臨床微生物標本的正確采集及運送

臨床微生物標本的正確采集及運送1/15/2023第一頁，共三十七頁，2022年，8月28日一、臨床微生物標本正確采集的重要意義二、各種類型標本的正確采集和送撿主要內容2第二頁，共三十七頁，2022年，8月28日標本質量的好壞直接影響診斷結果的正誤，不當標本可導致假陰性、假陽性結果的出現。因此正確采集和運送微生物標本，直接影響到微生物培養(yǎng)鑒定結果?？煽康臋z驗結果可以指導臨床診斷治療，為臨床科學用藥和成功的感染控制提供依據，是正確、合理使用抗菌藥物，延緩細菌耐藥，減少抗菌藥物濫用和監(jiān)測醫(yī)院感染的第一步，也是最重要的一步。為此應正確采集各種細菌學標本。臨床微生物標本正確采集和運送的重要意義第三頁，共三十七頁，2022年，8月28日

血液標本的采集與運送第四頁，共三十七頁，2022年，8月28日1、血液培養(yǎng)的送檢指征①發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃）②寒戰(zhàn)③白細胞增多（>10×109/L,特別是有“核左移”）④粒細胞減少（<1×109/L）⑤血小板減少⑥皮膚、黏膜出血⑦昏迷⑧多器官衰竭⑨血壓降低⑩呼吸加快以及肝脾腫大；關節(jié)疼痛；C反應蛋白和降鈣素原升高等

患者出現以上一種或同時具備幾種臨床表現時可作為血培養(yǎng)的重要指征血液標本的采集與運送第五頁，共三十七頁，2022年，8月28日2、血培養(yǎng)標本的采集時間盡可能在患者寒戰(zhàn)或開始發(fā)熱時采血在患者接受抗生素治療前采血如患者已經使用抗生素進行治療，應在下一次用藥前采血血液標本的采集與運送第六頁，共三十七頁，2022年，8月28日3、血培養(yǎng)標本的采集⑴皮膚消毒程序：嚴格執(zhí)行以下3步法：①75%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上，②再用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用90s以上，從穿刺點向外畫圈消毒，至消毒區(qū)域直徑3cm以上；③最后用75%酒精脫碘。如對碘過敏的患者，可用75%酒精消毒60s，待酒精揮發(fā)干燥后采血。注意：不允許在消毒后按壓靜脈，除非戴有無菌手套血液標本的采集與運送第七頁，共三十七頁，2022年，8月28日⑵血培養(yǎng)瓶消毒程序：用75%酒精擦拭血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60s；用無菌紗布或無菌棉簽清除橡皮塞子表面殘余酒精，然后注入血液。注入血液后，應輕輕顛倒混勻防止血液凝固。血液標本的采集與運送第八頁，共三十七頁，2022年，8月28日4、血培養(yǎng)采血量

由于每毫升血量中含菌量很小，血培養(yǎng)的陽性率直接與血樣本容量有關，據報道每增加1ml血樣本可使血培養(yǎng)陽性率上升3%，所以采血量要足夠。通常采血量與培養(yǎng)基之比以1:5~1:10為宜，成人一次采血10~20ml平均注入兩個血培養(yǎng)（需氧、厭氧瓶）中，嬰幼兒采血量為全血量的1%（1~2ml），兒童采血量3~5ml。當發(fā)生菌血癥時，通常成人血液中含有的菌量小于1CFU/ml,而兒童血液中含有的菌量常超過100CFU/ml，所以嬰幼兒、兒童采血量少于5ml時，不會影響培養(yǎng)的陽性率。血液標本的采集與運送第九頁，共三十七頁，2022年，8月28日5、血培養(yǎng)采集的次數⑴對懷疑菌血癥、真菌血癥的成人患者，推薦同時或短時間間隔（10分鐘內）從不同部位（如雙臂）采集2套血培養(yǎng)標本，做到“雙瓶雙側”。如有必要，可同時或短時間間隔內從下肢靜脈采血接種第3套培養(yǎng)瓶。在采集血培養(yǎng)后的2-5天內，不需要重復采集血培養(yǎng)。當采血量不能滿足推薦的采血量時，應首先接種需氧瓶。⑵嬰幼兒患者，需要同時采集2次（不同部位）血培養(yǎng)標本。

血液標本的采集與運送第十頁，共三十七頁，2022年，8月28日有研究表明，只做1套血培養(yǎng)，病原菌的檢出率僅為65%；2套血培養(yǎng)為80%；3套血培養(yǎng)為96%。對于成年患者的血培養(yǎng)，只采集單瓶是不允許的，因為單瓶的培養(yǎng)結果很難解釋是致病菌還是污染菌。血液標本的采集與運送第十一頁，共三十七頁，2022年，8月28日6、血培養(yǎng)標本的運送⑴

