仿制藥及一致性評價的研究思路及關鍵研究內容解讀課件

仿制藥注冊和一致性評價研究思路和關鍵研究內容孫亞洲2016.10.22仿制藥注冊和一致性評價研究思路和關鍵研究內容孫亞洲主要內容仿制藥一致性評價的核心點解讀1

2幫助API排除豬一樣的隊友---原輔料相容性研究及案例解析2.12.2制劑處方前研究的重點內容2.3關鍵項目分析方法的建立和驗證與制劑相關的關鍵理化性質的研究及案例解析2.4知彼知己、百戰(zhàn)不殆---參比制劑解析的意義、方法及案例解析2.5原料藥與參比制劑雜質譜對比分析、原料藥的精制處理及內控標準的建立主要內容仿制藥一致性評價的核心點解讀12幫助API排3.1實驗室小試處方工藝研究的關鍵點解讀中試處方工藝研究的關鍵點解讀大生產處方工藝研究的關鍵點解讀工藝驗證的關鍵點解讀3.23.33.43制劑處方工藝開發(fā)研究的流程和關鍵點解讀3.1實驗室小試處方工藝研究的關鍵點解讀中試處方工藝研究的關普通固體制劑體外溶出度評價方法重點事項介紹44.1溶出度評估前基礎研究4.1.1生物藥劑學分類系統4.1.2原料藥在不同溶媒中溶解度和穩(wěn)定性的測定4.2與溶出度有關的生理及基礎知識4.2.1人體胃部結構圖及小腸的結構特點、藥物主要吸收部位4.2.2常用的溶出介質、轉速與人體生理環(huán)境的關系4.3方法的開發(fā)

4.3.1實驗儀器、裝置的檢查和校正

4.3.2實驗現象觀察4.3.3處方工藝研究初期對溶出結果的分析、對策和初步判斷4.3.4介質的脫氣處理

4.3.5沉降籃

4.3.6攪拌

4.3.7取樣及時間點設計普通固體制劑體外溶出度評價方法重點事項介紹44.1溶出4.4參比制劑及存在的問題、

參比制劑批次如何選擇4.5用什么樣品做溶出曲線對比4.6溶出液中藥物量的測定方法及驗證人體生物等效性試驗（BE試驗）5.1藥品企業(yè)是臨床實驗的第一責任人5.2試驗基本要求

5.3研究的總體設計

5.4

BE研究報告內容5.5

生物等效性的豁免

54.4參比制劑及存在的問題、

參比制劑批次如何選擇一、仿制藥及一致性評價制劑研究的核心點解讀2、核心改變（1）以中試水平注冊生產的原新藥/補充申請開發(fā)模式，轉變?yōu)橐宰罱K的大生產線制備的“生產水平合格樣品”進行注冊！（一致性評價要求與原生產線保持一致）1、目標：產品不僅可通過一致性評價，并且朝上市后每批次產品仍然可以達到與參比制劑等效的最高境界不懈努力和邁進?。。?--仍停留在以做BE試驗的“樣品”通過一致性評價即大功告成的企業(yè)，不太可能通過一致性評價的考驗！這可能是近半數企業(yè)的態(tài)度和做法。一、仿制藥及一致性評價制劑研究的核心點解讀2、核心改變1、目---將對現有研發(fā)思維、體系、整體水平和費用帶來深層次的革命性巨變，必將淘汰掉一大批“劣質的企業(yè)和研發(fā)公司”。---幾十年的“以投機取巧、弄虛作假完成藥學開發(fā)即是大功告成，BE/或臨床無論如何做都可以獲得生產批件”的新藥開發(fā)模式，導致整個研究體系和思維處于新藥開發(fā)研究的初級階段水平，只會“做藥學”！難以勝任現行新的研究模式。---要轉變到以臨床療效為評價終端的高度，“俯視性”的指導整個藥品的一致性評價研究。---現狀：大部分處于希望審評機構詳細指導下的“填空式”研發(fā)水平，而非“本質的發(fā)現，科學的設計，全面的研究”來說服審評機構。---企業(yè)及研發(fā)公司需要轉變到配備各專業(yè)的人員，或整合社會資源協作完成；僅憑藥學人員無法勝任。2、核心改變（2）以藥學達到“質量一致性”評價為終點的原新藥開發(fā)/補充申請模式，轉變?yōu)橐浴芭R床效果一致”為終點的科學模式！---將對現有研發(fā)思維、體系、整體水平和費用帶來深層次的革命3、產品開發(fā)的科學整體觀

---溶出派：制劑研究輔佐溶出度研究，以體外溶出度為評價終端，體外4條溶出曲線一致，即可保證90%以上藥物BE一致！？---BE派：以體內生物等效性為評價終端，不看重溶出度研究，提倡開發(fā)過程中進行多批次樣品的BE研究。---制劑派：制劑是龍頭，溶出度和BE是眼睛，制劑研究決定BE的一致性。---整體理念：藥物-原料藥理化性質；人體-藥代、藥效、不良反應等；制劑因素-劑型、輔料和設備，所有因素共同影響著BE的一致性！?。∷幬镏苿óa品質量是生產決定?。┖腿梭w是決定因素，溶出度、BE及其它是客觀指標-眼睛；所有的因素均屬于質量控制體系，都同樣重要，不可厚此薄彼，只是難以程度、研究時間長短的不同！

科學認識觀殊途同歸！3、產品開發(fā)的科學整體觀不在今天的討論范圍內不在今天的討論范圍內1、處方前研究的重點內容---是在已完成全面、充分的文獻調研，提交出立項報告和項目研究計劃書的基礎上，開始進行的實驗研究！---此部分非常重要，但以前被大部分研究者排除在外，一上來就

直奔處方工藝研究而去！！

但欲速則不達，仍將回到原點?。?.1

關鍵項目分析方法的建立及目的---兵馬未動糧草先行?。?）需要建立方法的主要項目：有關物質、聚合物、對映異構體、溶出度及含量等。（2）目的和作用：為各項研究建立“適宜的”評價方法和手段。二、處方工藝研究開發(fā)1、處方前研究的重點內容二、處方工藝研究開發(fā)（3）注意事項和存在的問題：1）前期建立的方法并不一定與最終質量標準中的方法一致。---體現藥品研發(fā)的研究過程變化和發(fā)展提高理念。2）有關物質---檢測方法建立的原則是篩選出雜質檢測能力強的色譜條件并進行有針對性的部分項目方法學驗證！---因事先難以判斷哪些屬于工藝雜質和/或降解產物，故盡可能將已有雜質和潛在雜質有效檢出（可以通過獲得多批次原料藥的粗品、購買到已知雜質、原料藥適當破壞等方式的樣品進行考察），通過前期研究到小試甚至中試樣品的各種研究，尋找出哪些是屬于制劑的降解產物，對一般的工藝雜質通過建立原料藥的內控標準進行控制；再建立針對高毒性雜質及降解產物的制劑有關物質檢測方法（可能同前期方法，也可能改為簡便的條件）。（3）注意事項和存在的問題：---EP方法雜D與溶劑峰分離不佳，基線漂移，出現小梯度峰；但各個已知雜質均可得到分離。---CP方法雜D與溶劑峰重疊，雜質F與主峰重疊，且分離時間過長-

經對原料藥和原研藥的有關物質檢測對比，最終確定采用EP色譜條件基線處方前有關物質研究！雜DEP方法CP方法---EP方法雜D與溶劑峰分離不佳，基線漂移，出現小梯度峰；3）溶出度---原研藥的溶出度是如何定的？為何要與參比制劑進行溶出曲線的對比？

原研藥的溶出度來源于臨床試驗，即溶出度的方法和限度是根據臨床而不是藥學確定的?、衿谂R床：可以獲得治療窗的上限-最低中毒血藥濃度、藥代參數和特性、生物利用度等，如首過效應、是否線性藥代或范圍、個體差異和變異性大小情況、是否有腸肝循環(huán)等。Ⅱ期臨床：初步獲得治療窗的下限-最低有效血藥濃度，以及與藥效的相關性。Ⅲ期臨床（通常分為多期完成）：在獲得充分藥動學資料基礎上，進行一般3到4個不同溶出度樣品（如30分鐘溶出25%、50%、80%和100%）在人體內的生物利用度對比研究，確定在什么溶出度以上可以達到起效要求，并獲得是否具有體內外相關性的結果。3）溶出度---即仿制藥研究時，已有了達到起效要求的標桿，如果溶出度各種情況下做到與其一致-相當于參比自己在重復生產，當然可以提高BE等效的成功率！---但BE不僅僅只受溶出度一個因素影響，且不一定體內外相關，因此溶出度也不是萬能的！溶出一致但BE不等效，或者溶出不一致但BE等效的案例同樣很多！---應該在完成原料藥的溶解性、穩(wěn)定性等試驗考察后進行；前期不局限在4條溶出曲線，主要是篩選出具有區(qū)分力的溶出度檢測條件。---如參比制劑易得并較為便宜，可在初期采用參比制劑篩選，小試階段用自制樣品確認（最佳的方式）。如相反，則采用自制小試樣品進行篩選研究，參比制劑確認。

