儀器分析課程復(fù)習(xí)課

儀器分析課程復(fù)習(xí)課（一）光學(xué)分析法部分一、光學(xué)分析法緒論1、光學(xué)分析法的主要過程有哪些？2、電磁輻射與物質(zhì)的相互作用可以分為哪兩大類？各自有什么類型？3、光學(xué)分析法可以分為哪些類別？分類依據(jù)是什么？4、光譜分析法可以分為哪些類別？分類依據(jù)是什么？5、原子光譜與分子光譜的區(qū)別有哪些？6、具體光譜分析方法的分類。小結(jié)——光學(xué)分析法的分類2023/1/144光分析法光譜分析法非光譜分析法原子光譜分析法分子光譜分析法原子吸收光譜原子發(fā)射光譜原子熒光光譜X射線熒光光譜折射法圓二色性法X射線衍射法干涉法旋光法紫外光譜法紅外光譜法分子熒光光譜法分子磷光光譜法核磁共振波譜法2023/1/145光譜分析法吸收光譜法發(fā)射光譜法原子光譜法分子光譜法原子發(fā)射原子吸收原子熒光X射線熒光原子吸收紫外可見紅外可見核磁共振紫外可見紅外可見分子熒光分子磷光核磁共振化學(xué)發(fā)光原子發(fā)射原子熒光分子熒光分子磷光X射線熒光化學(xué)發(fā)光7、光譜分析儀器的組成部分有哪些？8、分光系統(tǒng)由哪些部件組成？各自的作用是什么？9、棱鏡與光柵的區(qū)別。10、請(qǐng)比較玻璃比色皿和石英比色皿的使用情況，并說明原因。二、紫外-可見分光光度法1、有機(jī)化合物的電子躍遷類型有哪些？各自的結(jié)構(gòu)特征是什么？2、無機(jī)化合物的電子躍遷類型有哪些？各自的結(jié)構(gòu)特征是什么？3、UV-Vis光譜常用術(shù)語及其概念。4、有機(jī)化合物的吸收帶類型有哪些？分別與什么結(jié)構(gòu)有關(guān)？2023/1/148躍遷類型峰位強(qiáng)弱分子基團(tuán)舉例

*<150nm弱飽和烴類

CH3-CH3

(max=135nm)n*

150-250nm較強(qiáng)含-OH,-NH2CH3Cl-X,-S等(max=215nm=140)

*

-200nm

強(qiáng)含不飽和鍵CH2=CH2分子(max=165nm

=10-4)

n*

200-400nm

較弱含有雜原子丙酮不飽和基團(tuán)(max=279nm=10-30)小結(jié)——5、影響光譜吸收帶的因素，溶劑極性對(duì)吸收帶的影響。6、相關(guān)定量計(jì)算公式。T

=II0

透射光強(qiáng)入射光強(qiáng)A=-lgT=ECl2023/1/1410A=-lgT=ECl，C為百分濃度，單位是g/100mLε，C為摩爾濃度，單位是mol/L吸光系數(shù)法：對(duì)照品法：

同一種物質(zhì)，同一臺(tái)儀器，同一波長(zhǎng)下測(cè)定，E值和l值相同。標(biāo)準(zhǔn)曲線法：求回歸直線方程：y=a+bx，將A樣代入方程中即可求C樣。計(jì)算題結(jié)果保留小數(shù)點(diǎn)后兩位！2023/1/14121.已知化合物X的分子量為236，將其配成每100mL含0.4962mg的溶液，盛于1cm吸收池中，在波長(zhǎng)355nm處測(cè)得A值為0.557,試求X的

值與ε值。

2023/1/14132.稱取維生素C樣品0.05g，用0.005mol/L硫酸溶液稀釋至100mL中，再精密量取此溶液2.0mL稀釋至100mL，盛于1cm吸收池中，在245nm處測(cè)得A值為0.551，已知(245nm)=560，求維生素C在樣品中的百分含量與ε值。(M=176.12)

2023/1/1414計(jì)算題小結(jié)：濃度、百分含量固體制劑稱取Wg溶解V1取V2稀釋到V3取V4稀釋到V5A值123

液體制劑量取V1稀釋到V2取V3稀釋到V4取V5稀釋到V6A值123

4.硫噴妥鈉的含量測(cè)定：取供試品0.25g，用水稀釋至500mL，精密量取1.0mL，用0.4%NaOH溶液定量稀釋至100mL作為供試液；另取硫噴妥鈉對(duì)照品，用0.4%NaOH溶液配制濃度為5ug/mL的對(duì)照品溶液。使用分光光度法，在304nm處分別測(cè)得供試品和對(duì)照品的A值分別為0.540和0.545，求硫噴妥鈉的含量。2023/1/1417

對(duì)照品法（固體、液體制劑）供試品稀釋1A供稀釋2對(duì)照品稀釋1A對(duì)稀釋2雙波長(zhǎng)法——系數(shù)倍率法——差示分光光度法——2023/1/1419

