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文檔簡介
高速逆流色譜溶劑體系篩選方法
HSCCC分離條件基本原則:不造成樣品分解或變性
對樣品有較大溶解度固定相在分離柱中有較好保留樣品在兩相溶劑系統(tǒng)中有合適的分配系數(shù)溶劑體系的篩選方法
蘆薈提取物的HPLC圖譜實例(HPLC法測K值)蘆薈未知物蘆薈苷B蘆薈苷A-上層-下層體系氯仿/異丁醇/甲醇/水(4/0.25/3/2)
目標物質(zhì)蘆薈未知物蘆薈苷A蘆薈苷B分配系數(shù)K0.91.92.3HSCCC保留時間2.3h4.0h5.3h蘆薈未知物蘆薈苷B蘆薈苷A蘆薈提取物的HSCCC圖譜蘆薈苷B蘆薈苷A蘆薈未知物對已知化合物類別的物質(zhì)可參考相關(guān)文獻,在文獻提供的體系的基礎(chǔ)上進行調(diào)整對未知樣品,可采用氯仿-甲醇-水=10-3-7或正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水=1-1-1-1兩個極性分布范圍較廣的體系先進行嘗試,也可以根據(jù)樣品的極性選擇相對應(yīng)的溶劑體系,再根據(jù)目標組分的分配系數(shù)進行調(diào)整
2.經(jīng)驗法
3.分析型HSCCC法優(yōu)點:分析時間短溶劑消耗少進樣量小,節(jié)省樣品確定的體系可直接用于放大制備,重現(xiàn)性佳
1:1:1.2:0.8
1:1.2:1.2:0.8
0.8:1.2:1.2:1.2
0.8:1.2:1.2:1.5
正己烷/乙酸乙酯/乙醇/水(0.8:1.2:1.2:1.7)
槲皮素
山萘酚
異鼠李素
HSCCC工藝重現(xiàn)性TBE-20A分析型HSCCCTBE-300B半制備型HSCCCTBE-1000A制備型HSCCC4.多元溶劑體系的選擇方法Ito方法HBAW方法ARIZONA方法BHAW方法是將非極性溶劑體系正已烷-乙腈(1:1)和極性溶劑體系正丁醇-水(1:1)結(jié)合起來,形成了7種多元溶劑體系,編號為-3~+3首先試驗0號溶劑體系,以確定下一步試驗的方向。如果樣品傾向于極性的水相,應(yīng)該進一步實驗0~+3號正方向的體系,否則應(yīng)該試驗0~-3號反方向的體系這組溶劑的特點是紫外透明性很好總結(jié):溶劑體系的選擇是HSCCC分離中最關(guān)鍵也是難度最大的一個環(huán)節(jié),一般從樣品的溶解度,通過參考文獻及常用體系,測定K值等來篩選溶劑體系,然后再
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