抑膠素對大鼠腦膠質瘤增殖細胞核抗原表達的影響

DOC格式論文，方便您的復制修改刪減DOC格式論文，方便您的復制修改刪減抑膠素對大鼠腦膠質瘤增殖細胞核抗原表達的影響（作者: 單: 郵: ）作者：姜慧軼林衛(wèi)紅馬滌輝劉仕成崔俐方法采用鼠腦立體定向的方法建立大鼠腦膠質瘤動物模型并進行分組：抑膠素不同濃度實驗組(Ⅰ：8μ;Ⅱ：6μ;Ⅲ：2μμg/kg14d(PCNA)的表達，觀察瘤細胞增殖變化情C6腦膠質瘤細胞有顯著抑制作用，(P0.05，P0.01);抑膠PCNAPCNA照組相比較有統(tǒng)計學差異(P0.05，P0.01)。結論抑膠素能夠抑制大鼠腦膠質瘤體內生長。其機制之一可能與膠質瘤內PCNA表達，使腫瘤細胞增殖水平下降有關。【關鍵詞】抑膠素;腦膠質瘤;增殖細胞核抗原神經(jīng)膠質瘤是發(fā)生于神經(jīng)外胚層的腫瘤，是顱內腫瘤中最常見的一(antigliomatin)作為一種特異性氯離子通道阻滯劑，是一材料與方法C6生理教研室提供。動物選用雄性、健康Wistar506～8w200～250g，由高新技術開發(fā)區(qū)動物中心提供。2C625cm2C610%滅活小牛血清的IMDM置于含5%CO23720.25%胰酶溶Ca2+、Mg2+的磷酸鹽緩沖液中消化細胞，在顯微鏡下觀察105minC6(SABC)GFAPC6細胞，細胞濃度為0μ，經(jīng)MTT法檢測細胞存活率達以上。以2.0×106/只鼠的量接種，所有的大鼠均采用立體定向方法進Barker1.2mm，10μl的微量注射器針頭銳性刺破硬膜在立體6.0mm，1.0mm5.0mm10μl1μl/min510U5d7dWistar51014d，具體如下：(1)空白)(8μ6μ2μ4μ。4%多聚甲醛固定腫瘤標本，沿腦表接種穿刺點做冠狀切口，測量腫=a2×b×π/6(a為腫瘤的短徑，為腫瘤的長徑)。抑瘤率=(對照組腫瘤的平均體積-實驗組腫瘤的平均體積)/對照組腫瘤的平均體積抑制率≥30%為腫瘤對藥物敏感。免疫組化染色檢測增殖細胞核抗原(PCNA)蛋白采用SABC1010min。60min。傾去血清，加0稀釋的，置濕盒內S沖洗5min×360min。PBS振洗5mi3C0miS振洗5min×4DAB3min。自來水沖洗，酒精水核或(和)胞質中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，高倍視野下(400PCNA標記指數(shù)(LI)。SPSSst檢驗。2結果實驗大鼠的腫瘤體積和抑瘤率的變化活體灌注4%多聚甲醛固定腫瘤標本，沿腦表接種穿刺點做冠狀切口，測量腫瘤大小，算出各實驗組的抑制率并與對照組做比較用完全隨機設計兩總體均數(shù)比較的t檢驗對所測得的腫瘤體積大小進行統(tǒng)計學處理、分析。由表1可以看出：實驗組Ⅰ腫瘤體積與對照組相比無統(tǒng)計學意義(t=0.86，P0.05);實驗組Ⅱ～Ⅳ與對照組相比有顯著差異 (P0.05，P0.01)，并且隨抑膠素濃度增大，瘤體積縮小越明顯，抑瘤率也隨抑膠素濃度增高而增加實驗組Ⅰ組與Ⅱ組比較無統(tǒng)計學差其余各組兩兩比較有顯著性差(P0.05)。見表1。PCNA免疫組化結果分析PCNA棕黃色，鏡下計數(shù)腫瘤內5個視野的陽性細胞。對照組腫瘤細胞中PCNA蛋白陽性表達率平均為72.18%，表現(xiàn)為陽性細胞密度高，胞核呈強陽性，數(shù)量多。經(jīng)抑膠素治療后即可見腫瘤內PCNA陽性細胞密度下降，核PCNA陽性強度減弱，隨濃度增加陽性率呈下降趨勢。實驗組Ⅱ～ⅣPCNA(P0.05，P0.01PCNA(P0.0511PCNA指數(shù)變化與對照組比較：1)P0.05，2)P0.013討論(chlorotoxin)，有研究表明Cl3;19984〕報125I131IGCC在人體神經(jīng)膠質瘤細胞中選擇性產(chǎn)生，且產(chǎn)生量與腫瘤的惡化程度呈正相關。Sontheimer〔〕將放射性的碘和一種植物毒素連接在氯毒素上，借C6Ⅱ～Ⅳ組與對照組相比有顯著差異，并且隨抑膠素濃度增大，瘤體積縮小越明顯，抑瘤率也隨抑膠素濃度增高而增加，提示抑膠素具有抑制腫瘤生長作用。PCNA36kD的多肽，僅在增殖細胞中合成與表達，在細胞周期S期合成最高，是存在于細胞核內的酸性蛋白，S期細胞的標志物。PCNAPCNA,意味著處于S6PCNA,它對腫瘤的治療及預后的判斷有重要意義。PCNA陽性細胞密度下降，核PCNA陽性強度減弱，隨濃度增加陽性率呈下降趨Ⅱ～ⅣPCNA組PCNA蛋白表達比較無統(tǒng)計學意義。推測抑膠素抑制腫瘤增殖的PCNA合成與表達，從而也就抑制了DNA此阻止腫瘤細胞質和細胞核的復制，抑制細胞有絲分裂。本研究明確了抑膠素對腦膠質瘤細胞的抑制、殺傷作用，并且其作用機制之一可能與抑制PCNA發(fā)應用提供了實驗依據(jù)?！緟⒖嘉墨I】1崔俐，林衛(wèi)紅，姜慧軼，等.抑膠素對大鼠膠質瘤的抑瘤效應及對神經(jīng)細胞黏附分子的影響〔J〕.中風與神經(jīng)疾病雜志，2005;22(2)：12830.2.C6膠質瘤細胞P16J.2.3UllrichN,SontheimerH.Biophysicalandpharmacologycalcharacterizationofchloridecurrentsinhumanastrocytomacells〔J〕.AmJPhysiol，1996;270:C151121.SoroceanuL,GillespieGY，KhazaeliMB,etal.Useofchlorotoxinfortargetingofprimarybrain〔J〕.CancerRes，1998;58：48719.UllrichN,SontheimerH.Expressionofvoltageactivatedchloridecurrentsinacuteslicesofhumangliomas〔J〕.Neuroscience，1998;83(4):13613.KorkolopoulouP,ChristodoulouP,Lekk