麻醉學(xué)研究生開題報(bào)告

精品精品精品精品大連大學(xué)研究生學(xué)位論文開題報(bào)告學(xué) 號(hào)：姓 名：導(dǎo)師姓名研究方向： 羥考酮的藥效學(xué)與藥代動(dòng)力學(xué)論文題目：羥考酮對(duì)小鼠全腦缺院（系）：入學(xué)時(shí)間：開題時(shí)間：

血再灌注損傷干預(yù)效果的影響麻醉學(xué)系2007年 9月 5日2008年 11月5日二○〇八年十一月五日學(xué)位論文開題報(bào)告評(píng)審表姓 名 導(dǎo)師姓名專 業(yè) 麻醉學(xué) 所屬院（系類 別 □博士 √□碩士 □碩博連讀

第一次開題麻醉學(xué)系論 題目名稱基礎(chǔ)理論研究（）應(yīng)用性研究（√）開發(fā)性研究（）基礎(chǔ)理論研究（）應(yīng)用性研究（√）開發(fā)性研究（）國(guó)家項(xiàng)目（自選項(xiàng)目（）√）合作項(xiàng)目（ 其它項(xiàng)目：?。ú浚╉?xiàng)目（）選題 類別（√）

不同時(shí)間甘露醇脫水對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷干預(yù)效果的影響姓名職稱工作單位及職務(wù)簽字組長(zhǎng)評(píng)審組成員總成績(jī)票同意票不同意綜合分均分：（含：選題意義；實(shí)驗(yàn)條件；技術(shù)方案可行性；研究計(jì)劃合理性等）評(píng)審意見評(píng)審組長(zhǎng)簽字： 年 月 日注：一半以上不同意或評(píng)價(jià)綜合分低于C+（70分）者，必須重新開題一、立論依據(jù)（包括研究意義、國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀分析，并附主要參考文獻(xiàn)及出處）（一） 研究意義臨床麻醉中各種原因引起圍術(shù)期的心肺功能受損，如心跳驟停、急性呼吸道梗阻等，都會(huì)不同程度的存在腦缺血再灌注損傷。麻醉期間意外發(fā)生率為5.2～44.3/萬，猝死率為2.8～7.0/萬[1]。急救過程中，腦復(fù)蘇環(huán)節(jié)是保證遠(yuǎn)期復(fù)蘇效果的關(guān)鍵?，F(xiàn)階段大多數(shù)對(duì)腦缺血再灌注損傷干預(yù)措施的研究集中于缺血再灌注損傷發(fā)生前的預(yù)處理，報(bào)道對(duì)腦缺血再灌注損傷有預(yù)防作用的涉及地氟烷[2]、異氟烷[3]、異丙酚[4]、氯胺酮[5]等等眾多臨床常用藥物。由于臨床意外難以預(yù)見，及在腦缺血再灌注后死亡細(xì)胞和凋亡細(xì)胞的不可逆性，預(yù)處理的思路常常無助于臨床意外中對(duì)腦損傷的治療。我們認(rèn)為改善缺血再灌注后腦的功能，應(yīng)該積極關(guān)注腦缺血再灌注后的變性神經(jīng)元，建立穩(wěn)定，可靠，適用于對(duì)腦缺血再灌注損傷后變性神經(jīng)元救治實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物模型具有探索價(jià)值。羥考酮主要作用部位是中樞神經(jīng)系統(tǒng),其次是平滑肌,其藥理作用主要是鎮(zhèn)痛,其他還包括鎮(zhèn)咳、縮瞳、惡心、嘔吐、瘙癢、呼吸抑制、胃腸蠕動(dòng)降低等。研究認(rèn)為羥考酮的鎮(zhèn)痛作用可能與μ、κ受體有關(guān),盡管其精確作用機(jī)制現(xiàn)在還不明確,但現(xiàn)已確定羥考酮產(chǎn)生呼吸抑制是通過直接作于腦干呼吸中心,其鎮(zhèn)咳是通過直接作用于髓鞘咳嗽中心而起作用。羥考酮精神依賴性的形成與紋狀體多巴胺釋放量增加有關(guān)。（二）國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀腦缺血再灌注損傷的機(jī)制ATP此時(shí)神經(jīng)元以無氧酵解的方式可提供少量ATPPH的影響，因而神經(jīng)元的功能遭到破壞。例如能量障礙引起毒使谷氨酸攝取受阻，突觸隙內(nèi)有谷氨酸堆積，通過大量激活其NMDA受體，致Ca2+內(nèi)流增加，胞內(nèi)鈣超載，但此時(shí)依賴能量的離子泵Ca2+受損，無法將Ca2+排出胞外，細(xì)胞內(nèi)過量的引發(fā)一系列生化反應(yīng)，如自由基及過氧化物生成，細(xì)胞因子釋放及炎癥反應(yīng)等，最終造成對(duì)神經(jīng)元的損害，但其[6]目前關(guān)注的腦保護(hù)的方法有：（1）低溫[7]；麻醉藥物的應(yīng)用（包括吸入麻醉藥、靜脈麻醉藥及某些局麻藥血液稀釋；[9]；[10]；[11]羥考酮與腦缺血再灌注損傷正常時(shí)海馬結(jié)構(gòu)包括：連合前海馬、灰被、束狀回、海馬、齒狀回以及下托。海馬可分為四個(gè)區(qū)：CA1:海馬水平部的背內(nèi)側(cè)部分和垂直部的后內(nèi)側(cè)部分；CA2：海馬水平部的背外側(cè)部分和垂直部的前外側(cè)部分；CA3：海馬CA4：冠以齒狀回的部分，即齒狀回的多形細(xì)胞層。從海馬的腦室面向海馬溝觀察，可見下列層次：室管膜層、槽層、多行細(xì)胞層、椎體細(xì)胞層、輻狀層、腔隙層和分子層；再向外則是齒狀回的分子層、顆粒層和多行細(xì)胞層。