學(xué)家維勒成功地通過(guò)無(wú)機(jī)物的化學(xué)反映合成了尿素,揭開了歷史上人工合成有機(jī)物的新篇章。尿素研究思路
篩選菌株
PCR的自動(dòng)化需要耐高溫的DNA聚合酶,這種酶要能忍受93℃左右的高溫??茖W(xué)家從水生耐熱細(xì)菌Taq中分離到耐高溫的TaqDNA聚合酶。為什么Taq細(xì)菌能從熱泉中被篩選出來(lái)呢?因?yàn)闊崛?0--80℃的高溫條件淘汰了絕大多數(shù)微生物,而使耐高溫的Taq細(xì)菌脫穎而出。實(shí)驗(yàn)室微生物的篩選原理
應(yīng)用篩選Taq細(xì)菌的原理,人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目
常用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)30—300的平板計(jì)數(shù)。培養(yǎng)基上的菌落設(shè)置對(duì)照設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)合課本上給出的資料與實(shí)驗(yàn)流程示意圖,思考有關(guān)問(wèn)題,然后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),并且些出詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案。資料一土壤取樣資料二樣品的稀釋資料三微生物的培養(yǎng)與觀察操作提示無(wú)菌操作
1.取土樣的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都需要滅菌。
2.應(yīng)在火焰旁稱取土壤。在火焰附近將稱好的土樣倒入燒瓶中,塞好棉塞。
3.在稀釋土壤溶液的過(guò)程中,每一步都要在火焰旁操作。做好標(biāo)記本實(shí)驗(yàn)使用的平板和試管比較多。為避免混淆,最好在使用前就做好標(biāo)記。例如:在標(biāo)記培養(yǎng)皿時(shí),應(yīng)注明培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)日期以及平板上培養(yǎng)樣品的稀釋度。
規(guī)劃時(shí)間對(duì)于耗時(shí)較長(zhǎng)的生物實(shí)驗(yàn),我們需要實(shí)現(xiàn)規(guī)劃時(shí)間,以便提高工作效率,在操作時(shí)更加有條不紊。結(jié)果分析與評(píng)價(jià)結(jié)合對(duì)照,分析培養(yǎng)物總共是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出一些菌落?是否獲得了某一稀釋度下,菌落數(shù)目在30—300的平板。在這一稀釋度下,是否至少有兩個(gè)平板的菌落數(shù)相接近?你統(tǒng)計(jì)的每克土壤中含有能分解尿素的細(xì)菌的菌落數(shù)是多少?與其他同學(xué)的結(jié)果接近嗎?如果差異很大,可能是什么原因引起的?課題延伸本課題對(duì)能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了初步的篩選,這只是純化菌種的第一步。對(duì)分離菌種作進(jìn)一步的鑒定,還需要借助生物化學(xué)的方法。我們可以通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基pH的變化來(lái)判斷細(xì)菌是否分解尿素的化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。指示劑也可以幫助我們準(zhǔn)確地鑒定該種細(xì)菌能否分解尿素。相關(guān)鏈接活菌計(jì)數(shù)技術(shù)廣泛應(yīng)用于土壤含菌亮的測(cè)定、食品衛(wèi)生和水源污染度的檢驗(yàn)等方面。如果你趕興趣,可以從下列項(xiàng)目中選做一個(gè)。空氣中微生物總數(shù)的檢測(cè)水中細(xì)菌總數(shù)的檢測(cè)牛奶中細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)土壤中真菌(或放線菌)的分離與計(jì)數(shù)■高中生物課件(人教課標(biāo)版)課題3:
分解纖維素的
微生物的分離教學(xué)目標(biāo):1、知道纖維素酶的種類及作用2、初步掌握從土壤中分離出分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)方法閱讀課本27頁(yè)基礎(chǔ)知識(shí)部分第一、二段,回答下列問(wèn)題:1、纖維素在生物圈的分布狀況?2、纖維素酶的組成及作用?纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素。其中棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即CX酶、
C1酶和葡萄糖苷酶,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。一、纖維素和纖維素酶二、纖維素分解菌的篩選閱讀課本課本28頁(yè)相關(guān)部分,回答下列問(wèn)題:1、纖維素分解菌的篩選方法2、纖維素分解菌的篩選方法的原理剛果紅染色法:這種方法能夠通過(guò)顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選剛果紅是一種染料,它可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不和纖維二糖、葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解為中心的。這樣我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌透明圈
練一練:1、下列關(guān)于纖維素酶的說(shuō)法,錯(cuò)誤的是A、纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括三種B、纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C、纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D、葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖2、利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌,下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是A、剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物B、剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物C、剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D、若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈,則說(shuō)明已篩選出了纖維素分解菌三、實(shí)驗(yàn)操作土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落土壤取樣取樣的環(huán)境是怎樣的,作出這種選擇的理由是什么?