新生化儀檢測(cè)系統(tǒng)的校準(zhǔn)程序

新生化檢測(cè)系統(tǒng)的

校準(zhǔn)程序北京普朗新技術(shù)有限公司普概述：《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版指出：“不同檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)同一份檢測(cè)標(biāo)本的同一檢測(cè)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)具有可比性，這樣的檢測(cè)結(jié)果才有臨床價(jià)值”。為了確保生化儀檢測(cè)系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，并具有與公認(rèn)參考系統(tǒng)的可比性，現(xiàn)參考上海臨檢中心馮仁豐教授的有關(guān)文章，制定了本公司生化儀檢測(cè)系統(tǒng)的校準(zhǔn)程序，目的是建立一個(gè)完整的生化檢測(cè)系統(tǒng)提供給我們的客戶(hù)（尤其是原來(lái)沒(méi)有建立參考檢測(cè)系統(tǒng)的客戶(hù)）。生化檢測(cè)系統(tǒng)的校準(zhǔn)程序1.生化檢測(cè)系統(tǒng)的基本組成儀器：北京普朗全自動(dòng)生化分析儀或半自動(dòng)生化分析議試劑：北京普朗（或科華）生化試劑校準(zhǔn)品：朗道校準(zhǔn)品檢測(cè)項(xiàng)目的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)2確定溯源性的目標(biāo)

在校準(zhǔn)前，必須首先確定一個(gè)溯源性的目標(biāo)系統(tǒng)。普朗檢測(cè)系統(tǒng)目前選擇奧林帕斯（OLYMPUS）檢測(cè)系統(tǒng)（含儀器、試劑、校準(zhǔn)品等）為溯源性的目標(biāo)，即普朗檢測(cè)系統(tǒng)準(zhǔn)備使患者樣本的檢測(cè)結(jié)果向奧林帕斯檢測(cè)系統(tǒng)靠攏。（當(dāng)然用戶(hù)也可以選擇其它任何公認(rèn)的有溯源性的系統(tǒng)作為目標(biāo)系統(tǒng)，包括用戶(hù)本室的原有公認(rèn)系統(tǒng)）。3

待校準(zhǔn)檢測(cè)系統(tǒng)的準(zhǔn)備：

為實(shí)現(xiàn)校準(zhǔn)目的，必須確保待校準(zhǔn)的檢測(cè)系統(tǒng)（PUZS-300）處于正常良好的工作狀態(tài)。3.1試驗(yàn)儀器的保養(yǎng)：對(duì)新建系統(tǒng)的試驗(yàn)儀器進(jìn)行一次完整的維護(hù)和保養(yǎng)，并確認(rèn)儀器一直處于良好狀態(tài)。確保用于儀器上的各種水質(zhì)優(yōu)良（蒸餾水、洗液等）。3.2準(zhǔn)備試劑盒：應(yīng)選擇質(zhì)量長(zhǎng)期穩(wěn)定并獲得出廠合格證的，性能良好的試劑。校準(zhǔn)時(shí)，最好使用新批次的試劑盒（保證有足夠的量）,并編寫(xiě)完整和詳細(xì)的操作規(guī)程。3.3質(zhì)量控制：所有校準(zhǔn)過(guò)程都必須有分析過(guò)程的質(zhì)量控制。確保在同批實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果處于在控的前提下采集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，否則，應(yīng)停止實(shí)驗(yàn)。3.4系統(tǒng)評(píng)價(jià)：應(yīng)該對(duì)新建系統(tǒng)的可報(bào)告范圍、精密度、準(zhǔn)確度進(jìn)行初期評(píng)價(jià)，尤其是精密度CV值應(yīng)小于CLIA`88規(guī)定值（以確保校準(zhǔn)效果；CLIA`88規(guī)定的指標(biāo)見(jiàn)有關(guān)資料。如已有數(shù)據(jù)證明以上性能指標(biāo)可被接受，可免做此評(píng)價(jià)）。3.5注意

為了克服基質(zhì)差異對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，在實(shí)現(xiàn)溯源性的目標(biāo)過(guò)程中，切記：永遠(yuǎn)以患者的新鮮標(biāo)本為實(shí)驗(yàn)對(duì)象、永遠(yuǎn)以方法學(xué)比較實(shí)驗(yàn)方式為驗(yàn)證手段（參考EP9-A《用患者標(biāo)本進(jìn)行方法比較和偏倚評(píng)估》）。4校準(zhǔn)步驟4.1目標(biāo)實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備

