毛細(xì)血管電泳法在藥物分析中的應(yīng)用

毛細(xì)血管電泳法在藥物分析中的應(yīng)用摘要：高技毛細(xì)管電泳是近年來在分析化學(xué)和生物醫(yī)藥學(xué)中應(yīng)用廣泛的一門分離分析技術(shù)。從高效毛細(xì)管電泳的類型、特點(diǎn)、原理應(yīng)臨床樣品分析等方面?綜速了誼項(xiàng)技術(shù)的應(yīng),glgt/a,介紹了在不同成份分析中的優(yōu)勢度前哥．在臨床疾藕診斷治療方面的價(jià)值。關(guān)鍵詞：高效毛細(xì)血管電泳：藥物分析：蛋白質(zhì)分析JournalofZhejiangUniversitySchoolofBiologicalandChemicalEngineeringHangzhou310023Abstract:Capillaryelectrophoresisisahigh-techinrecentyearsinanalyticalchemistryandbio-medicineiswidelyusedinaseparateanalysis.Fromthehighperformancecapillaryelectrophoresistypes,characteristics,principlesofclinicalsamplesshouldbeso.Fully-speedtechnology,theYitermshouldbe,glgt/a,describesthedifferentcomponentsoftheanalysisofdominanceintheformerColumbia.Lotusintheclinicaldiagnosisandtreatmentofdiseasesofthevalue.Keywords:HighPerformanceCapillaryElectrophoresis:PharmaceuticalAnalysis:Proteinanalysis1引言高效毛細(xì)管電泳(HighPerformanceCapillaryElectrophoresis,HPCE)是近年來發(fā)展起來的一種分離,分析技術(shù),它是凝膠電淶技術(shù)的發(fā)展,是高效液相色譜分析的樸競。談技術(shù)可分析的成份小至有機(jī)離子,大至生物大分子如蛋白質(zhì),棱硪等。可用于分析多種體漬樣本如血清或血漿，屎，腦脊液及唾j葭等，HPCE分析高效、快速.微量。。根據(jù)其分離樣本的原理設(shè)計(jì)不同主要分為吼下幾種類型：①毛細(xì)管區(qū)帶電濠；毛細(xì)管等速電泳；毛婦管胺建電動(dòng)色譜｛毛細(xì)蕾凝膠電泳(Capillarygelelectrophoresis,CGE)；毛細(xì)蕾等電聚焦(Capillary；soejectriefocusing,ClEF)目前CZE和MECC用得較多，本文以這兩種方法為倒來說明HPCE的厚理。1技術(shù)介紹1．1基本原理毛細(xì)管電泳(CE)又稱高效毛細(xì)管電泳(HPEC)，指以高壓電場為驅(qū)動(dòng)力，以毛細(xì)管為分離通道，依據(jù)樣品中各組分之問淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)的一類液相分離技術(shù)。在電解質(zhì)溶液中，帶電粒子在電場作用下，以不同的速度向其所帶電荷相反方向遷移的現(xiàn)象叫電泳。cE所用的石英毛細(xì)管柱，在pH〉3情況下，其內(nèi)表面帶負(fù)電，和溶液接觸時(shí)形成了一雙電層。在高電壓作用下，雙電層中的水合陽離子引起流體整體地朝負(fù)極方向移動(dòng)的現(xiàn)象叫電滲。粒子在毛細(xì)管內(nèi)電解質(zhì)中的遷移速度等于電泳和電滲流(EOF)兩種速度的矢量和。正離子的運(yùn)動(dòng)方向和電滲流一致，故最先流出；中性粒子的電泳流速度為“零”，故其遷移速度相當(dāng)于電滲流速度；負(fù)離子的運(yùn)動(dòng)方向和電滲流方向相反，但因電滲流速度一般都太于電泳流速度，故它將在中性粒子之后流出，從而因各種粒子遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)分離。1．2分離模式CE有8種分離模式，分別為：毛細(xì)管區(qū)帶電泳(CZE)、毛細(xì)管凝膠電泳(cGE)、膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜(MECC,MEKC)、毛細(xì)管等電聚焦(CIEF),毛細(xì)管等速電泳(CITP)、毛細(xì)管電滲色譜(CEC)、非水毛細(xì)管電泳(NACE)、膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜。2HPCE在藥物分析中的應(yīng)用藥物是指能影響機(jī)體生理、生化和病理過程，用以預(yù)防、診斷、治療疾病和計(jì)劃生育的化學(xué)物質(zhì)，在人們的日常生活中是不可或缺的，其質(zhì)量的高低直接關(guān)系到人們的健康和生命安全，所以需要一個(gè)全面、合理、科學(xué)、安全有效的質(zhì)量監(jiān)測方法來給大家提供一個(gè)安全的用藥環(huán)境。近年來國內(nèi)外大量的科學(xué)家投入到這項(xiàng)工作中，藥物分析分離的研究工作十分活躍。中藥的成分非常復(fù)雜，一般含有糖類、油脂、維生素、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、氨基酸、無機(jī)鹽、鞣質(zhì)、生物堿、揮發(fā)油等等。目前，主要分析生物堿類、苷類、有機(jī)酸類、香豆素類、酚酸類成分。2．1生物堿類生物堿為一類含氮的有機(jī)化合物，是中草藥中一類分布較廣的化學(xué)成分，存在于自然界(一般指植物，但有的也存在于動(dòng)物)。已知的生物堿種類已超過3000種，由于其的堿性，即存在一N—基，可調(diào)節(jié)溶液的pH值，使其帶有一定的正電荷，可采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳(CZE)模式分析。有時(shí)可以使用不同的緩沖溶液及不同的pH值或加入適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)改性劑，使結(jié)構(gòu)相近的同類生物堿達(dá)到分離的目的。王峻梅等以lmm刪｛Ac+2nlmol/LNI"LAc+10inmo1/LB—CD+2lllmol/LSD緩沖液為電泳介質(zhì)，分離電壓14.OKV,用高頻電導(dǎo)法實(shí)現(xiàn)了對千金藤屬植物粉防己中粉防己堿和去甲粉防己堿兩種生物堿的測定。陳康等對10個(gè)不同產(chǎn)地麻黃樣品中麻黃堿和偽麻黃堿進(jìn)行定量分析，得出結(jié)論為不同產(chǎn)地的麻黃生物堿含量各相同，且相互間具有良好的精密度和線性關(guān)系。鄭一寧等I習(xí)摘要采用高技毛細(xì)管電泳電導(dǎo)檢測法分離麻黃堿和偽麻黃堿。初步探討了分離機(jī)理，建立了檢測方法。以檸檬酸一檸檬酸鈉為緩沖體系，銅鹽為絡(luò)合劑，在pH值為4.5、電壓13.5kV的條件下，鹽酸麻黃堿和偽麻黃堿得到了較好的分離，加人適量乙醇可改善峰形和分離效果。用該法以水揚(yáng)酰胺為內(nèi)標(biāo)，對古鹽酸麻黃堿和偽麻黃堿的實(shí)際樣品進(jìn)行檢測，回收率9713%—101.1%。2．2有機(jī)酸類有機(jī)酸成分解離后帶負(fù)電荷，可以CZE模式分析，但在中性成分后出峰，分析時(shí)間較長。采用高效CZE模式，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品在20min內(nèi)得到基線分離。陳帆等對藥用海藻羊棲菜中的氨基酸進(jìn)行分離測定，用高離子強(qiáng)度Tris硼酸緩沖溶液在優(yōu)化條件下對18種常用的氨基酸進(jìn)行分離可得到l7個(gè)峰（其中亮氨酸和異亮氨酸為1個(gè)色譜峰）°Ca。等以CZE—E法分析了滿山紅中原兒茶酸、丁香酸、香草酸等有機(jī)酸的含量。2．3苷類苷類又稱配糖體。是糖或糖的衍生物與另一類非糖物質(zhì)通過糖的端基碳原子連接而成的一類化合物。劉峻等采用膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法對不同來源得黃花倒水蓮提取物中皂昔的含量進(jìn)行了測定，在內(nèi)可以完成樣品中皂昔的含量測定。陳纘光等采用毛細(xì)管電泳安培法測定雞矢藤中熊果苷的含量。CaoYau將毛細(xì)管電泳一電化學(xué)法檢測器成功成應(yīng)用于中藥大麻的分析中，測定大麻中種活性成分和種碳水化合物。3前景高效毛細(xì)管電泳HPCE已應(yīng)用到分析、分離的各個(gè)方面，且具有高靈敏度、高速、樣品耗用量少、重現(xiàn)性好、自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)，隨著商品化儀器的不斷改進(jìn)，必將在分析領(lǐng)域得到更為廣泛的應(yīng)用。展望：HPCE技術(shù)當(dāng)八十年代以來得到迅速發(fā)展，在分析化學(xué)和生物醫(yī)藥學(xué)中已有廣泛應(yīng)用t應(yīng)用最多的是藥物分析，特剮在混合組份中藥分析分離中表現(xiàn)出其獨(dú)特的優(yōu)勢，使在臨床體寢1標(biāo)本的測定方面一直處在研究和探索階段，主要表現(xiàn)在測定標(biāo)豐的范圍不斷擴(kuò)大，測定分析條件的不斷完善。預(yù)計(jì)隨HPCE自動(dòng)分析儀的推廣和應(yīng)用，HPCE分析技術(shù)畚遵漸為臨床實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)測試所接受，以改善現(xiàn)有的測定技術(shù)。參考文獻(xiàn)羅國安，王義明．毛細(xì)管電泳的原理及應(yīng)用．色譜。1995，13(4)：254．LiuYM，ShenSJ．J．Chromatogr．A，1993，634；329-333王峻梅．毛細(xì)管電泳高頻電導(dǎo)法測