實(shí)驗(yàn)四 微生物的菌落形態(tài)觀察、平板菌落計(jì)數(shù)及菌種保藏(張理珉)

實(shí)驗(yàn)四

微生物的菌落形態(tài)觀察、

平板菌落計(jì)數(shù)及菌種保藏目的要求1、觀察細(xì)菌、放線菌、霉菌的菌落形態(tài)特征，并加以區(qū)分。2、掌握平板菌落計(jì)數(shù)的原則和方法。3、掌握三種類群微生物的單菌落挑取，并接種于斜面，進(jìn)一步加強(qiáng)無(wú)菌操作技術(shù)。4、了解菌種保藏的原理、重要性及常見方法。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容微生物菌落形態(tài)觀察及區(qū)分（細(xì)菌、放線菌、霉菌、酵母菌——放在后面介紹）平板菌落計(jì)數(shù)（細(xì)菌、放線菌、霉菌）挑取單菌落接種于斜面介紹菌種保藏的原理和方法對(duì)于一個(gè)樣品，針對(duì)微生物來(lái)說(shuō)最想了解的問(wèn)題（首要問(wèn)題）存在的微生物種類各類微生物的數(shù)量各類微生物的作用說(shuō)明：

只是針對(duì)可人工培養(yǎng)的微生物來(lái)說(shuō)，樂觀估計(jì)可人工培養(yǎng)的部分只占總數(shù)的10%（保守估計(jì)只有1%）；證據(jù)來(lái)源有兩方面——分子生物學(xué)的探索；和原位培養(yǎng)的比較。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一

——微生物菌落形態(tài)觀察及區(qū)分一、微生物的形態(tài)和菌落特征的比較表單細(xì)胞微生物菌絲狀微生物細(xì)菌酵母菌放線菌霉菌主要特征菌落含水狀態(tài)很濕或較濕較濕干燥或較干燥干燥外觀形態(tài)小而突起或大而平坦大而突起小而緊密大而疏松或大而致密細(xì)胞相互關(guān)系單個(gè)分散或有一定排列方式單個(gè)分散或假絲狀絲狀交織，緊密絲狀交織形態(tài)特征小而均勻，個(gè)別有芽孢大而分化細(xì)而均勻粗而分化參考特征菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌落與培養(yǎng)基結(jié)合程度不結(jié)合不結(jié)合牢固結(jié)合較牢因結(jié)合菌落顏色多樣單調(diào)，一般呈乳脂或礦燭色，少數(shù)紅色或黑色十分多樣十分多樣菌落正反面顏色的差別相同相同一般不同一般不同菌落邊緣一般看不到細(xì)胞可見球狀，卵圓狀或假絲狀細(xì)胞有時(shí)可見細(xì)絲狀細(xì)胞可見粗絲狀細(xì)胞細(xì)胞生長(zhǎng)速度一般很快較快慢一般較快氣味一般有臭味多帶酒香味常有泥腥味或抗生素氣味往往有霉味二、細(xì)菌菌落形態(tài)的多樣性（示意圖）延展性較強(qiáng)的一些霉菌菌絲（松散）平板中菌落形態(tài)三、菌落特征描寫方法①大小大、中、小、針尖狀。可先將整個(gè)平板上的菌落粗略觀察一下，再?zèng)Q定大、中、小的標(biāo)準(zhǔn)，或由教師指出一個(gè)大小范圍。②顏色黃色、金黃色、灰色、乳白色、紅色、粉紅色等。③干濕情況干燥、濕潤(rùn)、粘稠④形態(tài)圓形、不規(guī)則等⑤高度扁平、隆起、凹下⑥透明程度透明、半透明、不透明⑦邊緣整齊、不整齊注意：可以進(jìn)一步細(xì)分描述菌落形態(tài)可因培養(yǎng)基成分不同而發(fā)生顯著變化（枯草芽孢桿菌在營(yíng)養(yǎng)缺乏時(shí)形成的雪花狀菌落）四、各類型菌落的總體特征

