紫外吸收光譜法

Chapter2UltravioletAbsorptionSpectrometry第二章

紫外吸收光譜法1本章要點教學內(nèi)容：

1.紫外吸收光譜的基本原理2.影響紫外吸收光譜的主要因素3.有機化合物的紫外吸收光譜4.紫外-可見分光光度計簡介5.紫外吸收光譜的應用

2基本要求：

掌握分子中電子能級和電子躍遷的規(guī)律、光譜特征及其主要影響因素；熟悉各類有機化合物的紫外吸收光譜特征和紫外分光光度計的使用；了解紫外吸收光譜在有機化合物結(jié)構(gòu)測定中的應用情況。教學重點：

分子結(jié)構(gòu)變化及不同取代基對吸收光譜的影響。3第一節(jié)紫外吸收光譜法基本原理

一、分子吸收光譜的產(chǎn)生電子能級振動能級轉(zhuǎn)動能級BA

在分子中，除了電子相對于原子核的運動外，還有核間相對位移引起的振動和轉(zhuǎn)動。這三種運動能量都是量子化的，并對應有一定能級。分子的能級示意圖4

若用△E電子、△E振動、△E轉(zhuǎn)動分別表示電子能級、振動能級、轉(zhuǎn)動能級差，即有△E電子△E振動△E轉(zhuǎn)動

。處在同一電子能級的分子，可能因其振動能量不同，而處在不同的振動能級上；當分子處在同一電子能級和同一振動能級時，它的能量還會因轉(zhuǎn)動能量不同，而處在不同的轉(zhuǎn)動能級上。所以分子的總能量可以認為是這三種能量的總和：E分子

=E電子

+E振動

+E轉(zhuǎn)動當用頻率為ν的電磁波照射分子，而該分子的較高能級與較低能級之差△E恰好等于該電磁波的能量hν時，即有△E=hν（h為普朗克常數(shù)）5此時，在微觀上出現(xiàn)分子由較低的能級躍遷到較高的能級；在宏觀上則透射光的強度變小。若用一連續(xù)輻射電磁波照射分子，將照射前后光強度的變化轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘枺⒂涗浵聛?，然后以波長為橫坐標，以電信號（吸光度A）為縱坐標，就可以得到一張光強度變化對波長的關(guān)系曲線圖——分子吸收光譜圖。6

紫外吸收光譜是由分子中價電子能級躍遷所產(chǎn)生，由于振動和轉(zhuǎn)動能級的躍遷能量遠低于電子能級的能差，因此，當電子能級改變時，振動能級和轉(zhuǎn)動能級不可避免地發(fā)生變化，即電子能譜不僅包括電子躍遷產(chǎn)生的譜線，也包括振動和轉(zhuǎn)動的譜線。儀器的分辨率不高時，各種譜線密集在一起，往往只看到一個較寬的吸收帶。

這就是紫外吸收光譜由吸收線變寬成為吸收帶的原因。7紫外光區(qū)的劃分：紫外光的波長范圍是4～400nm，其中4～200nm為遠紫外區(qū)，在該波長范圍內(nèi)，空氣中的N2、O2、CO2、水蒸氣等都有吸收，給樣品的測定帶來干擾，因此，只有在真空中進行研究，故又稱真空紫外區(qū);而200～400nm為近紫外區(qū)，400～800nm為可見光區(qū)。常見的分光光度計一般包括紫外和可見兩部分，波長范圍為200～800nm，稱紫外－可見分光光度計。價電子的種類：

有機分子主要有三種價電子：形成單鍵的σ電子、形成雙鍵的π電子和未成鍵的孤對n電子。8電子躍遷的類型：

基態(tài)時，σ電子和π電子分別處于其成鍵軌道中，n電子處于非鍵軌道中。當電子吸收適當?shù)哪芰繒r，電子可以發(fā)生由成鍵到反鍵軌道上的躍遷。因此，可能的躍遷類型主要為σσ*、ππ*、nσ*、n*等。