正常海馬CA1區(qū)2-3層錐體細(xì)，長(zhǎng)徑[12]。國(guó)內(nèi)有報(bào)道沙土鼠缺血再灌注后CA1區(qū)多數(shù)神經(jīng)元變形壞死，表現(xiàn)細(xì)胞腫脹，胞漿內(nèi)形成空泡，核呈不規(guī)則固縮，深染等，甘露醇治療組僅有個(gè)別神經(jīng)元變性壞死。可見從形態(tài)學(xué)角度說明甘露醇有神經(jīng)元保護(hù)作用。但這方面小鼠的實(shí)驗(yàn)報(bào)道不多。目前常見的全腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ停海ㄍ瑫r(shí)阻斷雙側(cè)頸總動(dòng)脈和基底動(dòng)脈（同時(shí)阻斷雙側(cè)頸總動(dòng)脈和基底動(dòng)脈（同時(shí)阻斷雙側(cè)的頸總動(dòng)脈和椎動(dòng)脈三動(dòng)脈阻斷法和四動(dòng)脈阻斷法的缺血程度較雙動(dòng)脈阻斷法為重或和梗死灶重疊，不能形成較好的觀察區(qū)域。雙動(dòng)脈阻斷法建立小鼠全腦缺血再灌注損傷模型10min22.3%[16],接近大多數(shù)臨床意外時(shí)腦缺血的情況，且對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成的應(yīng)激性生理及病理反射較小[17]。實(shí)驗(yàn)觀察了昆明小鼠雙頸總動(dòng)脈阻斷30～120min再灌注24h后的腦缺血CA1區(qū)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，認(rèn)為昆明小鼠缺血60min再灌注24h造成的損傷程度適中，不同程度的受損細(xì)胞比例均衡，可作為以變性神經(jīng)元為觀察對(duì)象，在腦缺血后實(shí)施干預(yù)的腦缺血再灌注損傷重復(fù)性好的特點(diǎn)。在此實(shí)驗(yàn)動(dòng)物平臺(tái)上分別成功的進(jìn)行了腦缺血再灌注損傷后納洛酮和皮質(zhì)激素干預(yù)效果的觀察和評(píng)價(jià)。同時(shí)間甘露醇脫水治療的效果評(píng)價(jià)和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物觀察?！局饕獏⒖嘉墨I(xiàn)】[1]王玉明，李小平，李江明.麻醉與猝死.北京軍區(qū)醫(yī)藥[J].1999,11(5):365-368可能性保護(hù)作用.中國(guó)臨床康復(fù)[J].2005,9(14):215進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào)[J].2005,26(5):392-394子-1κB表達(dá)的影響.中華麻醉學(xué)雜志[J].2005,25(2):122-125醫(yī)藥雜志[J].2003,29(10):741-742．彭靜，鄢建勤.烏司他丁與腦保護(hù)，2007麻醉學(xué)新進(jìn)展，2007：46~47包正夫,徐 蔚.低溫腦保護(hù)技術(shù)的現(xiàn)狀與進(jìn)展[J].昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2007,24(1)107~109陳伯蠻李德馨.麻醉藥對(duì)腦功能和腦代謝的影響和腦保護(hù)[J].《國(guó)外醫(yī)學(xué)》麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè)，2003，24(1)：1~2保護(hù)作用的機(jī)制研究[J，2004，8（4：658~659甘國(guó)勝,王焱林.藥物預(yù)處理在顱腦手術(shù)圍術(shù)期的腦保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J誤診學(xué)雜志,2006,6(8):1443~1445王 瑜.中藥治療腦缺血及對(duì)腦保護(hù)作用的研究[J].中醫(yī)藥學(xué)刊，2002，20王平宇，朱治遠(yuǎn)，等．大白鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)解剖學(xué)基礎(chǔ)．2003：34~39EklofB,SiesjoBK.Theeffectofbilateralcarotidarteryligationuponthebloodflowandtheenergystateoftheratbrain[J].ActaPhysiolScand,1972,86:155~165.KameyamaM,SuzukiJ,ShiraneR,etal.Anewmodelofbilateralhemisphericischemiaintheratthreevesselocclusionmodel[J].Stroke,1985,16:489~493.PulsinelliWA,BrierleyJB.Anewmodelofbilateralhemisphericischemiaintheunanesthetized[J].Stroke,1979,10:267~272.