2023/1/1420對(duì)照法：無需查閱E值，同雙波長(zhǎng)法7、雙波長(zhǎng)法（對(duì)照品法）的應(yīng)用。8、比色法的原理與應(yīng)用。9、紫外分光光度計(jì)的儀器構(gòu)造。三、熒光分光光度法1、電子從激發(fā)態(tài)回遷至基態(tài)的能量傳遞途徑可以分為哪兩大類？各包括什么方式？2、熒光與磷光的區(qū)別有哪些方面？3、熒光物質(zhì)的特征光譜是什么？它們的區(qū)別是什么？4、熒光光譜的特征是什么？5、物質(zhì)產(chǎn)生熒光的兩個(gè)條件是什么？6、哪些分子結(jié)構(gòu)特征能夠影響熒光的強(qiáng)度？它們的變化將如何影響熒光強(qiáng)度？7、影響熒光強(qiáng)度的外部因素有哪些？8、紫外與熒光分光光度計(jì)的區(qū)別有哪些？9、熒光定量分析的計(jì)算（標(biāo)準(zhǔn)曲線法、對(duì)照品法）計(jì)算題——采用熒光分光光度法測(cè)定某注射液的百分含量，激發(fā)波長(zhǎng)為285nm，發(fā)射波長(zhǎng)為435nm。測(cè)得空白溶液的熒光值為30，供試品溶液的熒光值為330，對(duì)照品溶液的熒光值為580。已知對(duì)照品濃度為50mg/ml，求供試品的百分含量。2023/1/1424

四、原子吸收分光光度法1、屬于原子光譜，應(yīng)用范圍是。2、定量基礎(chǔ)（峰值吸收）。3、儀器構(gòu)造，與紫外儀器的區(qū)別。儀器分析課程復(fù)習(xí)課（二）色譜部分一、色譜分析法概論1、色譜流出曲線和相關(guān)概念。（定性參數(shù)、定量參數(shù)、柱效參數(shù)、分離效能指標(biāo)）2、色譜分離的前提條件是什么？3、固定相與流動(dòng)相的概念。4、色譜法的分類。5、分配色譜法、吸附色譜法、離子交換色譜法、分子排阻色譜法。6、塔板數(shù)和塔板高度的計(jì)算。二、氣相色譜法1、氣相色譜法的特點(diǎn)。2、氣相色譜儀的組成部分。3、氣液色譜法的固定液要求、常用固定液和載體。4、氣固色譜法的固定相與常用載氣。5、氣相色譜法的檢測(cè)器種類，重點(diǎn)掌握TCD和FID檢測(cè)器的原理。6、氣相色譜法實(shí)驗(yàn)條件的選擇。7、氣相色譜儀定性分析方法（對(duì)照品法）與定量分析方法（歸一化法、外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法）。8、外標(biāo)法與內(nèi)標(biāo)法的區(qū)別與各自的優(yōu)點(diǎn)。三、高效液相色譜法1、高效液相色譜法的優(yōu)點(diǎn)。2、高效液相色譜儀的組成部分。（檢測(cè)器的類型與各自使用范圍）3、化學(xué)鍵合固定相。4、流動(dòng)相的基本要求，選擇。5、反相化學(xué)鍵合相色譜法。6、液相分離條件的選擇。7、定性依據(jù)與定量計(jì)算。（歸一化法、外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法）例：HPLC法測(cè)定硫酸沙丁胺醇片的含量。內(nèi)標(biāo)溶液的配制：取馬來酸氯苯那敏對(duì)照品，加流動(dòng)相制成濃度為5.0mg/mL的溶液；對(duì)照品溶液的配制：精密取硫酸沙丁胺醇對(duì)照品24.2mg，用流動(dòng)相稀釋至50mL，精密量取對(duì)照品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各10mL，用流動(dòng)相稀釋至25mL，取20μL注入色譜儀中，記錄色譜圖，其中硫酸沙丁胺醇對(duì)照品峰面積1034，內(nèi)標(biāo)峰面積782；另外取本品10片，精密稱得總重為0.6052g，研碎后精密稱取0.1197g，置25mL量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液10mL，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，也取20μL注入色譜儀中，記錄色譜圖，其中硫酸沙丁胺醇峰面積986，內(nèi)標(biāo)峰面積790。計(jì)算該片劑中硫酸沙丁胺醇的實(shí)際含量（mg/片）練習(xí)：采用HPLC法（內(nèi)標(biāo)一點(diǎn)法）測(cè)定阿司匹林栓劑的含量：取本品5粒，熔融后精密稱取0.7045g，加入咖啡因內(nèi)標(biāo)溶液（4mg/mL）5mL，乙醇稀釋至50mL，經(jīng)冷卻、過濾等操作后從中精密量取2.0mL，再次稀釋至50mL，制成供試品溶液；另外精密稱取阿司匹林對(duì)照品0.1584g，加入同樣量的內(nèi)標(biāo)溶液，按同法稀釋，制成對(duì)照品溶液。兩種溶液分別取10μL注入色譜儀中，結(jié)果如下表，該栓劑中阿司匹林的百分含量（%，W/W）。阿司匹林