穩(wěn)態(tài)熒光分析方法與應(yīng)用進(jìn)展

TheDiscoveryandDevelopmentoftheGreenFluorescentProtein,（GFP）綠色熒光蛋白2008諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)OsamuShimomura1960sMartinChalfie1990sRogerY.Tsien’s,today://分子熒光產(chǎn)朝氣理-JablonskiDiagram熒光分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)示意圖透射光吸收光譜氙燈(或高壓汞燈）（200-800nm)熒光信號(hào)熒光壽命熒光光譜熒光強(qiáng)度隨光譜變更成像（熒光物質(zhì)在樣本中分布的空間信息）強(qiáng)度壽命可獲得的信息分子結(jié)構(gòu)信息：熒光放射波長(zhǎng)，熒光壽命，大分子表面熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度隨溶劑極性的變更等等分子濃度信息：熒光強(qiáng)度增加或猝滅分子在溶劑中的狀態(tài)：熒光光譜的紅移或者藍(lán)移，靜態(tài)或動(dòng)態(tài)猝滅，熒光壽命的變更等等分子間的相互作用：熒光猝滅，熒光壽命，共振能量轉(zhuǎn)移、新的熒光峰的產(chǎn)生分子的大?。悍肿拥霓D(zhuǎn)動(dòng)速度對(duì)偏振光的消偏等一般穩(wěn)態(tài)熒光儀的功能2D熒光光譜：熒光強(qiáng)度-激發(fā)（放射）波長(zhǎng)3D-熒光光譜：激發(fā)波長(zhǎng)-放射波長(zhǎng)-熒光強(qiáng)度同步熒光光譜（固定Dl）：以確定波長(zhǎng)差同時(shí)掃描激發(fā)和放射單色器，Dl=Stokes位移;熒光強(qiáng)度-激發(fā)（放射）波長(zhǎng)共振光散射(固定Dl=0nm)熒光偏振技術(shù)：平面偏振光激發(fā)樣品。熒光動(dòng)力學(xué)方法導(dǎo)數(shù)熒光方法三維熒光分析方法應(yīng)用

自然與人工處理琥珀的三維熒光光譜亓利劍等，寶石和寶石學(xué)雜志，2005，7卷，1期，10-16天然琥珀熱處理琥珀熱處理琥珀熱填充處理琥珀同步熒光分析方法的應(yīng)用恒波長(zhǎng)同步熒光分析多環(huán)芳烴和生物大分子的檢測(cè)小分子與蛋白相互作用的熱力學(xué)探討恒能量同步熒光分析多環(huán)芳烴的檢測(cè)可變角同步熒光分析自然產(chǎn)物檢測(cè)高背景體系中微量組分的檢測(cè)生活污水的同步熒光譜(SFS)探討(lex=248nm)Wat.Res.Vol.29,No.6,pp.1599-1602,1995SettledsewageFinaleffluentSettledsewageFinaleffluentFilteredsewageTyrosinCinnamicacidHumicacidTyrosinHumicacidTri-distilledwaterFL&UVabsorptionFLSFS,Dl=20nmSFS,Dl=20nm280nm280nmβ-carotene在表面活性劑中的同步以及3D熒光光譜unpublishedresults大氣樣品中對(duì)苯二酚與間苯二酚的同步熒光測(cè)定

AnalBioanalChem(2004)378:1648–1651Dl=15nm共振光散射原理和應(yīng)用光散射共振光散射λLS≈λAbs1993年P(guān)asternack等用共振光散射技術(shù)探討了卟啉類化合物在核酸上的聚集，首次將該技術(shù)應(yīng)用于分析化學(xué)。黃承志等利用光散射技術(shù)探討了生物大分子體系的散射光譜。金納米(AuNPs)共振光散射測(cè)定糖原AuNPs

AuNPs和500ng?mL-1糖原+KAuGnKChSnTalanta

76,1207-1211,2008.J.Phys.chem.B(accepted)共振光散射探討亞甲基藍(lán)(MB)在核酸

分子骨架上的組裝MB在DNA分子骨架上的組裝Huangetal,Bull.Chem.Soc.Jpn,72,1501-1508(1999)DNAmg/mL0TheRLSspectrapfMBwithDNA(pH8.14)熒光偏振技術(shù)(1926年，Perrin)以平面偏振光激發(fā)熒光分子時(shí)，靜止的熒光分子則放射與入射光相同偏振面的偏振光（各向異性/偏振)。由于分子存在旋轉(zhuǎn)翻滾運(yùn)動(dòng)，放射光的偏振平面與入射光會(huì)有差異，產(chǎn)生消偏振。消偏振vs分子運(yùn)動(dòng)大分子(如蛋白質(zhì))運(yùn)動(dòng)緩慢，放射光偏振度較高。小分子，旋轉(zhuǎn)與翻滾速度快，放射光有不同程度的消偏振現(xiàn)象。獲得分子的大小以及分子之間相互作用的信息。免疫分析激素-受體作用蛋白-多肽相互作用DNA-蛋白相互作用以及酪氨酸激酶分析等方面的探討。熒光偏振免疫分析(FPIA)熒光分析法（第三版），許金鉤王尊本，科學(xué)出版社，2007熒光分析法穩(wěn)態(tài)熒光時(shí)間辨別熒光2D熒光3D熒光同步熒光共振光散射脈沖時(shí)間辨別