盧曉梅,金玉梅.燈盞花素對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷的影響 [J].錦州醫(yī)學(xué)院報(bào),2006,27(1):44-46賈棟，高國(guó)棟.大鼠全腦缺血/再灌注模型之比較研究.卒中與神經(jīng)疾病[J].1999,6(3):145-148二、研究方案（一）研究目標(biāo)、研究?jī)?nèi)容和擬解決的關(guān)鍵問題研究目標(biāo)探索不同時(shí)間羥考酮處理對(duì)小鼠全腦缺血再灌注損傷干預(yù)效果的影響。研究?jī)?nèi)容光鏡下觀察正常小鼠海馬CA1光鏡下觀察不同處理組小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的病理形態(tài)學(xué)變化光鏡下觀察不同時(shí)間甘露醇干預(yù)后的小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的病理形態(tài)學(xué)變化擬解決的關(guān)鍵問題按照郗東峰同學(xué)的方法建立小鼠腦缺血再灌注損傷模型。準(zhǔn)確完成不同時(shí)間的甘露醇干預(yù)完整取腦，正確選取觀察部位的腦組織。客觀描述病理形態(tài)學(xué)標(biāo)本所見準(zhǔn)確統(tǒng)計(jì)病理形態(tài)學(xué)指標(biāo)適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)處理，導(dǎo)出實(shí)驗(yàn)結(jié)論（二）擬采取的研究方法、技術(shù)路線、實(shí)驗(yàn)方案及可行性分析研究方法健康昆明小鼠42只，隨機(jī)分為對(duì)照組、假手術(shù)組、缺血再灌注損傷組和羥考酮干預(yù)組。按照結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈法制備小鼠腦缺血再灌注損傷模型。進(jìn)行腦組織海馬CA1區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞計(jì)數(shù)，光鏡觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元病理形態(tài)學(xué)的改變，并計(jì)算變性細(xì)胞率。技術(shù)路線取腦組織固對(duì)照組(n=6)定、石蠟包健康昆明小鼠42只假手術(shù)組(n=6)缺血再灌注損傷組(n=6)再灌注即刻羥考酮干預(yù)組(n=6)再灌注30min羥考酮干預(yù)組再灌注1h羥考酮干預(yù)組(n=6)埋切片再灌注24h后取腦組織固定、石蠟HE染色光鏡細(xì)胞計(jì)形態(tài)學(xué)觀察數(shù)據(jù)處理、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析、得出結(jié)論包埋再灌注1.5h羥考酮干預(yù)組(n=6)切片3實(shí)驗(yàn)方案實(shí)驗(yàn)分組：健康昆明小鼠42只（山西省腫瘤醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，雌雄不分，體重20±2克左右，隨機(jī)分為對(duì)照組An=、假手術(shù)組Bn=、（C（D1、再灌注30min羥考酮干預(yù)組、再灌注1hn=和再灌注1.5h羥考酮干預(yù)組D4n=D組給予羥考酮1g/kg腹腔注射。動(dòng)物模型制備：手術(shù)在室溫25℃50%0.6%的戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉60mg/k，絡(luò)合碘消毒，鋪單，行頸部正中切口，分離兩側(cè)頸總動(dòng)脈，用3-0后實(shí)現(xiàn)再灌注?？p合切口，置清潔飼養(yǎng)籠中觀察。A組既不手術(shù)也不給藥。B但不結(jié)扎。C組分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈，結(jié)扎1h后再灌注，但不給藥。D1、D2、D3、D430min1h和1.5h腹腔注射甘露醇1g/kg24h后0.6%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，迅速取腦。檢查指標(biāo)和方法標(biāo)本置于4%多聚甲醛液中固定24h包埋，冠狀切片，片厚μmHE染色，光鏡下在有測(cè)微尺顯微鏡下（×10）計(jì)數(shù)海馬CA1區(qū)2mm范圍內(nèi)核完整的存活細(xì)胞數(shù)（CA1區(qū)始點(diǎn)起，并觀察海馬CA1區(qū)細(xì)胞形態(tài)變化，并計(jì)算變性細(xì)胞率。統(tǒng)計(jì)分析：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（xs）表示，采用單因素方差分析，組間進(jìn)行多重比較，各組變性細(xì)胞率用X2檢驗(yàn)比較，SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件分析，P＜0.05認(rèn)為有顯著性差異。