若確定以?shī)W林帕斯檢測(cè)系統(tǒng)為實(shí)現(xiàn)溯源性的目標(biāo)系統(tǒng)，則應(yīng)事先與正在使用奧林帕斯檢測(cè)系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室取得聯(lián)系：準(zhǔn)備足夠量的臨床新鮮血樣本（一般規(guī)定40例，為了減少工作量，建議＞20例即可），選擇需要校準(zhǔn)的檢測(cè)項(xiàng)目（自己規(guī)定的項(xiàng)目），在目標(biāo)系統(tǒng)處于受控狀態(tài)的情況下，連續(xù)對(duì)臨床新鮮血樣本檢測(cè)3次以上，取平均值（確保樣本定值準(zhǔn)確可靠）。4.2臨時(shí)校準(zhǔn)品的確定：在目標(biāo)實(shí)驗(yàn)室送來(lái)的新鮮血標(biāo)本中選分析物含量適中的某個(gè)新鮮血標(biāo)本為臨時(shí)校準(zhǔn)品，并用目標(biāo)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的平均值作為臨時(shí)校準(zhǔn)值。4.3對(duì)自建系統(tǒng)（如PUZS-300）的臨時(shí)校準(zhǔn)：在自建系統(tǒng)上，以該新鮮血清為臨時(shí)校準(zhǔn)品，用目標(biāo)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的均值為校準(zhǔn)值，對(duì)自建檢測(cè)系統(tǒng)（儀器、試劑）進(jìn)行校準(zhǔn)。（這樣就利用已具有溯源性結(jié)果的新鮮血標(biāo)本，完成了在新建系統(tǒng)上準(zhǔn)確度的溯源性傳遞。）4.4臨時(shí)校準(zhǔn)后的驗(yàn)證對(duì)取得的其余臨床患者血清（內(nèi)含分析量最好分布于整個(gè)可報(bào)告范圍）在自建系統(tǒng)上進(jìn)行雙份平行檢測(cè)，取均值。然后與目標(biāo)系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行方法學(xué)比較（參考EP9-A），如果此時(shí)：①回歸統(tǒng)計(jì)的相關(guān)系數(shù)r＞0.975；斜率接近1（建議±0.03）；而且截距小（建議≤下限值的5-10%）；②用回歸方程計(jì)算出的系統(tǒng)誤差（在臨床決定水平附近），不超過(guò)CLIA`88允許總誤差的1/2；CV值不超過(guò)CLIA`88/4。說(shuō)明臨時(shí)校準(zhǔn)成功。如果還沒(méi)有達(dá)到要求，應(yīng)對(duì)臨時(shí)校準(zhǔn)品的血清再次用目標(biāo)系統(tǒng)檢測(cè)，觀察有無(wú)偏倚，糾正后，重復(fù)上述的實(shí)驗(yàn)，直到成功。5.建立自建系統(tǒng)的穩(wěn)定校準(zhǔn)品

5.1

因?yàn)榕R床新鮮血不可能長(zhǎng)期作為校準(zhǔn)品，所以在以上實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，選定一種穩(wěn)定的校準(zhǔn)品，是保持自建檢測(cè)系統(tǒng)可持續(xù)溯源至目標(biāo)檢測(cè)系統(tǒng)的關(guān)鍵。普朗生化檢測(cè)系統(tǒng)現(xiàn)在選擇朗道校準(zhǔn)品（當(dāng)然也可選擇其它廠家的產(chǎn)品）作為自建檢測(cè)系統(tǒng)的穩(wěn)定校準(zhǔn)品（自建校準(zhǔn)品）。應(yīng)特別說(shuō)明的是：購(gòu)買(mǎi)的朗道校準(zhǔn)品，只是把它當(dāng)做正確度傳遞的工具，只要求瓶間差小、內(nèi)含分析物穩(wěn)定，根本不采用原公司的標(biāo)定值。5.2用自建校準(zhǔn)品的最終校準(zhǔn)

5.2.1自建校準(zhǔn)品的標(biāo)定值

按照使用說(shuō)明書(shū)要求，復(fù)溶朗道校準(zhǔn)品。將校準(zhǔn)品當(dāng)作一個(gè)樣品，在經(jīng)臨時(shí)校準(zhǔn)血清校準(zhǔn)后的自建系統(tǒng)上進(jìn)行多次檢測(cè)（3次以上），取平均值作為標(biāo)定值。