1.σσ*躍遷：在有機化合物分子中，飽和的

C–C、C–H等單鍵都是由H原子的S電子或C原子的

sp雜化所構(gòu)成的σ鍵，其上的電子可產(chǎn)生這類型躍遷。

常見于飽和烴類化合物。例如乙烷max=135nm由于此種躍遷需要的能量較高，故一般發(fā)生在真空紫外光區(qū)。它們常用作紫外吸收光譜的溶劑。92.ππ*躍遷：不飽和烴類化合物及芳香族化合物除含有σ電子外，還含有π電子，由于π電子易受激發(fā)，發(fā)生ππ*躍遷需要的能量低于σσ*躍遷，吸收峰一般接近于近紫外光區(qū)，在170~200nm范圍內(nèi)，其特征是摩爾吸光系數(shù)大，一般εmax≥104為強吸收帶。如乙烯、丙烯等化合物。當烯烴上有取代基或烯鍵與雙鍵產(chǎn)生共軛時，其此類躍遷的波長將移到近紫外區(qū)。例如丁二烯max=217nm。而芳香族化合物的ππ*躍遷將出現(xiàn)三個特征吸收帶（E、K、B）。103.nσ*躍遷：當分子中含有O、N、X等原子基團時會產(chǎn)生此種躍遷，其吸收光譜落于遠紫外光區(qū)或近紫外光區(qū)，如CH3OH和CH3NH2的nσ*躍遷光譜分別為183nm和213nm。4.nπ*躍遷：這類躍遷發(fā)生在近紫外光區(qū)。它是簡單的生色團如羰基、硝基等中的孤對電子向反鍵軌道躍遷。其特點是躍遷所需能量較低，產(chǎn)生的吸收波長最長，但其譜帶強度弱，摩爾吸光系數(shù)小。如丙酮中羰基的nπ*吸收波長為280nm。各種躍遷形式所需能量的大小為：

σ

σ*>n

σ*≥π

π*>nπ*

11Ess*pp*n各種電子躍遷能量示意圖

電子躍遷所處的波長范圍遠紫外區(qū)近紫外區(qū)可見光區(qū)200400（λ/nm）σσ*ππ*nσ*n*12二、紫外吸收光譜的表示法和常用術(shù)語紫外吸收帶的強度紫外光譜中吸收帶的強度標志著相應能級躍遷的幾率，遵從Laber-Beer定律A=lgI0/I=lg1/T=εcl

紫外光譜中吸收帶的強度可用A、ε或lgε表示，也可用T

表示。前者隨著數(shù)值的增大，吸收強度增大，后者則恰恰相反。

13紫外光譜的表示方法

圖示法：A~λ、ε~λ或

lgε~λ；

數(shù)據(jù)表示法：常用λmax、εmax或lgεmax值表示。如：巴豆醛（CH3CH=CH-CHO）

λ1218nm(lgε4.26)、λ2320nm(lgε1.48)

紫外光譜圖提供了兩個重要的數(shù)據(jù)：吸收峰的位置和吸收光譜的吸收強度。在大多數(shù)的文獻報道中，通常不繪制出紫外光譜圖，只是報道化合物的最大吸收峰的波長λmax及與之相對應的摩爾消光系數(shù)ε。如：CH3I：λmax258nm（lgε2.55）。

14對于測定物質(zhì)組成不確定時，可用百分吸光系數(shù)A1%1cm（或E1%1cm）表示。如：A1%1cm237=0.625表示樣品濃度為1%（W/V）時，通過1cm樣品池在波長237nm

處測得的吸光度值為0.625。一般情況，強吸收帶

lgε>3.5

中等強度吸收帶

lgε2.5~3.5

弱吸收帶

lgε1~2.515常用術(shù)語1.發(fā)色團和助色團有機分子中能引起π

π*或nπ*電子躍遷的基團被稱為發(fā)色團；與發(fā)色團或飽和烴相連能引起

nσ*電子躍遷的基團被稱為助色團。

常見的發(fā)色團有C＝C、C=O、-COOH、C≡CPh-、-NO2、-CONH2、-COCl、-COOR等；常見的助色團有：-X、-OH、-OR、-NH2、-NR2-SR等。162.紅移和藍移；增色效應和減色效應吸收峰向長波（或短）方向移動的現(xiàn)象稱為紅（或藍）移；使吸收帶強度增大（或減?。┑默F(xiàn)象被稱為增色（或減色）效應。3.肩峰和末端吸收

肩峰是指吸收曲線變化過程中有停頓之處，或吸收稍微增加或降低的峰；而末端吸收是指吸收曲線隨波長變短而強度增大直至儀器測量極限，即在儀器極限處測出的吸收。174.吸收帶吸收帶是指與分子結(jié)構(gòu)相對應的峰形及峰位，可用于推斷化合物的結(jié)構(gòu)。通常分為四類：

R吸收帶：由含有O、S、N等雜原子的發(fā)色團如羰基、硝基中未成鍵n電子向π*軌道躍遷（nπ*）時所產(chǎn)生的吸收帶。

特征：波長較長，強度很弱（λ>205nm；lgε<2.0）

K吸收帶：由含共軛雙鍵分子發(fā)生π

π*躍遷所產(chǎn)生的吸收帶。如丁二烯、丙烯醛

特征：波長λ為210~250；強度很強lgε>4.0

18

B吸收帶：是芳香族化合物的主要特征吸收帶，來自閉合環(huán)狀共軛雙鍵π

π*躍遷所產(chǎn)生的吸收帶。

特征：波長λ為230~270nm；強度較弱lgε≈2.30

乙酰苯的紫外吸收光譜（正庚烷中）19

E吸收帶：是苯環(huán)中三個雙鍵的π

π*躍遷所致，同樣是芳香族化合物的特征吸收帶，可分為兩個區(qū):E1帶λ<200nm，E2帶λ≈200nm，且強度E1（lgε=5.67）>E2

（lgε=3.84）。

當R、B、K三帶同時出現(xiàn)時，則一般吸收波長排序為R>B>K；吸收強度排序為R<B<K。20第二節(jié)影響紫外吸收光譜的主要因素一、溶劑效應—外部因素

通常情況下溶劑的極性發(fā)生改變會引起吸收光譜的變化。增加溶劑極性能使π

π*躍遷的吸收光譜發(fā)生紅移；而使nπ*躍遷的吸收光譜發(fā)生藍移；如：異丙叉丙酮CH3COCH=C(CH3)2

正己烷氯仿甲醇水

π

π*

230238237243nm

nπ*

329315309305nm

*

溶劑的極性還影響化合物的吸收強度和精細結(jié)構(gòu)。

因此，在溶解度允許范圍內(nèi)，選擇極性小的溶劑更有利于測定。21二、分子結(jié)構(gòu)的改變（內(nèi)部因素）

化合物分子結(jié)構(gòu)的變化將導致紫外吸收光譜發(fā)生顯著的變化。當分子中雙鍵的位置或基團排列位置的不同，它們的吸收波長及強度就會出現(xiàn)一定的差異。

例如，α和β紫羅蘭酮分子末端環(huán)中雙鍵位置不同，使其π

π*躍遷吸收波長分別為227nm和299nm。λmax=227nmλmax=227nm22某些化合物存在互變異構(gòu)現(xiàn)象。例如，β二酮在不同的溶劑中可形成酮式和烯醇式的互變異構(gòu)體，因烯醇式異構(gòu)體中存在雙鍵與羰基的共軛作用，π

π*躍遷所需能量較低，其吸收波長較長。烯醇式酮式23三、分子離子化（內(nèi)部因素）

當化合物在不同pH介質(zhì)中形成陽離子或陰離子時，其吸收波長也會隨著離子化而發(fā)生位移。例如，苯胺在酸性介質(zhì)中形成苯胺鹽陽離子，因N原子上未成鍵電子的消失，其助色作用也隨著消失，使其吸收帶發(fā)生藍移（230203nm；280254nm）。

苯酚在堿性介質(zhì)中能形成苯酚陰離子，因O原子上孤對電子增加到三對，其共軛作用增強，導致其吸收帶發(fā)生紅移，強度有所增強。（210235nm；270287nm）24四、取代基不同（內(nèi)部因素）

1.當發(fā)色團的一端有含孤對電子的助色團時，會產(chǎn)生n—π共軛作用，使π

π*躍遷的吸收波長發(fā)生紅移。例如，取代烯烴-C=C-XX=SR2NR2ORCl

π

π*

+45nm+40nm+30nm+5nm

2.當苯環(huán)上H原子被助色團取代時，其E、B吸收帶將產(chǎn)生紅移。例如，氯苯：E帶+6nm；B帶+9nm；苯甲醚：E帶+13nm；B帶+13nm。253.當助色團與羰基碳原子相連時，羰基nπ*躍遷的吸收波長將產(chǎn)生藍移。例如，

