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實(shí)驗動物基本知識基本操作實(shí)驗方法第一頁,共三十四頁,2022年,8月28日
實(shí)驗動物是生命科學(xué)研究最重要的和不可替代的實(shí)驗材料。實(shí)驗動物和動物實(shí)驗是研究包括人類在內(nèi)的生命活動及其疾病防治規(guī)律的基本手段。一、實(shí)驗動物(experimentalanimal)第二頁,共三十四頁,2022年,8月28日婚墊雄蟾(一)實(shí)驗動物的種類。蟾蜍(Toad)蟾蜍屬兩棲動物,其一些基本生命活動與哺乳動物近似,其離體組織和器官所需的生理環(huán)境比較簡單(無須供氧和恒溫)。蟾蜍常用于神經(jīng)生理、肌肉生理、心臟生理,微循環(huán)、水腫等實(shí)驗。雄蟾雌蟾第三頁,共三十四頁,2022年,8月28日(一)實(shí)驗動物的種類。小鼠(Mouse)小鼠被廣泛的用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)學(xué)、生理學(xué)、遺傳學(xué)、藥理、毒理、腫瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生產(chǎn)和教學(xué)。第四頁,共三十四頁,2022年,8月28日(一)實(shí)驗動物的種類。大鼠(Rat)大鼠應(yīng)用于生理學(xué)、藥理學(xué)、免疫學(xué),內(nèi)分泌學(xué)、神經(jīng)生理、營養(yǎng)學(xué)、傳染病、腫瘤和肝外科等的研究。第五頁,共三十四頁,2022年,8月28日(一)實(shí)驗動物的種類。豚鼠(Guineapig)常用于免疫學(xué)、微生物學(xué)、傳染病學(xué)、聽覺生理、實(shí)驗性壞血癥等研究。
第六頁,共三十四頁,2022年,8月28日(一)實(shí)驗動物的種類。家兔(Rabbit)常用于免疫學(xué)、腫瘤、實(shí)驗生理學(xué)、生殖生理、遺傳性疾病等的方面的研究,制造生物制品。
第七頁,共三十四頁,2022年,8月28日(一)實(shí)驗動物的種類。貓(Cat)貓的神經(jīng)系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)較發(fā)達(dá),與人很相似。常用于神經(jīng)、循環(huán)和呼吸方面的實(shí)驗。
第八頁,共三十四頁,2022年,8月28日(一)實(shí)驗動物的種類。犬(Dog)常用于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、藥理、毒理學(xué)、實(shí)驗外科學(xué)、行為學(xué)、腫瘤學(xué)等方面研究
在以犬為實(shí)驗動物的研究成果中,只有應(yīng)用Beagle才能被國際公認(rèn)。
第九頁,共三十四頁,2022年,8月28日(一)實(shí)驗動物的種類。豬(Pig)常應(yīng)用于皮膚燒傷、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、心血管及糖尿病、遺傳性和營養(yǎng)性疾病、移植、外科手術(shù)等方面的研究
第十頁,共三十四頁,2022年,8月28日(一)實(shí)驗動物的種類。猴(Monkey)主要用于傳染病學(xué)、藥理學(xué)和毒理學(xué)、生殖生理、口腔醫(yī)學(xué))營養(yǎng)、代謝、行為學(xué)和高級神經(jīng)活動研究及老年病、器官移植、眼科、內(nèi)分泌病和畸胎學(xué)、腫瘤學(xué)第十一頁,共三十四頁,2022年,8月28日(二)實(shí)驗動物的分類近交系近交系一般是指采用20代以上全同胞兄弟妹妹或親子(子女與年青的父母)進(jìn)行交配,而培養(yǎng)出來的遺傳基因純化的品系。(F=98.6%)雜交一代由兩個近交系雜交產(chǎn)生的子一代稱為雜交一代。它既有近交系動物的特點(diǎn),又獲得了雜交優(yōu)勢。封閉群在同一血緣品系內(nèi),不以近交方式,而進(jìn)行隨機(jī)交配繁衍,經(jīng)五年以上育成的相對維持同一血緣關(guān)系的種群。1.按遺傳學(xué)特征分類第十二頁,共三十四頁,2022年,8月28日突變品系在育種過程中,由于單個基因的突變,或?qū)⒛硞€基因?qū)?,或通過多次回交“留種”,而建立一個同類突變品系,此類個體中有具同樣遺傳缺陷或病態(tài)。非純系即一般任意交配繁殖的雜種動物。雜種動物具有旺盛的生命力,適應(yīng)性強(qiáng),繁殖率高,生長快,易于飼養(yǎng)管理。個體差異大,反應(yīng)性不規(guī)則,實(shí)驗結(jié)果的重復(fù)性差。但其中包含有最敏感的與最不敏感的兩種極端的個體。第十三頁,共三十四頁,2022年,8月28日(二)實(shí)驗動物的分類普通動物(Conventionalanimals,CV)又稱一級動物,是微生物控制要求中最低的一個級別的動物,要求不帶有動物烈性傳染病和人畜共患病原體。