GB/T 18643-2021雞馬立克氏病診斷技術(shù)

ICS11220

B41.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T18643—2021

代替

GB/T18643—2002

雞馬立克氏病診斷技術(shù)

DianostictechniuesforMareksdisease

gq’

2021-04-30發(fā)布2021-11-01實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T18643—2021

目次

前言

…………………………Ⅰ

引言

…………………………Ⅱ

范圍

1………………………1

縮略語(yǔ)

2……………………1

臨床診斷

3…………………1

病毒分離

4…………………3

瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)檢測(cè)

5…………………4

檢測(cè)

6PCR…………………6

熒光定量檢測(cè)

7PCR(q-PCR)……………7

綜合判定

8…………………8

附錄規(guī)范性附錄病毒分離用溶液配制

A()……………9

附錄規(guī)范性附錄瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)用溶液配制

B()…………………11

附錄規(guī)范性附錄檢測(cè)用引物反應(yīng)條件及溶液配制

C()PCR、………12

附錄規(guī)范性附錄檢測(cè)用引物探針和反應(yīng)條件

D()q-PCR、…………15

GB/T18643—2021

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)代替雞馬立克氏病診斷技術(shù)本標(biāo)準(zhǔn)與相比主

GB/T18643—2002《》。GB/T18643—2002

要技術(shù)變化如下

:

修改了鑒別診斷部分的描述見(jiàn)年版的

———(3.4,20023.4);

增加了病毒分離檢測(cè)方法見(jiàn)第章附錄

———(4,A);

增加了檢測(cè)方法見(jiàn)第章附錄

———PCR(6,B);

增加了熒光定量檢測(cè)方法見(jiàn)第章附錄

———PCR(7,C)。

本標(biāo)準(zhǔn)的修訂參考了陸生動(dòng)物診斷實(shí)驗(yàn)和疫苗標(biāo)準(zhǔn)手冊(cè)版并結(jié)合國(guó)內(nèi)外技術(shù)研究

OIE《》(2017),

新成果與國(guó)際先進(jìn)技術(shù)保持一致

,。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任

。。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心

:、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人劉長(zhǎng)軍龔振華張艷萍路平王笑梅李陽(yáng)高玉龍祁小樂(lè)李凱王志亮

:、、、、、、、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為

:

———GB/T18643—2002。

Ⅰ

GB/T18643—2021

引言

雞馬立克氏病是一種雞的高度傳染性以淋巴細(xì)胞增生為特征的腫瘤性疾

(Marek’sdisease,MD)、

病由雞皰疹病毒型即雞馬立克氏病病毒

,2(Gallidherpesvirus2,GaHV-2),(Marek’sdiseasevirus,

引起一般發(fā)生于周齡以上的禽只多發(fā)生于周齡周齡可引起多種嚴(yán)重的

MDV)。MD3,12~30。MD

病癥其中淋巴組織增生是最常見(jiàn)也是最重要的一種經(jīng)典型主要侵害神經(jīng)組織死亡率很少超

,。MD,

過(guò)可持續(xù)數(shù)周至數(shù)月急性型可使發(fā)病雞內(nèi)臟器官產(chǎn)生淋巴瘤發(fā)病率一般為

10%~15%,。MD,10%~

暴發(fā)流行時(shí)發(fā)病率可高達(dá)死亡率可能在數(shù)周內(nèi)迅速增加然后死亡停止也可能在數(shù)月內(nèi)

30%,70%。,,

保持穩(wěn)定的死亡率并逐漸下降目前最常見(jiàn)的是產(chǎn)生廣泛內(nèi)臟器官淋巴瘤的急性型

,。,MD。

在臨床診斷上容易與雞的其他腫瘤性疾病禽白血病和禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織

MD,(Avianleukosis,AL)

增生病發(fā)生混淆一般需要通過(guò)流行病學(xué)和病理組織學(xué)進(jìn)行鑒別診斷

(Reticuloendotheliosis,RE),。。

可通過(guò)活疫苗免疫預(yù)防免疫屬于非清除性免疫不能清除病原也不能阻止環(huán)境中野毒的

MD,,,MDV

感染和感染雞排毒由于疫苗普遍應(yīng)用以及疫苗的自身特點(diǎn)臨床上疫苗毒株的接種和野

。MD,,MD

毒株的感染情況復(fù)雜需要實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)進(jìn)行確診

,。

從感染雞組織中分離可用于該病的檢測(cè)通常選用從抗凝血樣中分離的淋巴細(xì)胞腎細(xì)胞

MDV。、

或脾細(xì)胞懸液作為分離病毒用的材料也可以用羽髓組織漿液作為分離材料細(xì)胞懸液或羽髓

,MDV。

組織漿液可接種雞腎細(xì)胞鴨胚成纖維細(xì)胞

(Chickenkidneycells,CKC)、(Duckembryofibroblast,

或雞胚成纖維細(xì)胞進(jìn)行病毒分離應(yīng)用瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)

DEF)(Chickenembryofibroblast,CEF)。

對(duì)羽髓抗原進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)可以確定感染

(Agargelimmunodiffusion,AGID)MDV,MDV。AGID

是檢測(cè)抗體最常用的方法然而由于疫苗毒株也可以刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體抗體的檢測(cè)對(duì)于

,MD,

的臨床診斷僅具有參考價(jià)值方法可以用于檢測(cè)

MD。PCR(Polymerasechainreaction,PCR)MDV,

法還可以鑒別血清型野毒株和疫苗毒株

PCRMDVⅠ。

Ⅱ

GB/T18643—2021

雞馬立克氏病診斷技術(shù)

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了雞馬立克氏病臨床診斷以及病毒分離瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)檢測(cè)和熒光定量

,、、PCR

檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的技術(shù)要求和綜合判定

PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于雞馬立克氏病的檢測(cè)診斷檢疫和流行病學(xué)調(diào)查等

、、。

2縮略語(yǔ)

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)

AGID:(Agargelimmunodiffusion)

禽白血病

AL:(Avianleukosis)

雞胚成纖維細(xì)胞

CEF:(Chickenembryofibroblast)

雞腎細(xì)胞

CKC:(Chickenkidneycells)

鴨胚成纖維細(xì)胞

DEF:(Duckembryofibroblast)

致細(xì)胞病變效應(yīng)

CPE:(Cytopathiceffect)

鴨胚成纖維細(xì)胞

DEF:(Duckembryofibroblast)

脫氧核糖核酸

DNA:(Deoxyribonucleicacid)

溴化乙錠

EB:(Ethidiumbromide)

胎牛血清

FBS:(Fetalbovineserum)

禽淋巴性白血病

LL:(Lymphoidleukosis)

培養(yǎng)基

M199:M199(M199Medium)

雞馬立克氏病

MD: