自身抗體的應(yīng)用及研究進(jìn)展課件

自身抗體的應(yīng)用及研究進(jìn)展

2011-04-132酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）

1間接免疫熒光法（IFAIndirectFluorescentAssay

）3免疫印跡法（IB）WesternblotLIA4其它：IDA、RIA等全自動(dòng)自身抗體分析儀自動(dòng)化檢測(cè)檢測(cè)定量化單個(gè)項(xiàng)目隨時(shí)檢測(cè)多個(gè)項(xiàng)目同時(shí)檢測(cè)45-90分鐘報(bào)告結(jié)果原廠質(zhì)控和校正血清精確溫度調(diào)控系統(tǒng)五點(diǎn)定標(biāo)、三重檢測(cè)風(fēng)濕病的實(shí)驗(yàn)室診斷血清學(xué)檢查

自身抗體——特異性非特異的免疫相關(guān)指標(biāo)滑液分析一般的實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目項(xiàng)目檢驗(yàn)方法SLE四項(xiàng)

ANA間接免疫熒光抗DS－DNA抗體間接免疫熒光抗組蛋白抗體ELISA抗核小體抗體ELISAENA系列

抗RNP免疫印跡、ELISA抗SM免疫印跡、ELISA抗SSA免疫印跡、ELISA抗SSB免疫印跡、ELISA抗JO-1免疫印跡、ELISA抗SCL-70免疫印跡、ELISA抗核糖體P蛋白免疫印跡、ELISARA三項(xiàng)

AKA（抗角質(zhì)蛋白抗體）間接免疫熒光抗RA33ELISA抗CCP（抗環(huán)瓜氨酸肽抗體）ELISAANCA四項(xiàng)

P-ANCA（熒光模型為核周模型）間接免疫熒光C-ANCA（熒光模型為細(xì)胞質(zhì)模型）間接免疫熒光MPO-ANCA（髓過(guò)氧化酶抗體）ELISAPR3-ANCA（抗蛋白酶3抗體）ELISA常見的自身抗體及其檢測(cè)方法(1)(2)自身免疫肝炎七項(xiàng)

ANA間接免疫熒光抗LMA抗（肝細(xì)胞膜抗體）間接免疫熒光ASMA（抗平滑肌抗體）間接免疫熒光抗LKM（抗肝腎微粒體抗體）間接免疫熒光抗SLA（抗可溶性肝抗原抗體）間接免疫熒光AMA（線粒體抗體）間接免疫熒光抗LSP（抗肝臟特異性蛋白抗體）間接免疫熒光RF三項(xiàng)

RF-IgGELISARF-IgAELISARF-IgMELISA抗磷脂綜合征三項(xiàng)（ASP）ELISAPT-IgG（凝血素抗體）ELISAPT-IgMELISA抗β2-糖蛋白1抗體ELISA常見的自身抗體及其檢測(cè)方法(一)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）

類風(fēng)濕因子（RF）早期診斷的系列指標(biāo)抗RA33/36抗體 抗核周因子（APF）抗角蛋白抗體（AKA）抗Sa抗體抗環(huán)瓜氨酸抗體（抗CCP）

類風(fēng)濕因子（RF）抗人IgG分子Fc片段上抗原決定簇的特異性抗體,分為IgM、G、A、E型RF在RA中的陽(yáng)性率為70%~８０％，是診斷RA的重要標(biāo)準(zhǔn)之一RF含量與病情的活動(dòng)性和嚴(yán)重性成正比，持續(xù)高滴度的RF常提示RA病情活動(dòng)，骨侵蝕發(fā)生率高，?？砂橛衅は陆Y(jié)節(jié)或血管炎等關(guān)節(jié)外表現(xiàn)，提示預(yù)后不良類風(fēng)濕因子（RF）RF并非RA獨(dú)有的特異性抗體，對(duì)RA的診斷不具特異性

SLE30%SS70%~90%

SSc20%~30%MCTD50%~60%

非風(fēng)濕性疾病

5%以下的正常人RF陽(yáng)性不等于一定就是RARF陰性也不等于一定就不是RARF常用檢測(cè)方法RF 1：40陽(yáng)性乳膠凝集法（測(cè)IgM-RF）RF256Iu/ml雙抗夾心ElISA法(測(cè)總RF）RF-IgG 110IU/ml -IgA 18IU/ml ELISA法