4）含量測定---在未知數較多的前期研究中，推薦采用專屬性高的HPLC等方法測定含量。5）其它：根據原料藥和制劑的特性選擇需要控制的項目建立方法。---即仿制藥研究時，已有了達到起效要求的標桿，如果溶出度各1.2原料藥與參比制劑雜質譜對比分析、原料藥的精制處理及內控標準的建立（1）雜質譜的概念、對比的意義及技術要求1）雜質譜：是指包括藥物中各種潛在雜質的種類、來源、含量、結構及活性等的信息總和。---切記：雜質限度不是靠藥學來確定的??！只是我們習慣了仿制藥的以被仿制品標準或樣品雜質情況來制定限度的做法，以為雜質限度是通過藥學研究來確定！2）雜質譜對比：是對所有雜質種類、含量及分布的比較和分析，甄別哪些雜質為原研藥中不存在的新增雜質，哪些為超過原研藥及指導原則規(guī)定的超量雜質，并參照雜質研究相關技術指導原則的思路，重點研究論證新增雜質及超量雜質的可接受性。

眾多研究人員存在的最大誤區(qū)之一：不是所有出現的（如只有萬分之幾的）雜質都必須一致?。?！1.2原料藥與參比制劑雜質譜對比分析、原料藥的精制處理及---即分別對低于鑒定限的、低于質控限的、高于質控限的雜質進行對比，主要是對高于質控限度（即屬于特定雜質范疇）的雜質嚴格控制，低的可以不一致??！保險起見控制高于鑒定限的雜質一致?。。。?6自制藥原研藥---即分別對低于鑒定限的、低于質控限的、高于質控限的雜質進（3）雜質譜分析的基本思路1）由傳統的“以終為始”的被動思維上升到“以源為始”的主動控制模式。即不是從得到的產品分析結果-色譜圖開始分析產品雜質情況，而是從雜質來源的分析入手，結合產品的實際生產工藝、結構特點等分析可能存在于產品中的中間體、副產物、降解物、反應物料及由其引入的雜質等各種潛在雜質。---制劑研究時藥審中心建議盡可能從原料藥企業(yè)獲得合成路線、起始物料及中間體，特別是粗品（多批次），以證明各國藥典標準、或建立的有關物質方法的適用性。

案例：苯磺酸氨氯地平片的雜質控制原研藥為輝瑞的絡活喜片，處方組成為微晶纖維素、磷酸氫鈣、羧甲淀粉鈉、硬脂酸鎂；但國外有4種不同的處方組成，其中一種處方組成中含有乳糖，而氨氯地平中的伯胺基與乳糖可以發(fā)生美拉德（Maillard）縮合反應，乳糖中的雜質微量葡萄糖也同樣有此反應。（3）雜質譜分析的基本思路---含有乳糖的處方，質量標準中除控制原有的特定雜質A、B、D外，根據輔料的情況尚要控制特定雜質氨氯地平乳糖加成物和葡萄糖加成物。

從含有乳糖的源頭分析雜質的來源！---含有乳糖的處方，質量標準中除控制原有的特定雜質A、B、2）質量標準中對雜質的分類①特定雜質：是指高于質控限度的雜質。

技術要求：該類雜質中的每一個都必須在質量標準中進行定位，并制定每一個雜質的限度。---包括已知雜質和未知雜質。注意點---即不是特定雜質全部都要搞清楚結構！但未知雜質必須是原研藥中也同樣存在的??！---如何定位是質量研究和標準中的難題！②其它單雜：是指低于質控限度以下至可忽略雜質（如標準中有規(guī)定；制劑通常是指0.05%以下，原料藥要根據具體情況確定。）之間的所有雜質。也包括已知和未知雜質。---標準中通常以“其他單雜不得過0.1%（原料藥或高危制劑）或0.2%（普通制劑）”來控制。③總雜：是指全部雜質的總和，或者是去除某些指定雜質后的總和2）質量標準中對雜質的分類

3）根據風險級別及雜質類型制定相應的雜質分析與控制策略

①根據掌握的雜質譜概況，依據各類潛在雜質的風險級別、產生的可能性高低制定進一步的研究控制策略。其中遺傳毒性雜質在很低濃度時即可造成人體遺傳物質的損傷，進而導致基因突變并可能促使腫瘤的發(fā)生，各發(fā)達國家和組織均嚴格控制此類雜質。

因此類雜質含量極低，通常的有關物質檢查方法不能有效檢測，一般需要采取單獨的方法外標法進行檢測。如采用HPLC法，因供試品濃度很高，其它主成分、雜質干擾的可能性大幅增高。藥審中心對注冊申報的品種不管是新藥還是仿制藥，也不管國外藥典或CP2015的同品種標準只定單雜和總雜，在質量標準的有關物質項下，基本都是按照這3類雜質分別來要求！3）根據風險級別及雜質類型制定相應的雜質分析與控制策①通過雜質譜分析全面掌握產品的雜質概貌，根據各類潛在雜質的風險級別（一般較為安全的雜質；有毒性的雜質；遺傳毒性雜質等），有針對性地建立合適的分析方法，以確保各種潛在雜質的有效檢出和確認。②通過雜質譜分析明確可能的雜質來源和去向，在制備工藝設置相應雜質的針對性控制措施，并通過產品包裝和貯藏條件的研究，有效抑制藥品的降解，實現從雜質產生的源頭主動性地把控藥品雜質。③新藥開發(fā)中需要跟蹤雜質譜對安全性試驗或臨床試驗結果產生的影響，并結合相關指導原則、文獻信息等評估雜質的可接受水平，確立上市產品的雜質控制限度。④仿制藥的雜質譜需要與參比制劑一致，且雜質量不得高于參比品。即不是低于標準的限度，是低于參比的實際值?、偻ㄟ^雜質譜分析全面掌握產品的雜質概貌，根據各類潛在雜質4）與原研藥進行雜質譜的對比分析

①為什么要求必須與原研藥進行對比，而不能與國內已上市多年的產品比較？

因國外原研藥上市前經過了大量的安全性毒理試驗，大規(guī)模的人體臨床試驗，以及上市后的臨床使用跟蹤，獲得了較為詳細的資料。而國內上市品雖然使用人群遠高于原研藥，但幾乎沒有此類的、正規(guī)的、有可信度的、可獲得的資料來證明其安全性！---所以只認與原研藥或參比制劑對比的結果！

切記：雜質限度不是靠藥學來確定的??！只是我們習慣了仿制藥的以被仿制品標準或樣品雜質情況來制定限度的做法，以為雜質限度是通過藥學研究來確定！4）與原研藥進行雜質譜的對比分析（2）原料藥內控標準研究的重點和建立---因制劑的有關物質控制水平大幅提高，經常出現與原料藥有關物質控制水平“倒掛”現象，因此必須建立原料藥的內控標準。---對各國藥典和進口標準等進行對比研究，篩選出符合本制劑所用原料藥雜質分析的最佳條件，對工藝雜質和降解產物等進行控制。---制劑企業(yè)倒逼原料藥企業(yè)提高制備水平，但存在很多困難?。?）原料藥的精制處理及法規(guī)的非配套性帶來的困惑---誰來處理？誰有資格處理？

藥審中心支持精制！但現場核查及動態(tài)生產考核時認為不合法！---原料藥廠家處理：不同的劑型可能對雜質的要求不同，精制的工藝也可能不同。是否有改變工藝的嫌疑？未申報批準如何外售？---制劑廠家處理：原料藥是按品種認證的，有該原料藥的GMP車間嗎？監(jiān)管部門會批準用于精制的GMP車間嗎？---實際上制劑注冊者很少有達到精制大生產化的要求?。?）原料藥內控標準研究的重點和建立---誤差分析：移液管和吸量管的區(qū)別和使用范圍---流動性配制：有機相和水相的量取方式1.3數據準確性在試驗研究中的重要性---是一切研究結果分析、判斷的前提，是基礎的基礎；但恰恰又是阻礙科研水平提升的最主要因素之一！---借用川大承強老師的精辟語錄：魔鬼都在細節(jié)中！?。?/p>