4.可行性分析：（1）2005級(jí)研究生吳曉陽已經(jīng)建立了穩(wěn)定的小鼠全腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ汀?006級(jí)研究生田彥鵬在此實(shí)驗(yàn)動(dòng)物平臺(tái)上分別成功的進(jìn)行了腦缺血再灌注損傷后納洛酮和皮質(zhì)激素干預(yù)效果的觀察和評(píng)價(jià)。本實(shí)驗(yàn)參考大量相關(guān)文獻(xiàn)。實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)已落實(shí)。（三）本課題的創(chuàng)新之處國(guó)內(nèi)多數(shù)報(bào)道的是腦缺血再灌注損傷前的藥物干預(yù)，以梗死和凋醇干預(yù)，以變性細(xì)胞為觀察指標(biāo)。合適的時(shí)間，從而為臨床心肺腦復(fù)蘇提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。（四）研究計(jì)劃及預(yù)測(cè)進(jìn)展2015年7月——2015年11月 文獻(xiàn)檢索及撰寫綜述2015年12月——2016年2月 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備、預(yù)實(shí)驗(yàn)2016年3月——2017年6月 實(shí)驗(yàn)階段2017年7月——2017年9月 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理、論文撰寫（五）.預(yù)期研究成果（2）預(yù)期提交學(xué)術(shù)論文1-2篇。三、研究基礎(chǔ)與本課題有關(guān)的，前期研究工作積累和已取得的研究工作成績(jī)已閱讀大量國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，并撰寫了有關(guān)綜述?；菊莆諏?shí)驗(yàn)所需的各項(xiàng)操作技能及各項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)量方法。前期的研究工作是成功建立了兩動(dòng)脈阻斷法小鼠前腦缺血再灌注損傷模型，該方法簡(jiǎn)單易行，成功率高，并用羥考酮、納洛酮和皮質(zhì)激素干預(yù)的效果證實(shí)了此實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的有效性。已具備的實(shí)驗(yàn)條件，尚缺少的實(shí)驗(yàn)條件和擬解決的途徑（重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和部門開放實(shí)驗(yàn)室的計(jì)劃與落實(shí)情況）學(xué)術(shù)條件圖書館可獲得大量文獻(xiàn)資料。統(tǒng)計(jì)學(xué)、及其他教研室的老師可以給予指導(dǎo)。設(shè)備和實(shí)驗(yàn)條件大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心可提供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備。精品精品精品精品研究生開題報(bào)告評(píng)分表姓 名 郭文義 學(xué) 號(hào) Sc2007122 導(dǎo)師姓名 趙嘉訓(xùn)院（系） 麻醉學(xué)系 教研室 麻醉 第一次開論文題目 不同時(shí)間甘露醇脫水對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷干預(yù)效果的影響評(píng)價(jià)內(nèi)容 評(píng)價(jià)參考研究意義 有重要科學(xué)意義或國(guó)民經(jīng)濟(jì)建設(shè)中的重要科技問題10有重要科學(xué)意義或國(guó)民經(jīng)濟(jì)建設(shè)中的重要科技問題10對(duì)學(xué)科發(fā)展有促進(jìn)或有應(yīng)用前景8屬一般問題4科學(xué)意義或應(yīng)用前景不大2有明顯的創(chuàng)新15有一定的創(chuàng)新和特色12創(chuàng)新性不強(qiáng)6無創(chuàng)新2充分，科學(xué)性強(qiáng)15

打分標(biāo)準(zhǔn)

參考分?jǐn)?shù)學(xué)術(shù)思想 立 論 依立項(xiàng)依據(jù)據(jù)（博士生可附查新報(bào)告）對(duì)國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀分析研究?jī)?nèi)容和擬解決的關(guān)鍵問題研 擬采用的研究 究方法與技方 術(shù)路線（實(shí)案 驗(yàn)方案）研究的預(yù)目標(biāo)研 與本研究有究 關(guān)的研究工基 作積累和實(shí)礎(chǔ) 驗(yàn)條件答 對(duì)問題的理辯