NY/T 559-2002禽曲霉菌病診斷技術(shù)

NY中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準NY/T559—2002禽曲霧菌病診斷技術(shù)Diagnostictechniquesforavianaspergillosis2002-08-27發(fā)布2002-12-01實施中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)：布

NY/T559-2002可禽曲莓菌病(avianaspergilosis）是多種食類、哺乳動物和人畜共惠的一種真菌病。主要侵害呼吸系統(tǒng)，在肺和氣囊發(fā)生炎癥和小結(jié)節(jié)，導(dǎo)致呼吸困難，甚至室息死亡。病原體主要為曲莓屬（Aspergillus)中的煙曲爵(A./umigalws)和黃曲霉（A./auus），其次為構(gòu)巢曲鑫（A.midrlans）、黑曲露（A.iger)和土曲蛋（A.emeus)等。本病發(fā)生于世界各地，對維雞的危害最大，可引起幼錐大批死亡，造成重大經(jīng)濟損失。對曲霉菌病的診斷，近年來提出了一些新技術(shù)。但是，各國確定的常用方法，仍是本標準規(guī)定的病理學檢查和病原學檢查。病理學檢查(包括在病變組織內(nèi)發(fā)現(xiàn)曲霉菌)可以確定病性,病原學檢查不僅可以提高診斷率，而且能夠鑒定曲莓菌菌種。國際上無相應(yīng)的診斷標準或規(guī)范可供參照。本標準的實施，對提高我國食曲莓菌病的診斷水平，保證養(yǎng)禽業(yè)健康發(fā)展，將起到重要的作用。本標準的附錄A、附錄B為規(guī)范性附錄。本標準由農(nóng)業(yè)部畜牧售醫(yī)局提出。本標準由全國動物檢疫標準化技術(shù)委員會歸口本標準起草單位：中國人民解放軍軍需大學。本標準主要起草人：宣華、向華

NY/T559-2002禽曲要菌病診斷技術(shù)1范圍本標準規(guī)定了禽曲蛋菌病病理學和病原學檢查的技術(shù)要求.本標準適用于禽（鳥)類曲霉菌病的診斷和檢疫。病理學檢盤2.1材料準備2.1.1器材小動物解部器具，滅菌試管(供采集真菌學檢查樣品用)普通顯微鏡等2.1.2試劑體積分數(shù)為10%的甲醛溶液.30%甘油緩沖溶液，其配方見附錄A。2.2尸體刮檢方法按照常規(guī)的食類尸體部檢術(shù)式，將可疑病禽的各內(nèi)臟器官取出·逐一檢查。重點檢查呼吸系統(tǒng)。如發(fā)現(xiàn)可疑病變.先取1份置于無菌中試管內(nèi)或30%甘油緩沖溶液（見第A.1章)中，供病原學檢查用，再取1份置入10%甲醛溶液內(nèi)，供病理組織學檢查用。2.3主要病理變化禽曲霉菌病的病變主要見于呼吸系統(tǒng)，在肺臟和氣囊形成數(shù)最不等、栗粒大至綠豆粒大的結(jié)節(jié)，結(jié)節(jié)質(zhì)地較硬.切面墾同心圓輪層狀。顯微鏡檢查，見結(jié)節(jié)周邊為淋巴細胞、多核巨細胞和成纖維細胞構(gòu)成的肉芽組織，中央為干酪樣壞死區(qū)，內(nèi)含大量的爵菌菌絲。可在氣囊、氣管、支氣管、肺臟及腹膜表面形成大小不一的番菌斑·菌斑上有灰綠色粒狀物或絨球狀物。此外，有時在眼臉內(nèi)、肝、牌、腎、消化系統(tǒng)乃至神經(jīng)系統(tǒng)表面也能發(fā)現(xiàn)類似的結(jié)節(jié)或菌斑病變。3病原學檢盤3.1材料準備3.1.1器材載玻片，蓋玻片，培養(yǎng)血，鉑金耳或針，恒溫箱，手術(shù)刀，普通顯微鏡等。3.1.2試劑220%氫氧化鉀溶液,乳酸酚棉藍染色液,沙保勞（Sabouraud）氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基或改良察貝克（Czapek)氏瓊脂培養(yǎng)基等，其配制方法見附錄A。3.1.3樣品采集對病理學檢查可疑的病禽，應(yīng)無菌操作采取帶有病變(如結(jié)節(jié)、霉菌斑等)的組織各數(shù)小塊，置于滅菌容器(如中試管)內(nèi)冷藏.并盡快送檢，如果不能立即送檢，可皆時保存于30%甘油緩沖液中。3.2檢查方法3:2.1壓滴標本法取結(jié)節(jié)暨于載玻片上，用手術(shù)刀切開，由切面刮取干酪樣壞死組織，或由病變組織表面刮取莓菌斑，或用鉑金針鉤取純培養(yǎng)物置于載玻片