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文檔簡介
歡迎光臨遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)
遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)日常要求1.課前預(yù)習(xí),課間做好實(shí)驗(yàn)記錄,課后詳細(xì)總結(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果并按時提交實(shí)驗(yàn)報告2.嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的各種規(guī)章制度3.
維持實(shí)驗(yàn)臺面、地面衛(wèi)生,實(shí)驗(yàn)儀器有序、整潔
實(shí)驗(yàn)一、果蠅的形態(tài)觀察及性別鑒定(3學(xué)時)
Drosophilamelanogaster一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.熟悉果蠅的形態(tài)特征、生活史及常見突變性狀;2.區(qū)別雌雄果蠅;3.掌握實(shí)驗(yàn)果蠅的飼養(yǎng)、管理及實(shí)驗(yàn)處理方法和技術(shù)二、實(shí)驗(yàn)材料、用具及試劑材料:黑腹果蠅(D.
melanogaster)
18﹟,2﹟(vg)
,6﹟(w、sn3、m),10﹟(e),14﹟(vg、e),22﹟(w)
用具:雙目解剖鏡、放大鏡、鑷子、麻醉瓶、白瓷板、毛筆、酒精棉球試劑:乙醚、瓊脂粉、白糖、丙酸、酵母粉、玉米粉等果蠅作實(shí)驗(yàn)材料的優(yōu)點(diǎn)生活史短繁殖率高突變類型多CS少,唾腺CSbee+
w、m、snwm三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.
生活史觀察2.果蠅的麻醉3.雌雄果蠅的辨別4.突變性狀的觀察1.果蠅的生活史完全變態(tài)半天交尾,1d產(chǎn)卵1-2d孵化3d,兩次蛻皮2-3d化蛹4d羽化果蠅的生活周期長短與溫度有關(guān).
30℃以上果蠅不育和死亡,低溫則使它的生活周期延長,生活力降低;最適溫度為20-25℃10℃15℃20℃25℃卵幼蟲
8d
5d幼蟲成蟲
57d
18d6.3d4.2d25℃時,從卵到成蟲約10d,成蟲約活15d
卵:長0.5mm,橢圓形,腹面稍扁平,被絨毛膜,在背面的前端伸出一對觸絲,使卵附著在食物(或瓶壁)上幼蟲:三齡幼蟲長4-5mm,頭部稍尖,黑斑為口器;其后有一對透明的唾液腺;一對生殖腺位于軀體后半部上方,精巢較大,似明顯的黑點(diǎn),而卵巢則較小,可以此作為鑒別.幼蟲活動力強(qiáng)而貪食,爬行時留下很多條溝,溝多而且寬時,表明幼蟲生長良好.
蛹:化蛹前從培養(yǎng)基爬出,附著在瓶壁上,形成一梭形的蛹.起初蛹?xì)ゎ伾S而柔軟,以后逐漸硬化,變?yōu)樯詈稚?即將羽化成蟲:剛羽化的蟲體較長,翅膀尚未展開,體表未完全幾丁質(zhì)化,呈半透明的乳白色;透過腹部體壁,可見黑色的消化系統(tǒng),漸變?yōu)槎檀謭A形,雙翅展開,體色加深;如WT初為淺灰色,后呈灰褐色果蠅的寄生蟲—螨蟲2.形態(tài)構(gòu)造頭部:一對復(fù)眼,一對觸角胸部:三對足,一對翅腹部:背面有黑色環(huán)紋,腹面有腹片,外生殖器在腹部末端,全身被體毛和剛毛
3.
成蟲雌雄的鑒別♀♂體形較大體形較小腹部橢圓,末端稍尖腹部末端鈍圓背面5條黑紋背面3條黑紋,前兩條細(xì),后一條寬且延續(xù)至腹面腹面6個腹片(剛毛圍成一圈)4個腹片無性梳第一對跗節(jié)基部有性梳外生殖器比較簡單外生殖器較復(fù)雜,剛羽化的幼蠅可觀察到生殖弧、肛口板等4.
