GB/T 5009.158-2003蔬菜中維生素K1的測定

ICS67.040C53中華人民共和國國家標準GB/T5009.158-2003蔬菜中維生素K，的測定DeterminationofvitaminK,invegetables2003-08-11發(fā)布2004-01-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國國國家標準菜中維生素K,的測定GB/T5009.158-2003中中國標準出版社出版發(fā)行北京西城區(qū)復興門外三里河北街16號郵郵政編碼：100045電話：63787337、637874472004年8月第一版2004年11月電子版制作書號：155066·1-21574版權(quán)專有侵權(quán)必究舉報電話：（010)68533533

GB/T5009.158-2003前本標準對應于AOAC.45維生素和營養(yǎng)素部分食物中維生素D的測定(1995年英文版),本標準與AOAC.45的一致性程度為非等效。本本標準由中華人民共和國衛(wèi)生部提出并歸口本標準起草單位：中國預防醫(yī)學科學院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所本標準主要起草人：王竹、王光亞、周瑞華、王國棟、楊月欣。

GB/T5009.158-2003本標準參考AOAC.45維生素和營養(yǎng)素部分食物中維生素D的測定(1995年版)的前處理過程,以磷酸鹽處理過的氧化鋁為色譜柱.應用高效液相色譜反相柱對蔬菜中維生素K，進行定性及定量分析

GB/T5009.158—2003蔬菜中維生素K，的測定范圍本標準規(guī)定了蔬菜中維生素K，的測定方法本標準適用于各類蔬菜、綠色植物及其干制品中維生素K，的測定本標準方法出限為0.5g，線性范圍為1Pg/mL～100g/mL.原理蔬菜中的維生素K，經(jīng)石油醚提取后,注入經(jīng)磷酸鹽處理的氧化鋁色譜柱中進行色譜分離，除去干擾物。收集含維生素K，的淋洗液流分.濃縮定容后注入高效液相色譜柱，用紫外檢測器,在248Dm處測定。以外標法計算試樣中維生素K，的含量。武劑和材料色譜用水和有機溶劑使用前均需重新蒸。無無水硫酸鈉：使用前需在150℃的烘箱內(nèi)烘烤4h～8h,以去除水分。3.2.14mol/L硫酸鈉溶液：稱取20無水硫酸鈉,用蒸留水溶解后定容至1L3.3丙酮3.4石油醚：沸程30C~60C、3.5乙醚：不含過氧化物3.5.1過氧化物的檢查方法:用5mL乙醚加1ml.0.6mol/L碘化鉀溶液，振搖1min,如有過氧化物則放出游離碘，水層呈黃色?；蚣?滴5g/L淀粉液，水層呈藍色。則該乙醚含有過氧化物需處理后使用。3.5.2去除過氧化物的方法：重蒸時瓶中加一段純鐵絲·棄去首尾10%部分·收集留出的乙醚。再檢查過氧化物·應符合要求。3.6洗脫液：石油醚+乙醚（97+3）37甲醇：優(yōu)級純。3.8正己烷：優(yōu)級純3.9中性氧化鋁：層析用.100目～200目3.9.1氧化鋁的處理：取250g中性氧化鋁.20g磷酸氫二鈉,1.6L水，放入容積為2L的錐形瓶中.置于沸水浴30min.不時搖動。冷卻.倒掉上層液體(包括懸浮的細小顆粒).然后用布氏漏斗抽濾。將殘留物轉(zhuǎn)至平底玻璃血中.于150℃干燥箱中烘烤3h～5h至兩次稱量相差3g以下。烘烤過程中不時攪拌，以避免結(jié)塊冷卻后放入干燥器中保存。3.9.2失活:將磷酸鹽處理的氧化鋁(3.9.1).加入具塞錐形瓶中。按每100g氧化鋁加9.0mL水的比例加入去離子水,蓋緊瓶塞,蒸汽浴或80C干燥箱加熱3min～5min,劇烈搖動錐形瓶，使氧化鋁可以自由流動.無結(jié)塊。冷卻.靜置30min使水分分布均勾。3.9.3氧化鋁的檢驗：取標準使用液1.0mL.用氮氣(3.11)吹干，再用石油醚(3.4)溶解定容至1.0mL.然后按裝柱,將標準溶液加入柱上·按色譜分離步驃進行柱色譜,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶(4.5.1)收集含有維生素K，的洗脫分,濃縮，氮氣吹干,用正己烷(3.8)定容至1.0mL。進樣HPLC測定,記錄峰面積或峰