食品檢驗(yàn)員培訓(xùn)

化學(xué)與制藥工程學(xué)院食品分析檢驗(yàn)員第一節(jié)樣品的采集與處理一、樣品的采集1.采樣的意義及要求采樣：從整批被檢食品中抽取一部分有代表性的樣品，供分析化驗(yàn)用。采樣的正確與否，是檢驗(yàn)工作成敗的關(guān)鍵。采樣的要求：（1）采樣時(shí)，必須注意樣品的代表性和均勻性，以確保所采集樣品能代表整個(gè)供試材料的平均組成。（2）采樣時(shí)，要認(rèn)真填寫(xiě)采樣記錄，寫(xiě)明樣品的生產(chǎn)日期、批號(hào)、采樣條件、方法、數(shù)量、包裝情況等。同時(shí)注意其運(yùn)輸及保管條件，并填寫(xiě)檢驗(yàn)?zāi)康?、?xiàng)目及采樣人。2、采樣的數(shù)量和方法（1）樣品的分類

檢樣：從整批待測(cè)食品的各個(gè)部分所采取的少量樣品稱為檢樣。

原始樣品：把質(zhì)量相同的許多份檢樣綜合在一起稱為原始樣品。

平均樣品:原始樣品經(jīng)過(guò)處理再抽取其中一部分供分析檢驗(yàn)用，稱為平均樣品。（2）采樣的數(shù)量采樣的數(shù)量應(yīng)能反映該批食品的衛(wèi)生質(zhì)量和滿足檢驗(yàn)項(xiàng)目對(duì)試樣量的需要，一式三份供檢驗(yàn)、復(fù)檢和備查用，每份不少于0.5kg。（3）采樣的方法

采樣的一般方法：隨機(jī)抽樣：不帶主觀框架，在抽樣過(guò)程中保證整批食品中的每一個(gè)單位產(chǎn)品都有被抽取的機(jī)會(huì)。簡(jiǎn)單隨機(jī)抽樣系統(tǒng)隨機(jī)抽樣分層隨機(jī)抽樣階段隨機(jī)抽樣具體樣品的抽取方法①有完整包裝的食品，首先根據(jù)下列公式確定取樣件數(shù)n為取樣件數(shù)，N為總件數(shù)。a.固體樣品：用雙套回轉(zhuǎn)取樣管插入包裝中，回轉(zhuǎn)180°取出樣品。每一包裝須由上、中、下三層取出三份樣品，把許多份檢樣綜合起來(lái)成為原始樣品，再按四分法縮分至所需數(shù)量。

b.稠的半固體樣品：動(dòng)物油脂、果醬等，啟開(kāi)包裝后，用采樣器從上、中、下三層分別取出檢樣，然后混合縮減至所需數(shù)量。c.液體樣品：如鮮乳、酒或飲料等，充分混勻后采取一定量的樣品混合。②散裝固體樣品：先化分為若干等體積層，然后在每層的四角和中心分別用雙套回轉(zhuǎn)取樣管采取一定數(shù)量的樣品，混合后按四分法縮分至所需數(shù)量。③肉類、水產(chǎn)、果品蔬菜等組成不均勻的食品：由被檢物有代表性的各部位分別采樣，經(jīng)搗碎、混勻后，再縮減至所需數(shù)量。④罐頭、瓶裝食品或其他小包裝食品：根據(jù)批號(hào)連同包裝一起采樣。同一批次取樣數(shù)量，250g以上包裝不得少于3個(gè)，250g以下包裝不得少于6個(gè)。3、采樣的注意事項(xiàng)采樣時(shí)要認(rèn)真填寫(xiě)采樣記錄。采樣的數(shù)量一般三份供檢驗(yàn)、復(fù)查和備查用，每份不少于0.5kg。采樣工具應(yīng)該清潔，不應(yīng)將任何有害物質(zhì)帶入樣品中。樣品在檢測(cè)前，不得受到污染、發(fā)生變化。樣品抽取后，應(yīng)迅速送檢測(cè)室進(jìn)行分析。盛裝容器可根據(jù)要求選用硬質(zhì)玻璃或聚乙烯制品，容器上要貼上標(biāo)簽，并做好標(biāo)記。第二節(jié)分析試樣的制備及分解一、樣品的制備指對(duì)所采取的樣品進(jìn)行分取、粉碎、混勻等過(guò)程。1、常規(guī)食品樣品的制備（1）液體、漿體或懸浮液體一般將樣品充分搖勻和攪拌均勻即可。（2）互不相溶的液體如油和水的混合物，可分離后再分別取樣測(cè)定。（3）固體樣品采用切碎、搗碎、粉碎、反復(fù)研磨等方法將樣品研細(xì)并混合均勻。