CH3CO-HCH3CO-NH2CH3CO-OC2H5

nπ*

290nm220nm208nm26第三節(jié)有機化合物的紫外吸收光譜一、飽和烴飽和單鍵碳氫化合物僅有σ鍵電子，躍遷時需要較大能量，須在波長較短的遠紫外光照射下才能發(fā)生σσ*躍遷，其吸收峰位于遠紫外區(qū)，一般在150nm左右。例如，甲烷的σσ*躍遷吸收波長為125nm。當飽和單鍵碳氫化合物中的H被O、N、X、S等雜原子取代時，因n電子較σ電子易激發(fā)，所需能量降低，其吸收波長向長波方向移動，此時產(chǎn)生n

σ*躍遷。例如碘甲烷nσ*躍遷吸收波長為258nm27二、不飽和脂肪烴

這類化合物包括含孤立雙鍵和共軛雙鍵的烯烴，它們均含有π電子，可產(chǎn)生π

π*躍遷。對于具有共軛雙鍵的化合物，其紫外吸收光譜與含有孤立雙鍵的有顯著的不同，通常情況下由于共軛效應使化合物的吸收波長發(fā)生紅移。例如，乙烯和丁二烯，前者λmax為165nm，而后者λmax為217nm；其原因是后者π—π共軛效應生成了大π鍵，鍵各能級間的距離較近，電子容易激發(fā)，所以吸收波長向長波方向移動。共軛分子包括共軛二烯（環(huán)、鏈狀）；α、β不飽和酮；共軛多烯以及芳香核與雙鍵或羰基的共軛。28三、芳香烴

芳香族化合物為環(huán)狀共軛體系，都具有三個吸收帶。以苯為例，它在乙醇中的紫外光譜如下：

苯在184nm和204nm有二個強吸收帶分別為E1和E2（lgε1=5.67

、lgε2=3.84

），是由苯環(huán)結(jié)構(gòu)中三個雙鍵形成的環(huán)狀共軛體系的躍遷所產(chǎn)生，是芳香族化合物的特征吸收。

29B帶在230~300nm之間，為一弱峰，有明顯的裂分，其λmax=255nm（lgε=2.36）稱為精細結(jié)構(gòu)吸收帶，是由π

π*躍遷和苯環(huán)的振動的重疊引起的，也是苯的重要特征吸收帶，這些特征可用來鑒別芳香化合物。當苯環(huán)上有助色團取代基時由于n-π共軛會使吸收帶向長波方向移動；對于二取代苯，當兩個取代基的位置不一樣時，其吸收強度和波長也不一樣。一般處在對位的強度和波長大于間位和鄰位。30第四節(jié)紫外-可見分光光度計31一、儀器的基本組成光源單色器樣品室檢測器記錄儀1.光源：在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命?？梢姽鈪^(qū)鎢燈作光源，紫外光區(qū)氫或氘燈作光源。2.單色器：將光源發(fā)射的復合光分解成單色光并可從中選出一任波長單色光的光學系統(tǒng)，一般為棱鏡或光柵。323.樣品室：放置各種類型的吸收池（比色皿）和相應的池架附件。吸收池主要有石英和玻璃兩種。在紫外區(qū)須采用石英池，可見區(qū)一般用玻璃池。

4.檢測器：利用光電效應將透過吸收池的光信號變成可測的電信號，常用的有光電池、光電管或光電倍增管。5.結(jié)果顯示記錄系統(tǒng)：檢流計、數(shù)字顯示、微機進行儀器自動控制和結(jié)果處理。33二、分光光度計的類型1.單光束：簡單，價廉，適于在給定波長處測量吸光度或透光度，一般不能作全波段光譜掃描，要求光源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。2.雙光束：自動記錄，快速全波段掃描。可消除光源不穩(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因素的影響，特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器較復雜，價格較高。3.雙波長：將不同波長的兩束單色光(λ1、λ2)快束交替通過同一吸收池而后到達檢測器。產(chǎn)生交流信號。無需參比池?！?1～2nm。兩波長同時掃描即可獲得導數(shù)光譜。34三種分光光度計結(jié)構(gòu)示意圖3536四、紫外光譜測定時溶劑的選擇基本原則：1.具有良好溶解能力2.在測定波長范圍無明顯吸收

