藥物分析雜環(huán)類藥物

第1節(jié)吡啶類藥物

一、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)異煙肼

尼可剎米

均含吡啶環(huán)第1頁(yè)/共38頁(yè)第一頁(yè)，共39頁(yè)。二、性質(zhì)（1）吡啶環(huán)上N原子：弱堿性pKb～8.8，可用非水滴定法測(cè)定含量或與重金屬鹽的沉淀反應(yīng)鑒別（2）吡啶環(huán)可發(fā)生開(kāi)環(huán)反應(yīng)，可用于吡啶類藥物的鑒別（3）共軛結(jié)構(gòu)：UV、IR吸收（4）水解性：易水解，遇堿水解后，釋放二乙胺，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變藍(lán)色，故可進(jìn)行鑒別。第2頁(yè)/共38頁(yè)第二頁(yè)，共39頁(yè)。三、鑒別試驗(yàn)（一）酰肼基團(tuán)的反應(yīng)（異煙肼的鑒別）

1.氨制硝酸銀的反應(yīng)

氨制AgNO3+H2NNH2H2NNH24AgNO34Ag↓+N2

↑+4HNO3發(fā)生氣泡與黑色渾濁，并在試管壁上生成銀鏡第3頁(yè)/共38頁(yè)第三頁(yè)，共39頁(yè)。2.縮合反應(yīng)

異煙肼+香草醛-H2O異煙腙（黃色）熔點(diǎn)為228～231℃3.紅外光譜法鑒別方法：取異煙肼約0.1g，加水5ml溶解后，加10％香草醛的乙醇溶液1ml，搖勻，微熱，放冷，即析出黃色結(jié)晶；濾過(guò)，用稀乙醇重結(jié)晶，在105℃干燥后，依法測(cè)定熔點(diǎn)，熔點(diǎn)為228～231℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。第4頁(yè)/共38頁(yè)第四頁(yè)，共39頁(yè)。異煙肼的紅外光譜圖第5頁(yè)/共38頁(yè)第五頁(yè)，共39頁(yè)。（二）尼可剎米的鑒別1.水解反應(yīng)

尼可剎米二乙胺（臭氣）

能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變藍(lán)NaOH△2.戊烯二醛反應(yīng)

方法：取本品1滴，加水50ml，搖勻，分取2ml，加溴化氰試液2ml與2.5％苯胺溶液3ml，搖勻，溶液漸顯黃色。第6頁(yè)/共38頁(yè)第六頁(yè)，共39頁(yè)。四、雜質(zhì)檢查1.異煙肼中游離肼的檢查雜質(zhì)來(lái)源:原料引入、降解產(chǎn)生

雜質(zhì)對(duì)照比較法（硫酸肼法）雜質(zhì)限量為0.02%。2.尼可剎米中有關(guān)物質(zhì)的檢查主要是合成的副產(chǎn)物乙基煙酰胺

采用自身稀釋對(duì)照法檢查供試品硫酸肼第7頁(yè)/共38頁(yè)第七頁(yè)，共39頁(yè)。五、含量測(cè)定（一）異煙肼原料藥及其制劑含量測(cè)定1.異煙肼原料藥

《中國(guó)藥典》2005版：異煙肼原料藥制劑溴酸鉀法原理：異煙肼具有還原性，在強(qiáng)酸性介質(zhì)中可被溴酸鉀氧，溴酸鉀被還原為溴化鉀。終點(diǎn)時(shí)微過(guò)量的溴酸鉀可將粉紅色的甲基橙指示劑氧化，以粉紅色消失指示終點(diǎn)的到達(dá)。第8頁(yè)/共38頁(yè)第八頁(yè)，共39頁(yè)。測(cè)定方法：取本品約0.2g，精密稱定，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度。搖勻；精密量取25ml，加水50ml、鹽酸20ml與甲基橙指示液1滴，用溴酸鉀滴定液(0.01667mol/L)緩緩滴定（溫度保持在18～25℃）至粉紅色消失。每1ml溴酸鉀滴定液(0.01667mol/L)相當(dāng)于3.429mg的C6H7N3O。注意事項(xiàng)：1.溫度應(yīng)控制在18℃～25℃，緩緩滴定并充分振搖，防止局部濃度過(guò)高終點(diǎn)提前；2.甲基橙為不可逆的氧化還原指示劑，到終點(diǎn)后，補(bǔ)加一滴指示劑，如顏色褪去即可，否則未到終點(diǎn)；3.加入鹽酸是滴定反應(yīng)的基本條件。第9頁(yè)/共38頁(yè)第九頁(yè)，共39頁(yè)。（二）尼可剎米原料藥及其制劑含量測(cè)定《中國(guó)藥典》2005版：

