《蛋白質(zhì)與酶工程實驗》實驗教學大綱

第頁《蛋白質(zhì)與酶工程實驗》實驗教學大綱課程名稱：蛋白質(zhì)與酶工程實驗

課程類別：專業(yè)主干課適用專業(yè)：生物技術(shù)

所屬實驗室：生化與蛋白質(zhì)工程實驗室

實驗學時、學分：

32

學時

1

學分一、實驗教學目的通過系列綜合實驗設(shè)計與實踐操作，使學生能自主綜合運用所學基本理論與基本實驗技術(shù)進行綜合實驗設(shè)計與操作，從而更加系統(tǒng)深入的理解蛋白質(zhì)與酶工程的基礎(chǔ)理論與相關(guān)實驗技術(shù)，培養(yǎng)學生綜合運用知識與分析、解決問題的能力，為學生進一步獨立開展科研課題奠定基礎(chǔ)。二、實驗教學要求蛋白質(zhì)與酶工程實驗以設(shè)計性和綜合性實驗為主，學生分組進行，每組約20～25人。授課教師通過發(fā)放微課視頻與實驗題目，并結(jié)合講解和演示，使學生明白實驗?zāi)康呐c任務(wù)，掌握實驗儀器原理和操作使用過程，提前撰寫思維導圖式實驗方案與流程，經(jīng)教師審核通過后，方可進生化與蛋白質(zhì)工程實驗室進行實驗，并要求在規(guī)定時間內(nèi)熟悉、學習儀器設(shè)備的使用與操作，并完成相關(guān)實驗任務(wù)。三、對學生的指導和要求（一）實驗指導要求：教師通過網(wǎng)絡(luò)教學平臺上學生的實驗記錄，定期檢查學生的實驗進度，并對學生所出現(xiàn)的問題進行線上與線下指導，引導學生獨立分析并解決問題，鼓勵學生積極創(chuàng)新。（二）實驗報告要求：采用山西師范大學設(shè)備處統(tǒng)一印制的實驗紙，以思維導圖模式撰寫實驗?zāi)康?、實驗原理、實驗?nèi)容、實驗材料與方法、實驗結(jié)果與分析?；蛞钥蒲姓撐男问阶珜戨娮影?。以上兩種形式均需上傳到網(wǎng)絡(luò)教學平臺。教師進行線上評閱。四、實驗考核方式主要包括四個方面：思維導圖式實驗方案與流程、實驗操作規(guī)范、網(wǎng)絡(luò)平臺實驗進度與過程性結(jié)果撰寫、實驗報告，每項各占25%。五、實驗教學內(nèi)容實驗項目(一)：抑制條件下Km和Vmax的測定及抑制類型的判定（5學時）（1）項目類別：必做■選做□（2）項目性質(zhì)：演示性□驗證性■

設(shè)計性□

綜合性■（3）項目主要目的要求：1.掌握米氏方程基本理論；2.掌握抑制條件下Km和Vmax的測定方法；3.掌握酶的抑制類型。（4）主要儀器：移液器、錐形瓶、恒溫水浴鍋、分光光度計。實驗項目(二)：固定化酵母細胞及蔗糖酶的檢測（3學時）（1）項目類別：必做■選做□（2）項目性質(zhì)：演示性□

驗證性■

設(shè)計性□

綜合性□（3）項目主要目的要求：1.掌握固定化細胞的原理與方法；2.掌握蔗糖酶酶活檢測原理與方法。（4）主要儀器：注射器、燒杯等。實驗項目(三)：大蒜細胞SOD的提取和分離（6學時）（1）項目類別：必做■選做□（2）項目性質(zhì)：演示性□

驗證性■

設(shè)計性□

綜合性□（3）項目主要目的要求：1.掌握SOD的提取原理；2.掌握酶的分離純化方法。（4）主要儀器：離心機、分光光度計、移液器、錐形瓶等。實驗項目(四)：堿性蛋白酶高產(chǎn)菌株的選育（6學時）（1）項目類別：必做■選做□（2）項目性質(zhì)：演示性□

驗證性□

設(shè)計性■

綜合性■（3）項目主要目的要求：1.掌握高通量篩選產(chǎn)酶微生物的方法；2.掌握快速檢測堿性蛋白酶的酶活方法。（4）主要儀器：超凈工作臺、高壓滅菌鍋、移液器等。實驗項目(五)：自主設(shè)計酶分子修飾實驗（6學時）（1）項目類別：必做■選做□（2）項目性質(zhì)：演示性□

驗證性□

設(shè)計性■

綜合性■（3）項目主要目的要求：1.掌握酶分子修飾原理；2.掌握酶分子修飾技術(shù)。（4）主要儀器：移液器、錐形瓶、分光光度計、離心機。實驗項目(六)：基于易錯PCR原理自主設(shè)計酶的定向進化實驗（6學時）（1）項目類別：必做■選做□（2）項目性質(zhì)：演示性□

驗證性□

設(shè)計性■

綜合性■（3）項目主要目的要求：1.掌握易錯PCR原理；2.掌握酶的定向進化基本理論與知識；3.掌握易錯PCR操作方法。（4）主要儀器：PCR擴增儀、移液器、分光光度計、離心機。六、實驗學時分配序號實驗項目學時1抑制條件下Km和Vmax的測定及抑制類型的判定52固定化酵母細胞及蔗糖酶的檢測33大蒜細胞SOD的提取和分離64堿性蛋白酶高產(chǎn)菌株的選育65自主設(shè)計酶分子修飾實驗66基于易錯PCR原理自主設(shè)計酶的定向進化實驗6合計

32七、推薦教材與輔助教學資料［1］《生物工程實驗指導》（第一版），王祎玲、段江燕編，科學出版社，2018年；［2］《酶工程實驗指導》（第一版），王君編，化學工業(yè)出版社，2018年；［