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文檔簡介
動物細胞工程1220日抗體等,其中動物細胞培育技術是其它動物細胞工程技術根底。一、動物細胞培育讓這些細胞生長和增殖。2、原理:細胞增殖3、過程分散成單個細胞,留意:①10代以內細胞保持正常二倍體核型,無突變發(fā)生,常見于實踐或冷凍保存。②超出50代,極少數(shù)細胞突破自然壽命極限,突變成癌細胞,含有沒有限增殖力量;假設超出50代,細胞不再增殖,全部死亡,則說明細胞沒有發(fā)生癌變。思考回復:⑴、為何選擇幼齡動物組織或胚胎進展細胞培育?答:其細胞分化程度低,增殖力量強,有絲分裂旺盛,輕易培育。⑵、動物細胞培育需要脫分化嗎?為何?胞,使其分化成所需要組織或器官。白酶行嗎?答:關鍵是蛋白質,不行,由于胃蛋白酶作用適宜PH26PH7.2-8.4,胰蛋白酶活性較高〕⑷、胰蛋白酶真不會把細胞消化掉嗎?為何?所以必需掌握好消化時間。不能,動物細胞培育只能使細胞數(shù)目增多,不能發(fā)育成動物個體4、關鍵概念①細胞貼壁:懸液中分散細胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細胞貼壁。培育要求:培育瓶或培育皿內外表光滑、無毒,易于貼附。象稱為細胞接觸抑制。③原代培育:動物組織消化后首次培育連續(xù)培育,讓細胞連續(xù)增殖,這種培育叫傳代培育。5、培育條件:——對培育液和全部培育用具進展無菌處理;在細胞培育液中添加肯定量抗生素。;無毒——定時更換培育液,預防細胞代謝產物積存對本身造成危害。⑵養(yǎng)分:元素等,還需參加血清、血漿等自然成份。培育基類型:合成培育基〔將細胞所需養(yǎng)分物質按其種類和所需數(shù)量嚴格配制而成培育基〕⑶溫度和pH值:哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜,多數(shù)細胞生存適宜pH為7.2~7.4。95%空氣加5%CO2混合氣體培育箱中進展培育。O2:是細胞代謝所必需CO2關鍵作用是維持培育液pH。細胞培育。用于檢測有毒物質,判定某種物質毒性。科學家培育正?;蚨喾N病變細胞,用于生理、病理、藥理等方面爭論,如用于篩選抗癌藥品等,為診療和預防癌癥及其它疾病供給理論依據(jù)?!镏参锝M織培育和動物細胞培育比較原理培育基性質培育結果
細胞全能性固體培育基植物體
細胞增殖液體培育基細胞株、細胞系培育目標二、動物細胞核移植技術
1.概念:將動物一個細胞細胞核移入一個已經去掉細胞核卵母細胞中,使其重組并發(fā)育成一個胚胎,這個胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植方法得到動物稱為克隆動物。2、原理:動物細胞核全能性3、動物細胞核移植可分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植。性相對輕易,動物體細胞分化程度高,恢復其全能性格外困難。4、體細胞核移植過程:〔以克隆高產奶牛為例〕〔10代以內細胞〕將供體細胞注入去核卵母細胞體卵母細胞。〔留意:合,表現(xiàn)細胞膜構造特點:含有肯定流淌性。同時連同第一極體一并去掉。③該技術形成重組細胞發(fā)育成一個個體,表現(xiàn)了細胞核全能性而非動物細胞全能性。a.卵母細胞體積大,便于操作;b.含有促進細胞核表示全能性物質;c.養(yǎng)分物質豐富思考回復:⑴、為何不能直接利用動物細胞培育動物體?需要借助核移植來實現(xiàn)。100%復制嗎?為何?克隆動物絕大局部DNA來自于供體細胞核,但其核外還有少許DNA即線粒體中DNA來自于受體卵母細胞。所以不是供核動物完全一樣復制。另外,即便動物遺傳根底完全一樣,但動物局部行為、習性形成和所處環(huán)境有很大關系,供核動物生活環(huán)境和克隆動物所生活環(huán)境中有可能發(fā)生基因突變,產生供體動物沒有性狀。基于上述三個方面緣由,克隆動物不會是100%復制。5、應用:⑴畜牧業(yè):能夠加速家畜遺傳改進進程,促進優(yōu)良畜群繁育⑵保護瀕危物種:可望利用體細胞核移植技術增加瀕危動物存活數(shù)量。組織和器官可作為異種移植供體;人核移植胚胎干細胞經過誘導分化,形成對應組織、器官后,可用于組織器官移植。做疾病模型能使大家愈
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