注意：防止易揮發(fā)性成分的逸散和避免樣品組成及理化性質(zhì)發(fā)生變化2、測(cè)定農(nóng)藥殘留量時(shí)樣品的制備（1）糧食充分混勻后用四分法取20g粉碎，全部過(guò)0.4mm篩（2）肉類除去皮和骨，將肥瘦肉混合取樣，每份樣品在檢測(cè)農(nóng)藥殘留量的同時(shí)還應(yīng)進(jìn)行粗脂肪的測(cè)定，以便必要時(shí)分別計(jì)算脂肪與瘦肉中農(nóng)藥的殘留量。（3）蔬菜、水果洗去泥沙并除去表面附著水，依當(dāng)?shù)厥秤昧?xí)慣，取可食用部分沿縱軸剖開(kāi)，各取1/4，然后切碎、混勻。（4）蛋類去殼后全部混勻（5）禽類取半只絞成肉泥（6）魚(yú)取半條絞成肉泥二、、樣樣品品的的預(yù)預(yù)處處理理1、、處處理理原原則則（1））消消除除干干擾擾因因素素，，即即干干擾擾組組分分減減小小至至不不干干擾擾被被測(cè)測(cè)組組分分的的測(cè)測(cè)定定；；（2））完完整整保保留留被被測(cè)測(cè)組組分分，，即即被被測(cè)測(cè)組組分分在在分分離離過(guò)過(guò)程程中中的的損損失失要要小小至至可可忽忽略略不不計(jì)計(jì)；；（3））使使被被測(cè)測(cè)組組分分濃濃縮縮，，以以便便獲獲得得可可靠靠的的檢檢測(cè)測(cè)結(jié)結(jié)果果；；（4））選選用用的的分分離離富富集集方方法法應(yīng)應(yīng)簡(jiǎn)簡(jiǎn)便便2、、常常用用的的預(yù)預(yù)處處理理方方法法（1））有有機(jī)機(jī)物物破破壞壞法法①干干灰灰化化法法將樣樣品品在在高高溫溫下下長(zhǎng)長(zhǎng)時(shí)時(shí)間間灼灼燒燒，，是是有有機(jī)機(jī)質(zhì)質(zhì)徹徹底底氧氧化化破破壞壞，，生生成成CO2和H2O逸逸出出，，而而與與有有機(jī)機(jī)質(zhì)質(zhì)結(jié)結(jié)合合的的金金屬屬部部分分則則變變成成簡(jiǎn)簡(jiǎn)單單的的無(wú)無(wú)機(jī)機(jī)化化合合物物。。灰化化溫溫度度:500℃℃~600℃灰化化時(shí)時(shí)間間:以以灰灰化化完完全全為為度度，，一一般般4~6h。。優(yōu)點(diǎn)點(diǎn)：破破壞壞徹徹底底，，簡(jiǎn)簡(jiǎn)便便易易行行、、消消耗耗藥藥品品少少。。缺點(diǎn)點(diǎn)：破破壞壞溫溫度度高高、、操操作作時(shí)時(shí)間間長(zhǎng)長(zhǎng)，，已已造造成成某某些些元元素素的的損損失失②濕濕消消化化法法向樣樣品品中中加加入入強(qiáng)強(qiáng)氧氧化化劑劑（（H2SO4、HNO3、、H2O2、、KMnO4）并并加加熱熱消消煮煮，，使使有有機(jī)機(jī)物物氧氧化化破破壞壞的的方方法法。。優(yōu)點(diǎn)點(diǎn)：加加熱熱溫溫度度低低，，減減少少了了低低沸沸點(diǎn)點(diǎn)元元素素?fù)]揮發(fā)發(fā)散散失失的的機(jī)機(jī)會(huì)會(huì)。。缺點(diǎn)點(diǎn)：產(chǎn)產(chǎn)生生大大量量酸酸霧霧和和刺刺激激性性氣氣體體，，對(duì)對(duì)人人體體有有害害注：：常常用用強(qiáng)強(qiáng)酸酸的的混混合合物物作作為為溶溶劑劑與與試試樣樣一一同同加加熱熱煮煮解解，，如如硝硝酸酸-硫硫酸酸，，硝硝酸酸-高高氯氯酸酸，，硝硝酸酸-高高氯氯酸酸-硫硫酸酸，，高高氯氯酸酸（（過(guò)過(guò)氧氧化化氫氫））-硫硫酸酸等等（2））溶溶劑劑提提取取法法利利用用混混合合物物中中各各物物質(zhì)質(zhì)溶溶解解度度的的不不同同，，將將混混合合物物組組分分完完全全或或部部分分分分離離的的方方法法稱稱為為溶溶劑劑提提取取法法。。浸提提法法用液液體體溶溶劑劑浸浸泡泡固固體體樣樣品品以以提提取取其其中中溶溶質(zhì)質(zhì)的的方法法。。