——反映細(xì)胞結(jié)構(gòu)及特點(diǎn)細(xì)菌——含水量高（多，形成毛細(xì)管水），濕潤(rùn)，細(xì)膩（個(gè)體?。?。

細(xì)菌菌落說(shuō)明：光滑型——一般具有莢膜；表面粗糙、褶皺、折光性強(qiáng)（不透明）菌落——一般具有芽孢；菌落大而扁平——一般具有鞭毛。放線菌——菌落大小差別不大，相對(duì)較小，干燥（粉狀），菌絲細(xì)（肉眼分不清楚）。霉菌——菌落較大，干燥（粉狀，較粗，顆粒），絲狀較粗（肉眼可以區(qū)分）。以最少的特征指標(biāo)完成區(qū)分或分類最好。細(xì)菌的培養(yǎng)特征包括（群體形態(tài)特征）：①各種固體培養(yǎng)基上的形態(tài)（針對(duì)菌落）②各種液體培養(yǎng)基上的表現(xiàn)形態(tài)③各種斜面培養(yǎng)基上的表現(xiàn)形態(tài)（針對(duì)菌苔）④各種半固體培養(yǎng)基上的形態(tài)（穿刺培養(yǎng)）⑤其它注意：微生物菌落形態(tài)的區(qū)分除了通過(guò)肉眼進(jìn)行區(qū)分判斷外，還可以借助其它工具進(jìn)行直接接觸區(qū)分判斷（牙簽、接種工具等）細(xì)菌菌落掃描電鏡顯微照片實(shí)驗(yàn)內(nèi)容二

——從分離平板上挑取單菌落挑取細(xì)菌單菌落接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基斜面上——接種環(huán)挑取放線菌單菌落接種于高氏1號(hào)培養(yǎng)基斜面上——接種環(huán)、接種鉤挑取霉菌單菌落接種于馬丁氏培養(yǎng)基斜面上——接種環(huán)、接種鉤一般流程圖（無(wú)菌操作）：

拿起平板并打開→用接種工具挑取單菌落→放于酒精燈外焰旁（不得過(guò)近？）→放下平板拿起斜面并取下塞子→用已粘有菌體的接種工具在斜面上劃“之”字線或直線→接種工具取出、灼燒→塞好膠塞→作標(biāo)記（菌種名稱、接種人、接種日期等）。接種斜面的演示圖操作要點(diǎn)：①始終保持無(wú)菌操作；②棉塞或硅膠塞不放于桌面，只能夾于拿接種工具的手中（小手指和手掌中間或無(wú)名指和小手指中間）；③一般在斜面培養(yǎng)基上以“之”線劃接種（充分利用斜面，得到最大量的菌體）；④有時(shí)也進(jìn)行直線接種劃線（斜面培養(yǎng)特征觀察）說(shuō)明：注意試管斜面的拿法（手掌向上，斜面向上），與接種工具的配合使用；記號(hào)筆標(biāo)記時(shí)，過(guò)火烤一下，字不容易掉；挑取單菌落于相應(yīng)斜面，管口標(biāo)記學(xué)號(hào)，橡皮筋捆扎（三支）；三支斜面的接種情況作為一次考核，記入平時(shí)成績(jī)。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容三

——平板菌落計(jì)數(shù)一、相關(guān)知識(shí)介紹1、微生物增殖和樣品微生物數(shù)量的計(jì)量平板菌落計(jì)數(shù)

使單細(xì)胞形成菌落，一個(gè)單菌落代表一個(gè)單細(xì)胞，從而反映出微生物的數(shù)量。（1）利用計(jì)數(shù)器在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)（以后介紹）；（2）最大或然數(shù)（Mostprobablenumber，MPN，又稱稀釋培養(yǎng)測(cè)數(shù)法、最大可能數(shù)）；

