標準解讀

《WS/T 360-2011 流式細胞術檢測外周血淋巴細胞亞群指南》是由中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布的行業(yè)標準,主要針對使用流式細胞術進行外周血中不同類型的淋巴細胞(如T細胞、B細胞和NK細胞等)的定量分析提供了指導。該文件詳細規(guī)定了從樣本采集到數(shù)據(jù)報告整個過程中的技術要求與操作規(guī)范。

在樣本準備方面,強調(diào)了正確選擇抗凝劑的重要性,并指出EDTA-K2是推薦使用的類型之一;同時,對于血液樣本的處理時間也給出了建議,通常應在采血后4小時內(nèi)完成染色步驟以保證結(jié)果準確性。

關于抗體標記的選擇,《WS/T 360-2011》推薦使用直接熒光標記的方法來識別特定的細胞表面標志物或胞內(nèi)分子,通過多個參數(shù)組合可以更準確地區(qū)分不同的淋巴細胞亞群。此外,還特別提到了對照設置的重要性,包括同型對照、未染色對照以及單陽性對照等,這些都有助于減少非特異性結(jié)合帶來的誤差。

質(zhì)量控制方面,本標準提出了一系列措施確保實驗結(jié)果可靠有效。比如定期校準儀器性能、參與室間質(zhì)評活動、建立并維護實驗室內(nèi)部的質(zhì)量管理體系等。同時也指出了數(shù)據(jù)分析時應注意的問題,如設定合適的門控策略、合理解釋異常值等。


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....

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  • 已被廢除、停止使用,并不再更新
  • 2011-12-14 頒布
  • 2012-06-01 實施
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文檔簡介

ICS11020

C50.

中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準

WS/T360—2011

流式細胞術檢測外周血淋巴細胞亞群指南

Guidelinesforperipherallymphocytesubsetsbyflowcytometry

2011-12-14發(fā)布2012-06-01實施

中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布

WS/T360—2011

目次

前言…………………………

范圍………………………

11

術語和定義………………

21

試劑………………………

32

標本采集和處理…………………………

43

細胞絕對計數(shù)方法………………………

55

免疫熒光染色……………

66

對照標本…………………

77

流式細胞儀的質(zhì)量控制…………………

88

標本和數(shù)據(jù)分析…………………………

910

臨床意義………………

1013

結(jié)果報告和審核………………………

1114

數(shù)據(jù)儲存………………

1214

室內(nèi)質(zhì)量控制…………………………

1315

室間質(zhì)量評價…………………………

1415

人員培訓要求…………………………

1515

附錄資料性附錄四色抗體組合方案進行淋巴細胞亞群分析的示意散點圖……

A()16

參考文獻……………………

17

WS/T360—2011

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由衛(wèi)生部臨床檢驗標準專業(yè)委員會提出

。

本標準主要起草單位中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)院

:。

本標準主要起草人崔巍黃春梅王斐楊卓陳倩

:、、、、。

WS/T360—2011

流式細胞術檢測外周血淋巴細胞亞群指南

1范圍

本標準規(guī)定了流式細胞術檢測外周血淋巴細胞亞群細胞細胞細胞+細胞和

(T、B、NK、CD4T

+細胞的技術要點包括標本采集和運輸免疫熒光染色技術流式細胞儀檢測和分析結(jié)果報

CD8T),、、、

告和審核等方面

。

2術語和定義

下列術語和定義適用于本文件

。

21

.

分化抗原clusterofdifferentiationCD

,

不同譜系細胞在分化成熟活化過程中出現(xiàn)或消失的細胞表面標志細胞表面標志通常用單克

、、,。

隆抗體來識別每個抗體都有指定的編號能被特定抗體識別的特定抗原通常具有相同的編號例

。CD,,

如被抗體識別的抗原稱為抗原

,“CD1”“CD1”。

22

.

前向散射光forwardanglelightscatterFALSFSCFS

、、

光學檢測器在入射光的正前方所收集的低角度光信號與細胞或顆粒的大小和體積有關

,。

23

.

側(cè)向散射光sidescatterSSC

,

光學檢測器在入射光的直角處所收集的細胞散射的光信號與細胞或顆粒的內(nèi)部和表面結(jié)構(gòu)復雜

,

程度有關如細胞質(zhì)顆粒性膜不規(guī)則性及核形等

,、。

24

.

熒光強度fluorescenceintensity

結(jié)合到細胞或顆粒上的熒光素的量熒光信號的通道數(shù)越大提示熒光強度越強在恰當?shù)臈l件

。。

下熒光強度與一個細胞和特定熒光素相結(jié)合的位點數(shù)相關

,。

25

.

自發(fā)熒光autofluorescence

未染色細胞自身發(fā)出的熒光通常由嘧啶和黃素核苷酸所產(chǎn)生自發(fā)熒光的強度取決于激發(fā)光的

。,

波長且隨所分析細胞的類型和或細胞活化狀態(tài)而改變通過特殊的標本處理方法可以降低自發(fā)熒

,()。

光的強度如用結(jié)晶紫孵育

()。

26

.

顏色補償colorcompensation

由于一種熒光素發(fā)射的熒光疊加到其他熒光素發(fā)射的波長范圍內(nèi)而造成熒光信號重疊

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