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會計(jì)學(xué)1布洛芬在體內(nèi)的分布改進(jìn)課前準(zhǔn)備取小鼠2只,稱重,編號。2號用20%布洛芬灌胃0.1ml/10g。3號用20%布洛芬灌胃0.1ml/10g。計(jì)時第1頁/共13頁實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆諟y定藥物分布的方法和臨床意義。了解藥物在體內(nèi)的分布動力學(xué)規(guī)律。第2頁/共13頁相關(guān)知識——藥物分布藥物分布的概念:藥物從血液向組織、細(xì)胞間液和細(xì)胞內(nèi)液轉(zhuǎn)運(yùn)的過程。藥物分布影響因素:血漿蛋白結(jié)合率器官血流量組織細(xì)胞結(jié)合體液pH和藥物解離度體內(nèi)屏障血腦屏障、胎盤屏障和血眼屏障第3頁/共13頁小鼠灌胃給予同等劑量的布洛芬溶液后,在不同時間點(diǎn)測量血液、腦、腎、肝中布洛芬的濃度,繪出不同時點(diǎn)的布洛芬的組織分布圖。測量血液、肝中布洛芬濃度采用比色法。實(shí)驗(yàn)原理第4頁/共13頁實(shí)驗(yàn)步驟1標(biāo)準(zhǔn)管的制備:0.00125%布洛芬溶液第5頁/共13頁取小鼠3只(已禁食12h),稱重,編號。1號用生理鹽水灌胃0.1ml/10g,立即斷頭取血搖勻。2號用20%布洛芬灌胃0.1ml/10g,30min斷頭取血搖勻。3號用20%布洛芬灌胃0.1ml/10g,60min斷頭取血搖勻。取離心管3支編號,分別于1管(對照)、2管(給藥30min)和3管(給藥60min)內(nèi)加肝素0.1ml,斷頭取血,立即搖勻。分別從3支管中取抗凝血各0.5ml加入已預(yù)加無水乙醇4.5ml試管中,搖勻。稱取各小鼠300mg肝組織,分別置于研磨器中,加無水乙醇(0.4ml/100mg)研碎后再加入無水乙醇(0.5ml/100mg)搖勻,制成勻漿后全部傾入試管中。實(shí)驗(yàn)步驟2第6頁/共13頁實(shí)驗(yàn)步驟3編號采樣時間離心管內(nèi)容物1-1立即取血0.5ml+無水乙醇4.5ml1-2立即取肝300mg+無水乙醇(0.9ml/100mg)2-130min后血0.5ml+無水乙醇4.5ml2-230min后肝300mg+無水乙醇(0.9ml/100mg)3-160min后血0.5ml+無水乙醇4.5ml3-260min后肝300mg+無水乙醇(0.9ml/100mg)第7頁/共13頁實(shí)驗(yàn)步驟4將對照鼠和各給藥鼠的血及組織勻漿離心5min(3500轉(zhuǎn)/分),分別取上清液3.0ml放入比色杯中(稀釋)如果液體太濃,可用蒸餾水按比例稀釋,得到的光密度值乘以稀釋倍數(shù)即實(shí)際光密度值。第8頁/共13頁實(shí)驗(yàn)步驟5用分光光度計(jì)在222nm波長下以對照鼠樣品管作空白管,測定各用藥樣品管的光密度值,代入到公式換算出血藥濃度(μg/ml)和組織藥物濃度(μg/g)。
血藥濃度(μg/ml)=樣品管濃度×稀釋倍數(shù)(10)組織內(nèi)濃度(μg/g)=樣品管濃度×稀釋倍數(shù)(10)第9頁/共13頁實(shí)驗(yàn)后處理利用計(jì)算機(jī)繪制給藥后血液和肝臟組織中的藥物分布圖。第10頁/共13頁注意事項(xiàng)取血:每次的取血量要準(zhǔn)確血樣加至無水乙醇試管應(yīng)該立即搖勻勻漿:勻漿器上的數(shù)字應(yīng)對應(yīng)組織勻漿后應(yīng)立即離心勻漿器應(yīng)清洗干凈離心:離心前一定要用水配平,離心管不要弄混離心后將轉(zhuǎn)速和時間歸零
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