要求求：提提取取劑劑既既能能溶溶解解被被測(cè)測(cè)物物質(zhì)質(zhì)，，又又不不破破壞壞被被提提取物物質(zhì)質(zhì)的的性性質(zhì)質(zhì)和和組組成成。。提取取劑劑：無(wú)機(jī)機(jī)溶溶劑劑：：水水，，稀稀酸酸，，稀稀堿堿有機(jī)機(jī)溶溶劑劑：：乙乙醇醇，，乙乙醚醚，，氯氯仿仿，，丙丙酮酮，，石石油油醚醚儀器器：索索氏氏抽抽提提器器萃取取法法：利利用用被被提提取取組組分分在在兩兩種種互互不不相相溶溶的的溶溶劑劑中中分分配配系系數(shù)數(shù)的的不不同同而而與與其其他他成成分分分分離離的的方方法法稱稱為為萃萃取取法法。。溶劑劑：選選用用的的溶溶劑劑應(yīng)應(yīng)與與溶溶液液中中原原溶溶劑劑互互不不相相溶溶，，且且對(duì)對(duì)被被測(cè)測(cè)物物質(zhì)質(zhì)有有最最大大的的溶溶解解度度，，而而對(duì)對(duì)雜雜質(zhì)質(zhì)有有最最小小的的溶溶解解度度。。儀器：分液漏漏斗，少少量多次次（4~5次））（3）揮揮發(fā)和蒸蒸餾分離離法揮揮發(fā)和和蒸餾是是利用物物質(zhì)的揮揮發(fā)性的的差異進(jìn)進(jìn)行分離離的一種種方法。?？梢杂糜糜诔トジ蓴_組組分，也也可以使使被測(cè)組組分定量量分離出出去后再再測(cè)定。。常壓蒸餾餾：適用于于被測(cè)組組分受熱熱不易分分解的或或沸點(diǎn)不不太高的樣品品。減壓蒸餾餾：用于常常壓蒸餾餾容易使使被測(cè)組組分分解解的或沸沸點(diǎn)太高的的樣品。。水蒸氣蒸蒸餾：用于被被測(cè)組分分加熱到到沸點(diǎn)時(shí)時(shí)可能分分解；或或被蒸餾組組分沸點(diǎn)點(diǎn)較高，，直接加加熱蒸餾餾時(shí)，因因受熱不均易易引起局局部炭化化的樣品品。（4）色色層分離離法（5）離離子交換換分離法法（6）沉沉淀分離離法（7）皂皂化法和和磺化法法：處理油脂脂或含脂脂食品常常用的分分離方法法（8）濃濃縮食食品品樣品經(jīng)經(jīng)提取、、凈化等等處理后后，有時(shí)時(shí)試液的的體積很很大、待待測(cè)組分分的濃度度很低，，因此在在測(cè)定前前須進(jìn)行行濃縮，，以提高高被測(cè)組組分的濃濃度。常壓濃縮縮法：主主要用于于待測(cè)組組分為非非揮發(fā)性性的樣品品溶液的濃縮縮。減壓濃縮縮法：主主要用于于待測(cè)組組分為對(duì)對(duì)熱不穩(wěn)穩(wěn)定或易易揮發(fā)的樣品品溶液的的濃縮。。1、樣品品采集后后應(yīng)于當(dāng)當(dāng)天分析析，以防防止其中中水分或或揮發(fā)性性物質(zhì)的的散失以以及待測(cè)測(cè)組分含含量的變變化。2、不能能使樣品品出現(xiàn)受受潮、揮揮發(fā)、風(fēng)風(fēng)干、變變質(zhì)等現(xiàn)現(xiàn)象，以以保證測(cè)測(cè)定結(jié)果果的準(zhǔn)確確性。3、制備備好的平平均樣品品應(yīng)裝在在潔凈、、密封的的容器內(nèi)內(nèi)，必要要時(shí)貯存存于避光光處，容容易失去去水分的的樣品應(yīng)應(yīng)先取樣樣測(cè)定水水分。第三節(jié)樣樣品的的保存4、容易易腐敗變變質(zhì)的樣樣品可用用以下方方法保存存：（1）冷冷藏短短期保存存溫度一一般以0℃~5℃℃為宜。。（2）干干藏根根據(jù)樣品品的種類類和要求求采用風(fēng)風(fēng)干、烘烘干、升升華干燥燥（冷凍凍干燥））等方法法。（3）罐罐藏不不能即時(shí)時(shí)處理的的鮮樣，，在允許許的情況況下可制制成罐頭頭貯藏。。5、一般般樣品在在檢驗(yàn)結(jié)結(jié)束后應(yīng)應(yīng)保留一一個(gè)月以以備需要要時(shí)復(fù)查查，保留留期從檢檢驗(yàn)報(bào)告告單簽發(fā)發(fā)之日起起開(kāi)始計(jì)計(jì)算；易易變質(zhì)食食品不予予保留。。