“體外診斷試劑研發(fā)全流程管理培訓(xùn)課程-分析性能評(píng)價(jià)”精彩回顧之100問

5/5“體外診斷試劑研發(fā)全流程管理培訓(xùn)課程—分析性能評(píng)價(jià)”精彩回顧之100問（5）2022年11月17日，由中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備協(xié)會(huì)應(yīng)用評(píng)價(jià)分會(huì)主辦、北京水木濟(jì)衡生物技術(shù)有限公司承辦的《體外診斷試劑研發(fā)全流程管理培訓(xùn)課》第三期分析性能評(píng)價(jià)課程正式開課，培訓(xùn)課程持續(xù)三天，邀請(qǐng)了多位行業(yè)資深專家授課，吸引了上百家企業(yè)參加。培訓(xùn)的最后一天，設(shè)置了討論環(huán)節(jié)，多位專家就學(xué)員提出的問題進(jìn)行了詳細(xì)的解答，現(xiàn)將部分問題及專家回復(fù)整理如下。本節(jié)主要針對(duì)檢出限相關(guān)問題。專家答疑43咨詢問題LOB建立過程中，測(cè)試了60個(gè)數(shù)據(jù)，那這60個(gè)數(shù)據(jù)的數(shù)值中會(huì)有可能出現(xiàn)大于最后建立的LOB嗎？專家答復(fù)完全有可能?？瞻讟颖締蝹?cè)95%分布的上限為L(zhǎng)oB，如下圖所示，對(duì)于空白樣本，其測(cè)量結(jié)果的5％（取α=0.05）高于LoB。44咨詢問題LOD測(cè)試，如果現(xiàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)有相應(yīng)指標(biāo)要求，企業(yè)在研發(fā)階段是不是可以直接用驗(yàn)證的方法測(cè)試即可？專家答復(fù)不可以。行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)給出的檢出限規(guī)定是基本要求，企業(yè)的產(chǎn)品不能低于該要求，企業(yè)在產(chǎn)品定型后應(yīng)進(jìn)行完整系統(tǒng)的性能評(píng)價(jià)，建立自己的檢出限指標(biāo)。以CRP試劑盒為例，YY/T1513—2017《C反應(yīng)蛋白測(cè)定試劑盒》規(guī)定超敏CRP試劑盒的檢出限不高于0.5mg/L,“0.5mg/L”是基本要求，事實(shí)上有的試劑盒檢出限能到0.2mg/L，有的甚至到0.01mg/L。45咨詢問題確認(rèn)檢出限和定量限時(shí)，一般都要求實(shí)驗(yàn)開展2天或以上，對(duì)于天間測(cè)值不穩(wěn)定的樣本，有何更好的方法?專家答復(fù)性能評(píng)價(jià)的時(shí)候，應(yīng)避免使用不穩(wěn)定的樣本。如人源樣本不易獲得，也可以尋找可行的替代物。46咨詢問題LOQ確定時(shí)是怎么設(shè)定允許的相對(duì)總誤差TE和偏倚的呢？專家答復(fù)：根據(jù)臨床需求和室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的允許誤差設(shè)定總誤差目標(biāo)值。國(guó)內(nèi)一些標(biāo)準(zhǔn)，例如WS/T403-2012《臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量指標(biāo)》，還有醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（YY標(biāo)準(zhǔn)）中的一些產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)，都給出了常規(guī)項(xiàng)目的變異系數(shù)、偏倚、總誤差要求。47咨詢問題定量試劑盒，能否不做空白限和檢測(cè)限，只做定量限？小于定量限就直接報(bào)告小于了？專家答復(fù)：不能。空白限、檢出限、定量限三者的意義不一樣。檢出限指分析方法在規(guī)定實(shí)驗(yàn)條件下所能檢出被測(cè)組分的最低濃度或最低量。定量限是指分析方法可定量測(cè)定樣品中待測(cè)組分的最低濃度或最低量。下圖是測(cè)量結(jié)果的分布及其推薦的結(jié)果報(bào)告方式。48咨詢問題受限于樣本的可獲取性，檢測(cè)血液中人源mRNA的產(chǎn)品，LoD可以設(shè)定為100%檢出的濃度嗎？還是必須做到95%？專家答復(fù)：可以以100%檢出的濃度作為L(zhǎng)oD。49咨詢問題：膠體金產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)沒有已上市的定量產(chǎn)品，在最低檢測(cè)限研究中如何對(duì)樣本進(jìn)行定值？專家答復(fù)：分析性能評(píng)估所用樣本的基本信息均需明確，例如樣本來源、樣本類型、采集和處理方式、稀釋方式、定值過程及數(shù)據(jù)等。以新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗原檢測(cè)試劑為例，研究中采用的新型冠狀病毒樣本，應(yīng)采用合理方法對(duì)樣本進(jìn)行標(biāo)定，包括拷貝數(shù)、Ct值、TCID50值等。試劑開發(fā)中一定要選好參照標(biāo)準(zhǔn)，如果是國(guó)內(nèi)首創(chuàng)的新靶標(biāo)，可以擴(kuò)大范圍，例如臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)、其他準(zhǔn)確的方法、國(guó)外已上市的產(chǎn)品等等。50咨詢問題定性膠體金產(chǎn)品，陽(yáng)性判斷值應(yīng)當(dāng)如何進(jìn)行確認(rèn)和定義，可否用最低檢測(cè)限的研究替代該部分研究，同時(shí)用于研究的樣品是否需要定量產(chǎn)品確定濃度？專家答復(fù)：陽(yáng)性判斷值和檢出限是2個(gè)指標(biāo)，意義不同，確定的方法也不同。一般情況下，根據(jù)所開發(fā)試劑的用途（篩查、診斷、確認(rèn)），確定能接受的診斷靈敏度和特異性，通過ROC