GB/T 17999.8-2008SPF雞微生物學(xué)監(jiān)測第8部分：SPF雞雞白痢沙門氏菌檢驗(yàn)

犐犆犛１１．２２０

犅４１

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜１７９９９．８—２００８

代替ＧＢ／Ｔ１７９９９．７—１９９９

犛犘犉雞微生物學(xué)監(jiān)測

第８部分：犛犘犉雞雞白痢沙門氏菌檢驗(yàn)

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２００８１２３１發(fā)布２００９０５０１實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

書

犌犅／犜１７９９９．８—２００８

前言

ＧＢ／Ｔ１７９９９《ＳＰＦ雞微生物學(xué)監(jiān)測》分為１０個部分：

———第１部分：ＳＰＦ雞微生物學(xué)監(jiān)測總則；

———第２部分：ＳＰＦ雞紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)；

———第３部分：ＳＰＦ雞血清中和試驗(yàn)；

———第４部分：ＳＰＦ雞血清平板凝集試驗(yàn)；

———第５部分：ＳＰＦ雞瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)；

———第６部分：ＳＰＦ雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；

———第７部分：ＳＰＦ雞胚敏感試驗(yàn)；

———第８部分：ＳＰＦ雞雞白痢沙門氏菌檢驗(yàn)；

———第９部分：ＳＰＦ雞試管凝集試驗(yàn)；

———第１０部分：ＳＰＦ雞間接免疫熒光試驗(yàn)。

本部分為ＧＢ／Ｔ１７９９９的第８部分。

本部分修訂參照了ＮＹ／Ｔ５５６—２００２《雞傳染性喉氣管炎診斷技術(shù)》和ＯＩＥ《陸生動物（哺乳動物、

禽鳥和蜜蜂）診斷試驗(yàn)和疫苗手冊》（第五版）中的有關(guān)規(guī)定。

本部分代替ＧＢ／Ｔ１７９９９．７—１９９９《ＳＰＦ雞雞白痢沙門氏菌檢驗(yàn)》。

本部分與ＧＢ／Ｔ１７９９９．７—１９９９相比主要變化如下：

———增加了活禽泄殖腔拭子檢測樣品；

———增加了沙門氏菌菌體抗原血清學(xué)檢測方法；

———增加了附錄Ａ“革蘭氏染色方法及生化試驗(yàn)結(jié)果判定”；

———對試驗(yàn)操作程序進(jìn)行了修訂，將細(xì)菌鏡檢程序提前；

———在范圍中進(jìn)一步明確了本部分使用的情況；

———刪除了引用標(biāo)準(zhǔn)；

———修訂了試驗(yàn)操作程序。

本部分的附錄Ａ為規(guī)范性附錄。

本部分由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。

本部分由全國動物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會（ＳＡＣ／ＴＣ１８１）歸口。

本部分起草單位：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所、中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心、濟(jì)南斯帕法

斯家禽有限公司。

本部分主要起草人：曲連東、姜騫、韓凌霞、邵衛(wèi)星、朱果、單忠芳、劉家森、司昌德、郭東春、于海波、

孟慶文。

本部分所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：

———ＧＢ／Ｔ１７９９９．７—１９９９。

Ⅰ

書

犌犅／犜１７９９９．８—２００８

犛犘犉雞微生物學(xué)監(jiān)測

第８部分：犛犘犉雞雞白痢沙門氏菌檢驗(yàn)

１范圍

ＧＢ／Ｔ１７９９９的本部分規(guī)定了雞白痢沙門氏菌檢驗(yàn)的技術(shù)要求。

本部分適用于對ＳＰＦ雞進(jìn)行雞白痢沙門氏菌的分離和鑒定。

用血清平板凝集試驗(yàn)進(jìn)行雞白痢沙門氏菌的抗體檢測，結(jié)果難以判斷時，可采用本部分進(jìn)行復(fù)檢。

２原理

取待檢樣品（腸內(nèi)容物、有關(guān)臟器勻漿、活禽泄殖腔拭子）接種于增菌培養(yǎng)基中進(jìn)行增菌，然后將培

養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到選擇、鑒別培養(yǎng)基上培養(yǎng)，挑選可疑菌落接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，取培養(yǎng)物進(jìn)行生化試驗(yàn)

與血清學(xué)試驗(yàn)，以確定雞白痢沙門氏菌。

３試劑和器材

３．１材料

３．１．１培養(yǎng)基

營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、ＤＨＬ瓊脂、ＳＳ瓊脂、亞硫酸鉍瓊脂（ＢＳ）、三糖鐵培養(yǎng)基（ＴＳＩ）、營養(yǎng)瓊脂、半固體

瓊脂。

３．１．２生化反應(yīng)試劑

糖發(fā)酵培養(yǎng)基、蛋白胨水、硝酸鹽培養(yǎng)基、氧化酶試劑、氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基、尿素培養(yǎng)基（結(jié)果

判定見附錄Ａ）。

３．１．３沙門氏菌診斷血清

ＡＦ多價Ｏ血清、Ｏ９因子血清、Ｏ１２因子血清、Ｈａ因子血清、Ｈｄ因子血清、Ｈｇ．ｍ因子血清和

Ｈｇ．ｐ因子血清。

３．２器材

３７℃恒溫培養(yǎng)箱。

４操作步驟

４．１采樣

無菌采取卵巢、肝、脾以及小腸和盲腸，活禽泄殖腔拭子。

４．２分離培養(yǎng)

將采集樣品放入滅菌乳缽或均漿器中研磨成勻漿，加入少量營養(yǎng)肉湯稀釋。取培養(yǎng)物或活禽泄殖

腔拭子分別在ＳＳ或ＢＳ和ＤＨＬ瓊脂平板培養(yǎng)基上劃線接種，置（３６±１）℃培養(yǎng)２４ｈ～４８ｈ。在ＤＨＬ

培養(yǎng)基上若出現(xiàn)黃褐色透明小菌落；或在ＳＳ瓊脂平板上出現(xiàn)無色半透明圓形小菌落；或在ＢＳ瓊脂平

板上出現(xiàn)黑色或黑綠色小菌落，則為可疑菌落。