保留樣樣品加封封存入適適當(dāng)?shù)牡氐胤?，并并盡可能能保持原原狀。要求：1、掌握握定性及及定量分分析實(shí)驗(yàn)驗(yàn)的基本本原理和和條件；；對(duì)簡(jiǎn)單單的實(shí)物物樣品會(huì)會(huì)選擇適適當(dāng)?shù)姆椒椒ú⒛苣塥?dú)立完完成分析析方案的的設(shè)計(jì)；；能獲得得可靠的的分析結(jié)結(jié)果。2、在實(shí)實(shí)驗(yàn)中能能根據(jù)準(zhǔn)準(zhǔn)確度的的要求，，正確地地選擇合合適精度度的儀器器，并能能做到該該精確就就精確，，該粗略略就粗略略，處理理得當(dāng)。。3、培養(yǎng)養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牡目茖W(xué)態(tài)態(tài)度和良良好的實(shí)實(shí)驗(yàn)工作作習(xí)慣。。從進(jìn)入入分析化化學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室開(kāi)始始，對(duì)公公用和個(gè)個(gè)人的儀儀器從擺擺放到使使用都要要求規(guī)范范化；實(shí)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象象和數(shù)據(jù)據(jù)的記錄錄要準(zhǔn)確確，要實(shí)實(shí)事求是是，要有有條理。。原始數(shù)據(jù)據(jù)必須記記在記錄錄本上，，不準(zhǔn)涂涂改。4、能正正確地表表示分析析結(jié)果及及處理有有關(guān)數(shù)據(jù)據(jù)第四節(jié)化化學(xué)分分析實(shí)驗(yàn)驗(yàn)技能及及其操作作規(guī)范一、化學(xué)學(xué)分析儀儀器的洗洗滌及洗洗液的配配制和使使用1、分析析儀器的的洗滌一般的玻玻璃儀器器先用自自來(lái)水沖沖洗，用用試管刷刷蘸洗滌滌劑刷洗洗。帶刻度的的容量器器皿，為為了保證證容積的的準(zhǔn)確性性，一般般不宜用用試管刷刷刷洗，，應(yīng)選用用適當(dāng)?shù)牡南匆簛?lái)來(lái)洗。2、洗液液的配制制和使用用（1）鉻鉻酸洗洗液：洗洗滌不宜宜用毛刷刷刷洗的的器皿，，可洗油油脂及還還原性污污垢配制方法法：10g工業(yè)業(yè)用K2Cr2O7固體于燒燒杯中，，假如30mL熱水，，溶解后后冷卻，，在攪拌拌下慢慢慢加入170mL濃H2SO4，溶液呈呈暗紅色色，貯存存于細(xì)口口玻璃瓶瓶中備用用。（2）NaOH-KMnO4洗液用用于洗滌滌油脂及及有機(jī)物物配制方法法：稱取取KMnO44g，，溶于少少量水中中，在攪攪拌下慢慢慢地加加入100mL10%NaOH溶液液即成。。（3）肥肥皂液、、堿液洗洗滌液用用于洗洗滌油脂脂和一些些有機(jī)物物。（4）還還原性洗洗滌液用用于洗洗滌氧化化性雜質(zhì)質(zhì)如草酸，鹽酸酸羥胺（5）HNO3洗滌液洗液是一種化化學(xué)處理方法法，要充分應(yīng)應(yīng)用已有的化化學(xué)知識(shí)來(lái)處處理實(shí)際問(wèn)題題。二、定性分析析實(shí)驗(yàn)技術(shù)1、定性分析析試劑、試液液的存放和取取用2、定性分析析主要儀器的的規(guī)格和使用用（1）離心試試管（2）點(diǎn)滴板板（3）表面皿皿（4）試劑瓶瓶（5）滴管（6）離心機(jī)機(jī)3、定性分析析實(shí)驗(yàn)技術(shù)（1）試劑的的取用（2）溶液酸酸堿性的檢查查及溶液酸化化處理（3）沉淀及及沉淀完全的的檢查（4）離心沉沉降（5）離心液液的轉(zhuǎn)移（6）沉淀的的洗滌（7）沉淀的的移取和溶解解（8）加熱和和蒸發(fā)（9）紙上點(diǎn)點(diǎn)滴反應(yīng)（10）氣體體的檢驗(yàn)（11）焰色色反應(yīng)三、分析天平平和稱量1、天平的使使用規(guī)則2、稱量（1）遞減稱稱量法（2）固定重重量稱量法電子天平（1）增量法法（2）減量法法四、重量分析析技術(shù)1、沉淀操作作2、沉淀的過(guò)過(guò)濾和洗滌3、坩堝的恒恒重4、沉淀的包包裹、烘干、、炭化和灼燒燒5、干燥器五、滴定分析析技術(shù)1、滴定管的的組裝、校正正和使用2、容量瓶的的相對(duì)校正和和使用3、移液管、、吸量管的使使用4、溶液的配配制和標(biāo)定六、固體樣品品或基準(zhǔn)試劑劑的干燥處理理一、簡(jiǎn)介：三聚氰胺（melamine）簡(jiǎn)稱稱三胺，學(xué)名名三氨三嗪，，別名蜜胺、、氰尿酰胺、、三聚酰胺。。三聚氰胺含含氮量為66.6％，折折合成粗蛋白白含量為416.27%，加入寵物物飼料和牛奶奶中可以大幅幅提高蛋白質(zhì)質(zhì)測(cè)定表觀含含量，但食用用后可誘發(fā)腎腎衰竭并導(dǎo)致致死亡，因此此一直禁止在在飼料和食品品中使用。2007年，，國(guó)內(nèi)外發(fā)生生多起寵物因因食用添加了了三聚氰胺的的寵物食品而而致死的例子子，大量相關(guān)關(guān)產(chǎn)品被召回回。2008年9月，國(guó)內(nèi)發(fā)發(fā)生奶粉中三三聚氰胺導(dǎo)致致嬰幼兒腎結(jié)結(jié)石和腎功能能衰竭甚至死死亡的惡性事事件。食品中三聚氰氰胺的測(cè)定方方法二、試劑甲醇：色譜純純。乙腈：色譜純純。氨水：濃度25%-28%.飽和乙酸鉛溶溶液氨水-甲醇溶溶液：量取5mL氨水，，溶解于100mL甲醇醇中。乙腈溶液：75mL乙腈腈加入25mL純水，混混勻。三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)品（純度＞＞99%）。。三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：稱稱取50mg（精確到0.1mg））的三聚氰胺胺標(biāo)準(zhǔn)品，用用乙腈溶液溶溶解并定容于于100mL容量瓶中，，該溶液濃度度為0.5mg/mL，，于4℃冰箱箱內(nèi)貯存，有有效期3個(gè)月月。三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)工作液：分分別吸取適量量標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液液，用乙腈溶溶液稀釋成濃濃度為0.05ug/mL、1.0ug/mL、5.0ug/mL、、10ug/mL、50ug/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作作液。三、樣品處理理:固體樣品取樣樣2g，液體體樣品取樣5g，準(zhǔn)確加加入9mL緩緩沖液溶液，，加入1mL乙酸鉛溶液液。搖勻，劇劇烈震蕩25min，10000r/min離離心5min，取上清液液。分別用3mL甲醇，，3mL水活活化混合型陽(yáng)陽(yáng)離子交換固固相萃取柱，，加入2mL（液體樣品品3mL）上上清液上柱。。依次用0.1mol/L鹽酸水溶溶液、3mL水和甲醇3mL洗柱，，抽近干后用用氨水-甲醇醇溶液3mL洗脫。洗脫脫液50℃氮氮?dú)獯蹈?，殘殘?jiān)?0％％乙腈溶解，，0.45um濾膜過(guò)濾濾，上機(jī)測(cè)定定。四、樣品分析條件件ShimadzuLC-MS-2010EV儀器（LC-20AD輸液泵，，SIL-20AC自動(dòng)動(dòng)進(jìn)樣器，CTO-20AC柱溫箱箱,LCMSsolution3.2工作作站軟件）。。色譜柱為CAPCELLPAKCR4.6×150mm5um；(Shiseido公司),流速1.5mL/min(約0.3mL/min進(jìn)質(zhì)譜)；；柱溫30℃；進(jìn)樣量量為10μL；等度洗脫脫。