---誤差分析：移液管和吸量管的區(qū)別和使用范圍1.3數據容量法建立時，供試品的稱樣量、滴定液的濃度、滴定管的體積（滴定液消耗量）如何對應選擇？10ml25ml50ml容量法建立時，供試品的稱樣量、滴定液的濃度、滴定管的體積（滴---稀釋的方式對準確性的影響：哪種方式更佳？---案例1：UV法含量測定回收率試驗原先采用方式2，小瓶先溶解，移液2ml到大瓶稀釋。結果因設計不合理而導致RSD不合格，藥檢所復核沒通過。改為方式1，稱樣量相應減少，順利通過！

原因：誤差大小的差異！5ml2ml方式1方式2---稀釋的方式對準確性的影響：哪種方式更佳？5ml2ml方案例2：奧美拉唑碳酸氫鈉散劑的含量測定---制備BE試驗用樣品時與注冊臨床的處方工藝未改變，只是將黃原膠由食品級改為符合15版藥典的藥用輔料（粘度提高到0.6Pa·S，比食品級高10倍以上），其它原料藥和輔料均與注冊核查樣品的同批次。---出現的問題：A、含量大幅下降；B、沉降比不合格。---導致的原因分析：A、含量測定方法采用的是上述方式1，小量瓶→大量瓶。因黃原膠粘度大幅增高，小量瓶中溶液粘度過高，過濾困難、移液時殘留量增大等所致。B、黃原膠因粘度增高，遇水凝膠化現象更嚴重，溶解速度減慢，溶液的粘度初始階段反而降低所致。案例2：奧美拉唑碳酸氫鈉散劑的含量測定---解決方法：A、提出三種方案：a、改為方式1，先大量瓶，后移液到小量瓶；b、換用含有乙醇的溶劑，降低黃原膠粘性；c、換用內容量移液管

結果：a方案即圓滿解決！B、采取各種方式使黃原膠溶解

結果：混懸液樣品振搖10分鐘后再測定沉降體積比，即可合格！---解決方法：試劑的選擇原則：如配制流動相或溶出介質時的磷酸氫二鈉，存在

Na2HPO4（無水物）、Na2HPO4·2H2O、Na2HPO4·7H2O、Na2HPO4·12H2O四種。---按摩爾數配制時則以無水物計，沒有異議---按重量計（稱取2.8g）時用哪種？？？---切記：按藥典附錄試藥規(guī)定的分子式計-12個水！?。∮捎诓灰?guī)范導致在各實驗室、不同人員之間結果無法重現！分析天平的選擇原則：

天平的靈敏度（E）、感量（D;E=10D）和樣品稱量量之間的關系，決定分析結果的RSD是否符合相應方法的誤差要求。---即萬分之一、十萬分之一（定量檢測為10mg以上）和百萬分之一的天平應該對應于多大的最小稱樣量？其它：舉例說明試劑的選擇原則：1.4與制劑性能相關的原料藥關鍵理化特性（1）理化性質1）物理性質：顯微形狀、堆密度、流動性、晶型、粒度及粒度分布、吸濕性、溶解性等。

案例1：氨氯地平（100倍）、阿托伐他汀鈣（400倍）顯微形狀

氨氯為低規(guī)格（5mg）、高溶解性；圓柱狀結晶，致使流動性差、堆密度低、粉性強，會影響混合均勻性。因此采取粉碎工藝進行前處理，解決其可壓性和均勻性問題。

阿托伐為難溶性，故需要微粉化處理。

氨氯粉碎前氨氯粉碎后阿托伐微粉化1.4與制劑性能相關的原料藥關鍵理化特性氨案例2：某API的顯微形狀與堆密度、流動性的相關性

球狀顆粒，應該流動性很好！---Mastersizer2000激光粒度儀測定結果：d(0.1)=1.219um，d（0.5）=3.528um，d（0.9）=8.219um---堆密度為0.192g/ml；振實密度為0.289g/ml---

流動性：休止角測不出，原料藥吸附在漏斗表面，不能自由流動，流動性很差。

案例2：某API的顯微形狀與堆密度、流動性的相關性說明書及專利處方：片重180mg主藥：5mg甘露醇130.9mg、預膠化淀粉（玉米）18mg、玉米淀粉18mg、共聚乙烯吡咯烷酮5.4mg、硬脂酸鎂2.7mg（1.5%）10um說明書及專利處方：片重180mg10um

甘露醇流動性很差與形態(tài)有關；但原料藥和淀粉形態(tài)和流動性之間為何會出現看起來是“矛盾的結果”？---需要綜合評判，在微粉級的狀況下，粒徑及粒徑分布是影響粉末物理性質的主因！---對片劑工藝和質量可能帶來的影響：①混合均勻性：是否需要與處方中流動性好的輔料先混合分散后再與其它輔料混合？與誰混合？做哪些研究？或溶解后與粘合劑一并加入？---API與除粘合劑、潤滑劑外的輔料分別混合、及一起混合，考察其各項性質和混合均勻性。

結果：①API與甘露醇、預膠化淀粉的混合物顯微照片顯示API細粉粘附在輔料顆粒上；②與輔料一起混合的均勻性良好。甘露醇流動性很差與形態(tài)有關；但原料藥和淀粉形態(tài)和流動性之間甘露醇、預膠化淀粉作為分散載體，可以吸附API，促進其混合均勻性！淀粉不吸附。因此結論是：將API與稀釋劑和崩解劑共同混合！API與甘露醇與預膠化淀粉與淀粉

---易出現的問題：

①易聚集性：高表面活性導致細粉聚團，無法過篩，影響含量均勻性。解決辦法-與適宜輔料混合后粉碎（為了分散）、過篩、高速混合。

②高吸附性：易產生靜電等，吸附在容器上導致含量下降。甘露醇、預膠化淀粉作為分散載體，可以吸附API，促進其混合均---研究原則：生產工藝越簡潔越好，不要人為把簡單問題復雜化！但工藝研究時要充分考慮到各種因素的影響并給予確認！②化學穩(wěn)定性：微粉化的粉末比表面積急劇增大，與輔料、空氣等的接觸大幅增加，有可能增加不穩(wěn)定的風險性。---可以通過原料藥和原輔料相容性來進行初步評判。---研究原則：生產工藝越簡潔越好，不要人為把簡單問題復雜化案例3：阿托伐他汀鈣的粒徑和粒徑分布---不能只看D90，要整體看其分布。---馬爾文的儀器對于難溶性藥物不同測定方法差異較大，需要進行方法學對比，選擇適宜的檢測方法，并進行相關的驗證。

干法基本屬于正態(tài)分布。案例3：阿托伐他汀鈣的粒徑和粒徑分布---乙醚中出現雙峰現象是有可能性的，需要進一步確證。---水中明顯是有部分微細粉末被溶解，且因高表明能作用，粉末有聚集現象。---乙醚中出現雙峰現象是有可能性的，需要進一步確證。案例4原料藥的晶型和粒度及粒度分布（1）不同晶型：影響藥物的溶解度、穩(wěn)定性等。主要與難溶性藥物有關，高溶解性藥物通常不需要研究。---對于具有多晶型的難溶性藥物，首先必須清楚原研對照藥的晶型，如沒有文獻資料可以確定，需要通過X-衍射、電鏡掃描、拉曼光譜等方法進行研究確認。---仿制藥最好與原研對照藥晶型一致，但不是必須一致！如因專利、工藝等原因不一致時，必須對不同晶型的原料藥和制劑進行詳細的對比研究，包括體內等效性和可能的臨床試驗，以證明選用晶型的合理性和可行性，不能不進行研究而想蒙混過關！（2）粒度及粒度分布---難溶性藥物的溶解度與粒度及分布有關，進而影響制劑的溶出度。如某藥物，在D90為30um時與原研品一致。微粉化（25um以下）后溶出高于對照藥；45um時明顯低于對照藥。案例4原料藥的晶型和粒度及粒度分布如某藥物，在D90為30---微粉化是眾多難溶性藥物提高溶出度的有效的常用方式，但同時要注意制劑工藝中原料藥因粉末過細靜電及聚集效應增大，容易出現聚團導致均勻性出現問題；且一般不能采取直接將原料藥過篩分散的工藝（越振搖越聚團）。舉例：非布司他片原研上市品處方組成：非布司他（微粉級）乳糖、微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、HPMC、硬脂酸鎂、薄膜衣。片重分別約為262mg（規(guī)格40mg），523mg（規(guī)格80mg）。國內注冊片劑處方相同，但片重（規(guī)格40mg）僅100mg，原料藥單獨過不了40目篩；將原輔料初混后再進行混合時原料藥聚團，60目篩也過不去（輔料全通過，剩下原料藥的小球）。但將微晶纖維素量提高，片重近200mg時，全部可以通過100目！

