LY/T 2745-2016仁用杏品種鑒定技術(shù)規(guī)程SSR分子標(biāo)記法

ICS67060

B21.

中華人民共和國(guó)林業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

LY/T2745—2016

仁用杏品種鑒定技術(shù)規(guī)程

SSR分子標(biāo)記法

Identificationofkernel-usingapricotcultivars—SSRmarkermethod

2016-10-19發(fā)布2017-01-01實(shí)施

國(guó)家林業(yè)局發(fā)布

LY/T2745—2016

目次

前言

…………………………Ⅰ

范圍

1………………………1

術(shù)語(yǔ)和定義

2………………1

原理

3………………………1

儀器設(shè)備與主要試劑耗材

4、………………2

溶液配置

5…………………2

核心引物

6…………………2

操作步驟

7…………………2

指紋比對(duì)

8…………………3

結(jié)果判定

9…………………4

附錄資料性附錄儀器設(shè)備與主要試劑耗材

A()、………5

附錄資料性附錄溶液配置

B()…………6

附錄規(guī)范性附錄核心引物

C()…………8

附錄資料性附錄仁用杏品種指紋圖譜鑒定報(bào)告書

D()SSR………10

參考文獻(xiàn)

……………………11

LY/T2745—2016

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家林業(yè)局歸口

。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院經(jīng)濟(jì)林研究開發(fā)中心北京林業(yè)大學(xué)

:、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人傅大立劉夢(mèng)培秦玥朱高浦趙罕

:、、、、。

Ⅰ

LY/T2745—2016

仁用杏品種鑒定技術(shù)規(guī)程

SSR分子標(biāo)記法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了利用簡(jiǎn)單重復(fù)序列分子標(biāo)記法鑒定仁用杏

(Simplesequencerepeats,SSR)

Armeniacacathayana品種的技術(shù)規(guī)程

(D.L.Fuetal.)。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于仁用杏品種的分子指紋比對(duì)鑒定

SSR。

2術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

。

21

.

待檢品種testcultivar

待鑒定的仁用杏品種由送檢人提供

,。

22

.

對(duì)照品種comparingcultivar

用于與待檢品種進(jìn)行指紋比對(duì)的若干品種待檢品種為新品種則對(duì)照品種為近似品種待檢品種

(,;

為假冒品種則對(duì)照品種為真品種由送檢人或他人提供

,),。

23

.

核心引物coreprimer

擴(kuò)增產(chǎn)物具有高度的穩(wěn)定性和一致性沒(méi)有干擾譜帶并具有較強(qiáng)鑒別能力可以用于建立仁用杏

(),,

指紋比對(duì)的人工合成引物

。

24

.

指紋圖譜SSRfingerprint

采用核心引物或相當(dāng)于核心引物擴(kuò)增出的待檢品種和對(duì)照品種的片段通過(guò)聚丙烯

SSR()DNA,

酰胺電泳或毛細(xì)管電泳得到不同大小的片段圖譜

,DNA。

25

.

指紋比對(duì)SSRfingerprinting

將待檢品種與對(duì)照品種的指紋圖譜進(jìn)行比對(duì)分析待檢品種與對(duì)照品種的指紋是否具

SSR,SSR

有差異并確定其大小

,。

3原理

簡(jiǎn)單重復(fù)序列分子標(biāo)記通常又稱為微衛(wèi)星標(biāo)記分布于仁用杏整個(gè)基因組的不同位置

(SSR),“”,,

不同品種每個(gè)位點(diǎn)上重復(fù)單位的數(shù)量可能不同因而形成標(biāo)記的多態(tài)性由于每個(gè)簡(jiǎn)單重復(fù)序列

,SSR。

兩端的序列是高度保守的單拷貝序列因此可根據(jù)其兩端的序列設(shè)計(jì)特異引物利用技術(shù)對(duì)兩條

,,PCR

引物間的重復(fù)序列進(jìn)行擴(kuò)增通過(guò)電泳分離得到大小不同的擴(kuò)增產(chǎn)物片段經(jīng)熒光染料標(biāo)記加以

DNA