適用具有特殊生理功能的類群——存在但不能人工培養(yǎng)形成單菌落，可以利用生化手段檢測(cè)出；利用統(tǒng)計(jì)學(xué)原理計(jì)算，結(jié)果粗放，只能得到數(shù)量級(jí)（近似數(shù)）。（3）菌體濁度的測(cè)定（只針對(duì)單細(xì)胞微生物）；

利用分光光度計(jì)在600nm測(cè)定吸光度值。（4）細(xì)胞干重和濕重的測(cè)定（有時(shí)濕重以體積計(jì)量）；（5）各種細(xì)胞物質(zhì)含量的測(cè)定（蛋白質(zhì)、核酸、ATP、磷、葉綠素等定量測(cè)定）——建立了多種快速檢測(cè)方法；說(shuō)明：后兩種對(duì)絲狀菌比較有意義。2、常見微生物檢測(cè)項(xiàng)目（1）常規(guī)微生物項(xiàng)目：細(xì)菌總數(shù)、大腸菌群、大腸桿菌、酵母總數(shù)、霉菌總數(shù)（2）致病微生物項(xiàng)目：沙門氏菌、李斯特菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O-157：H7、彎曲桿菌、致病弧菌、副溶血弧菌、志賀氏菌、假單胞菌等3、快速檢測(cè)方法的現(xiàn)狀國(guó)外許多政府檢測(cè)機(jī)構(gòu)都在大量使用快速檢測(cè)方法，尤其是ATP法、免疫法、阻抗法和顯色培養(yǎng)基法在國(guó)外應(yīng)用相當(dāng)成功。國(guó)內(nèi)的許多政府檢測(cè)機(jī)構(gòu)也都已經(jīng)在使用或正在考慮使用國(guó)外先進(jìn)的快速檢測(cè)技術(shù)。從長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展趨勢(shì)來(lái)說(shuō)，快速方法是微生物檢測(cè)的一大方向（？）。4、常規(guī)微生物快速檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)狀傳統(tǒng)計(jì)數(shù)改良法：（1）螺旋平板計(jì)數(shù)法：螺旋接種儀＋菌落計(jì)數(shù)儀（2）濾膜法：常用于一些可過(guò)濾樣品的檢測(cè)。（3）紙片法：培養(yǎng)基固體在載體上。省去制做培養(yǎng)基的時(shí)間。主要用于細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)。（4）其它：如Simplate即用膠，改良MPN產(chǎn)品。螺旋平板法DWS螺旋平板接種儀aColyte自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀螺旋平板原理平皿旋轉(zhuǎn)接種針往外移動(dòng)同時(shí)自動(dòng)將樣品稀釋1000倍?？焖贆z測(cè)微生物數(shù)量的新方法：（1）ATP法（2）電化學(xué)法（3）顏色變化（4）流式細(xì)胞技術(shù)及激光掃描技術(shù)（5）其它：熱量法，放射測(cè)量法說(shuō)明：檢測(cè)方法建立的基礎(chǔ)——可測(cè)、穩(wěn)定、重現(xiàn)、可行、簡(jiǎn)便濁度與微生物生物量測(cè)定原理：①細(xì)胞的存在會(huì)造成光的散射，降低光線的透過(guò)；②在一定范圍內(nèi)細(xì)胞濃度與吸光度成正比二、平板菌落計(jì)數(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：反映的是微生物活菌數(shù)量，可獲得活菌的信息，所以被廣泛用于生物制品檢驗(yàn)（如活菌制劑），以及食品、飲料和水（包括水源水）等的含菌指數(shù)或污染程度的檢測(cè)。缺點(diǎn)：操作較繁，所需時(shí)間較長(zhǎng)，測(cè)定結(jié)果易受多種因素的影響。三、平板菌落計(jì)數(shù)的表述及計(jì)算因?yàn)槲⑸锊灰淄耆稚⒊蓡蝹€(gè)細(xì)胞；菌落的來(lái)源也并非完全為單個(gè)細(xì)胞；因此其測(cè)定結(jié)果比實(shí)際菌數(shù)偏低；引入菌落形成單位（colony-formingunits，cfu）來(lái)表示，而不以絕對(duì)菌體數(shù)量來(lái)表示樣品的活菌含量。計(jì)算公式：計(jì)算公式說(shuō)明：①如樣品來(lái)源為液體其表示為CFU/ml；②所加樣品量為每個(gè)平板所加入的相應(yīng)稀釋液的體積（ml）。四、菌落計(jì)數(shù)原則（六條）