非布司他分散在輔料中，分散性與輔料量有關，其片重的確定具有很高的科學性。---說明處方一致并不能保證質量一致！不能似是而非，需要從“本質上達到一致”。---微粉化是眾多難溶性藥物提高溶出度的有效的常用方式，但同2）化學性質：穩(wěn)定性等，一般需要進行影響因素和強制破壞研究，根據劑型的不同，考慮固體和/或液態(tài)下的破壞。（2）生物藥劑學分類及藥代動力學參數---主要是針對固體口服制劑。查詢得到藥物是屬于BCSⅠ～Ⅳ的具體分類和藥代參數，會對藥物制劑的處方工藝研究和溶出度方法建立、測定結果分析，特別是BE研究具有極高的指導意義。---BE豁免不要抱過大希望，只有FDA和歐盟明確規(guī)定可以豁免的，才能以文獻資料為證據提交豁免申請；其它需要按照指導原則進行依據的研究，而其并不比做BE簡單，甚至更為復雜！

藥審中心基本不認可BE豁免，此政策只針對一致性評價！

需要全面考慮、篩選出與制劑“有關的各項性質”，都會影響制劑的處方和工藝的設計、制備過程和質量，只是嚴重程度大小而已，不能“厚此薄彼”，但不同項目研究的工作量和難易程度差異極大！2）化學性質：穩(wěn)定性等，一般需要進行影響因素和強制破壞研究

1.5原輔料相容性（1）目的及前提等

---目的：此項研究是為了在盡可能短的時間內發(fā)現原料藥與“過量-高于處方中比例幾倍”輔料間配伍時可能存在的相互作用，因此不是考察“穩(wěn)定性”而是“相對變化趨勢”！故采用的是相對劇烈的條件。

對于與參比制劑處方組成一致者，主要是考察輔料質量；不一致者是篩選輔料種類及質量。

---前提：是在對原料藥的理化性質已充分了解和研究（如完成影響因素和破壞試驗）、并對輔料的特性有充分了解的基礎上進行。

---適用范圍：不是所有制劑都能夠進行相容性試驗，如乳膏、一些注射劑等。需要根據劑型的特點、制劑中原料藥的特性、處方組成等合理設計。---設計原則：API與處方中每個輔料一一混合為受試品，但特殊情況下需要幾個輔料一并考察，如有穩(wěn)定劑、助溶劑等。

1.5原輔料相容性

---原輔料的比例：除按照指導原則設計外，需要根據規(guī)格、片重（已知被仿制藥片重）等，有針對性的設計。

如低劑量藥物（5mg以下），片重在100mg以上，與稀釋劑的比例可能就要高于1∶10；而與用量少的粘合劑、潤滑劑等的比例可能就需要降低。

如是高劑量藥物（0.3g以上），輔料總量低于原料藥量，可能以上比例就要相反。---試驗條件：不局限于指導原則，可結合工藝過程設計。如通常采用將樣品加入約5%水密封、或放在RH75%等的環(huán)境下，置于50-60℃加熱，最多30天；如期間已出現顯著性變化，則即可停止；變化太快，如5天就出現顯著變化，則證明條件過于劇烈，可能缺乏“區(qū)分性”，需要降低條件。

如原料藥影響因素已證明對光不敏感，則無需進行光照試驗，反之要做！核心：因“藥”而異，沒有固定的模式?？茖W、合理為原則！---原輔料的比例：除按照指導原則設計外，需要根據規(guī)格、

（2）不同劑型原輔料相容性試驗的設計特點

---固體制劑：API與輔料混合后進行。---液體制劑：API在水中溶解/或混懸，調節(jié)至穩(wěn)定的pH值后進行。（3）相容性試驗研究的主要問題1）數據結果不穩(wěn)定，忽高忽低的鋸齒狀。---樣品混合不均勻，和/或取樣時未混勻。（請注意具體的試驗設計?。?）得到數據但無法判斷結果，或出現錯誤判斷。---沒有設計空白對照/API對照、上市藥對照等參照物同時進行對比試驗。3）結論錯誤。A：不是出現變化該輔料即不可以使用---看的是相對變化程度。B：固體制劑，如5天檢測出現降解，下結論不能采用濕法制粒工藝！---與濕法制粒的干燥時間不具有可比性。5天不穩(wěn)定，不能說明1小時（流化干燥）或6小時（箱式干燥）內不穩(wěn)定。

（4）試驗設計：注重細節(jié)的考慮，保持整個試驗過程中樣品條件的一致性。（2）不同劑型原輔料相容性試驗的設計特點（4）案例分析1）阿托伐他汀鈣片特點：原料藥穩(wěn)定，但與多種輔料配合后穩(wěn)定性下降，需要添加碳酸鈣做穩(wěn)定劑。（4）案例分析仿制藥及一致性評價的研究思路及關鍵研究內容解讀課件2）XXX注射劑考察輔料與主藥之間相容性，配制7組溶液，分別置高溫（60℃）、光照（12000Lux）條件下，于不同天數取樣檢測主藥的有關物質、含量以及抗氧劑的含量，觀察溶液顏色與濁度以及檢測溶液的pH。結果：A、抗氧劑Ⅰ顯著影響主藥的穩(wěn)定性，特別是在光照條件下，5天后主藥已完全降解；B、抗氧劑Ⅱ對主藥有保護作用；C、在同時有抗氧劑Ⅰ、Ⅱ的條件下，主藥的穩(wěn)定性顯著提高。D、后續(xù)研究證明配液過程中充氮氣可以保護抗氧劑Ⅰ。

---四連環(huán)套！2）XXX注射劑3）克霉唑乳膏原料藥與吐溫-80的相容性-60°30天經與各種輔料的相容性考察，均只有雜質A發(fā)生變化，TW-80為變化最大輔料。小試樣品的影響因素試驗結果也只有雜A增大。

因此最終改為等度色譜條件，只對雜A按照特定雜質進行控制。雜質A3）克霉唑乳膏原料藥與吐溫-80的相容性-60°30天雜質A1.5、參比制劑分析的意義與方法

（1）參比制劑分析的重大意義---推薦采用反向工程。一般研究者的目的通常只是為了研究處方工藝；高水平者目的是為了研究參比的質量控制！---對于固體制劑，研究溶出的目的是為了提高仿制藥一致性評價通過BE的成功率，不是替代BE。---仿制品在藥物溶出/釋放機理與參比制劑一致的前體下，如果能達到在任何條件下與參比制劑溶出一致（不僅僅是4條），那通過BE的成功率就很高，但少數體內吸收差異很大的藥物除外。充分分析、研究清楚參比制劑的情況，可達事半功倍的效果?。。?.5、參比制劑分析的意義與方法充分分析、研究清楚參比制劑的（2）原研藥分析的內容及方法1）內容---物理性質：如規(guī)格、重量、形狀等---處方組成：輔料種類、規(guī)格及資料來源，不同規(guī)格處方或比例是否一致等---工藝研究：是否微粉化，制粒是干法、濕法、直接壓片、包衣目的等2）方法---常規(guī)方法：重量、水分測定、HPLC等---儀器分析：X-光衍射、掃描電鏡、熱分析、拉曼光譜等（2）原研藥分析的內容及方法（3）案例分析1）阿托伐他汀鈣片（立普妥）-以文獻為基礎的典范①處方組成及工藝---國外Lipitor說明書有處方組成。---規(guī)格、片重為：10mg（154mg）、20mg（約308mg）和40mg（約616mg）---美國專利USPatent5,686,104詳細給出了立普妥的具體處方和濕法制粒的制備工藝，并采用碳酸鈣作為穩(wěn)定劑保護阿托伐他汀鈣。

專利處方組成與說明書一致，但有具體用量。藥物6.91%，碳酸鈣22%，微晶纖維素40%，乳糖22.19%，交聯羧甲基纖維素鈉6%，羥丙基纖維素2%，吐溫800.4%，硬脂酸鎂0.5%。

按工藝案例用量計算，與原研片的片重也基本相吻合?。?）案例分析---經EDTA絡合滴定法測定立普妥片中碳酸鈣量，為21.8%，與專利的22%一致。---可以通過HPLC示差檢測器或激光蒸發(fā)檢測器測定出立普妥片中的乳糖含量；或者通過物理的溶解、干燥法測出水溶性輔料的用量。

從上述分析和研究證明專利信息較為可靠！另處方中的吐溫-80干法難以加入，濕法制粒工藝的可能性也很高。②晶型

文獻報道有多晶型現象，輝瑞子公司（沃尼爾·朗伯）在中國申請了阿托伐他汀鈣一系列晶型專利，有I型、II型和IV型的新型結晶，其中I型結晶阿托伐他汀水合物為三水合物，比無定形更純和更穩(wěn)定。