選擇纖維素豐富的環(huán)境,如樹林中多年落葉形成的腐殖土,多年積累的枯枝敗葉等等。生物與環(huán)境的互相依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中纖維素分解菌的含量相對(duì)提高,因此從這種土壤中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境選擇培養(yǎng)1、選擇培養(yǎng)的目的:增加纖維素分解菌的濃度,以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物2、制備選擇培養(yǎng)基參照課本29頁(yè)旁欄中的比例配置,回答下列問(wèn)題a、旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為什么?b、這個(gè)培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有選擇作用?如果具有,是如何進(jìn)行選擇的?
c、你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn),說(shuō)明選擇培養(yǎng)基的作用是液體培養(yǎng)基,原因是配方中無(wú)凝固劑有選擇作用,本配方中的碳源是纖維素,所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與之對(duì)照3、操作方法:將土樣加入裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中,將錐形瓶固定在搖床上,在一定溫度下震蕩培養(yǎng)1~2天,直至培養(yǎng)液變渾濁。也可重復(fù)選擇培養(yǎng)思考:為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用梯度稀釋按照課題1的稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋,稀釋最大倍數(shù)到106將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上1、制備培養(yǎng)基:參照旁欄中的比例2、涂布平板:將稀釋度為104~106的菌懸液各取0.1ml涂布在培養(yǎng)基上,30℃倒置培養(yǎng)挑選產(chǎn)生透明圈的菌落參照課本剛果紅染色法,挑選產(chǎn)生透明圈的菌落,一般即為分解纖維素的菌落剛果紅染色法方法一:先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)方法二:在倒平板時(shí)就加入剛果紅思考:這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足方法一缺點(diǎn)是操作煩瑣,加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜;優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用方法二優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,不存在菌落混雜問(wèn)題缺點(diǎn)一是由于培養(yǎng)基中還含有淀粉類物質(zhì),可以使能產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng);缺點(diǎn)二有些微生物具有降解色素的能力,它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)降解剛果紅,形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分練一練1、在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌,符合下列哪一生物學(xué)觀點(diǎn)?()A、生物結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)的觀點(diǎn)B、生物結(jié)構(gòu)與功能整體性觀點(diǎn)C、生物與環(huán)境相適應(yīng)的觀點(diǎn)D、生物發(fā)展進(jìn)化的觀點(diǎn)2、從土壤中分離獲得某種微生物的步驟是()①土壤取樣②梯度稀釋③選擇培養(yǎng)④菌懸液涂布平板⑤挑選出單個(gè)菌落A、①②③④⑤B、①③②④⑤C、①②④③⑤D、①④②③⑤3、有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是()A、可以增加纖維素分解菌的濃度B、可以減少纖維素分解菌的濃度C、所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基D、所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基CBA四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)(一)培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落(二)分離的結(jié)果是否一致設(shè)置對(duì)照,若對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中無(wú)菌落生長(zhǎng)則說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落,則說(shuō)明可能獲得了分解纖維素的微生物。如果不同,分析產(chǎn)生不同結(jié)果的原因。五、課題延伸本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選,但是這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn),纖維素酶的測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定。作業(yè):完成基礎(chǔ)訓(xùn)練19-22頁(yè)相關(guān)題目■高中生物課件(人教課標(biāo)版)
組織培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)繁殖扦插嫁接壓條
課題1菊花的組織培養(yǎng)活動(dòng)1:什么是細(xì)胞分化?細(xì)胞分化的原因和結(jié)果?愈傷組織是怎樣形成的?有什么特點(diǎn)?組織培養(yǎng)的過(guò)程?以及組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)?脫分化、再分化?影響組織培養(yǎng)的因素?菊花組織培養(yǎng)的過(guò)程,及注意的問(wèn)題?