流動(dòng)相:乙乙睛/10mMNH4Ac(50:50)，HAc調(diào)節(jié)混合液液至pH=3質(zhì)譜參數(shù):ESI(＋＋)，Nebulizinggas:1.5L/min;Dryinggas:0.1MPa;CDLTemp：250℃;BlockHeater：200℃;DetectorVoltage:1.6kV五、測(cè)定1、掃描方式式結(jié)果Fig.1標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品品色譜圖2、標(biāo)準(zhǔn)曲線線配制標(biāo)準(zhǔn)溶液液0.1ppm，0.5ppm，，1ppm，，5ppm，，10ppm，50ppm分別進(jìn)樣樣，得到校準(zhǔn)準(zhǔn)曲線如圖所所示。選擇性性離子監(jiān)測(cè)方方式(SIM)檢測(cè)m/z127Y=410,165.3X+261,083.0相關(guān)系數(shù)為0.9996，線性度良良好。檢出限限為50ppbFig.2標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)曲線Fig.3奶奶粉粉樣品1、插入密度度計(jì)：將相對(duì)對(duì)密度計(jì)洗凈凈擦干，緩緩緩放入盛有待待測(cè)液體試樣樣的適當(dāng)量筒筒中，勿使碰碰及容器四周周及底部，保保持試樣溫度度在20℃，，靜置。2、測(cè)量：待待其靜置后，，再輕輕按下下少許，然后后待其自然上上升，靜置并并無(wú)氣泡后，，從水平位置置觀察與液面面相交處的刻刻度，即為試試樣的相對(duì)密密度?！咀⒁馐马?xiàng)項(xiàng)】密度計(jì)內(nèi)不不能有氣泡泡。食品密度測(cè)測(cè)定方法——相對(duì)密度計(jì)計(jì)法一、原理總酸度是指指飲料中所所有酸性成成分的總量量，以酚酞酞作指示劑劑，用標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)堿溶液滴滴定至微紅紅色為終點(diǎn)點(diǎn)，由消耗耗標(biāo)準(zhǔn)堿液液的量就可可以求出樣樣品中酸的的百分含量量。二、分析步步驟取10-20g(或10-20mL)果汁汁于錐形瓶瓶中，加入入100mL新煮沸沸冷卻的蒸蒸餾水，加加入3-4滴酚酞指指示劑，用用0.1mol/LNaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液液滴定至微微紅色在30s內(nèi)不不褪色為終終點(diǎn)。三、結(jié)果計(jì)計(jì)算果汁飲料中中總酸度的的測(cè)定一、原理樣品除去蛋蛋白質(zhì)后，，以亞甲藍(lán)藍(lán)為指示劑劑，用樣液液直接滴定定標(biāo)定過(guò)的的費(fèi)林試液液，達(dá)到終終點(diǎn)時(shí)，稍稍微過(guò)量的的還原糖即即可將藍(lán)色色的亞甲藍(lán)藍(lán)指示劑還還原成無(wú)色色，而顯出出氧化亞銅銅的鮮紅色色。二、試劑1、費(fèi)林甲甲液：稱取取34.639gCuSO4·5H2O，加適量量水溶解，，加0.5ml硫酸酸，用水稀稀釋至500mL,用精制石石棉過(guò)濾2、費(fèi)林乙乙液：稱取取173g酒石酸鉀鉀鈉和50gNaOH于適量量水中溶解解，用水稀稀釋至500mL,用精制石石棉過(guò)濾食品中還原原糖的測(cè)定定3、精制石石棉：石棉棉先用3mol/LHCl浸浸泡2-3d，用水水洗凈，再再用100g/LNaOH溶溶液浸泡2-3d，，傾去溶液液，再用熱熱的費(fèi)林乙乙液浸泡數(shù)數(shù)小時(shí)，用用水洗凈。。再以鹽酸酸浸泡數(shù)小小時(shí)，以水水洗至不呈呈酸性。然然后加水振振搖，使成成細(xì)微的漿漿狀軟纖維維，用水浸浸泡并貯存存于玻璃瓶瓶中。