原料藥非水滴定法

尼可剎米注射液紫外分光光度法1.原料藥含量測(cè)定：原理：尼可剎米分子中的吡啶環(huán)具有堿性，在冰醋酸溶液中與高氯酸定量反應(yīng)生成高氯酸鹽，以結(jié)晶紫為指示劑指示終點(diǎn)。方法：取本品約0.15g，精密稱定，加冰醋酸10ml與結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯藍(lán)綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于17.82mg的C10H14N2O。第10頁(yè)/共38頁(yè)第十頁(yè)，共39頁(yè)。2.尼可剎米注射液的含量測(cè)定：原理：為避免注射液中的水分對(duì)非水滴定法的干擾，尼可剎米分子中的吡啶環(huán)為共軛體系，故采用吸收系數(shù)測(cè)定含量。方法：用移液管精密量取本品2ml，置200ml量瓶中，用0.5％硫酸溶液分次洗滌移液管內(nèi)壁，洗液并入量瓶中，加0.5％硫酸溶液稀釋至刻度，搖勻；精密量取適量，加0.5％硫酸溶液定量稀釋成每1ml中約含尼可剎米20μg的溶液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法，在263nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，按C10H14N2O的吸收系數(shù)（Ｅ1%1cm）為292計(jì)算，即得。

※尼可剎米與硫酸成鹽后易溶于水，因此采用0.5%的硫酸溶液溶解樣品。第11頁(yè)/共38頁(yè)第十一頁(yè)，共39頁(yè)。

第2節(jié)喹諾酮類藥物

一、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與性質(zhì)

具有4-吡啶酮-3羧酸的基本結(jié)構(gòu)第12頁(yè)/共38頁(yè)第十二頁(yè)，共39頁(yè)。典型藥物的結(jié)構(gòu)諾氟沙星氧氟沙星環(huán)丙沙星第13頁(yè)/共38頁(yè)第十三頁(yè)，共39頁(yè)。

性質(zhì)（1）酸堿兩性

本類藥物因含有酸性的羧基和堿性的哌嗪基，呈酸堿兩性易溶于醋酸、鹽酸和氫氧化鈉溶液中。（2）還原性

分子結(jié)構(gòu)中的哌嗪基具有還原性，遇光易氧化，顏色逐漸變深。（3）紫外吸收

分子中具有共軛體系，可產(chǎn)生紫外吸收，用于鑒別和含量測(cè)定。第14頁(yè)/共38頁(yè)第十四頁(yè)，共39頁(yè)。二、鑒別試驗(yàn)1.《中國(guó)藥典》對(duì)諾氟沙星采用薄層色譜法鑒別。2.氧氟沙星

（1）高效液相色譜法鑒別（2）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集1003圖）一致。第15頁(yè)/共38頁(yè)第十五頁(yè)，共39頁(yè)。三、有關(guān)物質(zhì)的檢查1.來(lái)源：生產(chǎn)過(guò)程中和貯藏過(guò)程中引入的

2.檢查項(xiàng)目：（1）澄清度與顏色：堿液中的不溶性雜質(zhì)方法：取諾氟沙星（氧氟沙星）5份，各0.5g，加氫氧化鈉試液10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清；如渾濁，與2號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃。（2）有關(guān)物質(zhì)：

諾氟沙星：高效液相色譜法氧氟沙星：紫外吸光度法第16頁(yè)/共38頁(yè)第十六頁(yè)，共39頁(yè)。四、含量測(cè)定（一）非水滴定法：氧氟沙星原料藥含量測(cè)定

(二)高效液相色譜法：

諾氟沙星原料藥及其膠囊環(huán)丙沙星的原料藥及其制劑氧氟沙星制劑（三）紫外-可見(jiàn)分光光度法：

諾氟沙星軟膏和乳膏第17頁(yè)/共38頁(yè)第十七頁(yè)，共39頁(yè)。第3節(jié)托烷類藥物

一、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與性質(zhì)莨菪醇+莨菪酸酯類（生物堿）縮合典型藥物：硫酸阿托品、氫溴酸山莨菪堿山莨菪堿第18頁(yè)/共38頁(yè)第十八頁(yè)，共39頁(yè)。