專利中有各種晶型的X-衍射圖譜。---經EDTA絡合滴定法測定立普妥片中碳酸鈣量，為21.無需再進行晶型的確定研究。只要確定所用原料藥為三水合物，且x-衍射圖與專利三水合物一致即可！但晶癖有可能出現不一致，如在研究中發(fā)現不同批次原料藥在同樣粒徑及粒徑分布等一致條件下溶出度差異較大，需要注意此方面問題。③主要輔料的用量考察---碳酸鈣：通過絡合滴定法測定出片劑用量。---乳糖：HPLC測定或溶解法粗略測定④吐溫-80的存在部位考察---應該是加到片芯中改善API的疏水性?？梢酝ㄟ^表面活性劑具有發(fā)泡特性，設計實驗來初步確認。---如在片芯中，可基本確定為濕法制粒工藝，專利較為可靠。上市說明書的藥物結構明確為三水合物的晶型Ⅰ無需再進行晶型的確定研究。只要確定所用原料藥為三水合2）瑞格列奈片規(guī)格：0.5、1mg、2mg。屬于及其難溶藥物，生物藥劑學BCSⅡ類化合物。原研藥處方組成如下：2）瑞格列奈片工藝：原料藥混懸在甘油中，加入含有葡甲胺的泊洛沙姆水溶液中，攪拌使藥物與葡甲胺反應成鹽而溶解；噴霧干燥，粉末與其它輔料混合后制粒，干燥，壓片。---國內仿制單位大多采用將原輔料直接混合濕法制粒的工藝，因原料藥未與葡甲胺成鹽，溶出度遠低于原研片，曲線對比不一致！---選擇成鹽工藝后，因生產企業(yè)固體制劑車間基本沒有配備噴霧干燥機，也需要改變工藝。大多將原料藥溶于乙醇后，加到含有甘油、泊洛沙姆和葡甲胺的水溶液中使其成鹽，作為粘合劑加入其它輔料中制粒。---處方中的波拉克林鉀國內無輔料批準文號，需要更換，通常以交聯聚維酮替代。工藝：原料藥混懸在甘油中，加入含有葡甲胺的泊洛沙姆水溶液中，---按國內新處方工藝制備的樣品，溶出度大幅提高，除水為介質外，其它溶出介質均與原研片可以達到一致；但在水中原研片溶出與其它介質一致，但自制片不崩解，片面形成凝膠狀粘液層，幾乎不溶出！

原因：泊洛沙姆遇水形成凝膠，但粘度受金屬離子特別是鉀離子的影響很大，會使粘度急劇下降，故原研片以波拉克林鉀為崩解劑！將自制片改為加入0.9%氯化鈉的溶液中則立即崩解，溶出度正常。---因瑞格列奈與葡甲胺成鹽后以粘合劑方式加入，充分分散在輔料中，與原研片形成粉末加入相比，暴露量增加，穩(wěn)定性出現問題，需要調整穩(wěn)定劑的用量。總結：關注點不能僅停留在溶出度測定，需要與處方工藝緊密關聯，全面分析評價！注意：原研品處方中含有葡甲胺的品種（不只是固體制劑），如替米沙坦片、酮洛酸氨丁三醇等，均是極難溶解的藥物，工藝上均是要保證與葡甲胺成鹽。---按國內新處方工藝制備的樣品，溶出度大幅提高，除水為介質3)布洛芬緩釋膠囊（史克芬必得）規(guī)格：300mg；性狀：為白色球形小丸，內有丸芯。膠囊內容物小丸的重量約400mg，去掉300mg布洛芬，輔料為100mg。分析：①處方：無緩釋材料，應該是靠布洛芬自身的溶解度以及小丸的緊密程度控制釋放；輔料除去丸芯后，可以得到粘合劑用量。②工藝：根據處方組成和小丸形態(tài)、存在丸芯幾方面判斷，其工藝不是采用擠出、滾圓工藝是采用往丸芯上噴藥物和輔料的混懸液/溶液、或者是采用離心滾圓工藝將藥物干粉逐步添加，噴粘合劑滾圓制丸的工藝。3)布洛芬緩釋膠囊（史克芬必得）4）埃索美拉唑鎂腸溶膠囊4）埃索美拉唑鎂腸溶膠囊①處方分析國外上市的兩種腸溶膠囊處方組成不同，主要原因是采用的腸溶衣材料不同所致。Emozul?產品采用的Methacrylicacid–ethylacrylatecopolymer(1:1)dispersion30是水性腸溶包衣材料，而NEXIUM?采用的methacrylicacidcopolymertypeC是醇性/水性腸溶包衣材料，但是以醇性方式應用，其它配套的輔料是根據腸溶包衣材料和溶劑的不同而相應選擇。②制備工藝分析

腸溶微丸由內至外依次為：含藥層：處方組成包括載藥體（糖丸芯）、主藥、粘合劑、pH調節(jié)劑（主要為堿）、增溶劑及溶劑；隔離層：處方組成包括含藥微丸、增塑劑、抗粘劑、衣膜成分及溶劑；腸衣層：處方組成包括含藥隔離衣丸、衣膜（腸溶膜）、增塑劑、抗粘劑及溶劑等。①處方分析③被仿制品的處方分析研究對購買到的國外兩種上市腸溶膠囊進行全面的處方組成分析研究。A、腸溶衣層的研究取適量被仿制品碾碎，用pH6.8的緩沖液溶解，過濾。---濾液：加酸析出腸溶衣材料，過濾得到固體，干燥，稱重，即得到丙烯酸樹脂的重量。計算出被仿制品中腸溶衣材料的使用量，為腸溶衣的處方組成及包衣增重提供實驗依據。---濾渣：加水溶解，過濾；得到的濾渣再加乙醇溶解，過濾。得到水和醇的不溶解物質，即處方中的硬脂酸鎂、滑石粉、碳酸鎂、二氧化鈦。再設計相應的實驗進行種類及用量確認。B、隔離衣層的確認利用丙烯酸樹脂不溶于水，而其它PVP、增塑劑等在冷和熱水中均可溶解。但HPMC、HPC溶解于冷水，在熱水中不溶；而聚乙烯醇③被仿制品的處方分析研究（PVA）在冷水中不溶，溶解于熱水的性質，對上市品中的隔離衣進行研究確認。---取適量被仿制品，碾碎，加冷水適量振搖幾分鐘，過濾，a、取濾液加熱，如有絮狀沉淀析出，則含有HPMC或HPC，并對其用量進行確定；如無沉淀析出，則進行PVP的鑒別試驗考察。b、再在上述得到的濾渣中加入熱水振搖幾分鐘，過濾，冷卻，如有沉淀析出，則含有PVA，并對其用量進行確定。根據對隔離衣材料及用量的確認，對隔離衣層的增重進行分析計算。④糖丸芯的確認和研究分別對5-10粒上市膠囊，采用pH6.8緩沖液除去腸溶衣后，改用乙醇等有機溶劑將藥物等溶解除去，過濾得到丸芯，干燥，稱重，測定其小丸直徑、目數、每粒膠囊的小丸個數等。根據上述研究情況，對兩種國外上市品進行全面的分析總結。（PVA）在冷水中不溶，溶解于熱水的性質，對上市品中的隔離衣5）喹硫平緩釋片處方溯源計劃方案5）喹硫平緩釋片處方溯源計劃方案①緩釋材料HPMC溯源研究：原研藥幾片除去衣膜（含有HPMC），研碎，加適量水攪拌后加熱至70℃以上，冷卻至室溫，成粘稠溶液狀，再次加熱至70℃以上，撈取析出的白色塊狀沉淀物即為HPMC，干燥、稱取重量。

取獲得的HPMC加水配制成2%的溶液，測定其粘度。如與市售品粘度一致，則即可確定其粘度范圍；繼續(xù)可以測定甲氧基和羥丙甲的量以確定型號。

如不一致，則是不同粘度HPMC的混合物。再采用將不同粘度型號的產品2%溶液不同比例混合的方式，研究其各自用量。②乳糖、微晶：a、可以取上述析出HPMC后的混懸液，過濾得到不溶物殘渣，通過重量法得到各自用量。b、乳糖也可以通過HPLC示差檢測出用量。③檸檬酸鈉：可以通過測定上述溶液的pH值，再取檸檬酸鈉配成不同濃度得到的pH值進行對應即得。④硬脂酸鎂：原子吸收法（測定鎂）或氣相色譜法（測定硬脂酸-是個混合物）測定。①緩釋材料HPMC溯源研究：原研藥幾片除去衣膜（含有HPMC溯源研究存在的主要問題：---大部分人僅停留在獲得處方組成及輔料用量即大功告成的層面！---國外同一輔料有多種材料來源，以及幾種甚至十幾、幾十種型號，不同材料來源制備的輔料、不同型號其性能不同，作用也不一致，需要根據API、劑型、處方組成、體內吸收等全面分析、考察其可能采用的具體廠家和型號。

此項工作及其復雜和困難，需要高水平的制劑、分析和藥代人員共同合作！但只有做到這種程度，才能說是自制品“真正從本質上有可能”

達到與原研藥/參比制劑水平一致！！下圖是上海美極樂公司提供的藥用輔料乳糖的種類圖溯源研究存在的主要問題：仿制藥及一致性評價的研究思路及關鍵研究內容解讀課件美劑樂研磨和篩分的α-一水乳糖顯微照片細粒徑的研磨乳糖是濕法制粒的首選，而篩分乳糖和粗粒徑的研磨乳糖則時常用于膠囊和顆粒劑的直接灌裝工藝中。美劑樂研磨和篩分的α-一水乳糖顯微照片細粒徑的研磨乳糖是濕法美劑樂直接壓片用顆粒乳糖系列：Flowlac?---制備：是由研磨的細粉一水乳糖混懸液經噴霧干燥得到。水作為粘合劑在細粉乳糖粉末上形成液體橋，將乳糖粉末粘結一起。水分快速蒸發(fā)后，乳糖細粉由于液體橋的原因依然粘結在一起，形成乳糖顆粒，在噴霧干燥過程中帶入10-15%的無定型乳糖。---特點和作用：無定型乳糖具有塑性形變的特性。因此，噴霧干燥乳糖中兩種乳糖所具有的塑性行變與脆性形變的協同作用，使得FlowLac?具有優(yōu)良的流動性和極優(yōu)的可壓性，適用于粉末直壓；并且具有二次壓縮性，適用于干法制粒。美劑樂直接壓片用顆粒乳糖系列：Flowlac?2、制劑處方工藝開發(fā)研究的流程和關鍵點解讀核心：從實驗室初期研究開始，一直到中試、大生產，至始至終都要站在今后大生產的角度出發(fā)，進行處方工藝的研究。即牢牢與生產實際掛鉤！關鍵點：研究和生產、質控人員的素質水平；原料藥性質研究和質量控制；參比制劑的反向分析解剖；輔料的質量水平；從小試到大生產研究過程中所用設備的質量水平和配套程度等。均有“決定生死存亡”的影響！

樣本量：包括研究批數和批量。要在充分的研究基礎上獲得工藝、質量控制的全面信息，想以手工制備、幾批次小試試制就實現大生產化是“癡心妄想”！2、制劑處方工藝開發(fā)研究的流程和關鍵點解讀核心：從實2.1、實驗室小試處方工藝開發(fā)研究---在了解生產企業(yè)全面情況的基礎上（如生產線設備類型、大小，檢測儀器的配備，人員水平等），深入進行全面的基礎研究并模擬生產狀態(tài)和過程，掌握影響制劑處方工藝、質量屬性”的方方面面因素。---在對品種特性充分研究、了解的基礎上，確定現有的生產線設備條件是否能夠適應研發(fā)項目的生產要求。---最好在與大生產原理一致的小型設備上摸索出基本參數范圍。2.1、實驗室小試處方工藝開發(fā)研究

注意點：---手工做工藝不是“處方工藝研究”，只能在最初期對基本性質研究中少量采用，或盡量不采用；---小試研究的批量需要根據大生產的批量合理配套設置，不能過低。---小試階段溶出度研究重點是通過尋找出有區(qū)分力的條件進行樣品的篩選考察，而不是“至始至終都一頭扎進溶出杯中瞎撲騰”，對4條或更多曲線進行無休無止的對比，要根據本制劑產品的特性“有所為而有所不為”！

切記：制劑樣品才是決定質量的最關鍵因素！溶出只是產品質量體系中比較重要的一個項目，是反映制劑處方工藝質量情況的一雙眼睛，對處方工藝的研究具有重大的指導作用！注意點：2.2、中試處方工藝研究---根據小試工藝規(guī)模與擬定的大生產工藝規(guī)模（制劑規(guī)格、臨床需求量、生產設備能力等）之間的差距，進行必要的逐級中試放大研究。至少最大規(guī)模中試研究所用的物料、工藝、流程及主要設備的操作原埋等均應與大生產一致，且最大批量至少為工業(yè)化生產規(guī)模的十分之一以上。---此時應結合對工藝的了解，重點對關鍵工藝步驟、關鍵工藝參數及放大可能存在問題的步驟等進行研究，確定適合商業(yè)化生產的工藝參數。---對溶出度進行詳細的研究，盡可能與參比制劑在各種條件下曲線一致，但千萬不要落入以溶出曲線為一切評判標準的絕對化陷阱！---最關鍵點是確定處方組成是否可行，以及初步確定關鍵工藝參數！---根據處方工藝研究結果以及質量研究結果，按照GMP規(guī)范制定出第一個版本的生產工藝操作規(guī)程以及所有配套的質量檢驗操作規(guī)程；并根據研究情況進行必要的調整。2.2、中試處方工藝研究2.3、生產工藝研究及確認---根據中試研究或生產研究結果，按照GMP的規(guī)范由生產部門制定出注冊批樣品制備的“第n個版本”的生產工藝操作規(guī)程，以及由質量部門制定出原料藥進廠標準、內控標準、中間體、成品等的質量標準和“第n個版本”的操作規(guī)程。即在BE樣品和/或注冊批生產前應完成所有的標準和SOP，而不是在生產之后申報前完成！

體現新藥注冊的GMP化，是實現商業(yè)化大生產的保證！---在正式生產線上對經中試研究確定的處方工藝進行試制，對各工藝步驟參數進行操作及檢驗確認。2.3、生產工藝研究及確認2.4工藝驗證---可以與注冊生產批同時進行，也可以后續(xù)進行。

---工藝驗證是指按照研究確定的工藝操作規(guī)程和參數、連續(xù)不變的制備3批以上樣品！生產過程中的任何改變均不能算作工藝驗證批次，只能屬于工藝研究范疇，需要重新驗證。2.4工藝驗證四、普通固體制劑體外溶出度評價方法

重點事項介紹1、需要進行溶出度測定的口服制劑類型

片劑膠囊顆粒劑干混懸劑混懸液溶出度局部用制劑不做生物等效性不等于不需要做溶出度！藥物發(fā)揮作用仍然需要從制劑中溶出?。∷?、普通固體制劑體外溶出度評價方法

重點事項介紹1、需要進行溶出度一致性與BE一致性的相關性溶出度一致生物等效性一致4條或更多溶出曲線一致90%以上可以等效？溶出度不一致生物等效性肯定不一致？難道沒有其它條件只看溶出度嗎？？？不一定！溶出度一致性與BE一致性的相關性溶出度一致案例1：苯磺酸氨氯地平片：輝瑞及其它上市企業(yè)的溶出度曲線（曲線來源于王成港老師的文章）不同廠家上市產品溶出度曲線差異很大，但體內BE是等效的！！！案例1：苯磺酸氨氯地平片：輝瑞及其它上市企業(yè)的溶出度曲線不同案例2：利格列汀片原研藥上市前的臨床研究資料解析。---Ⅰ期臨床采用的口服溶液劑型給藥---Ⅱ期臨床采用片劑劑型，規(guī)格10、20mg，主要稀釋劑為微晶纖維素；臨床樣品批量為約50萬片。---Ⅲ期臨床前重新進行處方工藝研究，規(guī)格改為5mg，輔料改變，主要稀釋劑改為甘露醇、淀粉等；臨床樣品批量為幾百萬片規(guī)模。Ⅲ期臨床樣品采用確定的同樣方法測定溶出度曲線，10分鐘、20分鐘較Ⅱ期臨床樣品分別降低約40%和20%，30分鐘時基本一致。-溶出曲線出現顯著性差異！---原研廠家采用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期臨床的樣品進行了等效性對比，結果：是等效的！?。。ㄗ⒁猓孩衿谂R床是口服液?。┳C明溶出度不是決定BE等效的唯一因素?。?！案例2：利格列汀片證明溶出度不是決定BE等效的唯一因素?。?！2、溶出度評估前基礎研究也可稱為前期評估，是對產品發(fā)展以及溶出度方法開發(fā)的前期研究評估，是在方法開發(fā)之前，對用以評價劑型的體內行為，溶出行為的濾膜、溶出介質、介質體積和溶出設備，以及檢測溶液中藥物量的方法進行篩選。2.1生物藥劑學分類系統最常見的為BCS分類法。（1）Ⅰ類：高溶解性–高滲透性藥物---口服溶出后即可快速吸收，通常無等效性的問題，但需要關注制劑因素對溶出度的影響。研究中如可以證明崩解后藥物即可完全溶出，則在處方工藝和穩(wěn)定性試驗過程中相當部分的樣品可以采用崩解度代替溶出度的檢測。