3.有良好的吸收峰形4.安全、無毒，揮發(fā)性小

*應盡可能選擇非極性溶劑37第五節(jié)紫外吸收光譜的應用紫外吸收光譜具有特征性強和靈敏度高的特征，如分子中不存在任何的發(fā)色團、助色團，則紫外無吸收。對含量極微的共軛烴、羰基、亞硝基化合物、偶氮化合物、芳香化合物，其鑒定尤其可靠和有用。紫外吸收光譜不能給出所有的結(jié)構(gòu)信息，但可以給出一個鑒定特征結(jié)構(gòu)的方法，尤其提供了發(fā)色團和助色團的信息。38一、定性分析就其定性分析而言，紫外吸收光譜法在無機元素的定性分析應用方面是比較少的，無機元素的定性分析主要采用原子發(fā)射（或吸收）光譜法或化學分析法；而本法的主要應用是有機化合物的定性分析和結(jié)構(gòu)分析。而定性分析的光譜依據(jù)是：吸收光譜的形狀、吸收峰的數(shù)目和位置及相應的摩爾吸光系數(shù)，而最大吸收波長max及相應的εmax是定性分析的最主要參數(shù)。39由于有些有機化合物在紫外區(qū)沒有吸收帶，有些僅有簡單而寬的吸收帶，光譜信息較少，特征性不強；另一方面，紫外光譜反映的基本上是分子中發(fā)色團和助色團的特性，而不是整個分子的特性，例如，甲苯和乙苯的紫外光譜實際上是一樣的。因此，僅根據(jù)一個化合物的紫外光譜不能完全確定其分子結(jié)構(gòu)，這種方法的應用有較大的局限性。但是它適用于不飽和有機化合物，尤其是共軛體系的鑒定，以此推斷未知物的骨架結(jié)構(gòu)。40通常采用的定性方法是在相同的測試條件下，比較未知物與已知標準物的紫外光譜圖；若二者相同，則可推測或判斷它們可能是同一物質(zhì)，或具有相同的分子骨架和發(fā)色基團。

注意：紫外吸收光譜相同的兩種化合物有時也未必是同一物質(zhì)。但如果待測物與標準物不僅吸收波長相同，而且吸光系數(shù)也相同，則可認為二者為同一物質(zhì)。41二、有機化合物分子結(jié)構(gòu)的推測

1.官能團的推測：紫外光譜與有機化合物分子結(jié)構(gòu)的一般關(guān)系如下：①如在200～800nm無吸收，則表明分子中不含直鏈和環(huán)狀的共軛體系，無CHO、RBr、RI，可能是脂肪烴、脂肪胺、醚、羧酸、氟代烷、氯代烷等。

②如在210～250nm有吸收，則可能是碳鏈較長的羧酸、酰胺、醇、硫醇、硫醚等低共軛體系。

③如在250～300nm有弱吸收，則表明有C=O，中等強度吸收是苯核的特征。42④如化合物有顏色，則分子中所含共軛的發(fā)色團、助色團的總數(shù)將大于5（例外：偶氮，亞硝基，乙二醛、碘仿等）。⑤如一個光譜圖有許多吸收譜帶，其中一些甚至出現(xiàn)在可見光區(qū)，可推知該化合物可能含有一個長鏈共軛發(fā)色團和一個多環(huán)芳核發(fā)色團。432.異構(gòu)體的推測①酮式/烯醇式互變異構(gòu)：例如乙酰乙酸乙酯存在酮-烯醇式互變異構(gòu)體

λ204nm(弱吸收帶)

K帶λ254nm(lgε=4.25)

兩種異構(gòu)體的互變平衡與溶劑有密切關(guān)系。在水這樣的極性溶劑中，由于C=O可能與H2O形成氫鍵而降低能量以達到穩(wěn)定狀態(tài)，所以酮式異構(gòu)體占優(yōu)勢；而在乙烷這樣的非極性溶劑中，由于形成分子內(nèi)的氫鍵，且形成共軛體系，使能量降低以達到穩(wěn)定狀態(tài)，所以烯醇式異構(gòu)體比率上升。44②順反異構(gòu)體：例如1,2-二苯乙烯具有順反兩種異構(gòu)體順式反式