4、次甲基基藍(lán)指示劑劑：10g/L水溶溶液5、標(biāo)準(zhǔn)葡葡萄糖溶液液：準(zhǔn)確稱稱取經(jīng)105℃干燥燥過(guò)的葡萄萄糖0.5g，置于于小燒杯中中，加水溶溶解后，轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)入100mL容量量瓶中，用用水稀釋至至刻度。6、醋酸鋅鋅溶液：0.1mol/L亞鐵氰化鉀鉀溶液：0.025mol/L三、樣品處處理1、乳及乳乳制品準(zhǔn)準(zhǔn)確稱取2.50g～5.00g固體試樣樣（吸取25.00mL～～50.00mL液體試試樣），置置于250mL容容量瓶中，，加入50mL水水，搖勻后后慢慢加入入5mL乙酸鋅溶溶液及5mL亞鐵鐵氰化鉀溶溶液，加水水至刻度，，混勻，沉沉淀，靜置置30分鐘鐘，用干燥燥濾紙過(guò)濾濾，棄去初初濾液，濾濾液備用。。2、汽水等等含二氧化化碳的飲料料吸吸取樣品品100.0mL置于蒸發(fā)發(fā)皿中，在在水浴上除除去CO2后，移入250mL容量瓶瓶中，用水水洗滌蒸發(fā)發(fā)皿，洗液液并入容量量瓶中。加加水至刻度度，混勻后后備用。四、測(cè)定1、標(biāo)定費(fèi)費(fèi)林試液吸取費(fèi)林甲甲液、費(fèi)林林乙液各5.0mL，置于150mL錐形瓶瓶中，加水水10mL，加入入玻璃珠2粒，從滴滴定管加入入標(biāo)準(zhǔn)葡萄萄糖溶液約約9.5mL，用電電爐加熱，，控制在2min內(nèi)內(nèi)沸騰，加加亞甲藍(lán)指指示劑2-3d，趁趁沸以每?jī)蓛擅?滴的的速度繼續(xù)續(xù)滴定，直直至藍(lán)色剛剛好褪去為為終點(diǎn)，記記錄消耗標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖糖溶液體積積。2、粗滴定定吸取費(fèi)林甲甲液、費(fèi)林林乙液各5.0mL，置置于150mL錐錐形瓶中，，加水10mL，，加入玻璃璃珠2粒，，控制在2min內(nèi)內(nèi)沸騰，趁趁沸以先快快后慢的速速度從滴定定管中滴加加試樣溶液液，待顏色色變淺時(shí)，，加亞甲藍(lán)藍(lán)指示劑2-3d，，趁沸繼續(xù)續(xù)以每?jī)擅朊?滴的速速度滴定，，直至藍(lán)色色剛好褪去去為終點(diǎn)，，記錄樣液液消耗體積積。3、精密滴滴定吸取費(fèi)林甲甲液、費(fèi)林林乙液各5.0mL，置置于150mL錐錐形瓶中，，加水10mL，，加入玻璃璃珠2粒，，從滴定管管加入比粗粗滴定約少少0.5-1mL的的樣品溶液液，加熱使使之在2min內(nèi)沸沸騰，并維維持沸騰2min。。加亞甲藍(lán)藍(lán)指示劑2-3d，，趁沸以每每?jī)擅?滴滴的速度滴滴定，直至至藍(lán)色剛好好褪去為終終點(diǎn)，記錄錄樣液消耗耗體積。X——試試樣中還原原糖的含量量；單位為為克每百克克（g/100g））；A——堿堿性酒石酸酸銅溶液（（甲、乙液液各半）相相當(dāng)于某種種還原糖的的質(zhì)量，單單位為毫克克（mg））；m——試試樣的質(zhì)量量，單位為為克（g））；V——測(cè)測(cè)定時(shí)平均均消耗試樣樣溶液體積積，單位為為毫升（mL）。五、計(jì)算食品中總糖糖的測(cè)定———蒽酮比比色法一、目的：1.掌握蒽蒽酮法測(cè)定定可溶性糖糖含量的原原理和方法法。2.學(xué)習(xí)植植物可溶性性糖的一種種提取方法法。二、原理：糖類在較高高溫度下可可被濃硫酸酸作用而脫脫水生成糠糠醛或羥甲甲基糖醛后后，與蒽酮酮(C14H10O)脫水縮縮合，形成成糠醛的衍衍生物，呈呈藍(lán)綠色。。該物質(zhì)在在620nm處有有最大吸收收，在150μμg/ml范圍內(nèi)內(nèi)，其顏色色的深淺與與可溶性糖糖含量成正正比。這一方法有有很高的靈靈敏度，糖糖含量在30μg左右就能能進(jìn)行測(cè)定定，所以可可做為微量量測(cè)糖之用用。一般樣樣品少的情情況下，采采用這一方方法比較合合適。三、儀器、試劑劑和材料1.