---在禁食狀態(tài)下，胃內滯留（排空）T50%時間為15～20分鐘。對于Ⅰ類）及某些情況下的Ⅲ藥物制劑，以0.1mol/LHCl為介質，在適當的溶出度試驗條件下，15分鐘的溶出度大于85%時，可認為藥物制劑的生物利用度不受溶出行為的限制，即制劑的行為與溶液相似。2、溶出度評估前基礎研究---在這種情況下，胃排空速度是藥物吸收的限速步驟。如果藥物制劑溶出比胃排空時間慢，建議在多種介質中測定溶出曲線。---高溶解度藥物不一定就必須快速溶出，還受對胃腸道的刺激性、藥效作用特點、藥物穩(wěn)定性等的影響，有時需要控制其溶出的速度和量，主要看被仿制品的情況而定。（2）Ⅱ類：低溶解性–高滲透性藥物---容易出現溶出度問題，且能夠較好的建立體內外相關性！---口服制劑中相當多的藥物屬于難溶性化合物，跟制劑加工需要、生物膜的滲透特性、體內分布等有關。（3）Ⅲ類：高溶解性–低滲透性藥物---吸收基本不受溶出度影響，難以建立體內-外的相關性！（4）Ⅳ類：低溶解性–低滲透性藥物---即口服難以吸收的藥物，不太適宜做口服制劑；雙重影響更不易建立體內-外相關性。注意：難以吸收和生物利用度低不是一碼事，后者有可能是由于首過效應等因素所致，即不能以生物利用度低就認為是難以吸收---在這種情況下，胃排空速度是藥物吸收的限速步驟。如果藥物Ⅳ類藥物通常制成靜脈注射劑使用，如紫杉醇等。上述分類原則可作為制定體外溶出度質量標準的依據，也可用于預測能否建立良好的體內-體外相關性。2.2原料藥在不同溶媒中溶解性和穩(wěn)定性的測定2.1.1高/低溶解性和pH依賴型藥物（1）高/低溶解度藥物判定方法：在37±1℃下，測定最高劑量單位的藥物在250mLpH值介于1.0和8.0之間的溶出介質中的濃度，當藥物的最高劑量除以以上介質中的藥物濃度小于或等于250mL時，可認為是高溶解性藥物；否則即為低溶解度藥物。問題：①用什么測：原料藥（通常80～120目粉末）。②什么介質：通常用水、pH1.2的鹽酸溶液、pH4.0/或4.5的醋酸鹽緩沖液、pH6.8的磷酸鹽緩沖液。通常較難查詢到藥物滲透性的文獻！在胃腸道內穩(wěn)定且吸收程度高于85%或有證據表明其良好滲透性的藥物，可認為是高滲透性藥物。Ⅳ類藥物通常制成靜脈注射劑使用，如紫杉醇等。通常較難查詢到藥③如何做：先采用藥典凡例的溶解度測定方法，如果可以明確的判斷是否能夠溶解，則可以下高/低溶解度的結論；如難以判斷，則需要采用搖瓶法測定飽和溶解度來判斷。④如何判斷：是看藥物在全部溶劑中的溶解情況，而不是其中1到若干個的結果。⑤低溶解度的達不到漏槽條件的難溶性藥物如何辦：通過測定溶解度，篩選不同種類的表面活性劑（要涵蓋陰離子、非離子型和陽離子型），確定合適的后再對不同濃度進行篩選，確定可以達到漏槽條件的最低濃度。

---通常情況下，表面活性劑的濃度要高于它的臨界膠束濃度（CMC）?。劬唧wCMC數據見溶出度試驗的開發(fā)和驗證(USP1092)］---國內通常使用十二烷基硫酸鈉（SDS）和吐溫-80。---注意表面活性劑的純度，對溶出度結果有較大影響！---注意離子化效應出現的沉淀現象，如SDS與磷酸鉀鹽出現鹽析沉淀，而與磷酸鈉鹽不出現。---當需要加入表面活性劑而溶解度與pH值無關時，可以采用水做介質，以避免其它酸、堿和鹽產生的影響。③如何做：先采用藥典凡例的溶解度測定方法，如果可以明確的判斷---加入表面活性劑后通常會對UV法檢測產生干擾，需要采用HPLC法等檢測，工作量大幅增加。---不推薦在水相中加入有機溶劑作為介質?。?）pH依賴型藥物：在不同pH值的溶劑中溶解度不一樣，有的屬于高溶解度，有的屬于低溶解度。---需要測定pH-溶解度曲線，并根據該曲線尋找可以達到漏槽條件的pH介質。---pH依賴型基本不考慮加表面活性劑來提高溶出度，而是通過選擇適宜的pH值！但對于低溶解度的pH溶劑，可以考慮添加表活來對比溶出曲線。（3）藥物在介質中的穩(wěn)定性：需要對藥物在各種介質中的穩(wěn)定性進行研究測定，包括化學（指出現降解等）和物理（指出現析出等）穩(wěn)定性。（4）溶解速率與溶解度：需要在前期取點密集些，以考察溶解速率。---加入表面活性劑后通常會對UV法檢測產生干擾，需要采用H3、與溶出度有關的生理及基礎知識3.1人體胃腸部結構圖及小腸的結構特點、藥物主要吸收部位3、與溶出度有關的生理及基礎知識3.1人體胃腸部結構圖及小3.2常用的溶出介質、轉速與人體生理環(huán)境的關系（1）pH值：胃內生理pH值為1～3.5，小腸約為6.8～7.0，結腸約為7.5～8.0。---溶出介質基本是考慮人體胃腸道的pH變化而對應設計。（2）離子：胃液中主要離子是H+和Cl-，腸液中主要離子是HCO3-，Cl-，Na+，K+，Ca2+；還有膽酸鹽、各種酶類。---介質中加入HCl、醋酸鹽、磷酸鹽，以及蛋白酶等，可以模擬其離子強度；加入表面活性劑，可以模擬具有表面活性作用的膽酸鹽。（3）胃排空和腸蠕動程度：健康成年人的胃腸蠕動強度相當于轉藍50～100rpm，轉槳50～75rpm；故用于兒童和老年人的藥物制劑在溶出度測定時應該適當降低轉速。3.2常用的溶出介質、轉速與人體生理環(huán)境的關系（1）pH值1.2濾膜相容性研究過濾的目的：是為了去除溶出液中未溶解的藥物和輔料，是獲得準確試驗結果關鍵步驟之一。（1）溶出度測定過程中必須對樣品立即過濾，a、將未溶解的藥物和輔料從供試品溶液中去除，以防止未溶解的藥物顆粒會繼續(xù)溶解并改變試驗結果。b、過濾同時也可去除可能干擾測定的不溶性輔料。（2）選擇適當的過濾材料非常重要，并且最好在早期的溶出開發(fā)過程中用實驗進行確定。濾膜的材料、型號和孔徑大小是選擇重點。早期階段篩選出的過濾系統，在后期試驗中比如隨藥品或成分的變化以及輔料質量的變化可能需要重新考慮。（3）過濾可能發(fā)生對藥物的吸附，要通過試驗考察吸附情況和棄去的初濾液量。1.2濾膜相容性研究1.3溶出介質和體積選擇溶出試驗方法的目標即滿足漏槽條件時溶出度結果不受藥物溶解度的影響，能夠更好的反映藥物制劑的質量情況。漏槽條件的定義：為溶出介質體積至少為達到溶解藥物主成分所需體積的若干倍。---USP和中國藥典規(guī)定3倍以上，EP是3-10倍。通常情況下，溶出介質的組成和體積取決于藥物溶解性試驗的結果，應當滿足漏槽條件，以及檢測對濃度的需求。滿足漏槽條件藥物溶解度制劑因素藥物的溶出影響消除溶解度因素的影響1.3溶出介質和體積選擇滿足漏槽藥物溶解度制劑因素藥物的影響對于藥典收載的籃法槳法，溶出介質的體積可以在500ml～1000ml內選擇。1.4區(qū)分力及其存在的誤區(qū)區(qū)分力定義：是指對制劑質量差異的區(qū)分能力。在適當條件下，介質不滿足漏槽條件也是可以接受的，以提高區(qū)分力！