λmax=280nm；lgεmax=4.02λmax=295nm；lgεmax=4.43（空間位阻，影響共平面）(共平面產(chǎn)生最大共軛效應，ε大）45例如：肉桂酸的順、反式異構(gòu)體如下：

λmax＝280nmλmax＝295nmlgεmax=4.13lgεmax=4.43同樣，同一化學式的多環(huán)二烯，可能有兩種異構(gòu)體：一種是順式；另一種是異環(huán)二烯，是反式。一般來說，異環(huán)二烯的吸收帶強度總是比同環(huán)二烯的大。461.如果一個化合物在紫外區(qū)沒有吸收峰，而其中的

雜質(zhì)有較強的吸收，就可方便的檢該化合物中是否

含有微量的雜質(zhì)。

例1.如檢查甲醇或乙醇中是否含有雜質(zhì)苯。苯在256nm處有B吸收帶，而甲醇或乙醇在此波長附近幾

乎沒有吸收。

例2.檢查四氯化碳中有無二硫化碳雜質(zhì)。只要觀察在318nm處有無二硫化碳的吸收峰即可。

三、純度的檢查472.如果一個化合物在紫外可見區(qū)有較強的吸收帶，有時可用摩爾吸光系數(shù)來檢查其純度。

例如，檢查菲的純度。在氯仿溶液中，菲在296nm處有強吸收（文獻值lgε=4.10）。而用某法精制的菲，熔點為100℃，沸點為340℃（文獻值：熔點為99~101℃，沸點為336℃），似乎已很純。如果用紫外光譜檢查，測得的lgε值比標準菲值低10%,因而樣品的實際含量只有90%，說明含有雜質(zhì)。48四、定量分析—郞伯-比爾定律定量分析的依據(jù)是朗伯-比爾定律，同基礎(chǔ)分析“分光光度分析法”一樣，應用廣泛。常見有如下幾種方法：1．單組分的定量分析如果在一個試樣中只要測定一種組分，且在選定的測量波長下，試樣中其它組分對該組分不干擾，這種單組分的定量分析較簡單。一般有標準對照法和標準曲線法兩種。49①標準對照法在相同條件下，平行測定試樣溶液和某一濃度Cs（應與試液濃度接近）的標準溶液的吸光度Ax和As，則由Cs可計算試樣溶液中被測物質(zhì)的濃度Cx：標準對照法因使用單個標準，引起誤差的偶然因素較多，故往往較不可靠。50②．標準曲線法是實際分析工作中最常用的一種方法。配制一系列不同濃度的標準溶液，以不含被測組分的空白溶液作參比，測定標準系列溶液的吸光度，繪制吸光度－濃度曲線，稱為校正曲線（也叫標準曲線或工作曲線）。在相同條件下測定試樣溶液的吸光度，從校正曲線上找出與之對應的未知組分的濃度。此外，有時還可以采用標準加入法。512.多組分的定量分析根據(jù)吸光度具有加和性的特點，在同一試樣中可以同時測定兩個或兩個以上組分。假設要測定試樣中的兩個組分A、B，如果分別繪制A、B兩純物質(zhì)的吸收光譜，繪出三種情況，如下圖所示。52(a)情況表明兩組分互不干擾，可以用測定單組分的方法分別在λ1、λ2測定A、B兩組分；(b)情況表明A組分對B組分的測定有干擾，而B組分對A組分的測定無干擾，則可以在λ1處單獨測量A組分，求得A組分的濃度CA；然后在λ2處測量溶液的吸光度AA+B

λ2及A、B純物質(zhì)的εA

λ2和εBλ2值，根據(jù)吸光度的加和性，即得則可以求出CB。53(c)情況表明兩組分彼此互相干擾，此時，在λ1、λ2處分別測定溶液的吸光度AA+Bλ1及AA+Bλ2，而且同時測定A、B純物質(zhì)的εAλ1、εB

λ1及εAλ2、εBλ2

然后列出聯(lián)立方程:解得CA、CB。顯然，如果有n個組分的光譜互相干擾，就必須在n個波長處分別測定吸光度的加和值，然后解n元一次方程以求出各組分的濃度。應該指出，這將是繁瑣的數(shù)學處理，且n越多，結(jié)果的準確性越差。用計算機處理測定結(jié)果將使運算大為方便。54(d)吸收光譜重疊嚴重的情況，還能進行分析嗎？