1、先計(jì)算相同稀釋度的平均菌落數(shù)。若其中一個(gè)平板有較大片狀菌苔生長(zhǎng)時(shí)，則不應(yīng)采用，而應(yīng)以無(wú)片狀菌苔生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的平均菌落數(shù)。若片狀菌苔的大小不到平板的一半，而其余的一半菌落分布又很均勻時(shí)，則可將此一半的菌落數(shù)乘2以代表全平板的菌落數(shù)，然后再計(jì)算該稀釋度的平均菌落數(shù)。

2、首先選擇平均菌落數(shù)在30～300之間的，當(dāng)只有一個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時(shí)，則以該平均菌落數(shù)乘其稀釋倍數(shù)即為該樣品的細(xì)菌總數(shù)（見下表，例1）。

3、若有兩個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)均在30～300之間，則按兩者菌落總數(shù)之比值來(lái)決定。若其比值小于2，應(yīng)采取兩者的平均數(shù)；若大于2，則取其中稀釋度(倍數(shù))較小的計(jì)算菌落總數(shù)（見下表，例2及例3）。

4、若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，則應(yīng)按稀釋度(倍數(shù))最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)（見下表，例4）。

5、若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度(倍數(shù))最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)（見下表，例5）。

6、若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30～300之間，則以最近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)（見下表，例6）。計(jì)算菌落總數(shù)方法舉例（加樣量為1mL）例次不同稀釋度的平均菌落數(shù)兩個(gè)稀釋度菌落數(shù)之比菌落總數(shù)（個(gè)／mL）備注10-110-210-3１136516420－1.64×104一般采用科學(xué)計(jì)數(shù)法；取兩位小數(shù)；“無(wú)法計(jì)數(shù)”和“0”在這里是兩個(gè)概念——前者是指因稀釋倍數(shù)掌握不好或其它原因造成不能計(jì)數(shù)，后者指平板上無(wú)微生物菌落生長(zhǎng)。２2760295461.63.78×104３2890271602.22.71×104４無(wú)法計(jì)數(shù)1650513－5.13×105５27115－2.70×102６無(wú)法計(jì)數(shù)30512－3.05×104針對(duì)計(jì)數(shù)原則的說(shuō)明1、比較時(shí)要換算至同一個(gè)稀釋度進(jìn)行；2、霉菌可能難以完全遵循此六項(xiàng)計(jì)數(shù)原則，菌落大，漫延性強(qiáng)，30~300個(gè)/皿時(shí)，菌落過(guò)密重疊而無(wú)法計(jì)數(shù)。3、牛肉膏培養(yǎng)基：只計(jì)細(xì)菌的數(shù)量高氏1號(hào)培養(yǎng)基：只計(jì)放線菌的數(shù)量馬丁氏培養(yǎng)基：只計(jì)霉菌的數(shù)量五、平板菌落計(jì)數(shù)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)表細(xì)菌稀釋度10-310-410-5123平均123平均123平均cfu數(shù)/平板每毫升中的cfu數(shù)放線菌稀釋度10-210-310-4123平均123平均123平均cfu數(shù)/平板每毫升中的cfu數(shù)霉菌稀釋度10-210-310-4123平均123平均123平均cfu數(shù)/平板每毫升中的cfu數(shù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容四

——介紹菌種保藏的原理和方法一、菌種保藏的重要性微生物基本特性所決定的——微生物個(gè)體微小、代謝活躍、生長(zhǎng)繁殖快、易變異、易污染。研究工作的連續(xù)性需要。工業(yè)及科研菌種要注意菌種的衰退和復(fù)壯。二、菌種的衰退

