標準解讀
GB/T 18654.15-2008 是一項中國國家標準,全稱為《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗 第15部分:RAPD分析》。該標準主要針對養(yǎng)殖魚類的種質(zhì)檢測,特別是利用隨機擴增多態(tài)性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,簡稱RAPD)技術(shù)進行遺傳多樣性和種質(zhì)鑒定的方法進行了規(guī)定和指導(dǎo)。
標準內(nèi)容概覽:
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適用范圍:本部分標準適用于養(yǎng)殖魚類種質(zhì)資源的遺傳多樣性評估、品種鑒定、親緣關(guān)系分析及種群結(jié)構(gòu)研究等領(lǐng)域。通過RAPD技術(shù),可以快速識別不同魚類品種間的遺傳差異。
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術(shù)語與定義:標準首先明確了與RAPD技術(shù)相關(guān)的專業(yè)術(shù)語,如引物、擴增產(chǎn)物、多態(tài)性等,為后續(xù)操作提供統(tǒng)一的術(shù)語基礎(chǔ)。
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試劑與材料:詳細列出了進行RAPD分析所需的各種化學(xué)試劑、DNA提取套件、引物以及實驗所需的儀器設(shè)備,確保實驗條件的標準化。
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樣本收集與處理:規(guī)范了魚類樣本的采集方法、保存條件及DNA的提取步驟,保證樣本質(zhì)量滿足實驗要求。
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RAPD反應(yīng)體系與程序:詳細描述了進行RAPD-PCR反應(yīng)的混合物組成、反應(yīng)條件(如溫度循環(huán)設(shè)置)、以及PCR擴增的具體步驟,確保實驗結(jié)果的可重復(fù)性。
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電泳與成像分析:說明了如何通過凝膠電泳分離擴增產(chǎn)物,并通過成像系統(tǒng)記錄結(jié)果。同時,對電泳條件、染色方法及結(jié)果分析做了具體指導(dǎo)。
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數(shù)據(jù)處理與分析:提出了如何根據(jù)電泳圖譜分析多態(tài)性位點,使用特定軟件進行帶型分析、構(gòu)建遺傳距離樹或進行聚類分析,以評估遺傳多樣性及種間關(guān)系。
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質(zhì)量控制:強調(diào)了實驗過程中應(yīng)采取的質(zhì)量控制措施,包括陰性對照和陽性對照的應(yīng)用,以驗證實驗的有效性和準確性。
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結(jié)果報告:規(guī)定了實驗結(jié)果報告應(yīng)包含的信息,如實驗條件、觀察到的多態(tài)性位點數(shù)、遺傳距離計算方法及分析結(jié)論等,確保信息的完整性和透明度。
實施意義:
此標準的制定和實施,為我國養(yǎng)殖魚類的種質(zhì)檢測提供了科學(xué)依據(jù)和技術(shù)規(guī)范,有助于提高種質(zhì)資源管理的效率和精確度,促進魚類遺傳改良、保護生物多樣性及提升水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展能力。通過標準化的RAPD分析方法,可以更有效地鑒別優(yōu)良品種、監(jiān)控種質(zhì)退化情況,為漁業(yè)科研及生產(chǎn)實踐提供重要支持。
如需獲取更多詳盡信息,請直接參考下方經(jīng)官方授權(quán)發(fā)布的權(quán)威標準文檔。
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- 廢止
- 已被廢除、停止使用,并不再更新
- 2008-06-27 頒布
- 2008-10-01 實施
文檔簡介
犐犆犛65.150
犅50
中華人民共和國國家標準
犌犅/犜18654.15—2008
養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗
第15部分:犚犃犘犇分析
犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀狅犳犵犲狉犿狆犾犪狊犿犳狅狉犮狌犾狋狌狉犲犱犳犻狊犺犲狊—
犘犪狉狋15:犚犃犘犇犪狀犪犾狔狊犻狊
20080627發(fā)布20081001實施
中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局
發(fā)布
中國國家標準化管理委員會
書
犌犅/犜18654.15—2008
前言
GB/T18654《養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗》分為下列部分:
———第1部分:檢驗規(guī)則;
———第2部分:抽樣方法;
———第3部分:性狀測定;
———第4部分:年齡與生長的測定;
———第5部分:食性分析;
———第6部分:繁殖性能的測定;
———第7部分:生態(tài)特性分析;
———第8部分:耗氧率與臨界窒息點的測定;
———第9部分:含肉率測定;
———第10部分:肌肉營養(yǎng)成分的測定;
———第11部分:肌肉中主要氨基酸含量的測定;
———第12部分:染色體組型分析;
———第13部分:同工酶電泳分析;
———第14部分:DNA含量的測定;
———第15部分:RAPD分析;
……
本部分為GB/T18654的第15部分。
本部分的附錄A、附錄B和附錄C為規(guī)范性附錄。
本部分由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。
本部分由全國水產(chǎn)標準化技術(shù)委員會淡水養(yǎng)殖分技術(shù)委員會歸口。
本部分起草單位:上海水產(chǎn)大學(xué)、中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長江水產(chǎn)研究所。
本部分主要起草人:李思發(fā)、鄒曙明、徐忠法、趙金良、蔡完其。
Ⅰ
書
犌犅/犜18654.15—2008
養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗
第15部分:犚犃犘犇分析
1范圍
GB/T18654的本部分規(guī)定了魚類RAPD分析的試劑與材料、儀器和設(shè)備、抽樣、分析步驟和結(jié)果
判定。
本部分適用于常見淡水、海水養(yǎng)殖魚類。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的條款通過GB/T18654的本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文
件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本部分,然而,鼓勵根據(jù)本部分達成
協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本
部分。
GB/T18654.1—2002養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗第1部分:檢驗規(guī)則
GB/T18654.2養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗第2部分:抽樣方法
3原理
利用10堿基的隨機寡核苷酸引物,對樣品基因組的DNA進行PCR擴增,擴增產(chǎn)物進行電泳分離
和溴化乙錠染色,根據(jù)譜帶多態(tài)性比較分析,判定魚類物種的遺傳特性。
4試劑與材料
除非另有說明,在分析中僅使用確認為分析純的試劑和蒸餾水或去離子水或相當純度的水。
4.1三羥甲基氨基甲烷(Tris)。
4.2氫氧化鈉(NaOH)。
4.3氯化鈉(NaCl)。
4.4十二烷基磺酸鈉(SDS)。
4.5氯化鉀(KCl)。
4.6氯化鎂(MgCl2)。
4.7乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)。
4.8硼酸。
4.9瓊脂糖。
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