是指在人工培養(yǎng)基上,離體培養(yǎng)植物的器官、組織、細(xì)胞,并使其生長(zhǎng)、增殖、分化以及再生長(zhǎng)成植株的技術(shù)。組織培養(yǎng)1、細(xì)胞分化的原因是什么?在特定的時(shí)間和空間條件下,基因的選擇性表達(dá)。思考:(一)植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程細(xì)胞分化個(gè)體發(fā)育中細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過(guò)程植物組織培養(yǎng)過(guò)程示意圖2、上面的示意圖中還有什么地方不夠完善的?沒(méi)有進(jìn)行滅菌處理,試管也沒(méi)有做密封等。離體的植物器官、組織、細(xì)胞脫分化愈傷組織再分化根芽植物體植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程愈傷組織愈傷組織是通過(guò)細(xì)胞分裂形成的,其細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則,高度液泡化呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。(二)影響植物組織培養(yǎng)的因素
材料的選擇、營(yíng)養(yǎng)成分、激素、一定的外界因素(溫度、空氣、無(wú)菌環(huán)境、適合的PH、適時(shí)光照等)。MS固體培養(yǎng)基成分及比例同微生物培養(yǎng)基相比,MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同?
微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同,MS培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng),無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類。閱讀課文,思考以下問(wèn)題1.同微生物培養(yǎng)基相比,MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同?2、你認(rèn)為組織培養(yǎng)過(guò)程中,成功的關(guān)鍵有哪些?這些步驟的適宜條件是什么?
組織的脫分化及愈傷組織的再分化。
植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,影響植物細(xì)胞脫分化、再分化的最重要因素是植物激素。激素配比對(duì)組織培養(yǎng)的影響在培養(yǎng)基中需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等植物激素,其濃度、使用的先后順序、用量的比例等都影響結(jié)果。
高利于根分化、抑制芽的形成生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素低利于芽的形成適中利于愈傷組織的形成
活動(dòng)2:用自己的話把菊花組織培養(yǎng)的操作流程給描述出來(lái)?(提示:怎樣配制MS培養(yǎng)基?外植體消毒應(yīng)如何進(jìn)行?接種、培養(yǎng)、移栽時(shí)應(yīng)注意什么問(wèn)題?)1、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時(shí)帶入4、環(huán)境不清潔結(jié)合錄像外植體滅菌與接種操作,談?wù)劷M織培養(yǎng)污染的主要途徑及怎樣預(yù)防污染?污染的預(yù)防措施(一)防止外植體帶菌(二)保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌(三)操作人員嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程(四)保證接種與培養(yǎng)環(huán)境清潔試評(píng)價(jià)下列操作正確與否本課題內(nèi)容小結(jié)菊花組織培養(yǎng)基礎(chǔ)知識(shí)實(shí)驗(yàn)操作植物體的組織培養(yǎng)影響組織培養(yǎng)的因素細(xì)胞分化細(xì)胞全能性組織培養(yǎng)過(guò)程營(yíng)養(yǎng)激素環(huán)境條件MS固體培養(yǎng)基制備外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培■高中生物課件(人教課標(biāo)版)課題2:
月季的花藥培養(yǎng)一、課題目標(biāo)說(shuō)出被子植物花粉發(fā)育的過(guò)程及花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑,說(shuō)出影響花藥培養(yǎng)的因素,學(xué)習(xí)花藥培養(yǎng)的基本技術(shù),嘗試用月季或其他植物的花藥進(jìn)行培養(yǎng)。二、課題重點(diǎn)與難點(diǎn)課題重點(diǎn):選取適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基。課題難點(diǎn):選取適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基。(一)被子植物的花粉發(fā)育被子植物的花的結(jié)構(gòu)是怎樣的?觀察下圖,和減數(shù)分裂比較,你能指出對(duì)應(yīng)的時(shí)期嗎?又有何特點(diǎn)?雌蕊:花絲花藥:囊狀結(jié)構(gòu),內(nèi)有很多花粉?;ǚ凼切℃咦幽讣?xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂而形成的,因此,花粉是單倍體的生殖細(xì)胞?;ǚ鄣陌l(fā)育要經(jīng)歷:四分體時(shí)期、單核期、雙核期注意:①二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核。(精子在花粉管中形成)②三核花粉粒:有些植物的花粉,在成熟前,生殖細(xì)胞進(jìn)行一次有絲分裂,形成兩個(gè)精子,這樣的花粉在成熟時(shí),含有一個(gè)營(yíng)養(yǎng)核和兩個(gè)精子。③兩個(gè)精子和一個(gè)營(yíng)養(yǎng)核的基因型相同。④1花粉母細(xì)胞4個(gè)小孢子減分有分4個(gè)花粉管細(xì)胞核4個(gè)生殖細(xì)胞核有分8個(gè)精子又稱人造種子、合成種子或無(wú)性種子,就是將組織培養(yǎng)所產(chǎn)生的體細(xì)胞胚、不定芽、頂芽、腋芽或小鱗莖等繁殖體,包裹在能提供營(yíng)養(yǎng)的膠囊(人造胚乳)里,再在外面包上一層具有保護(hù)功能和防止機(jī)械損傷的外膜(人造種皮),造成一種類似種子的結(jié)構(gòu),能在一定的條件下萌發(fā)生長(zhǎng),形成完整植株。(二)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑有哪兩種途徑?原因是什么?花藥中的花粉花藥中的花粉胚狀體愈傷組織叢芽叢芽生根移栽花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑(三)影響花藥培養(yǎng)的因素1、材料的選擇不同植物同一植物的不同生理狀況(花期早期-初花期)合適的花粉發(fā)育期(單核居中期與靠邊期之間)此外,植株生長(zhǎng)條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等2、培養(yǎng)基的組成材料的選擇:花期早期時(shí)的花藥比后期的更容易產(chǎn)生花粉植株。一般,月季的花藥培養(yǎng)時(shí)間選在五月初到五月中旬,即月季的初花期。選擇合適的花粉發(fā)育時(shí)期也是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素。一般來(lái)說(shuō),在單核期,細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期,花藥培養(yǎng)成功率最高。為了挑選到單核期的花藥,通常選擇完全未開放的花蕾。為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來(lái)困難?答:花瓣松動(dòng)后,微生物就可能侵入到花藥,給材料的消毒帶來(lái)困難。(一)材料的選取染色鏡檢(二)材料的消毒酒精、氯化汞、次氯酸鈣(三)接種和培養(yǎng)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)
選擇花藥時(shí),一般通過(guò)鏡檢來(lái)確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。最常用的方法有醋酸洋紅法。但是,某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色,需采用焙花青-鉻礬法,這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。1、花蕾用V/V為70%的酒精浸泡30秒2、無(wú)菌水清洗3、無(wú)菌吸水紙吸干花蕾表面的水分4、放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中2~4分鐘(也可質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液)5、無(wú)菌水沖洗3~5次用于培養(yǎng)花藥,實(shí)際上多數(shù)未熟,由于它的外面有花萼、花瓣或穎片保護(hù),通常處于無(wú)菌狀態(tài),所以只要將整個(gè)花蕾或幼穗消毒即可。
滅菌后花蕾,要在無(wú)菌條件下除去萼片和花瓣,并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。在剝離花藥時(shí),要盡量不損傷花藥(否則接種后,容易從受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織),同時(shí)還要徹底去除花絲,因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。通常每瓶接種花藥7-10個(gè),溫度控制在25℃左右,不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。一般經(jīng)過(guò)20-30天培養(yǎng)后,會(huì)發(fā)現(xiàn)花藥開裂,長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體。將愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上,以便進(jìn)一步分化出再生植株。
如果花藥開裂釋放出胚狀體,則一個(gè)花藥內(nèi)就會(huì)產(chǎn)生大量幼小植株,必須在花藥開裂后盡快將幼小植株分開,分別移植到新的培養(yǎng)基上,否則這些植株將很難分開。在花藥培養(yǎng)中,特別是通過(guò)愈傷組織形成的花粉植株,常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變化。(主要原因是營(yíng)養(yǎng)核和生殖核融合造成的。)植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的異同點(diǎn)項(xiàng)目相同點(diǎn)不同點(diǎn)植物組織培養(yǎng)技術(shù)離體的植物組織經(jīng)脫分化形成愈傷組織,再分化成叢芽,誘導(dǎo)出根,然后進(jìn)行移栽。外植體為體細(xì)胞,染色體數(shù)無(wú)需加倍?;ㄋ幣囵B(yǎng)技術(shù)取材為花藥,培養(yǎng)的為單倍體幼苗,植株弱小,高度不育,必須用秋水仙素處理,使染色體加倍,恢復(fù)正常植株的染色體數(shù),而且為純種。三、課題背景分析課題背景介紹了花藥培養(yǎng)的歷史以及花藥培養(yǎng)在育種工作上的意義。有條件的話可以嘗試某種植物的花藥培養(yǎng)。被子植物的花粉發(fā)育知識(shí)要點(diǎn):1.花粉是單倍體生殖細(xì)胞;2.花粉的發(fā)育要經(jīng)歷不同的時(shí)期。產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑知識(shí)要點(diǎn):花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑。影響花藥培養(yǎng)的因素知識(shí)要點(diǎn):選取適宜的材料和培養(yǎng)基組成是花粉植株誘導(dǎo)成功的關(guān)鍵。練習(xí)1.答:F2代紫色甜玉米的基因型組成可能為Aasusu或AAsusu。如果運(yùn)用常規(guī)育種方法,將F2代中的紫色甜玉米與白色甜玉米(aasusu)進(jìn)行測(cè)交,可以選擇出基因型為AAsusu純種紫色甜玉米。但這種方法比較繁瑣,耗時(shí)也較長(zhǎng),需要至少三年的選種和育種時(shí)間。如果利用花藥培養(yǎng)的技術(shù),在F1代產(chǎn)生的花粉中就可能有Asu的組合,再將花粉植株進(jìn)行染色體加倍,就可以直接得到紫色甜玉米的純合體(AAsusu)。這種方法可以大大縮短育種周期?!龈咧猩镎n件(人教課標(biāo)版)+課題1:果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用酶普遍存在于動(dòng)、植物和微生物中,將酶從生物組織或細(xì)胞以及發(fā)酵液中提取出來(lái),可加工成具有一定純度標(biāo)準(zhǔn)的生化酶制劑。
思考討論
酶具有哪些獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)其本質(zhì)和作用場(chǎng)所是什么?
●催化效率●專一性強(qiáng)●作用條件溫和
酶的本質(zhì)主要是蛋白質(zhì),少數(shù)是RNA.在生物體內(nèi)外均可發(fā)揮作用一.果肉的出汁率低,耗時(shí)長(zhǎng).二.榨取的果汁渾濁,黏度高,易發(fā)生沉淀.為什么能夠提高水果的出汁率并使果汁變得澄清?果膠酶有什么作用?1.果膠是植物組織的組成成分之一,它主要存在于植物組織的哪一部分?()A.細(xì)胞核B.細(xì)胞質(zhì)C.細(xì)胞間隙D.細(xì)胞壁及胞間層2.果膠酶能將植物組織內(nèi)的果膠分解成()A.透明果汁B.半乳糖醛酸C.丙酮酸D.酶制劑3.果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱,它不包括()A.多聚半乳糖醛酸酶
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