5.2.2對(duì)自建檢驗(yàn)系統(tǒng)的再次校準(zhǔn)在保持原自建檢驗(yàn)系統(tǒng)不變的情況下（儀器、試劑盒、操作程序），用朗道校準(zhǔn)品在自建系統(tǒng)上的檢測(cè)均值（自建校準(zhǔn)品的標(biāo)定值），再次對(duì)自建檢驗(yàn)系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)。5.3自建校準(zhǔn)品校準(zhǔn)后的驗(yàn)證

經(jīng)自建校準(zhǔn)品校準(zhǔn)后，再次對(duì)獲得的患者血清進(jìn)行自建系統(tǒng)和奧林帕斯系統(tǒng)進(jìn)行方法學(xué)比較（同上），驗(yàn)證合格說(shuō)明“自建校準(zhǔn)品”對(duì)“自建檢測(cè)系統(tǒng)”校準(zhǔn)成功。如果方法學(xué)比較結(jié)果，不如使用新鮮血清為臨床校準(zhǔn)品的比較結(jié)果，說(shuō)明對(duì)朗道校準(zhǔn)品的檢測(cè)值還不是最佳值?？梢愿鶕?jù)所有標(biāo)本結(jié)果差異分布上的趨勢(shì)，對(duì)其檢測(cè)值做微小的調(diào)整，再進(jìn)行方法學(xué)比較實(shí)驗(yàn)。如此反復(fù)的實(shí)驗(yàn)直至符合要求。6校準(zhǔn)完成自此，我們建立了普朗的完整檢測(cè)系統(tǒng)（普朗生化儀、普朗試劑、自建校準(zhǔn)品（朗道）和操作規(guī)程）。為了使自建系統(tǒng)能長(zhǎng)期保持溯源性，應(yīng)該用自建校準(zhǔn)品對(duì)自建檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行定期校準(zhǔn)，所以購(gòu)買(mǎi)的朗道校準(zhǔn)品，一個(gè)批次最好有足夠的量。切記：1）一直保持自建檢測(cè)系統(tǒng)的穩(wěn)定性；2）在以后對(duì)自建檢測(cè)系統(tǒng)校準(zhǔn)時(shí)，只使用在該系統(tǒng)上測(cè)定的標(biāo)定值，決不能用朗道公司提供的標(biāo)定值。7日常校準(zhǔn)

本檢測(cè)系統(tǒng)投入使用以后，遇到以下情況時(shí)應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn)：正常條件下的定期校準(zhǔn)、更換試劑盒批號(hào)、出現(xiàn)失控、儀器保養(yǎng)和更換關(guān)鍵零部件后、操作人員變動(dòng)、更換校準(zhǔn)品批次等。

7.1正常條件下的定期校準(zhǔn)

在保持自建檢測(cè)系統(tǒng)不變的情況下，直接用自建校準(zhǔn)品對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)。

7.2

更換試劑盒時(shí)的校準(zhǔn)

首先在原儀器上用原試劑和新試劑對(duì)同一批臨床新鮮血清標(biāo)本進(jìn)行方法學(xué)比較實(shí)驗(yàn)。

1.如果檢測(cè)結(jié)果具有可比性（誤差可被接受），說(shuō)明兩試劑間無(wú)差異，可直接用新試劑對(duì)臨床樣本進(jìn)行檢測(cè)。

2.如果檢測(cè)結(jié)果具有明顯差異：

a)在原系統(tǒng)上（不含原試劑）用新試劑重新校準(zhǔn)，并進(jìn)行比較實(shí)驗(yàn)；

b)如果仍具有明顯差異，說(shuō)明新試劑與原試劑有顯著差異。應(yīng)以原系統(tǒng)為目標(biāo)系統(tǒng)，按規(guī)定的校準(zhǔn)程序重新校準(zhǔn)（包括修正自建校準(zhǔn)品的定值）。（其它類(lèi)型的校準(zhǔn)可參照本原則根據(jù)實(shí)際情況處理。）校準(zhǔn)流程圖見(jiàn)下頁(yè)。

結(jié)束語(yǔ)：這樣，包括儀器、試劑盒、自建校準(zhǔn)品和操作程序，我們建立了普朗的完整檢測(cè)系統(tǒng)，并確保該系統(tǒng)對(duì)患者標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果可以溯源至奧林帕斯系統(tǒng)。因?yàn)閵W林帕斯系統(tǒng)對(duì)患者新鮮血標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果可以溯源至參考系統(tǒng)，因此，我們的自建檢測(cè)系統(tǒng)也實(shí)現(xiàn)了可溯源至參考系統(tǒng)的目的。

北京普朗公司技術(shù)部2010.01