菌種衰退（degeneration）是指由于自發(fā)突變的結(jié)果，而使某物種原有的一系列生物學(xué)性狀發(fā)生量變或質(zhì)變的現(xiàn)象。

純菌種自發(fā)突變突變個(gè)體傳代增殖原始個(gè)體不純菌種衰退菌種三、菌種衰退的現(xiàn)象菌落和細(xì)胞形態(tài)改變生長(zhǎng)速度緩慢，產(chǎn)孢子越來(lái)越少代謝產(chǎn)物生產(chǎn)能力下降，即出現(xiàn)負(fù)突變致病菌對(duì)宿主侵染能力下降對(duì)外界不良條件的抵抗能力下降等四、菌種衰退的原因

基因突變－－主要原因1、有關(guān)基因發(fā)生負(fù)突變導(dǎo)致菌種衰退

2、表型延遲造成菌種衰退

3、質(zhì)粒脫落導(dǎo)致菌種衰退

連續(xù)傳代－－加速衰退

不適宜的培養(yǎng)和保藏條件－－加速衰退五、菌種衰退的防止

控制傳代次數(shù)創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件利用不易衰退的細(xì)胞移種傳代采用有效的菌種保藏方法講究菌種選育技術(shù)定期進(jìn)行分離純化，測(cè)試性能六、菌種的復(fù)壯

狹義的復(fù)壯－－消極的措施是指在菌種已經(jīng)發(fā)生衰退的情況下，通過(guò)純種分離和測(cè)定典型性狀、生產(chǎn)性能等指標(biāo)，從已衰退的群體中篩選出少數(shù)尚未退化的個(gè)體，以達(dá)到恢復(fù)原菌株固有性狀的相應(yīng)措施。

廣義的復(fù)壯－－積極的措施是指在菌種的典型特征或生產(chǎn)性狀尚未衰退前，就經(jīng)常有意識(shí)地采取純種分離和生產(chǎn)性狀測(cè)定工作，以期從中選擇到自發(fā)的正突變個(gè)體。七、菌種復(fù)壯的主要方法1、純種分離法通過(guò)純種分離，可將衰退菌種細(xì)胞群體中一部分仍保持原有典型性狀的單細(xì)胞分離出來(lái)，經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)，就可恢復(fù)原菌株的典型性狀。菌落純（“菌種純”）細(xì)胞純（“菌株純”）

2、宿主體內(nèi)復(fù)壯法對(duì)于寄生性微生物的衰退菌株，可通過(guò)接種到相應(yīng)昆蟲或動(dòng)植物宿主體內(nèi)來(lái)提高菌株的毒性。

3、淘汰法將衰退菌種進(jìn)行一定的處理（如藥物、低溫、高溫等），往往可以起到淘汰已衰退個(gè)體而達(dá)到復(fù)壯的目的。

4、遺傳育種法把退化的菌種重新進(jìn)行遺傳育種，從中再選出高產(chǎn)而不易退化的穩(wěn)定性較好的生產(chǎn)菌種。八、菌種保藏達(dá)到的目的1、存活，不丟失，不污染；2、防止優(yōu)良性狀丟失；3、隨時(shí)為生產(chǎn)、科研提供優(yōu)良菌種。九、菌種保藏的基本原則

使微生物的新陳代謝處于最低或幾乎停止的狀態(tài)十、常采取的措施1、低溫——4℃、-20℃、-70℃、-196℃2、干燥——降低水活度（aw）3、缺（絕）氧——針對(duì)專性好氧菌4、低營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)5、高滲透壓——防腐（針對(duì)食品等）十一、常見的方法傳代培養(yǎng)法