性質(zhì)：1.堿性：

叔胺氮原子，堿性較強(qiáng)，可與酸成鹽。2.水解性：

酯健易水解，生成莨菪酸3.生物堿沉淀反應(yīng)：

可與生物堿沉淀試劑反應(yīng)。4.旋光性：氫溴酸山莨菪堿為左旋體；硫酸阿托品為外消旋體，無(wú)旋光性。5.Vitali反應(yīng)：酯鍵水解后生成莨菪酸，與發(fā)煙硝酸反應(yīng)生成黃色三硝基衍生物，遇醇制氫氧化鉀即顯深紫色。Vitali反應(yīng)是托烷類生物堿的特征鑒別反應(yīng)。第19頁(yè)/共38頁(yè)第十九頁(yè)，共39頁(yè)。二、鑒別試驗(yàn)藥典附錄中收載：Vitali反應(yīng)(托烷生物堿的鑒別）：取供試品約10mg，加發(fā)煙硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘?jiān)?，放冷，加乙?～3滴濕潤(rùn)，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。為硫酸阿托品和氫溴酸山莨菪堿的共有的鑒別反應(yīng)。第20頁(yè)/共38頁(yè)第二十頁(yè)，共39頁(yè)。1.硫酸阿托品的鑒別（1）紅外光譜法（2）Vitali反應(yīng)（3）硫酸鹽的反應(yīng)2.氫溴酸山莨菪堿的鑒別（1）紅外光譜法（2）Vitali反應(yīng)（3）溴化物的鑒別反應(yīng)第21頁(yè)/共38頁(yè)第二十一頁(yè)，共39頁(yè)。三、有關(guān)物質(zhì)的檢查

托烷類生物堿結(jié)構(gòu)復(fù)雜，在制備過(guò)程中可能帶入某些雜質(zhì)，故藥典規(guī)定檢查酸度、其他生物堿等

1.硫酸阿托品中有關(guān)物質(zhì)的檢查（1）莨菪堿：生產(chǎn)過(guò)程中消旋化不完全引入的，其毒性大，具有旋光性，用旋光度法檢查：旋光度不得過(guò)－0.40°

（2）其他生物堿：如東莨菪堿、山莨菪堿等的堿性較弱，在阿托品的鹽酸水溶液中，加入氨試液，其他生物堿立即游離，發(fā)生渾濁，而阿托品仍以鹽酸鹽的形式溶解于水中。即供試品不得顯渾濁。第22頁(yè)/共38頁(yè)第二十二頁(yè)，共39頁(yè)。2.氫溴酸山莨菪堿中有關(guān)物質(zhì)的檢查

其他生物堿：

氫溴酸山莨菪堿中可能存在如阿撲阿托品、顛茄堿等其它生物堿。方法：采用薄層色譜的對(duì)照法檢查以氫溴酸山莨菪堿為對(duì)照品，在氧化鋁薄層板上，用三氯甲烷－無(wú)水乙醇(95:5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，噴以稀碘化鉍鉀試液－碘化鉀碘試液(1:1)。

結(jié)果：供試品溶液除顯一個(gè)與對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)位置相同的灰黑色斑點(diǎn)外，不得顯其他斑點(diǎn)。第23頁(yè)/共38頁(yè)第二十三頁(yè)，共39頁(yè)。四、含量測(cè)定1.非水滴定法：具有弱堿性，在水溶液中直接用酸滴定沒(méi)有明顯突躍，在冰醋酸-醋酐溶液，堿性增強(qiáng)，可用高氯酸滴定氫溴酸山莨菪堿原料藥含量測(cè)定方法：取本品約0.2g，精密稱定，加冰醋酸20ml溶解后（必要時(shí)微熱使溶解），加醋酸汞試液5ml與結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯純藍(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于38.63mg的C17H23NO4·HBr?！话慵尤脒^(guò)量的醋酸汞冰醋酸溶液，使氫溴酸生成難解離的溴化汞消除干擾原料藥：非水滴定法制劑：紫外-可見(jiàn)分光光度法第24頁(yè)/共38頁(yè)第二十四頁(yè)，共39頁(yè)。2.紫外-可見(jiàn)分光光度法硫酸阿托品片的含量測(cè)定（方法略）原理：該類藥物一般無(wú)紫外吸收，必須加入顯色劑（溴甲酚綠）顯色后，與阿托品結(jié)合后溶于氯仿中，在420nm處才能測(cè)定吸收度。

第25頁(yè)/共38頁(yè)第二十五頁(yè)，共39頁(yè)。第4節(jié)吩噻嗪類藥物一、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與性質(zhì)具有硫氮雜蒽母核（吩噻嗪環(huán)），該類藥物結(jié)構(gòu)的主要差別是10位氮原子上和2位碳原子上的取代基不同吩噻嗪環(huán)第26頁(yè)/共38頁(yè)第二十六頁(yè)，共39頁(yè)。（1）含S、N的三環(huán)共軛的大體系:S、N與苯環(huán)形成p-共軛——具有紫外吸收光譜特征，最強(qiáng)峰多在250～265nm。（2）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子:

為-2價(jià)，具有還原性，易氧化呈色，遇光漸變色。（3）側(cè)鏈R上的N堿性較強(qiáng)，可與鹽酸成鹽—非水滴定法。（4）吩噻嗪類藥物隨取代基R和R′的不同，產(chǎn)生不同的紅外吸收光譜。第27頁(yè)/共38頁(yè)第二十七頁(yè)，共39頁(yè)。二、鑒別試驗(yàn)（一）顯色反應(yīng)：吩噻嗪環(huán)，具還原性，可被不同的氧化劑氧化而呈色，取代基不同，顏色不同。1.鹽酸異丙嗪+硫酸櫻桃紅色放置漸變深2.鹽酸異丙嗪+硝酸紅色放置漸變深沉淀溶解溶液呈橙黃色（二）紫外分光光度法含S、N的三環(huán)共軛的大體系，在紫外光區(qū)有三個(gè)吸收峰，分別在205nm、254nm和300nm附近。（三）紅外分光光度法：鹽酸氯丙嗪、鹽酸異丙嗪的紅外吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜一致。

△第28頁(yè)/共38頁(yè)第二十八頁(yè)，共39頁(yè)。三、雜質(zhì)檢查1.來(lái)源：生產(chǎn)、貯存過(guò)程中引入中間體、副產(chǎn)物吩噻嗪環(huán)易被氧化，貯存過(guò)程中的分解產(chǎn)物2.檢查項(xiàng)目：

溶液的澄清度與顏色有關(guān)物質(zhì)3.檢查方法（避光操作）以鹽酸氯丙嗪有關(guān)物質(zhì)檢查為例：

采用自身稀釋對(duì)照法，供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液所顯的主斑點(diǎn)比較，不得更深。鹽酸氯丙嗪注射劑的有關(guān)物質(zhì)的檢查：供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液（2）所顯的主斑點(diǎn)比較，不得更深；如有一點(diǎn)超過(guò)，應(yīng)不深于對(duì)照溶液（1）的主斑點(diǎn)。第29頁(yè)/共38頁(yè)第二十九頁(yè)，共39頁(yè)。四、含量測(cè)定以鹽酸氯丙嗪和異丙嗪為例原料藥：均采用非水滴定法

制劑：均采用紫外-可見(jiàn)分光光度法1.非水滴定法（鹽酸氯丙嗪原料藥的含量測(cè)定）方法：取本品約0.2g，精密稱定，加醋酐10ml，振搖溶解后，加醋酸汞試液5ml與橙黃Ⅳ指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯玫瑰紅色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于35.53mg的C17H19ClN2S·HCl。注意事項(xiàng)：本品為鹽酸鹽，鹽酸在冰醋酸中酸性較強(qiáng)，對(duì)測(cè)定有干擾，加入醋酸汞使其生成難解離的氯化汞，將藥物轉(zhuǎn)變成可測(cè)定的醋酸鹽，可排除干擾二者測(cè)定方法類似第30頁(yè)/共38頁(yè)第三十頁(yè)，共39頁(yè)。2.紫外-可見(jiàn)分光光度法（鹽酸氯丙嗪注射液含量測(cè)定）原理：制劑中有附加劑的干擾，且該藥物有紫外吸收，故采用該法測(cè)定，以吸收系數(shù)計(jì)算，避光操作。方法：精密量取本品適量（約相當(dāng)于鹽酸氯丙嗪50mg），置250ml量瓶中，加鹽酸溶液(9→1000)至刻度，搖勻；精密量取10ml，置50ml量瓶中，加鹽酸溶液(9→1000)至刻度，搖勻，照紫外-可見(jiàn)分光光度法，在306nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，，按C17H19ClN2S·HCl的吸收系數(shù)（Ｅ1%1cm）為115計(jì)算，即得。注意事項(xiàng)：氯丙嗪在254nm處有最大吸收，片劑采用254nm波長(zhǎng)處，吸收系數(shù)為（Ｅ1%1cm）915，但注射液中含抗壞血酸（抗氧劑），在254nm也有強(qiáng)吸收，對(duì)測(cè)定有干擾，故選用306nm處測(cè)定。第31頁(yè)/共38頁(yè)第三十一頁(yè)，共39頁(yè)。第5節(jié)苯并二氮雜卓類藥物

一、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與性質(zhì)地西泮第32頁(yè)/共38頁(yè)第三十二頁(yè)，共39頁(yè)。1.苯并二氮雜卓母核：UV吸收2.苯并二氮雜卓母核上N原子：弱堿性3.結(jié)構(gòu)中的環(huán)一般比較穩(wěn)定，但在酸性溶液中可水解，形成相應(yīng)的芳香第一胺結(jié)構(gòu)的二苯甲酮衍生物。性質(zhì)：第33頁(yè)/共38頁(yè)第三十三頁(yè)，共39頁(yè)。二、鑒別試驗(yàn)硫酸-熒光反