血培養(yǎng)采集后應立即送到微生物室（常規(guī)運送時間少于2h）⑵如果不能立即送到微生物室，需室溫保存或置于35℃-37℃孵箱中，切勿冷藏（因為有些苛養(yǎng)菌遇冷很容易死亡）。血液標本的采集與運送第十二頁，共三十七頁，2022年，8月28日

痰液標本的采集與運送第十三頁，共三十七頁，2022年，8月28日1、痰標本的采集時間及頻率⑴在抗生素應用前采集；⑵最好在清晨采集；多數患者在清晨痰較多，且含菌量也多，即使對痰量少的患者，也以清晨最為容易；⑶對于細菌性肺炎，痰標本送檢每天1次，連續(xù)2-3天；不建議24h內多次采集，除非痰液外觀形狀出現改變；⑷懷疑分枝桿菌感染者，應連續(xù)收集3天清晨痰液送檢。⑸采集痰標本前應先進行口腔清潔。因為本身人體口腔內含有很多微生物，致使痰液咳出時易受到污染。痰標本的采集與運送第十四頁，共三十七頁，2022年，8月28日2、痰標本的采集方法⑴自然咳痰法：留取前刷牙，用清水漱口3次（或硼酸漱口），以除去口腔內大部分雜菌，之后用力咳出呼吸道深部的痰液吐至無菌的廣口瓶內，蓋好蓋子?；颊咛狄狠^深不易咳出時，可在咳痰前捶背、協(xié)助排痰。采集痰量不能少于1ml。痰標本的采集與運送第十五頁，共三十七頁，2022年，8月28日⑵下呼吸道肺泡灌洗，支氣管刷洗，氣管抽吸：將抽吸物或灌洗液直接放入痰杯內，刷出物放入1ml無菌生理鹽水的痰杯中。⑶誘導咳痰：刷完牙齦和舌頭后讓患者用水漱口，借助霧化器使患者吸入約25ml3-5%的無菌鹽水誘導咳痰。痰標本的采集與運送第十六頁，共三十七頁，2022年，8月28日3、痰標本的運送標本采集后需盡快（<2h）送至微生物室，不及時運送可導致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應外界環(huán)境和自溶現象而死亡。如不能及時送達，應將標本置于4℃冰箱保存，以免雜菌生長，但不超過24h。痰標本的采集與運送第十七頁，共三十七頁，2022年，8月28日

鼻咽拭子標本采集及運送第十八頁，共三十七頁，2022年，8月28日鼻咽拭子標本采集采集標本時患者先用清水漱口，由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，用無菌鼻咽拭子由口腔進入，越過舌根到咽后壁或腭垂的后側采集鼻咽紅腫處，取材后小心退出，立即放入無菌試管內，避免觸及舌、口腔黏膜和唾液，以防污染。鼻咽拭子標本采集第十九頁，共三十七頁，2022年，8月28日

化膿和創(chuàng)傷標本的采集與運送第二十頁，共三十七頁，2022年，8月28日采集方法⑴未破裂膿腫：在采集標本前，對患者病灶局部的皮膚或黏膜表面，用2.5%—3%碘酊消毒、75%酒精脫碘，用無菌注射器將膿腫內容物吸出,然后切開膿腫、引流，采集的膿液（>1ml）,并取部分膿腫壁置于厭氧運送裝置或接種于厭氧培養(yǎng)基中立刻送檢。注意不主張用拭子采集標本?；摵蛣?chuàng)傷標本的采集與運送第二十一頁，共三十七頁，2022年，8月28日⑵開放性病灶和膿腫：首先用無菌生理鹽水清洗病灶表面的污染雜菌，用無菌棉拭子先蘸少許生理鹽水，以保持標本的濕度，然后采取膿液及病灶深部的分泌物（最好從膿腫底部或膿腫壁取樣）后置于無菌的容器中送檢。最好采集2個拭子，其中一個用于細菌培養(yǎng)，另一個用于涂片革蘭染色?；摵蛣?chuàng)傷標本的采集與運送第二十二頁，共三十七頁，2022年，8月28日⑶膿皰或水皰：用酒精消毒使之干燥，對于患兒用23號針頭挑破膿皰，拭子采集膿皰液和基底部標本。化膿和創(chuàng)傷標本的采集與運送第二十三頁，共三十七頁，2022年，8月28日膿腫標本采集及運送過程中的注意事項⑴應盡可能在使用抗生素前采集標本，若患者在采集標本前已用抗生素，應在檢驗申請單上注明應用的抗生素，并在下次用抗生素前采集；⑵在采集標本時，應注意無菌操作，以防帶入與感染無關的皮膚定植菌；⑶采集標本時應注意標本的性狀、色澤及氣味，為分離鑒定致病菌提供依據；⑷標本采集后應在室溫2h內送檢，若不能及時送檢，可保存在4℃冰箱中，但不應超過24h?；摵蛣?chuàng)傷標本的采集與運送第二十四頁，共三十七頁，2022年，8月28日

尿液標本的采集與運送第二十五頁，共三十七頁，2022年，8月28日1、尿液培養(yǎng)的送檢指征⑴有典型的尿路感染癥狀：如尿急、尿頻、尿痛⑵肉眼膿尿或血尿⑶尿常規(guī)檢查表現為白細胞或亞硝酸鹽陽性⑷不明原因的發(fā)熱，無其它局部癥狀⑸留置導尿管的患者出現發(fā)熱⑹膀胱排空功能受損⑺尿道口有膿性分泌物⑻泌尿系統(tǒng)疾病手術前尿液標本的采集與運送第二十六頁，共三十七頁，2022年，8月28日2、尿標本采集方法：盡量取早晨第一次尿液⑴清潔中段尿采集法①女性：采集前先用肥皂水或0.1%高錳酸鉀溶液沖洗外陰部及尿道口，用滅菌紗布擦拭，用手指將陰唇分開排尿，留取中段尿送檢②男性：用肥皂水翻轉包皮沖洗，用0.1%新潔爾滅消毒尿道口，用滅菌紗布擦拭，取中段尿送檢尿液標本的采集與運送第二十七頁，共三十七頁，2022年，8月28日⑵導尿法①直接導尿：將會陰局部清洗后，用導尿管直接經尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液。但有可能將下尿道細菌引入膀胱，導致繼發(fā)感染，一般不提倡用。②留置導尿：通過專門的采樣端口采集，不能把導尿管與尿袋拔開后收集尿液。采樣端口用酒精消毒；必要時可先夾住導尿管但不能超過30分鐘；將注射器針頭插入采樣端口，抽吸出尿液。注意：不能從集尿袋的下端管口留取標本，集尿袋內的尿液也不能用于培養(yǎng)。尿液標本的采集與運送第二十八頁，共三十七頁，2022年，8月28日⑶膀胱穿刺采集法采用恥骨上膀胱穿刺取尿。這種方法是評估膀胱內細菌感染的“金標準”方法。因有一定的痛苦，患者難以接受。尿液標本的采集與運送第二十九頁，共三十七頁，2022年，8月28日3、尿液標本運送收集中段尿5—10ml，及時送檢室溫保存下不得超過2h，否則應置于4℃冷藏保存時間不得超過8h。尿液標本的采集與運送第三十頁，共三十七頁，2022年，8月28日女性生殖道標本采集第三十一頁，共三十七頁，2022年，8月28日⑴陰道及宮頸分泌物采集⑵宮腔內標本采集羊膜腔感染時可經腹壁羊膜穿刺抽取羊水或經子宮頸插管抽取羊水進行細菌培養(yǎng)。但經子宮頸插管抽取羊水進行細菌培養(yǎng)易受陰道或子宮頸部位細菌污染，臨床應用價值有限。懷疑有急性宮腔內感染時，原則上不采取宮腔分泌物，以免引起感染播散；必要時用滅菌導管抽取，導管外套一層保護膜，經子宮頸插入宮腔后再刺穿保護膜抽取分泌物。女性生殖道標本采集第三十二頁，共三十七頁，2022年，8月28日

穿刺液標本的采集及運送第三十三頁，共三十七頁，2022年，8月28日1、標本采集由臨床醫(yī)生采集（無菌操作穿刺抽取標本或外科手術采集標本）膽汁采集分三種方法：⑴十二指腸引流法（以B膽汁—來自膽囊，做細菌培養(yǎng)意義較大）。⑵膽囊穿刺法⑶手術采取法。取標本約2ml裝入無菌密封容器送檢。其它穿刺液的采集：由臨床醫(yī)生采集標本5—10ml注入無菌密封容器內送檢（為防止凝固，可先加入滅菌肝素），也可將標本直接加入血培養(yǎng)瓶中送檢。心包液、關節(jié)液、鞘膜積液采樣量為1—5ml。穿刺液標本的采集及運送第三十四頁，共三十七頁，2022年，8月28日2、標本運送采集后應正確蓋好，防止泄露或容器外部留有殘留