清潔動物(Cleananimals,CL)又稱二級動物,除不帶有普通動物應(yīng)排除的病原體外,還不應(yīng)攜帶對動物危害大和對科學(xué)實(shí)驗干擾大的病原體。2.按微生物學(xué)分類第十四頁,共三十四頁,2022年,8月28日無特殊病原體動物(Specificpathogensfreeanimal,SPF動物)SPF動物又稱三級動物,除不帶有普通動物、清潔動物應(yīng)排除的病原體外,還應(yīng)排除有潛在感染或條件性致病的病原體,以及對實(shí)驗干擾大的病原。無菌動物(Germfreeanimals,GF)和悉生動物(Gnotobioticanimals,GN)四級動物。無菌動物是指采用當(dāng)前的技術(shù)手段無法在動物體表、體內(nèi)檢出一切其他生物體。第十五頁,共三十四頁,2022年,8月28日例如,過敏反應(yīng)或變態(tài)反應(yīng)的研究宜選用豚鼠,因為豚鼠易于致敏。因家兔體溫變化靈敏,故常用于發(fā)熱、熱原檢定、解熱藥和過熱的實(shí)驗。狗、大鼠、家兔常用于高血壓的研究。實(shí)驗動物的種屬選擇應(yīng)注意影響動物實(shí)驗效果的各種因素。盡可能選擇其結(jié)構(gòu)、功能和代謝特點(diǎn)接近于人類的動物,不同種屬的動物對于同一刺激的反應(yīng)也不同。實(shí)驗動物品系的選擇同一種屬動物的不同品系,對同一刺激的反應(yīng)也有很大差異。(三)實(shí)驗動物的種、系選擇。例如:DBA/2小鼠100%的可發(fā)生聽源性癲癇發(fā)作;而C57BL小鼠根本不出現(xiàn)這種反應(yīng)第十六頁,共三十四頁,2022年,8月28日實(shí)驗動個體的選擇同一品系的實(shí)驗動物,對同一刺激物反應(yīng)存在著個體差異。年齡、體重、性別、生理狀態(tài)和健康情況不同,往往導(dǎo)致對同一刺激的不同結(jié)果。敏感性:幼年>老年>成年10~28周齡小鼠老年小鼠有些犬因饑餓、創(chuàng)傷等原因尚未正式做休克實(shí)驗時,即已進(jìn)入休克氯丙嗪血糖升高血糖降低5~6周齡的雄性大鼠5~6周齡的雌性大鼠麥角新堿有鎮(zhèn)痛效果無鎮(zhèn)痛效果動物血壓高動物血壓低降壓藥降壓不降壓第十七頁,共三十四頁,2022年,8月28日動物的捉拿、固定動物性別的辨別實(shí)驗動物的編號常用給藥方法二、實(shí)驗動物的基本操作第十八頁,共三十四頁,2022年,8月28日蟾蜍(一)動物的捉拿、固定AB圖3-2-1青蛙(或蟾蜍)捉拿法圖3-2-2青蛙(或蟾蜍)固定法第十九頁,共三十四頁,2022年,8月28日小鼠(一)動物的捉拿、固定圖3-2-2小白鼠的捉拿法第二十頁,共三十四頁,2022年,8月28日大鼠、豚鼠家兔(一)動物的捉拿、固定圖3-2-5兔捉拿方法AB圖3-2-4大鼠和豚鼠的捉拿和固定第二十一頁,共三十四頁,2022年,8月28日蟾蜍小白鼠家兔(二)動物性別的辨別雄雌圖3-2-7小鼠性別的特征第二十二頁,共三十四頁,2022年,8月28日染色法掛牌法(三)動物的編號213456789102030407050806090圖3-2-8小鼠背部的編號方法第二十三頁,共三十四頁,2022年,8月28日(四)常用給藥方法經(jīng)消化道給藥法自動攝取法喂藥法灌胃給藥法經(jīng)直腸給藥圖3-2-9小鼠灌胃法胃管開口器圖3-2-10兔灌胃方法第二十四頁,共三十四頁,2022年,8月28日(四)常用給藥方法注射給藥法皮下注射腹腔注射圖3-2-11小鼠腹腔注射方法第二十五頁,共三十四頁,2022年,8月28日(四)常用給藥方法注射給藥法肌肉注射靜脈注射8.5cm3.5cm1cm圖3-2-12小鼠尾靜脈注射法圖3-2-13兔耳緣靜脈注射法第二十六頁,共三十四頁,2022年,8月28日(四)常用給藥方法涂布給藥法藥物經(jīng)皮膚吸收、局部作用或致敏作用時間根據(jù)藥物性質(zhì)和要求定第二十七頁,共三十四頁,2022年,8月28日(五)動物被毛的去除法拔毛法剪毛法剃毛法脫毛法第二十八頁,共三十四頁,2022年,8月28日三、實(shí)驗動物的麻醉常用麻醉藥氨基甲酸乙酯氯醛糖巴比妥類乙醚局部麻醉藥第二十九頁,共三十四頁,2022年,8月28日三、實(shí)驗動物的麻醉常用麻醉方法全身麻醉吸入麻醉注射麻醉局部麻醉第三十頁,共三十四頁,2022年,8月28日三、實(shí)驗動物的麻醉麻醉操作要求麻醉的基本原則注意不同個體的耐受性及時判斷麻醉的深淺靜脈麻醉堅持先快后慢原則補(bǔ)充麻醉麻醉注意事項第三十一頁,共三十四頁,2022年,8月28日四、實(shí)驗動物手術(shù)術(shù)前準(zhǔn)備理論準(zhǔn)備:了解結(jié)構(gòu)、方法、應(yīng)急措施等材料準(zhǔn)備:動物準(zhǔn)備、器械準(zhǔn)備藥品準(zhǔn)備、其他準(zhǔn)備儀器準(zhǔn)備第三十二頁,共三十四頁,2022年,8月28日四、實(shí)驗動物手術(shù)手術(shù)麻醉動物固定動物備皮皮膚切開組織分離結(jié)扎止血手術(shù)部位保護(hù)消毒縫合抗菌(具體方法在實(shí)驗前介紹)第三十三頁,共三十四
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