一般斜面培養(yǎng)基4℃保存、在培養(yǎng)物表面覆蓋無(wú)菌石蠟油（1cm以上）懸液法（蒸餾水、緩沖液）

對(duì)乳酸菌、酵母菌等有一定作用和效果載體法（砂土、濾紙片等）

針對(duì)微生物所產(chǎn)的孢子保存較好，所以抗生素生產(chǎn)菌種常用真空干燥法（冷凍真空干燥法、L-干燥法）

對(duì)不產(chǎn)孢子的絲狀真菌營(yíng)養(yǎng)體保存效果不好，不宜采用冷凍法（-20℃、-70℃、-196℃，保護(hù)劑）

溫度越低效果越好，液氮適用于所有生物材料的保存保護(hù)劑的選擇作用——可以使細(xì)胞經(jīng)低溫冷凍時(shí)減少冰晶的形成，從而避免冰晶的機(jī)械損傷（玻璃化）。真空冷凍干燥法——脫脂牛奶、多種糖類溶液、蛋白及多肽溶液等冷凍法——甘油溶液（10~40%）；二甲亞砜、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）等脫脂牛奶的制備：

鮮牛奶煮沸→冰箱靜止過(guò)液→吸取底部牛奶（虹吸）鮮牛奶煮沸→離心除脂（表層乳脂）幾種常用菌種保藏方法的比較方法名稱主要措施適宜菌種保藏期評(píng)價(jià)冰箱保藏法（斜面）低溫各大類3~6月簡(jiǎn)便冰箱保藏法（半固體）低溫、局部缺氧細(xì)菌、酵母菌6~12月簡(jiǎn)便石蠟油封藏法低溫、缺氧各大類1~2年簡(jiǎn)便沙土保藏法干燥、缺氧、低營(yíng)養(yǎng)產(chǎn)孢子微生物1~10年簡(jiǎn)便有效冷凍真空干燥法干燥、無(wú)氧、低溫、有保護(hù)劑各大類（不產(chǎn)孢絲狀真菌除外）5~15年以上簡(jiǎn)便有效冷凍法（-196℃）低溫、有保護(hù)劑各大類（包括各類細(xì)胞）15年以上適應(yīng)最廣十二、菌種保藏的補(bǔ)充說(shuō)明菌種保藏不是要求所有保存菌種都保持存活，而是在加入大量菌體經(jīng)保藏處理后還有少量存活；保藏可以采用多種措施聯(lián)合共同完成。針對(duì)專性寄生生物體還有一類宿主保藏法（下面介紹）宿主保藏法（針對(duì)專性寄生生命體）此法適用于專性活細(xì)胞寄生微生物（如病毒、立克次氏體等）。植物病毒可用植物幼葉的汁液與病毒混合，冷凍或干燥保存。噬菌體可以經(jīng)過(guò)細(xì)菌培養(yǎng)擴(kuò)大后，與培養(yǎng)基混合直接保存。動(dòng)物病毒可直接用病毒感染適宜的臟器或體液，然后分裝于試管中密封，低溫保存。十三、國(guó)內(nèi)外菌種保藏機(jī)構(gòu)國(guó)內(nèi)外都有專門的保藏機(jī)構(gòu)和制度其任務(wù)——廣泛收集科研和生產(chǎn)菌種、菌株，并加以妥善保管，使之達(dá)到不死、不衰、不亂以及便于研究、交換和使用的目的。菌種保藏機(jī)構(gòu)：中國(guó)微生物菌種保藏委員會(huì)(CCCCM)

美國(guó)的典型菌種保藏中心(ATCC)

英國(guó)國(guó)家典型菌種保藏所（NCTC）法國(guó)里昂巴斯德研究所（IPL）中國(guó)微生物菌種保藏機(jī)構(gòu)名稱和縮寫

縮寫名稱縮寫名稱ACCC中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心ISF中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所SH上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所CACC抗菌素菌種保藏管理中心IA中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院抗菌素研究所SIA四川抗菌素工業(yè)研究所CCGMC普通微生物菌種保藏管理中心AS中國(guó)科學(xué)院微生物研究所AS-IV中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研究所CFCC林業(yè)微生物菌種保藏管理中心CAF中國(guó)林業(yè)科學(xué)院菌種保藏管理中心CICC工業(yè)微生物菌種保藏管理中心IFFI輕工業(yè)部食品發(fā)酵工業(yè)科學(xué)研究所CMCC醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心ID中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院皮膚病研究所NICPB衛(wèi)生部藥品生物制品監(jiān)察所IV中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒研究所CVCC獸醫(yī)微生物菌種保藏管理中心CIVBP中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所YM云南省微生物研究所國(guó)際微生物菌種保藏機(jī)構(gòu)名稱和縮寫