儀器：：電熱恒溫溫水浴鍋，，分光光度度計(jì)，電子子天平，容容量瓶，刻刻度吸管等等2.試劑：：(1)葡萄萄糖標(biāo)準(zhǔn)液液：l00μg/ml(2)濃硫硫酸(3)蒽酮酮試劑：0.2g蒽酮溶于于100ml濃H2SO4中。當(dāng)日配制使使用。3.材料：：甜糜秸稈稈，雪碧四、操作步驟1.葡萄糖糖標(biāo)準(zhǔn)曲線線的制作取7支大試試管，按下下表數(shù)據(jù)配配制一系列列不同濃度度的葡萄糖糖溶液管號(hào)1234567葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液（ml）00.10.20.30.40.60.8蒸餾水（ml）10.90.80.70.60.40.2葡萄糖含量（μg）0102030406080在每支試管管中立即加加入蒽酮試試劑4.0m1，迅迅速浸于冰冰水浴中冷冷卻，各管管加完后一一起浸于沸沸水浴中，，管口加蓋蓋，以防蒸蒸發(fā)。自水水浴重新煮煮沸起，準(zhǔn)準(zhǔn)確煮沸l(wèi)0min取出，，用冰浴冷冷卻至室溫溫，在620nm波長(zhǎng)下以以第一管為為空白，迅迅速測(cè)其余余各管吸光光值。以標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖糖含量（μμg）為橫橫坐標(biāo)，以以吸光值為為縱坐標(biāo)，，作出標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)曲線。2.植植物物樣樣品品中中可可溶溶性性糖糖的的提提取取：：將樣樣品品剪剪碎碎至至2mm以以下下，，105ooC烘烘干干至至恒恒重重，，精精確確稱稱取取1~5g，，置置于于50mL三三角角瓶瓶中中，，加加沸沸水水25mL，，加加蓋蓋，，超超聲聲提提取取10min，，冷冷卻卻后后過(guò)過(guò)濾濾（（抽抽濾濾）），，殘殘?jiān)糜梅蟹姓粽麴s餾水水反反復(fù)復(fù)洗洗滌滌并并過(guò)過(guò)濾濾（（抽抽濾濾）），，濾濾液液收收集集在在50mL容容量量瓶瓶中中，，定定容容至至刻刻度度，，得得提提取取液液。。3.稀稀釋釋：：吸取取提提取取液液2mL，，置置于于另另一一50mL容容量量瓶瓶中中，，以以蒸蒸餾餾水水稀稀釋釋定定容容，，搖搖勻勻。。4.測(cè)測(cè)定定吸取取1mL已已稀稀釋釋的的提提取取液液于于試試管管中中，，加加入入4.0mL蒽蒽酮酮試試劑劑，，平平行行三三份份；；空空白白管管以以等等量量蒸蒸餾餾水水取取代代提提取取液液。。以以下下操操作作同同標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)曲曲線線制制作作。。根根據(jù)據(jù)A620平均均值值在在標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)曲曲線線上上查查出出葡葡萄萄糖糖的的含含量量（（μμg））。。C————在在標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)曲曲線線上上查查出出的的糖糖含含量量（（μμg））V總總————提提取取液液總總體體積積（（mL））V測(cè)測(cè)————測(cè)測(cè)定定時(shí)時(shí)取取用用體體積積（（mL））D————稀稀釋釋倍倍數(shù)數(shù)W————樣樣品品重重量量（（g））106———樣樣品品重重量量單單位位由由g換換算算成成μμg的的倍倍數(shù)數(shù)五、、結(jié)果果處處理理六、、注意意事事項(xiàng)項(xiàng)：該法法的的特特點(diǎn)點(diǎn)是是幾幾乎乎可可測(cè)測(cè)定定所所有有的的碳碳水水化化合合物物，，不不但但可可測(cè)測(cè)定定戊戊糖糖與與已已糖糖，，且且可可測(cè)測(cè)所所有有寡寡糖糖類類和和多多糖糖類類，，包包括括淀淀粉粉、、纖纖維維