誤區(qū)：以為不能完全溶出就是有區(qū)分力！有區(qū)分力的前提是必須保證藥物能夠完全溶出---至少達到85%以上，一般要達到95%以上。

否則無法說明是溶解度

還是制劑因素導致未溶出！

對于藥典收載的籃法槳法，溶出介質的體積可以在1.5選擇溶出設備（槳法和籃法以及其他方法）裝置的選擇：根據對處方設計的認知和試驗劑型的實際特點，通過試驗確定。對于固體口服制劑，以轉藍法和轉槳法使用最多。新的溶出裝置經過確定有效，并且優(yōu)于藥典裝置時可以使用。例如，一個小體積的溶出裝置配有小槳或者小藍可以用于低劑量的產品；旋轉瓶或透析管可能實用于微球、植入制劑，靶向制劑和特殊劑型。首選藥典規(guī)定裝置1.5選擇溶出設備（槳法和籃法以及其他方法）首選藥典規(guī)定裝置3、方法的開發(fā)一個良好的測試方法應該保證測試數據的均一性（即較低的變異性），并且能夠反映樣品的質量變化問題。較高變異性的結果難以確定質量變化趨勢和處方工藝變化對溶出度結果是否出現影響。對于溶出度結果變異性的要求是：在10分鐘或者之前12個樣本的相對標準偏差（RSD）不得過20%，后續(xù)取樣點的RSD值不得大于10%。引起變異性兩個最有可能的原因一是制劑本身（例如，原料藥，輔料，或制劑工藝過程，穩(wěn)定性情況）；二是測試過程中的相關處理程序和操作（例如，轉桿偏離中心位置，藍/槳葉擺動過大，氣泡，溶出液的漩渦？，片/膠囊粘在溶出杯壁或籃網上等）。3、方法的開發(fā)一個良好的測試方法應該保證測試數據的均3.1、實驗儀器、裝置的檢查和校正

是大家熟知要求但實際上不執(zhí)行或部分執(zhí)行的嚴重影響檢測結果真實性、可靠性的錯誤現狀之一！

主要內容：杯、轉桿的中心位置，轉藍/槳葉的擺動幅度，各杯溶出介質的溫度差異，轉速的差異和變動，校正片對儀器的校正等。

對策：固定標號并配對杯、轉桿、藍/槳葉，定期檢測儀器狀況；有條件的換用高水平的儀器。3.1、實驗儀器、裝置的檢查和校正3.2實驗現象觀察觀察并記錄產品在溶出過程中的崩解和溶出行為是極其重要但又被大部分實驗者忽視的行為之一！因為崩解和溶出方式可以為處方和工藝提供詳細的信息。通常觀察到的現象包括，但不限于以下內容：①片劑/膠囊的崩散時間、狀態(tài)；顆粒在整個容器內的分布均勻性情況?？赡艹霈F以下狀態(tài)：顆粒附著到容器的兩側，籃下或者槳下有錐型堆積物，薄膜衣片粘在杯壁，和/或偏離中心的堆狀物形成。②氣泡在容器內或裝置上或單片制劑上。③制劑是位于杯中心還是偏離中心，如果偏離中心，它是否粘在那里，還是在介質中飄動或者旋轉，或與槳葉發(fā)生碰撞。④圍繞膠囊內容物形成薄膜或類似的結構，如透明囊或橡皮囊。3.2實驗現象觀察⑤在溶出介質表面，存在大量的漂浮顆?；驂K狀物。⑥制劑的崩解速度。例如，在一定的時間范圍內，制劑以顆粒逐步層層脫落的方式崩散。⑦包衣膜或腸溶性產品的復雜崩解。例如，出現部分裂口和分裂（類似于翻蓋），伴隨氣泡和輔料的釋放。⑧試驗結束后，顆粒粘附于槳上或籃內。溶出曲線一致性對比的重要組成部分，在制劑溶出過程中的現象與原研參比品一致的情況下，才有可能進行曲線的一致性對比⑤在溶出介質表面，存在大量的漂浮顆?；驂K狀物。溶出曲線一致性3.3處方工藝研究初期對溶出結果的分析、對策和初步判斷溶出度測定結束后的現象分析和對策---前提是處方與原研一致！

（1）杯底部堆積有顆粒且溶出低：a、轉藍法：崩散過快，攪拌力度低所致。---采取任何方式將堆積物打散，再取樣測定。如溶出提高，則可以改用轉槳法解決堆積即可。b、轉槳法：提高轉速至堆積物散開，再取樣測定。如溶出提高，則可以通過提高轉速解決。（2）堆積的顆粒散開后溶出未改變：a、手摸顆粒，如有硬芯似砂礫感，則最大可能是工藝中制軟材和顆粒步驟時“過度制?！彼?；如原研無此現象，則可能是輔料質量差異導致。b、柔滑細膩感且為難溶性藥物，則可能是溶解度過低，提示可能需要微粉化降低藥物粒度，或通過制劑技術提高溶出度。

（3）無顆粒存在但溶出度低，同（2）項下b。研究初期的特點：未知因素太多！3.3處方工藝研究初期對溶出結果的分析、對策和初步判斷3.4介質的脫氣處理（1）氣泡對溶出度測定的影響

a、在溶出過程中如果在制劑或籃網出現氣泡，會起到屏障作用，影響試驗結果的可靠性。b、氣泡會使顆粒粘在設備和容器壁。c、制劑上的氣泡可能會增加浮力，導致溶出速率增加，或者會減少可用的溶出表面積而導致溶出度下降。（2）難溶性藥物對氣泡的干擾影響最敏感。因此，檢測這些類型的產品時需要脫氣。如布洛芬緩釋膠囊，氣泡會顯著降低溶出度。（3）典型的脫氣方法介質采取加熱，過濾，和在短時間內抽真空。3.4介質的脫氣處理3.5沉降籃在膠囊/或部分密度低的其它制劑的溶出度測試過程中如采用槳法，常會出現膠囊漂浮在液面上而影響檢測，故通常采用沉降籃用來調節(jié)劑型的浮力。因不同的沉降藍會顯著影響制劑的溶出度，故當使用沉降藍時，在標準的方法中必須描述清楚沉降籃的類型和使用方法。

需要通過具體的試驗研究來評估不同類型沉降籃對制劑溶出曲線的影響情況。并確定適宜的沉降藍。當轉移這個方法時，應使用相同的沉降籃，或者改用不同類型的沉降藍時，應當證明兩種不同的沉降籃產生相同的結果。一個標準的沉降籃可以通過使用合適長度的在介質中為惰性的金屬絲圍繞圓柱體卷繞制成。3.5沉降籃3.6攪拌對于速釋膠囊或片劑，一般采用籃法時轉速在50～100rpm，槳法時轉速在50～75rpm。如果有合適的理由其他攪拌速度也是可以接受的。考慮到攪拌速度太慢或太快產生的水流力度不一致，無論是籃法或者槳法，低于25rpm或高于150rpm的轉速，均是不能接受的。

對于混懸劑一般推薦轉速為25rpm～50rpm。3.7取樣及時間點設計對于快速溶出的藥物制劑，可能需要以10分鐘或更短的間隔取樣，以繪制獲得完整的溶出曲線。

對于高溶解性（BCS1類和3類）和快速溶出的藥物制劑，大多數情況下，標準中采用單點控制即可，取樣時間點一般為30～60分鐘，溶出限度通常應為不少于70％～85％。3.6攪拌對于溶出較慢或水溶性差的藥物（BCS2類），根據療效和/或副作用的特點，可采用兩點檢測法進行藥品的溶出控制，第一點在15分鐘，規(guī)定一個溶出度范圍，第二個取樣點（30、45或60分鐘）時的溶出量應不低于85%。

藥品在整個有效期內均應符合制定的溶出度標準。測定曲線時存在的問題：（1）前期特別是第一個取樣點設計不合理，不是在各杯受試品處于近似同樣的崩散狀態(tài)下取樣（第一個點溶出度的RSD在20%以內即是為此而要求）。（2）取樣點不是包括各個溶出的時段，影響f2值的計算。（3）不溶出的制劑取樣時間過長---通常在2-4小時以內即可。（4）補液時不是順著轉桿壁勻速注入，而是用取樣針推入，影響顆粒堆積物的狀態(tài)，或者影響水流攪拌力度，造成溶出度出現偏差。對于溶出較慢或水溶性差的藥物（BCS2類），根據療4、參比制劑及存在的問題

4.1參比制劑批次如何選擇

購買近期上市品最好3批以上，比較其溶出曲線的均一性；近效期批次至少1批以上，考察時間對溶出