縮寫名稱簡(jiǎn)要介紹ATCCAmericanTypeCultureCollection美國(guó)典型菌種保藏中心，美國(guó)馬里蘭州，羅克維爾市ATCC主要從事農(nóng)業(yè)、遺傳學(xué)、應(yīng)用微生物、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、工業(yè)微生物學(xué)、菌種保藏方法、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)、分子生物學(xué)、植物病理學(xué)、普通微生物學(xué)、分類學(xué)、食品科學(xué)等的研究。

該中心保藏有藻類111株，細(xì)菌和抗生素16865株，細(xì)胞和雜合細(xì)胞4300株，絲狀真菌和酵母46000株，植物組織79株，種子600株，原生動(dòng)物1800株，動(dòng)物病毒、衣原體和病原體2189株，植物病毒1563種。

另外，該中心還提供菌種的分離、鑒定及保藏服務(wù)。該中心保藏的菌種可出售。NRRLAgriculturalResearchServiceCultureCollection美國(guó)農(nóng)業(yè)研究菌種保藏中心是由美國(guó)農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)研究中心支持的政府性質(zhì)的菌種保藏中心。主要從事農(nóng)業(yè)、應(yīng)用微生物、基因工程、工業(yè)微生物、菌種保藏方法、環(huán)境保護(hù)、分子生物學(xué)、食品安全、普通微生物、分類學(xué)的研究。

該中心保藏有細(xì)菌10500株，真菌45000株，酵母14500株，放線菌9500株。

另外，該中心還提供細(xì)菌、真菌、酵母的鑒定服務(wù)。CBSCentraalbureauvoor

Schimmelcultures

荷蘭微生物菌種保藏中心，真菌中心收藏所，荷蘭，巴爾恩市CBS是半政府性質(zhì)的主要保藏真菌、酵母菌種保藏中心。

該中心主要從事菌種保藏方法、分類學(xué)、分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)等的研究。

該中心保藏有真菌35000株、酵母5500株。該中心保藏的菌種可出售。NBRCNITEBiologicalResourceCenter日本技術(shù)評(píng)價(jià)研究所生物資源中心，NBRC（IFO）是由日本經(jīng)濟(jì)部、商業(yè)部、工業(yè)部支持的半政府性質(zhì)菌種保藏中心。主要從事農(nóng)業(yè)、應(yīng)用微生物、菌種保藏方法、環(huán)境保護(hù)、工業(yè)微生物、普通微生物、分子生物學(xué)等的研究。

該中心保藏有細(xì)菌1446株，真菌568株，酵母164株。這些菌種主要來(lái)自本國(guó)的其它菌種保藏中心。該中心保藏的菌種可出售。國(guó)際微生物菌種保藏機(jī)構(gòu)名稱和縮寫

縮寫名稱簡(jiǎn)要介紹KCTCKoreanCollectionforTypeCultures韓國(guó)典型菌種保藏中心，KCTC是由政府科學(xué)技術(shù)部門支持的半政府性質(zhì)的菌種保藏中心。主要從事應(yīng)用微生物、基因工程、工業(yè)微生物、菌種保藏、發(fā)酵、分子生物學(xué)、分類學(xué)等的研究。

該中心保藏有細(xì)菌5005株，真菌178株，酵母225株，質(zhì)粒51株，動(dòng)物細(xì)胞98株，動(dòng)物雜合細(xì)胞21株，植物細(xì)胞31株。該中心保藏的菌種可出售。DSMZDeutscheSammlungvonMikroorganismenundZellkulture