-IgM200IU/mlRA早期診斷的系列指標(biāo)

敏感性特異性抗RA33/36抗體35.8%99.6%APF40%-80%70%-90%AKA40%-55%85%-95%抗Sa抗體40%-60%98.6%抗CCP46%-70%96%抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP）瓜氨酸是RA血清抗聚角蛋白微絲蛋白相關(guān)抗體的主要抗原決定簇對(duì)RA診斷具有高度特異性（98%）可在RA早期出現(xiàn)預(yù)測(cè)早期關(guān)節(jié)炎發(fā)展為RARA關(guān)節(jié)侵蝕破壞的早期識(shí)別及預(yù)測(cè)抗核抗體（ANA）定義——以細(xì)胞核內(nèi)物質(zhì)為抗原的抗體臨床意義①SLE的篩查抗體:

95%陽(yáng)性，但滴度與SLE活動(dòng)性無(wú)相關(guān)陰性基本可排除SLE②陽(yáng)性并非SLE特異陽(yáng)性并非風(fēng)濕病特異:——風(fēng)濕?。⊿LE、SSc、SS、RA)

非風(fēng)濕性疾?。ǜ腥?、慢肝、肺纖維化、腫瘤）服用某些藥物（INH、苯妥英鈉、肼苯達(dá)嗪、普魯卡因酰胺）

抗核抗體（ANA）方法——間接免疫熒光法結(jié)果判斷:①滴度〉1：100為陽(yáng)性②常見核型——5種不同核型的臨床意義不同

核膜型與抗ds-DNA有關(guān)，多見于SLE，特別是有腎炎者

均質(zhì)型與AHA（抗組蛋白抗體）、抗DNA有關(guān)，引起LE形成主要見于SLE、藥物性狼瘡

著絲點(diǎn)型多見于CREST綜合征ANA常見五種核型及臨床意義核膜型——與抗ds-DNA有關(guān)，多見于SLE，特別是有腎炎者均質(zhì)型——與AHA、抗DNA有關(guān)，引起LE形成主要見于SLE、藥物性狼瘡斑點(diǎn)型——與抗ENA有關(guān)，應(yīng)進(jìn)一步查特異性抗體核仁型——多見于硬皮病著絲點(diǎn)型——多見于CREST綜合征ANA檢測(cè)方法間接免疫熒光法印跡法ELISA法抗ds-DNA抗體臨床意義①對(duì)SLE的診斷有較高特異性②滴度與SLE活動(dòng)相關(guān)，可作為病情監(jiān)測(cè)及療效觀察指標(biāo)③與SLE腎損害有關(guān)檢測(cè)方法①放免法（Farr)——敏感，有利于早期預(yù)測(cè)檢測(cè)高親合力的抗ds-DNA②間接免疫熒光法(IF)——特異③ELISA——可檢測(cè)低親合力的抗ds-DNA

有助于中樞狼瘡的病情監(jiān)測(cè)④金標(biāo)免疫斑點(diǎn)法抗ENA抗體抗RNPMCTD100%陽(yáng)性，且滴度高 雙手腫脹，雷諾現(xiàn)象，肌炎，指（趾）端硬化 腎臟保護(hù)性抗體？抗SmSLE的標(biāo)記性抗體，陽(yáng)性率30%

有助于早期、不典型及治療緩解后SLE的回顧性診斷 抗Sm陽(yáng)性一定伴抗RNP陽(yáng)性，但抗RNP陽(yáng)性可單獨(dú)存在抗SSA①原發(fā)性SS：60-75%SLE:40-50% ②與皮損、光過(guò)敏、白細(xì)胞減少、淋巴結(jié)腫大、血管炎、紫癜相關(guān)③可造成新生兒狼瘡、嬰兒心臟傳導(dǎo)阻滯抗SSB ①原發(fā)性SS：40%，較抗SSA更特異 ②其它CTD伴抗SSB者常伴繼發(fā)性SS(三)皮肌炎/多發(fā)性肌炎（PM/DM）免疫學(xué)檢查ANAENA——抗Jo-1陽(yáng)性其它檢查——肌酶譜肌酸磷酸激酶（CPK）:MM-心肌和骨骼肌