果蠅常見的幾種突變類型突變性狀基因符號性狀特征所在CS白眼w復(fù)眼白色X檀黑體e體呈烏木色,黑亮IIIR黑體b體呈深色I(xiàn)IL殘翅vg翅退化,部分殘留IIR小翅焦剛毛msn翅較短剛毛卷曲XX四、實(shí)驗(yàn)步驟1.果蠅的飼養(yǎng)(1)
培養(yǎng)基的配制
成蠅以酵母菌為食.常用玉米粉配制培養(yǎng)基玉米培養(yǎng)基成份(100ml)水80ml玉米粉8.25g白糖6.2g瓊脂0.62g丙酸0.5ml酵母少許配制方法水分成兩份:一份用于溶解瓊脂和糖,另一份煮玉米粉,待兩份分別溶解煮好后再合到一起煮沸,滅火后加入丙酸;充分?jǐn)嚢韬笤俜盅b培養(yǎng)瓶待培養(yǎng)基冷卻后,在其表面灑稍許酵母粉,插一滅菌的濾紙片作為幼蟲化蛹的干燥場所培養(yǎng)瓶的滅菌準(zhǔn)備培養(yǎng)瓶棉塞濾紙包好棉塞滅菌鍋121℃20min配制好的培養(yǎng)基2)果蠅繼代培養(yǎng)果蠅轉(zhuǎn)移到新配制的培養(yǎng)基中繁殖.轉(zhuǎn)移時要注意,不要使果蠅從兩個瓶口的接縫處飛出.一般用黑紙包住帶有親本果蠅的培養(yǎng)瓶,使其飛入新培養(yǎng)瓶內(nèi)準(zhǔn)備轉(zhuǎn)移果蠅的親本及培養(yǎng)基幼蟲化蛹時爬到瓶璧或?yàn)V紙上2.
果蠅性狀的觀察1)果蠅的麻醉處理準(zhǔn)備一只與培養(yǎng)瓶口徑相同的空瓶作為麻醉瓶,并配以脫脂棉塞去掉培養(yǎng)瓶棉塞,立即與麻醉瓶口相對,培養(yǎng)瓶在上,一手穩(wěn)住兩瓶,另一手輕輕震拍培養(yǎng)瓶,使果蠅落入麻醉瓶中滴數(shù)滴乙醚于麻醉瓶棉塞內(nèi),迅速將兩瓶塞住,約30s,麻醉瓶內(nèi)的果蠅即處于麻醉狀態(tài).不能麻醉過度麻醉后的果蠅放在白瓷板上,用毛筆移動檢查,根據(jù)需要用肉眼、放大鏡或解剖鏡觀察;不再用的果蠅務(wù)必倒入死蠅盛留器中及時處死,防止品系間混雜果蠅的麻醉滴加乙醚的方法果蠅的麻醉劑轉(zhuǎn)入麻醉瓶中觀察結(jié)果死亡果蠅的標(biāo)志2)果蠅♀♂識別
♀♂體形大小腹紋53腹部末端尖圓性梳無有果蠅♀♂識別
果蠅♀♂識別
果蠅♀♂識別
果蠅♀♂識別果蠅♀♂識別果蠅性狀觀察3.眼色2.翅大小1.體色wmewvgwm剛毛形態(tài)剛毛形態(tài)觀察后的結(jié)果填入下表類型特征
黑身白眼小翅白眼殘翅紅眼黑檀體wmsn體色黑色(b)正常(+)正常(+)黑色(e)正常眼色白色(w)白色(w)紅色(+)紅色(+)白色翅形正常(+)小翅(m)殘翅(vg)正常(+)小翅剛毛正常(+)正常(+)正常(+)正常(+)卷毛注意事項配制培養(yǎng)基時要將玉米粉及瓊脂分開煮轉(zhuǎn)移果蠅時要防止果蠅飛走
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