MB-心肌

BB-平滑肌和腦內(nèi)乳酸脫氫酶（LDH）谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）堿性磷酸酶（ALP）(四)干燥綜合征（SS）ANA——陽(yáng)性率40%~70%ENA——抗SSA抗體陽(yáng)性率70%~96%

抗SSB抗體陽(yáng)性率50%~87%抗α-Fordrin——對(duì)于pSS或sSS的診斷有一定意義，但特異性和敏感性并不理想。RF——陽(yáng)性率75%~100%高球蛋白血癥WBC下降(五)系統(tǒng)性硬化?。╬SS）ANA——陽(yáng)性率50%~55%ENA——抗Scl-70陽(yáng)性率15%~40%抗著絲點(diǎn)抗體(ACA)陽(yáng)性(六)混合性結(jié)締組織?。∕CTD）ANA陽(yáng)性ENA——抗RNP高滴度陽(yáng)性（七）血管炎

抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）熒光圖譜分型主要抗原成分胞漿型cANCA核周型pANCA蛋白酶3（PR3）髓過(guò)氧化物酶（MPO）非典型型（cANCA）不清ANCA的臨床意義c-ANCA和PR3-ANCA

對(duì)韋格納肉芽腫有高度特異性（95%），敏感性80%

與病情活動(dòng)性相關(guān)常作為判斷藥物療效和病情復(fù)發(fā)的指標(biāo)p-ANCA和MPO-ANCA

不如c-ANCA具有診斷特異性陽(yáng)性者血管炎程度較高，其滴度也與病情活動(dòng)相關(guān)主要與顯微鏡下多血管炎

壞死性新月體腎小球腎炎

變應(yīng)性肉芽腫性血管炎相關(guān)（八）抗磷脂抗體綜合征（APS）是一種非炎癥性自身免疫病，臨床上以動(dòng)/靜脈血栓形成、習(xí)慣性流產(chǎn)和血小板減少等癥狀為表現(xiàn)，血清中存在抗磷脂抗體血清學(xué)檢查抗心磷脂抗體（ACA）——IgG、IgM、IgA（ELISA）抗β2糖蛋白1抗體（抗β2-GP1)狼瘡抗凝物（LA）——凝血酶原時(shí)間（PT）激活的部分凝血活酶時(shí)間（APTT）白陶土凝集時(shí)間（KCT）蛇毒試驗(yàn)（αRVVT）抗磷脂抗體抗β2-GP1抗體比LA和ACA在APS患者中更具有特異性，是導(dǎo)致APS的主要抗體抗β2GP1抗體只出現(xiàn)于自身免疫性疾病,而ACA也可出現(xiàn)于一些感染性疾病,如梅毒、AIDS、肝炎、結(jié)核等（九）自身免疫性肝病我科開展的自身免疫肝炎系列抗體包括：抗核抗體（ANA）抗肝細(xì)胞膜抗體(抗LMA)抗平滑肌抗體（ASMA）抗肝腎微粒體抗體（抗LKM抗體）抗肝-胰抗體(抗LP抗體)抗可溶性肝細(xì)胞抗體（抗SLA）抗線粒體抗體（AMA）自身免疫性肝炎（AIH）

ANA

抗平滑肌抗體（SMA）抗肝腎微粒體抗體原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）

抗線粒體抗體（AMA）——M2原發(fā)性硬化性膽管炎

ANCA陽(yáng)性自身免疫性肝病風(fēng)濕病的實(shí)驗(yàn)室診斷自身抗體——特異性非特異的免疫相關(guān)指標(biāo)一般的實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目血常規(guī)尿常規(guī)肝功能腎功能等注意事項(xiàng)選擇做哪些檢查項(xiàng)目時(shí)要重點(diǎn)突出避免“大撒網(wǎng)”解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)考慮以下幾個(gè)問題實(shí)驗(yàn)方法本身的敏感性、特異性、可靠性及實(shí)驗(yàn)室之間的差異性結(jié)合臨床應(yīng)把與之相關(guān)的一組實(shí)驗(yàn)結(jié)果放在一起考慮全國(guó)自身抗體檢測(cè)質(zhì)量控制總結(jié)

由中華醫(yī)學(xué)會(huì)風(fēng)濕病分會(huì)計(jì)劃參與質(zhì)控